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基于生物信息学方法设计鼠伤寒沙门氏菌OmpC-FliC多表位疫苗
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作者 刘意 张喜悦 +7 位作者 李昕 向祝 郎雨辰 宋时萍 赵格 曲志娜 刘立恒 王君玮 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第18期104-109,116,135,136,共9页
为了设计鼠伤寒沙门氏菌OmpC-FliC多表位疫苗,试验在NCBI网站的Protein数据库中获取OmpC和FliC蛋白的氨基酸序列,采用Expasy服务器分析其理化性质,通过在线工具AllerTopV.2.0和Vexijen分析其抗原性和致敏性,应用NPS~@服务器分析二级结构... 为了设计鼠伤寒沙门氏菌OmpC-FliC多表位疫苗,试验在NCBI网站的Protein数据库中获取OmpC和FliC蛋白的氨基酸序列,采用Expasy服务器分析其理化性质,通过在线工具AllerTopV.2.0和Vexijen分析其抗原性和致敏性,应用NPS~@服务器分析二级结构,应用IEDB在线工具分析OmpC和FliC的B、T细胞表位。选取优势表位设计鼠伤寒沙门氏菌OmpC-FliC多表位疫苗,对其理化性质、抗原性、致敏性及三级结构进行预测。结果表明:OmpC和FliC均是亲水性蛋白,无致敏性,抗原性较高;OmpC和FliC蛋白均筛选出3个B细胞优势表位,2个细胞毒性T细胞(CTL细胞)优势表位,1个辅助T细胞(Th细胞)优势表位。设计的多表位疫苗为亲水性的稳定蛋白,抗原性预测的分数为1.1422分,且为非致敏原,预测三级结构模型的可信度大。说明鼠伤寒沙门氏菌OmpC-FliC多表位疫苗对动物无致敏性,且具有良好的抗原性。 展开更多
关键词 沙门氏菌 生物信息学 ompc FLIC 表位 疫苗
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鼠伤寒沙门氏菌ompc基因PCR的检测方法 被引量:7
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作者 宫强 李战丽 +4 位作者 牛明福 王辉 刘永康 秦翠丽 孙晓菲 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第16期251-254,共4页
建立一种鼠伤寒沙门氏菌的聚合酶链式反应检测方法。根据Gen Bank中已发表的鼠伤寒沙门氏菌的ompc的基因序列,设计和合成了一对特异性引物,并优化了反应条件,检测了该方法的敏感性和特异性。结果成功扩增出了鼠伤寒沙门氏菌470 bp的omp... 建立一种鼠伤寒沙门氏菌的聚合酶链式反应检测方法。根据Gen Bank中已发表的鼠伤寒沙门氏菌的ompc的基因序列,设计和合成了一对特异性引物,并优化了反应条件,检测了该方法的敏感性和特异性。结果成功扩增出了鼠伤寒沙门氏菌470 bp的ompc特异性基因片段,而对致病性大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和志贺氏菌4种食品中常见的病原菌均未扩增出相应片段。敏感性实验结果表明本方法可检测到最低1 pg/μL的鼠伤寒沙门氏菌基因组DNA。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门氏菌 ompc基因 聚合酶链式反应 检测方法
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禽大肠杆菌外膜蛋白基因C(ompC)的序列分析 被引量:4
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作者 曹素芳 黄青云 +2 位作者 张煜坤 温纳相 陈红英 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期332-334,共3页
根据 Gen Bank中人源大肠杆菌 K- 12外膜蛋白基因 C(omp C)的核苷酸序列设计引物 ,应用 PCR方法从禽大肠杆菌 O2 、O78株及它们的融合双价弱毒菌株 O2 ,78(Norr Chlr)中分别扩增得到 omp C基因 ,序列测定及分析比较发现 ,3个菌株的 om ... 根据 Gen Bank中人源大肠杆菌 K- 12外膜蛋白基因 C(omp C)的核苷酸序列设计引物 ,应用 PCR方法从禽大肠杆菌 O2 、O78株及它们的融合双价弱毒菌株 O2 ,78(Norr Chlr)中分别扩增得到 omp C基因 ,序列测定及分析比较发现 ,3个菌株的 om p C基因均由 170 2 nt组成 ,核苷酸序列完全相同 ,只有 1个大的开放性阅读框 (ORF) ,长 10 92 bp,编码由 36 3个氨基酸组成的前 Om p C蛋白 ,前 2 1个氨基酸残基组成信号肽 ,成熟的 Omp C蛋白由 342个氨基酸残基组成 ,Mr为 4 0 0 0 0。其氨基酸序列也完全相同。从基因水平上证明了禽大肠杆菌 O2 、O78株及融合双价弱毒菌株 O2 ,78(NorrChlr)存在相同的外膜蛋白 C抗原 ,从而为进一步研究 Omp 展开更多
关键词 大肠杆菌 外膜蛋白 基因 序列分析 ompc 核苷酸
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以CotB为分子载体表面展示鸡白痢沙门氏菌OmpC的重组枯草杆菌芽孢对小鼠免疫效果的研究 被引量:5
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作者 刘明刚 戴茜茜 +3 位作者 徐毓琴 张飞燕 唐慧琴 潘康成 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期966-969,977,共5页
为研究小鼠口服以CotB为分子载体表面展示鸡白痢沙门氏菌外膜蛋白OmpC的重组枯草杆菌芽孢后诱导产生的特异性抗体水平与交叉保护作用,本研究将120只成年雌性小鼠随机分为5组,A组与B组在第0、15 d分别灌服重组枯草杆菌SE1与野生型枯草杆... 为研究小鼠口服以CotB为分子载体表面展示鸡白痢沙门氏菌外膜蛋白OmpC的重组枯草杆菌芽孢后诱导产生的特异性抗体水平与交叉保护作用,本研究将120只成年雌性小鼠随机分为5组,A组与B组在第0、15 d分别灌服重组枯草杆菌SE1与野生型枯草杆菌168芽孢(1.0×10^(10)cfu芽孢/次/只),C组与D组则分别拌料饲喂重组枯草杆菌SE1与野生型枯草杆菌168芽孢(1.0×10~6cfu芽孢/g饲料),E组仅饲喂基础日粮。饲喂至22d,每组随机选取4只小鼠采集血清和小肠内容物,采用ELISA检测各组小鼠OmpC特异性抗体水平;同时,每组小鼠随机选取16只并分为两个小组,进行鼠伤寒沙门氏菌交叉保护试验。结果显示,口服重组芽孢可诱导产生特异性血清IgG与肠粘膜SIgA抗体,与对照组相比差异极显著(p<0.01),拌料饲喂方式所诱导的抗体水平均显著高于灌服方式(p<0.05);重组芽孢可为小鼠抗2×LD_(50)和10×LD_(50)攻毒剂量的鼠伤寒沙门氏菌感染提供100%和50%的保护作用。结果表明,重组芽孢经口服免疫可诱导机体产生特异性血清IgG与肠粘膜SIgA抗体,并可赋予交叉保护作用抗鼠伤寒沙门氏菌感染。 展开更多
关键词 鸡白痢沙门氏菌 外膜蛋白ompc 枯草芽孢杆菌 芽孢表面展示 免疫效果
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OmpC高表达与大肠埃希氏菌四环素耐药的关系 被引量:2
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作者 张丹凤 李惠 王三英 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期858-862,共5页
大肠埃希氏菌(Escherichia coli)外膜蛋白OmpC与细菌耐药关系密切,但有关其高表达与大肠埃希氏菌耐药的关系研究尚不清楚.为深入探讨OmpC的耐药功能,将ompC克隆到pET-28a载体上进行诱导表达,采用MALDI-TOF质谱分析证明,重组OmpC能够在... 大肠埃希氏菌(Escherichia coli)外膜蛋白OmpC与细菌耐药关系密切,但有关其高表达与大肠埃希氏菌耐药的关系研究尚不清楚.为深入探讨OmpC的耐药功能,将ompC克隆到pET-28a载体上进行诱导表达,采用MALDI-TOF质谱分析证明,重组OmpC能够在外膜上大量表达.以此高表达菌株进行四环素耐药试验发现,ompC-pET-28a-BL21的最低抑菌浓度(MIC)值是对照菌株pET-28a-BL21的64倍.研究结果从蛋白质水平进一步证明OmpC在大肠埃希氏菌耐药中的重要作用. 展开更多
关键词 ompc 大肠埃希氏菌 耐药性 高表达
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Disrupted ompC Causes Osmosis Sensitivity of Escherichia coli in Alkaline Medium
6
作者 王玉琪 汪玲玲 +5 位作者 孙益嵘 陈艺彩 朱磊 郭丽霞 罗彪 王海洪 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1131-1138,共8页
The Escherichia coli strain DH42 is sensitive to high osmolarity in an alkaline medium. Using mini-Tn5 mutagenesis, construction of mutant strains by homologous recombination and subcloning of DNA fragment techniques,... The Escherichia coli strain DH42 is sensitive to high osmolarity in an alkaline medium. Using mini-Tn5 mutagenesis, construction of mutant strains by homologous recombination and subcloning of DNA fragment techniques, gene ompC was identified as the key factor that, once disrupted, caused osmosis-sensitivity of E. coli strain DH42 grown in an alkaline medium. Through P1 transduction, a mutant strain, D9 (W3110 ompC:kan), was constructed and growth comparison was performed between DH42 and D9 under different pHs and salt concentrations. The result showed that ompC was necessarily required for hyperosmotic adaptation of E. coli in the alkaline medium. 展开更多
关键词 ompc OSMOLARITY ALKALINE PH
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OmpC-HBsAg‘a’表位嵌合蛋白疫苗的构建表达及其对HBV转基因小鼠的免疫效果研究
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作者 钮晓音 倪润洲 李小彦 《南通大学学报(医学版)》 2011年第4期243-247,F0002,共6页
目的:构建OmpC-HBsAg‘a’表位嵌合蛋白疫苗来研究对HBV转基因小鼠的免疫效果。方法:将HBsAg‘a’抗原决定簇主要肽段S-(124-147aa)插入到沙门氏菌外膜孔道蛋白OmpC第4 Loop区,并运用DsbA进行辅助二硫键形成,对HBV转基因小鼠免疫,... 目的:构建OmpC-HBsAg‘a’表位嵌合蛋白疫苗来研究对HBV转基因小鼠的免疫效果。方法:将HBsAg‘a’抗原决定簇主要肽段S-(124-147aa)插入到沙门氏菌外膜孔道蛋白OmpC第4 Loop区,并运用DsbA进行辅助二硫键形成,对HBV转基因小鼠免疫,激活固有免疫系统中的B-1细胞产生HBsAb。结果:HBsAg的adr‘a’表位CTSPAQGTSMF-PSCCCTKPSDGNC成功插入OmpC-HBsAg‘a’基因的588~659 bp之间,重组后的载体PCR鉴定和测序结果完全与设计相一致。IPTG诱导表达后,荧光显微镜显示3E7抗体能够识别BL21外膜表面的OmpC-HBsAg‘a’表位嵌合蛋白,用表达该蛋白的BL21直接免疫HBV转基因小鼠,能够产生HBsAb抗体。结论:OmpC-HBsAg‘a’表位嵌合蛋白在原核中表达具有天然构象,以此蛋白为基础的疫苗能够打破HBV转基因小鼠对HBsAg的免疫耐受。 展开更多
关键词 嵌合蛋白疫苗 ompc 乙型肝炎病毒转基因小鼠 免疫
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大肠埃希菌外膜蛋白OmpC的原核表达与免疫保护作用研究 被引量:11
8
作者 俱雄 陈春琳 +3 位作者 刘祥 张涛 吴三桥 张晓娟 《生命科学研究》 CAS CSCD 2015年第2期131-136,共6页
Omp C蛋白为大肠埃希菌主要外膜蛋白,具有提高宿主免疫能力的作用,在疫苗上有很好的应用前景。通过分子克隆获得Omp C蛋白的表达菌株;Western-blotting法证实Omp C抗体可与表达的重组蛋白很好的结合。利用切胶纯化获得Omp C蛋白,免疫小... Omp C蛋白为大肠埃希菌主要外膜蛋白,具有提高宿主免疫能力的作用,在疫苗上有很好的应用前景。通过分子克隆获得Omp C蛋白的表达菌株;Western-blotting法证实Omp C抗体可与表达的重组蛋白很好的结合。利用切胶纯化获得Omp C蛋白,免疫小鼠产生抗体,然后攻毒大肠埃希菌肠道致病菌,结果显示保护率达到63.64%,与对照相比较具有显著差异。利用正交试验,获得Omp C菌株的最佳表达条件为:诱导时菌液OD600值0.5,IPTG终浓度0.3 mmol/L,诱导时间8 h,温度32℃;最佳培养条件为:葡萄糖浓度0%,转速230 r/min,装液量50 m L。为Omp C工业发酵、蛋白功能与疫苗开发研究奠定了基础。 展开更多
关键词 ompc蛋白 免疫保护 正交试验 诱导条件
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大肠杆菌外膜蛋白OmpC的生物信息学分析及表位多肽疫苗的重组预测 被引量:6
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作者 俱雄 党亚锋 +4 位作者 刘祥 丁锐 陈琛 冯自立 张辰露 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期94-100,共7页
为设计大肠杆菌外膜蛋白OmpC的表位多肽重组疫苗,进一步提高OmpC蛋白的免疫效果,通过生物信息学软件对OmpC蛋白的进化关系、高级结构与细胞表位进行分析。结果表明,大肠杆菌、沙门伤寒菌、肺炎克雷伯菌,这3种细菌具有较高同源性,OmpC蛋... 为设计大肠杆菌外膜蛋白OmpC的表位多肽重组疫苗,进一步提高OmpC蛋白的免疫效果,通过生物信息学软件对OmpC蛋白的进化关系、高级结构与细胞表位进行分析。结果表明,大肠杆菌、沙门伤寒菌、肺炎克雷伯菌,这3种细菌具有较高同源性,OmpC蛋白可能对这3种菌株的感染起到交叉免疫保护作用。OmpC为亲水性蛋白,1~21位氨基酸为信号肽位置,无跨膜结构并定位于细胞膜外;OmpC二级结构中含无规则卷曲43.05%,a-螺旋16.08%,β-转角0%,β-片层40.87%。OmpC蛋白可能存在5个优势B细胞表位,1个CTL表位,1个Th细胞表位;并重组拼接获得抗原性较好的OmpC蛋白表位多肽。 展开更多
关键词 大肠杆菌 ompc蛋白 表位疫苗 抗原分析
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鸡白痢沙门氏菌外膜蛋白C基因(OmpC)的克隆与表达 被引量:5
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作者 刘曼 杨桂连 +3 位作者 王春凤 刘琼 何佳雪 李颖 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期110-113,共4页
以鸡白痢沙门氏菌基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增得到1026bp的OmpC基因片段。将扩增的OmpC基因克隆至大肠杆菌-乳酸菌穿梭表达载体pW425et中,构建原核表达重组质粒pW425et-OmpC。将pW425et-OmpC转化至thyA基因缺陷型大肠杆菌感受态E.c... 以鸡白痢沙门氏菌基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增得到1026bp的OmpC基因片段。将扩增的OmpC基因克隆至大肠杆菌-乳酸菌穿梭表达载体pW425et中,构建原核表达重组质粒pW425et-OmpC。将pW425et-OmpC转化至thyA基因缺陷型大肠杆菌感受态E.coliX13中。SDS-PAGE分析可见1条约36ku的融合蛋白。Western blot分析表明,该重组蛋白具有反应原性,本研究结果为pW425et-OmpC在乳酸菌中的表达提供了实验依据。 展开更多
关键词 鸡白痢沙门氏菌 ompc基因 克隆和表达
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伤寒沙门菌外膜孔道蛋白ompC、ompF缺陷株的制备及其耐药性 被引量:3
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作者 汪伟伟 夏歆 +4 位作者 王静瑜 张桂红 陈龙 黄新祥 生秀梅 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2015年第6期532-535,542,共5页
目的:制备伤寒沙门菌omp C缺陷株及omp C-omp F双缺陷株,研究外膜孔道蛋白Omp C、Omp F在伤寒沙门菌耐药中的作用。方法:经自杀质粒介导的同源重组方法制备omp C缺陷株及omp C-omp F双缺陷株,比较伤寒沙门菌omp C缺陷株、omp F缺陷株及o... 目的:制备伤寒沙门菌omp C缺陷株及omp C-omp F双缺陷株,研究外膜孔道蛋白Omp C、Omp F在伤寒沙门菌耐药中的作用。方法:经自杀质粒介导的同源重组方法制备omp C缺陷株及omp C-omp F双缺陷株,比较伤寒沙门菌omp C缺陷株、omp F缺陷株及omp C-omp F双缺陷株与野生株在多黏菌素B、卡那霉素以及氨苄青霉素处理下的生存能力。结果:成功制备伤寒沙门菌omp C单缺陷以及omp C-omp F双缺陷株。各菌株在普通培养条件下生长情况无差异;多黏菌素B及氨青苄霉素处理条件下omp C缺陷株、omp C-omp F双缺陷株生存能力明显强于野生株,而omp F缺陷株生存能力则低于野生株;卡那霉素处理条件下,各缺陷株生存能力均明显低于野生株。结论:外膜孔道蛋白Omp C、Omp F参与伤寒沙门菌耐药,但对不同药物的耐药机制不尽相同,具体机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 伤寒沙门菌 ompc OMPF 抗生素 耐药性
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基于rGroEL和rOmpC的牙鲆迟缓爱德华氏菌血清学诊断试纸条的制备 被引量:2
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作者 王欣茹 唐小千 +2 位作者 绳秀珍 邢婧 战文斌 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期32-37,共6页
本实验旨在制备一种基于重组抗原rGroEL和rOmpC的迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)血清学诊断试纸条,用于定性检测牙鲆(Paralichthys olivaceus)血清中抗迟缓爱德华氏菌的抗体水平。前期研究发现分子伴侣蛋白GroEL和外膜蛋白OmpC是... 本实验旨在制备一种基于重组抗原rGroEL和rOmpC的迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)血清学诊断试纸条,用于定性检测牙鲆(Paralichthys olivaceus)血清中抗迟缓爱德华氏菌的抗体水平。前期研究发现分子伴侣蛋白GroEL和外膜蛋白OmpC是迟缓爱德华氏菌的重要免疫保护性抗原。本研究重组表达获得高纯度的rGRoEL和rOmpC,以其免疫健康牙鲆制备抗血清,同时制备获得牙鲆抗迟缓爱德华氏菌全菌血清。ELISA结果显示rGroEL和rOmpC不存在抗原交叉,抗rGroEL和rOmpC血清均可与全菌发生阳性结合,且全菌抗血清也能识别rGroEL和rOmpC。将rOmpC、rGroEL及羊抗鼠IgG划线于NC膜分别作为检测线T1、检测线T2和质控线C,同时以制备的胶体金标记的鼠抗牙鲆IgM单克隆抗体2D8固定于结合垫,构建获得胶体金免疫层析试纸条。将试纸条分别用以检测不同稀释度的各抗血清,检测过程可在15min内完成,结果显示制备的灭活全菌、rGroEL和rOmpC牙鲆抗血清分别最高稀释200、600与400倍时,均可使检测线T1与T2显红色。同时,以试纸条检测牙鲆免疫全菌灭活疫苗后不同时间点的抗血清,结果显示3、4、5周检测结果为阳性,且检测线颜色随着免疫后时间延长而加深。实验结果表明,制备的基于重组抗原rGroEL和rOmpC迟缓爱德华氏菌血清学诊断试纸条,操作简单,结果快速可见,可以定性检测牙鲆血清中抗迟缓爱德华氏菌的抗体水平,可应用于全菌灭活疫苗、rGroEL和rOmpC亚单位疫苗免疫效果的评价,同时也具有牙鲆爱德华氏菌病的潜在诊断价值。 展开更多
关键词 牙鲆 GROEL ompc 迟缓爱德华氏菌 血清学诊断 胶体金免疫层析试纸条
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细菌膜泡(ECV)、外膜蛋白复合物(OMPC)的氨基酸组成分析
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作者 倪龙兴 史俊南 陈镔复 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 1994年第1期27-29,共3页
采用酸水解法比较分析了PgW50、Pg381的ECV、OMPC中17种氨基酸的不同含量,结果显示:ECV的蛋白结构基本上与同菌的OMPC相近,而在某些氨基酸浓度(nmol/L)存在差异,说明在ECV形成过程中其外膜可... 采用酸水解法比较分析了PgW50、Pg381的ECV、OMPC中17种氨基酸的不同含量,结果显示:ECV的蛋白结构基本上与同菌的OMPC相近,而在某些氨基酸浓度(nmol/L)存在差异,说明在ECV形成过程中其外膜可能发生某些生化改变;不同菌的OMPC之间、ECV之间在氨基酸含量上也存在着差异,表明不同种的细菌,其OMPC在结构上各有差异,相应形成的ECV都会发生某些特殊的变化;另外,天冬氨酸、甘氨酸可能也是组成Pg、Pe细菌细胞壁的重要的氨基酸成分。 展开更多
关键词 氨基酸 卟啉菌 膜泡 外膜蛋白
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大肠埃希菌尿液分离株β-内酰胺酶基因、AmpC酶基因和膜孔蛋白ompC基因研究 被引量:3
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作者 翁幸鐾 糜祖煌 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1083-1084,共2页
近年来,国内关于E.coli产β-内酰胺酶和AmpC酶耐β-内酰胺类药物的研究报道已有不少,但所涉及基因种类不够全面.为系统性地了解E.coli尿液分离株β-内酰胺酶基因、AmpC酶基因和膜孔蛋白ompC基因的存在和变异情况,本研究进行了E.coli可... 近年来,国内关于E.coli产β-内酰胺酶和AmpC酶耐β-内酰胺类药物的研究报道已有不少,但所涉及基因种类不够全面.为系统性地了解E.coli尿液分离株β-内酰胺酶基因、AmpC酶基因和膜孔蛋白ompC基因的存在和变异情况,本研究进行了E.coli可能存在的15种β-内酰胺酶基因、6种AmpC酶基因和膜孔蛋白ompC基因检测,结果3类基因均有检出,并发现了3株ompC基因新亚型,已登录美国GenBank(NB015:HQ333474,NB020:GQ501059,NB027:GQ501066). 展开更多
关键词 Β-内酰胺酶基因 AMPC酶基因 ompc 膜孔蛋白 C基因 分离株 大肠埃希菌 尿液
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外膜蛋白OmpC在枯草芽孢杆菌中的分泌表达及重组活菌制剂在肉鸡上的应用 被引量:3
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作者 王振华 潘康成 包小玉 《畜牧与兽医》 北大核心 2017年第8期84-87,共4页
为了研究携带鸡白痢沙门菌主要外膜蛋白OmpC基因的重组枯草芽孢杆菌活菌制剂在肉鸡上的免疫原性,以具有益生菌属性的枯草芽孢杆菌作为基因疫苗表达宿主,构建表达鸡白痢沙门菌主要外膜蛋白的枯草芽孢杆菌重组菌(pHT43/WB800n-OmpC)。将... 为了研究携带鸡白痢沙门菌主要外膜蛋白OmpC基因的重组枯草芽孢杆菌活菌制剂在肉鸡上的免疫原性,以具有益生菌属性的枯草芽孢杆菌作为基因疫苗表达宿主,构建表达鸡白痢沙门菌主要外膜蛋白的枯草芽孢杆菌重组菌(pHT43/WB800n-OmpC)。将重组菌饮水饲喂12日龄艾维茵肉鸡,同时设空白、空转菌及非诱导菌对照组,分别于免疫后27和42日龄测定特异性抗体效价,同时45日龄后采用沙门菌C79-13株腹腔注射攻毒。结果:SDS-PAGE分析显示该重组蛋白大小为37 ku;Western blot分析显示表达蛋白具有很好的反应原性;肉鸡饲喂结果显示,42日龄时血清中检测到特异性抗体,且抗体效价为1∶32;攻毒试验显示重组菌诱导组免疫保护率为76.92%,而对照组、空转菌组、非诱导组保护率分别为23.08%、38.46%和30.77%。结果表明:此重组菌对鸡沙门菌具有免疫保护作用,为沙门菌的免疫机制研究奠定了基础,同时实现了饲用疫苗的双重作用。 展开更多
关键词 沙门菌 外膜蛋白 ompc 枯草芽孢杆菌 免疫保护率
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鸡致病性E.coli O_(24)基因工程包涵体疫苗的制备及免疫原性 被引量:2
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作者 水小溪 李寒鸣 +2 位作者 蔡乐 赵宝华 张天兵 《河北师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2010年第1期103-107,共5页
利用已构建的基因工程菌株BL21/pET-28a-pilA和BL21/pET-28a-ompC,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析分别可见表达的20ku和40.9ku的特异条带,确定蛋白以包涵体的形式存在.Western blot结果表明,表达的Ⅰ型菌毛蛋白(pilA基因编码)和外膜蛋白(ompC... 利用已构建的基因工程菌株BL21/pET-28a-pilA和BL21/pET-28a-ompC,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析分别可见表达的20ku和40.9ku的特异条带,确定蛋白以包涵体的形式存在.Western blot结果表明,表达的Ⅰ型菌毛蛋白(pilA基因编码)和外膜蛋白(ompC基因编码)可与抗体发生特异性结合,说明其具有良好的反应原性.将表达特异蛋白的重组菌株BL21/pET-28a-pilA和BL21/pET-28a-ompC分别制成基因工程包涵体疫苗,免疫小鼠后,具有很好的保护能力.ELISA结果显示,免疫的小鼠体内已产生相应的抗体,效价为1∶400,说明这2种疫苗有很好的免疫原性.表明这2株基因工程菌株有望作为鸡致病性大肠杆菌基因工程疫苗的候选生产菌株. 展开更多
关键词 pilA ompc 基因工程包涵体疫苗 免疫原性
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致病性鸡大肠杆菌pilA和外膜蛋白C原核诱导表达条件的优化 被引量:1
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作者 水小溪 蔡乐 赵宝华 《河北师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2009年第5期671-676,共6页
分别从温度、接菌量、诱导时机、IPTG浓度、诱导时间等条件对2种重组菌株BL21/pET-28a-pilA和BL21/pET-28a-ompC进行优化.得到最佳诱导条件:BL21/pET-28a-pilA菌株为40℃摇培,80μL的接菌量,160 r/min摇培2 h后加入终浓度为0.96 mmol/L... 分别从温度、接菌量、诱导时机、IPTG浓度、诱导时间等条件对2种重组菌株BL21/pET-28a-pilA和BL21/pET-28a-ompC进行优化.得到最佳诱导条件:BL21/pET-28a-pilA菌株为40℃摇培,80μL的接菌量,160 r/min摇培2 h后加入终浓度为0.96 mmol/L的IPTG,再诱导表达4 h,得到最高特异蛋白表达量;BL21/pET-28a-ompC菌株为37℃培养,80μL的接菌量,160 r/min摇培2.5 h后加入终浓度为0.64 mmol/L的IPTG,再诱导表达6 h,得到最高特异蛋白表达量. 展开更多
关键词 pilA ompc 原核表达 诱导条件优化
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屠宰场猪肉中猪霍乱沙门氏杆菌的分离鉴定及16S rRNA的序列分析 被引量:2
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作者 杨佰启 温贵兰 +5 位作者 邱燕 张升波 徐丽 李昌红 林汉卿 田浪 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第6期73-77,171,共6页
为了了解屠宰场生猪肉被沙门氏杆菌污染的情况,试验对采集的20份生猪肉进行细菌分离培养、选择性培养、生化试验、革兰氏染色、沙门氏杆菌外膜蛋白C(Omp C)基因PCR检测等方法进行鉴定,采用MegAlign软件绘制分离菌16S rRNA遗传进化树。... 为了了解屠宰场生猪肉被沙门氏杆菌污染的情况,试验对采集的20份生猪肉进行细菌分离培养、选择性培养、生化试验、革兰氏染色、沙门氏杆菌外膜蛋白C(Omp C)基因PCR检测等方法进行鉴定,采用MegAlign软件绘制分离菌16S rRNA遗传进化树。结果表明:从屠宰场生猪肉中分离到一株疑似沙门氏杆菌,命名为GZ-Q1株; GZ-Q1株为革兰氏阴性的短小杆菌;生化试验结果与沙门氏杆菌的生化特性基本相符; Omp C基因PCR检测可见约204 bp的目的条带; GZ-Q1株与猪霍乱菌株(CP007639. 1)的同源性最高,为99. 9%。说明从屠宰场生猪肉中分离的GZ-Q1株为猪霍乱沙门氏杆菌。 展开更多
关键词 猪霍乱沙门氏杆菌 猪肉 分离鉴定 ompc 16S RRNA 屠宰场
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基于BP网络的稀疏信道估计算法的改进 被引量:1
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作者 管建中 孙艳华 张延华 《中国电子科学研究院学报》 2011年第3期284-289,共6页
为了在稀疏信道下有效地降低传统信道估计算法的复杂度,提出了一种基于反向传播(BP,back propagation)网络的正交匹配追踪后接消除(OMPC,orthogonal matching pursuit cancellation)信道估计改进算法。首先通过OMPC算法确定各个非零抽... 为了在稀疏信道下有效地降低传统信道估计算法的复杂度,提出了一种基于反向传播(BP,back propagation)网络的正交匹配追踪后接消除(OMPC,orthogonal matching pursuit cancellation)信道估计改进算法。首先通过OMPC算法确定各个非零抽头的位置,其次设置BP网络的权值与阈值,进一步实现对非零抽头估计值的逼近,最后通过自适应调整来对信道估计的准确度进行修正。通过与基于BP和OMPC信号稀疏分解的比较发现,本方法较好地解决了信号稀疏分解计算量大、收敛速度慢、不能利用信道稀疏特性等难题。 展开更多
关键词 稀疏信道 BP神经网络 ompc GASS MP
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重组大肠埃希菌外膜蛋白C的表达、纯化及多克隆抗体制备 被引量:2
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作者 俱雄 陈春琳 +4 位作者 刘祥 王成祥 王令 吴三桥 张涛 《陕西理工学院学报(自然科学版)》 2015年第3期52-57,共6页
采用分子克隆方法获得大肠埃希菌外膜蛋白Omp C表达菌株;利用SDS-PAGE电泳切胶纯化、尿素梯度复性获得Omp C蛋白,免疫小鼠制备Omp C蛋白多克隆抗体。ELISA法证实Omp C抗血清滴度达1∶6 400倍,Western blotting发现Omp C抗血清具有很好... 采用分子克隆方法获得大肠埃希菌外膜蛋白Omp C表达菌株;利用SDS-PAGE电泳切胶纯化、尿素梯度复性获得Omp C蛋白,免疫小鼠制备Omp C蛋白多克隆抗体。ELISA法证实Omp C抗血清滴度达1∶6 400倍,Western blotting发现Omp C抗血清具有很好的特异性。通过DNAMAN软件对Omp C序列同源性分析显示不同细菌间存在较高同源性,采用MEGA软件对Omp C的系统进化分析发现肠道致病菌亲缘关系更近。为Omp C蛋白免疫学功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 ompc蛋白 酶联试验 多克隆抗体 WESTERN BLOTTING
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