雌激素介导circZNF423作为ceRNA调控oar-miR-541-3p/CALM3通路促进绵羊成肌细胞增殖

【背景】雌激素是雌性哺乳动物卵巢组织分泌的主要激素,其对肌肉的生长发育起着重要的调控作用,circRNA已被发现参与多种与肌肉生长发育相关的信号通路。【目的】根据团队前期卵巢摘除苏尼特羊与假手术苏尼特羊全转录组整合分析发现circZNF423可作为内源性竞争RNA(ceRNA)调控oar-miR-541-3p/CALM3的表达。为进一步探究雌激素在绵羊肌肉生长中分子机制,通过体外培养绵羊原代成肌细胞,检测成肌细胞中外源添加雌激素介导circZNF423调控oar-miR-541-3p/CALM3对成肌细胞增殖的影响,为进一步研究雌激素及circRNA在绵羊生长发育性状中的作用机制提供理论依据,为绵羊分子设计育种提供新的研究思路。【方法】采集绵羊背最长肌组织,对绵羊原代成肌细胞进行体外分离培养,通过免疫荧光染色、RNA原位杂交(FISH)和核质分离试验确定circZNF423在成肌细胞中的表达位置;RNAhybrid在线软件预测circZNF423、oar-miR-541-3p和CALM3存在结合关系,通过双荧光素酶活性检测和生物素标记的miRNA下拉试验验证circZNF423和oar-miR-541-3p、oar-miR-541-3p和CALM3结合情况;体外构建合成circZNF423过表达或干扰载体、oar-miR-541-3p的模拟物(mimics)或抑制剂(inhibitor)、CALM3过表达或干扰载体,在绵羊原代成肌细胞中进行转染,利用RT-qPCR、Western blot、EdU和CCK-8检测绵羊成肌细胞增殖标志因子的表达和成肌细胞增殖情况;为进一步明确雌激素在绵羊肌肉生长发育中的作用,体外添加不同浓度的外源性雌二醇(E2),利用RT-qPCR、Western blot、CCK-8和EdU检测绵羊肌细胞增殖标志基因的表达变化。【结果】免疫荧光染色显示分离的原代细胞为绵羊成肌细胞,可用于后续功能验证;RNA原位杂交和核质分离试验表明,circZNF423主要在绵羊成肌细胞质中表达。RNAhybrid、双荧光素酶活性检测和生物素标记的miRNA下拉试验结果表明,circZNF423与oar-miR-541-3p、oar-miR-541-3p与CALM33’UTR之间均存在显著的结合关系;抑制circZNF423/CALM3表达或过表达oar-miR-541-3p后,绵羊成肌细胞增殖标志因子PCNA、CDK2和Pax7 mRNA与蛋白表达水平一致,均显著上调(P<0.05或P<0.01);EdU和CCK8结果表明,抑制circZNF423/CALM3表达或过表达oar-miR-541-3p后,绵羊成肌细胞增殖率显著上升(P<0.05);过表达circZNF423/CALM3或抑制oar-miR-541-3p后则相反。添加不同浓度外源雌二醇(E2)后,在浓度为10 nmol·L^(-1)时绵羊成肌细胞增殖标志因子表达最高,显著高于1和100 nmol·L^(-1)的添加浓度(P<0.05或P<0.01);绵羊肌细胞增殖标志因子PCNA、CDK2和Pax7mRNA和蛋白表达水平一致,均显著上调,circZNF423和CALM3的表达量显著降低,oar-miR-541-3p的表达量显著升高(P<0.05或P<0.01);EdU和CCK8结果显示,体外添加雌二醇后绵羊成肌细胞增殖率显著升高(P<0.05)。【结论】绵羊成肌细胞中circZNF423作为ceRNA调控oar-miR-541-3p和CALM3的结合及表达,添加外源雌激素可通过抑制circZNF423/oar-miR-541-3p/CALM3通路促进绵羊肌肉细胞的增殖。这些结果为揭示雌激素及circZNF423在绵羊骨骼肌发育性状中的分子机制提供理论基础。

百超(深圳)激光科技有限公司 D-SOAR PLUS G 40000 W特高功率高速光纤激光切割机

D-SOAR PLUS G 40000 W特高功率高速光纤激光切割机,主要针对高端客户精心配置,整机由瑞士百超集团技术团队领衔设计,主要零部件采用原装进口品牌,具有切割精度高、速度更快、操作更简单、使用成本更低和切割材料更广泛等特点,为客户提供了稳定的激光切割性能,减少了板材浪费,提高了生产能力。

oar-miR-133的表达对巴什拜羊骨骼肌细胞增殖和分化的影响

以巴什拜羊为对象,初步研究oar-miR-133的表达与巴什拜羊骨骼肌发育的关系。结果表明,oar-miR-133在巴什拜羊胎儿期第100天的骨骼肌和心肌中高表达;在巴什拜羊骨骼肌发育的不同阶段,oar-miR-133的表达量有明显的变化,在胎儿期的第100天和初生当天前后,骨骼肌中oar-miR-133的表达量均出现上调;当巴什拜羊骨骼肌卫星细胞处于增殖状态时,oar-miR-133表达量较低,而当骨骼肌卫星细胞处于诱导分化状态时,oar-miR-133表达量迅速升高,显著高于增殖状态(P<0.05);当骨骼肌卫星细胞中的oar-miR-133表达水平升高时,骨骼肌卫星细胞几乎停止增殖,细胞有相互融合转化为肌管的趋势,同时细胞内可检测到细胞分化的标志基因MyHC基因的表达;生物信息学分析共预测到96个oar-miR-133的靶基因,GO分析及KEGG信号通路分析结果表明,这些基因在细胞内通过参与一些重要的信号通路而发挥其生物学功能。

图书情报学领域学科库建设研究——E-LIS、DLIST和LIS-oar的比较分析

近年来,随着开放存取运动的发展,学科库这一新的学术交流方式逐步兴起并发挥着日益重要的作用。通过对图书情报学领域国内外3个学科库即E-LIS、DLIST和LIS-oar的基本情况、资源建设、用户服务和版权政策等方面的比较,发现我国国家图书馆创建的LIS-oar存在起步较晚、文档数量有限、提醒服务单一、没有制定完整的版权政策说明等问题。LIS-oar只有充分发挥其自身优势并大力借鉴国外先进的学科库建设经验,才能成为具有一定影响力的学科库,更好地为广大图书情报学界人士提供帮助。

基于OAR模型的航空影像高层建筑自动提取

基于建筑物的OAR模型,建立一种在单视角高分辨率航空影像中自动提取高层建筑物的策略.以建筑物垂直边缘为关键属性,结合窗户纹理和屋顶轮廓直线段属性及它们之间的关系,综合推理出建筑物的位置.实验结果表明,该方法能有效实现高层建筑物的自动提取.

OAR速率自适应机制的改进与实现

以最大化AdHoc网络吞吐量为目标,研究了基于IEEE802.11协议的物理层和MAC层信道接入机制和速率选择机制,分析了经典的速率自适应机制,但这些速率自适应机制绝大多数是针对数据帧提出的,而针对控制帧的速率自适应机制还非常少见。在研究基础上提出了一种控制帧速率自适应机制,详细阐述了实现过程,并对改进机制进行了仿真。仿真结果表明:通过控制帧速率自适应能有效地降低系统总开销,提高网络吞吐量。

ε-己内酯在引发剂La(OAr)_3作用下的开环聚合特征──用正交试验法探讨最优聚合条件

用三 ( 2 ,6-二叔丁基 -4-甲基苯氧基 )镧 [La( OAr) 3 ]引发ε-己内酯 ( CL)的开环聚合 .用正交试验方法探索了ε-己内酯在该引发剂下开环聚合的最优条件 .两组正交实验结果表明 ,最佳转化率的反应条件分别为t=2 0℃ ,t=5 0 min,c( CL ) =0 .6mol/L,n( CL ) /n( La) =1 0 0 0和 t=3 0℃ ,t=3 0 min,c( CL ) =0 .7mol/L,n( CL) /n( La) =1 0 0 0 . DSC分析结果表明 ,聚合物的结晶度为 5 0 %以上 .

外泌体源性oar-miR-10b在绵羊痘病毒感染绵羊睾丸细胞中的动态表达及靶基因的鉴定

以绵羊痘病毒(SPPV)感染绵羊睾丸细胞4h后外泌体中miRNAs的高通量测序结果为基础,应用RT-qPCR分析SPPV感染绵羊睾丸细胞4h、24h、48h和72h后外泌体中oar-miR-10b的动态表达;用双荧光素酶报告载体鉴定oar-miR-10b的靶基因。结果显示,在SPPV感染的不同时期,oar-miR-10b呈先增加后减少的趋势,特别是感染后24h的差异表达量为2.15倍;PmirGLO-BCL2L2-WT+oar-miR-10b mimics共转染组与PmirGLO-BCL2L2-WT+miRNA Negative Control对照组相比差异极显著(P <0.01),证实BCL2L2为oar-miR-10b的靶基因。结果表明,oar-miR-10b在SPPV感染的不同时期呈差异性表达,其靶基因为BCL2L2,为深入研究oar-miR-10b在SPPV感染中的作用机制奠定基础。

Time resource management of OAR based on fuzzy logic priority for multiple target tracking

For coping with the multiple target tracking in the presence of complex time-varying environments and unknown target information, a time resource management scheme based on chance-constraint programming（CCP） employing fuzzy logic priority is proposed for opportunistic array radar（OAR）. In this scheme,the total beam illuminating time is minimized by effective time resource allocation so that the desired tracking performance is achieved. Meanwhile, owing to the randomness of radar cross section（RCS）, the CCP is used to balance tracking accuracy and time resource conditioned on the specified confidence level. The adaptive fuzzy logic prioritization, imitating the human decision-making process for ranking radar targets, can realize the full potential of radar. The Bayesian Crame ′r-Rao lower bound（BCRLB） provides us with a low bound of localization estimation root-mean-square error（RMSE）, and equally important, it can be calculated predictively. Consequently, it is employed as an optimization criterion for the time resource allocation scheme. The stochastic simulation is integrated into the genetic algorithm（GA） to compose a hybrid intelligent optimization algorithm to solve the CCP optimization problem. The simulation results show that the time resource is saved strikingly and the radar performance is also improved.

绵羊成纤维细胞OAR-L1高效转染方法的探索

为了在绵羊肺成纤维细胞OAR-L1中高效表达外源蛋白,探索适合该细胞的转染方法,本研究比较了聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)、脂质体2000转染试剂(Lipofectamine^(TM) 2000 transfection reagent,Lipo 2000)、成纤维细胞转染试剂盒(Cytofect^(TM) fibroblast transfection kit,CF2)以及慢病毒介导的细胞转染方法在OAR-L1细胞中表达外源蛋白的效果。结果显示:以pLentiCMV-EGFP-Puro或pLentiCMV-mCherry-Puro荧光质粒转染OAR-L1细胞时,细胞密度和转染试剂用量均可影响PEI、Lipo 2000和CF2介导的细胞转染效率,且三者最佳转染效率均不超过30%,而慢病毒介导的细胞侵染不受细胞密度和病毒液用量的限制,获得的荧光细胞数目也显著高于前三者。包装好的病毒液可以在4或-80℃条件下至少保存15 d而侵染效果不受影响。在OAR-L1细胞中共表达2种外源蛋白时,包装获得的2种慢病毒液等比例混合后再侵染的方式能获得更高的共转率。综上所述,慢病毒侵染是一种能够实现在OAR-L1细胞中高效表达外源蛋白的细胞转染方式,本研究结果为其他难转染细胞系转染方式的选择提供了一定的参考。

鼻咽癌IMRT中设置虚拟OAR对剂量分布及放疗副反应的影响

目的:通过研究鼻咽癌调强放射治疗(intensity modulated radiation therapy,IMRT)中设置虚拟危及器官(organ at risk,OAR)并给予一定剂量限制条件,找出最优剂量分布的放疗方案,从而进一步提高疗效,减轻放疗副反应。方法:选取2016年1月—2021年1月我院收治的60例未接受过放疗鼻咽癌的患者,每例患者制作两套放疗计划,即采用常规勾画组(勾画全套的OAR)和根据剂量分布情况增设虚拟危及器官组(在常规勾画全套的OAR基础上再增加勾画虚拟危及器官),对比两种勾画方式在满足剂量适形度≥95%(V95)的基础上对剂量分布的不同影响。由于同步化疗会增加患者毒性反应,将60例病人分为单纯放疗组及同步放化疗组,每组病人内再分为实验组(增设虚拟OAR组)与对照组(常规勾画组),两组病人各30例,同时两组病人均给予相同干预处理。比较两组放疗计划剂量分布的适形度及OAR相应剂量体积百分数,同时对比放疗期间及放疗后两组患者放疗副反应差异,从而得出设置虚拟OAR对剂量分布及放疗副反应有无临床意义的结论。结果:(1)实验组剂量分布更为满意,适形度较对照组高,OAR相应剂量体积百分数更为优化,差异均有统计学意义(P<0.05);(2)实验组患者能明显减轻放疗口腔黏膜反应,但对于放疗后口干的对比却没得出阳性结论。结论:鼻咽癌IMRT放疗计划中设置虚拟OAR,可进一步优化放疗计划,从而减轻放疗相关副反应,但对远期预后的影响需进一步长期随访。

合浦珠母贝章鱼胺受体(OAR)基因的克隆与表达分析

章鱼胺受体(octopamine receptor,OAR)广泛存在于无脊椎动物中,具有调节神经肌源性节奏收缩、调节c AMP水平、参与磷酸化途径等多种重要功能,但其在贝类中的研究却很少。该研究克隆了合浦珠母贝(Pinctada fucata)OAR基因(pf OAR)的c DNA全长序列,比较分析了氨基酸序列的同源性,并采用荧光定量PCR技术检测了该基因在不同组织和幼体不同发育阶段的表达差异以及贝壳损伤后该基因在外套膜中表达水平的变化。结果显示:pf OAR的c DNA全长1 890 bp,开放阅读框1 659 bp,编码552个氨基酸,有7个跨膜结构域,具有G蛋白偶联受体的共性。pf OAR在6个被检测的组织中均有表达,且在外套膜中的表达水平显著高于其他组织;幼体发育过程中pf OAR表达水平逐渐升高,变态期的表达水平显著高于其他时期;人为损伤贝壳36 h后,pf OAR的表达水平显著升高。这些结果表明pf OAR在合浦珠母贝中可能具有多样化的功能,参与了贝壳的形成和修复,为进一步开展pf OAR的功能研究奠定了重要基础。

应用OARS问卷对社区老年人ADL功能的调查

目的：了解上海城市社区60岁以上老年人的日常活动能力（ADL）并探索其影响因素。方法：应用OARS问卷对上海某城区两个里委902名社区老年人日常活动能力（ADL）进行调查。结果：老年人各项ADL功能均不需帮助者占64．3％，至少有一项ADL功能下降者占34．2％，有7人（0．8％）完全丧失ADL功能。生理性ADL（PADL）中下降率最高的是沐浴（7．2％），最低的是进食（3．0％），PADL下降率随年龄增加而上升，但无性别差异。工具性ADL（IADL）中下降率最高的是打电话（28．5％），最低的是理财（7．5％）。结论：IADL下降率随年龄增加的趋势更加明显，是PADL的3．9倍，且有性别差异，女性下降率显著高于男性。影响ADL功能的因素主要有年龄、性别，ADL评分与老年人社会资源、经济状况、躯体健康及精神健康评分呈正相关，并有显著统计学意义。

oar-miR-143在绵羊卵巢不同发育时期表达研究及靶基因CDK2的验证

本研究前期通过高通量测序鉴定筛选出oar-miR-143在小尾寒羊卵巢不同发育时期发生差异表达并对其靶基因进行预测,通过GO和KEGG分析,推测其可能在卵巢发育过程中起到重要作用。本研究旨在对oar-miR-143预测到的靶基因进行验证,探究其影响和调控卵巢发育的可能分子机制。采用双荧光素酶检测系统,对筛选出的oar-miR-143与其候选靶基因CDK2的作用关系进行验证,首先进行miRNA与其候选靶基因结合位点的预测分析,然后构建含有靶位点的候选靶基因CDK2的野生型载体及突变型表达质粒载体,最后通过与oar-miR-143 minicis共转染293T细胞,进行双荧光素酶相对活性的检测。结果显示,oar-miR-143可抑制野生型CDK2-3’UTR载体的荧光素酶相对活性,而不影响突变型CDK2-3’UTR载体的荧光素酶相对活性,表明oar-miR-143可结合CDK2基因种子序列抑制CDK2的表达,CDK2被证实为oar-miR-143的靶向基因。这些数据将为阐明绵羊卵巢发育的分子调控机制,确定影响小尾寒羊繁殖性能的生物标志物提供了重要理论依据。

胶囊壳变更对头孢氨苄胶囊溶出曲线的影响研究

目的评价胶囊壳变更对头孢氨苄胶囊溶出曲线的相似性是否有影响。方法按照《中国药典》2020年版四部通则0931第二法(浆法)测定变更胶囊后头孢氨胶囊与参比制剂在不同pH溶出介质中的溶解度,采用非模型依赖法中相似因子法(f^(2)),比较头孢氨苄胶囊与参比制剂溶出曲线的相似性。结果使用3个不同厂家胶囊壳制备的头孢氨苄胶囊,对比头孢氨苄胶囊与参比制剂溶出曲线,其中2个批次头孢氨苄胶囊与参比制剂曲线相似,另外1个批次头孢氨苄胶囊在pH 6.8磷酸介质中溶出曲线与参比制剂溶出曲线不相似。结论头孢氨苄胶囊的胶囊壳变更对产品溶出曲线的相似性产生影响。

舟山船拳渔具套路技术特征探析

采用文献资料、实地调研和专家访谈等方法,对舟山船拳渔具套路技术特征进行深入探究。旨在对舟山船拳的船桨、带鱼耙、鱼钩、观音梭器械套路特征进行细致探索,揭示其独特的技术特点和文化内涵以及功能性运用、融合与创新等内在原理。研究发现舟山船拳的拳法技术特征主要体现在上身的灵活旋转、快速突刺、腰腿发力和身法变化等。如船桨套路注重上身的游走和旋转,以快速反击为特点;带鱼耙套路则以匕首般的快速突刺为主要特色;鱼钩套路则以腰腿发力为核心,打法狠辣凶狠;观音梭套路则以连贯的身法变化和灵活的躲闪为主要手段。

机载千伏级锥形束CT影像引导下危及器官剂量测定方法研究

目的:采用瓦里安加速器机载千伏级锥形束CT(kV-CBCT)对模体进行标准胸部扫描,测量不同次数影像引导下的胸部肿瘤周围危及器官(OAR)的吸收剂量,从而评估患者在整个放射治疗期间影像引导所致的OAR吸收剂量。方法:选用一致性≤±2%的热释光剂量计(TLD)并在标准剂量实验室刻度,将其放置在Anderson Rando模体的预留插孔内,在kVCBCT标准胸部扫描条件下,测量OAR在单次和5次影像引导下的吸收剂量,并以此计算器官当量剂量。结果:单次kVCBCT扫描条件下照射野内器官的吸收剂量范围在0.519~3.915 mGy,5次kV-CBCT扫描条件下照射野内器官的吸收剂量范围在1.436~17.971 mGy。其中心脏的吸收剂量最高,单次kV-CBCT扫描下的吸收剂量为3.915 mGy,5次kV-CBCT扫描下的吸收剂量为17.971 mGy;甲状腺右侧叶的吸收剂量最低,单次kV-CBCT扫描下的吸收剂量为0.519 mGy,5次kVCBCT扫描下的吸收剂量为1.436 mGy。感兴趣器官中左肺、右肺、心脏、甲状腺左侧、甲状腺右侧、左乳腺和右乳腺在不同辐照次数之间,TLD信号值的差异有统计学意义(Z=-12.120,Z=-10.574,Z=-39.202,Z=-5.716,Z=-13.483,Z=-20.838,Z=-42.698;P<0.05)。结论:多次影像引导条件下,OAR的累积吸收剂量不可采用单次剂量与影像引导次数的乘积计算,kV-CBCT影像引导下OAR剂量测定方法可为放射治疗患者在影像引导期间OAR累积吸收剂量的计算提供理论依据。

基于深度学习的自动分割方法对头颈部危及器官勾画的评价

目的:探讨与评价AccuContour软件基于深度学习的自动分割方法对头颈部危及器官(OAR)自动勾画结果的准确性。方法:选取20例鼻咽癌患者的CT图像资料,应用基于深度学习的机器算法模型AccuContour软件,对图像的19个OARs(脑干、脊髓、双侧眼球、双侧晶体、双侧视神经、垂体、双侧腮腺、口腔、下颌骨、双侧颌下腺、双侧颞颌关节、甲状腺和喉)进行自动勾画,勾画结果定义为深度学习勾画的体积(V_(DL)),对其进行手动修改后,将修改结果定义为参考勾画(V_(ref)),采用相似性系数(DSC)、Jaccard系数(JAC)、平均Hausdorff距离(AHD)、体积差异比(ΔV)、最大剂量(D_(max))或平均剂量(Dmean)评价勾画结果。结果:除垂体、双侧颞颌关节及双侧视神经外,其他器官的DSC平均值均>0.7,JAC平均值均>0.6;各器官AHD均值最大为1.91 mm,最小为0.23 mm。双侧眼球、双侧晶体、下颌骨、双侧颌下腺、喉和甲状腺在剂量评估中表现优异,以ΔD_(max)评估的器官中,绝对平均值最大为5.81 Gy,以Dmean评估的器官中,绝对平均值最大为3.77 Gy。结论:AccuContour软件基于深度学习的自动分割方法在头颈部OAR自动勾画中能够获得较好的结果,可以用来提高临床工作效率。

人体放疗辐射场检测系统研制

放疗辐射场检测系统是保证放疗安全和放疗质量的重要设备。针对检测设备测试效率低、价格昂贵等问题,基于数据采集卡和C++语言进行硬件搭建和软件编程设计,实现了放疗辐射场检测系统。经现场测试,对不同条件下检测数据进行分析,在10 cm×10 cm射野下6 MV X射线的射线质量指数为67.32%±0.68%,深度为5 cm时离轴比曲线均整度为102.78%±0.95%、对称性为101.91%±0.88%;6 MeV电子束的对称性和均整度分别为102.39%±0.36%,103.11%±0.35%。结果表明,系统具有较好的探测准确性和稳定性。