人微管蛋白失稳剂Oncoprotein18原核表达载体的构建及表达

目的:原核表达人Oncoprotein18(Op18)蛋白,为 制备抗Op18的mAb作准备.方法:从人皮肤组织中用RT PCR扩增Op18cDNA的全长编码序列,克隆入表达载体pR SETA中,构建Op18的高表达工程菌,并以IPTG诱导表达目 的蛋白,通过亲和层析法纯化表达的Op18融合蛋白.结果: 酶切及测序鉴定证明,获得含有目的基因片段的重组质粒,表 达的Op18融合蛋白以可溶性的形式存在.结论:所获Op18 融合蛋白以可溶性的形式存在,为制备其mAb及进一步研究 Op18在创伤愈合及瘢痕形成中的作用打下了基础.

微管失稳剂oncoprotein18/stathmin基因在深Ⅱ度烧伤愈合前创面及增生性瘢痕中的表达

目的 观察深Ⅱ度烧伤创面愈合前及愈合后增生性瘢痕组织中微管失稳剂oncopro tein18 stathmin(Op18)基因的表达。 方法 提取临床深Ⅱ度烧伤愈合前与愈合后不同时期增生性瘢痕中的总RNA,以GADPH基因表达为内参照 ,采用逆转录酶 多聚酶链式反应 (RT PCR)方法 ,半定量检测上述基因表达水平。 结果 与正常组织比较 ,伤口愈合前Op18基因表达显著降低 (P <0.0 5 ),愈合后表达迅速增高 (P <0.0 5 ),在 4～ 32个月增生性瘢痕中Op18基因稳定高表达。 结论 在伤后早期Op18基因的表达水平降低与细胞增殖、组织修复的需要相适应 。