随意引物PCR用于口腔链球菌基因分型的初步研究

目的：探讨口腔链球菌基因分型，比较细菌相互间基因差异。方法：设计２对１０碱基随意引物，提取变链球菌、血链球菌染色体ＤＮＡ，分别用一对引物进行ＰＣＲ扩增。结果：变链球菌、血链球菌扩增的ＤＮＡ基因片段有较大区别。设计不同序列引物，扩增的ＤＮＡ片段亦不同，可以分辨不同的基因位点。结论：随意引物ＰＣＲ检测方法稳定。

不同龋敏感儿童牙菌斑内口腔链球菌的PCR-DGGE分析

目的 应用PCR-变性梯度凝胶电泳（DGGE）技术，分析不同龋敏感儿童牙菌斑内口腔链球菌菌群及其菌种组成的多样性。方法 牙菌斑组织取自45例学龄前儿童，根据乳牙龋失补牙面（dmfs）指数分为无龋（dmfs=0）、中龋（dmfs=4～6）和高龋（dmfs〉8）（n=15）。分别提取细菌总DNA，进行链球菌属mp B特征序列的PCR扩增及DGGE分析，克隆、测序并与核酸序列数据库的序列进行比对。结果 无龋儿童菌斑中口腔链球菌菌群的基因型分布均显著高于中龋和高龋儿童（P〈0．05）；变异链球菌群是高龋组中的优势菌群。结论 PCR—DGGE技术结合rnpB基因克隆文库分析可较灵敏、直观地反映牙菌斑中链球菌属各菌群及其菌种的组成情况。

应用16S rDNA序列同源性分析鉴定放射线照射后的口腔链球菌

目的 对受放射线影响 ,糖发酵特征发生改变的口腔链球菌进行鉴定。方法 生理、生化试验 ;16SrDNA序列同源性分析 :提取待鉴定细菌的基因组DNA ,用多聚酶链式反应 (PCR)扩增 16SrDNA ,对其测序后输入GenBank中与已知序列进行比较。结果 应用 16SrDNA序列同源性分析方法可对因受放射线影响 ,糖发酵特征发生改变而无法通过生化试验进行鉴定的菌株做出准确鉴定。结论 在无法通过生化试验方法对细菌作出准确鉴定时 。

变形链球菌表面蛋白抗原在口腔链球菌中的分布

通过ＥＬＩＳＡ法和免疫电镜观察，以明确变形链球菌表面抗原在Ⅰ／Ⅱ在８种口腔常驻链球菌——变形链球菌、血链球菌、轻链球菌、米勒链球菌和唾链球菌中的分布。结果显示：抗原Ⅰ／Ⅱ或类似蛋白抗原广泛地存在于本研究测试菌中。这一结果表明抗原Ⅰ／Ⅱ，至少是其中部分抗原决定簇在口腔链球菌表面粘附器中具有高度保守性。

鸡卵黄特异抗体对人牙菌斑中变形链球菌影响的体内研究

目的 探讨鸡卵黄特异抗体 (IgY)对健康人牙菌斑中变形链球菌构成比的影响。方法 选择志愿受试者 2 4人 ,随机分为 3组 :实验组 (9人 )使用 1 5 %IgY ;阳性对照组 (9人 )使用 1 7mmol L洗必太溶液 ;阴性对照组(6人 )使用PBS缓冲生理盐水 ,各组均于饭后用药含漱 1min ,持续 3周。分别于用药前、用药中 1、2、3周及停药后1、3、5周记录菌斑指数 ,并收集光滑面集合菌斑样本在MS及MSB培养基中微需氧环境培养 ,检测菌斑中口腔链球菌群及变形链球菌的菌落形成数 ,分析各组使用药物前后菌斑中变形链球菌所占比例的变化及变化的延续性。结果 应用IgY后 ,其菌斑指数无明显改变 ,但牙菌斑中变形链球菌群在口腔链球菌群中的比例明显降低 ,并且在较长时间内 (停药后 5周 )保持菌斑中变形链球菌的低水平。结论 IgY处理后牙面菌斑的菌群微生态发生改变 ,为进一步研究牙菌斑微生态防治打下基础。

颗粒链球菌属的研究进展

颗粒链球菌属是兼性厌氧、触酶阴性的革兰阳性球菌,口腔微生物组研究发现颗粒链球菌属是人口腔的优势菌,可引起牙周病、牙髓炎等机会感染。本文重点介绍颗粒链球菌属的最新研究进展。

藤茶多酚分离纯化及其对口腔变形链球菌抑制作用研究

采用Folin-Ciocaileu比色法测定藤茶多酚质量浓度,计算吸附率和洗脱率,比较5种不同性质大孔树脂对藤茶多酚静态吸附和解吸的影响,优选出HPD-100型树脂。进一步通过单因素试验得到藤茶多酚分离纯化的优选工艺条件为:上样液藤茶多酚粗提物质量浓度2.4 g/L、流速2.0 BV/h、体积6.5 BV;洗脱剂乙醇体积分数60%、流速3 BV/h、体积7.5 BV。在此条件下,经大孔树脂处理后藤茶多酚质量分数由29.9%提高到69.8%。抑菌试验表明,经大孔树脂处理后的藤茶提取物具有显著抑制口腔变形链球菌生长的作用,其最低抑菌浓度为3.13 g/L。

口腔链球菌右旋糖酐酶分子结构和功能的研究进展

右旋糖酐酶是一种葡聚糖酶,主要降解α-1,6葡聚糖,能够水解水溶性多糖,广泛存在于自然界中。很多细菌包括口腔链球菌在内都能够合成右旋糖酐酶。口腔链球菌合成的右旋糖酐酶与胞外多糖的修饰以及细菌的黏附有关。本文主要对近年来口腔链球菌右旋糖酐酶的分子结构及其功能的研究进行综述。

双歧杆菌BB-12后生元对口腔变形链球菌的抑制作用

目的探讨双歧杆菌BB-12后生元对口腔变形链球菌的抑制作用,为预防和治疗口腔疾病提供新思路。方法本研究将双歧杆菌BB-12后生元与口腔变形链球菌共培养,按不同培养模式分为Control组(变形链球菌阳性对照组)、A组(变形链球菌+双歧杆菌组)、B组(变形链球菌+灭活双歧杆菌组)和C组(变形链球菌+发酵双歧杆菌组)。收集培养24 h后的各组菌体,Trizol法提取菌体总RNA,荧光定量PCR法检测葡糖基转移酶gtfB、gtfC基因、果糖基转移酶ftf基因、葡聚糖结合蛋白gbpB、gbpC基因和组氨酸激酶ciaH、comD基因的表达量。结果与Control组比较,其余3组的口腔变形链球菌gtfB、gtfC、ftf、gbpB、gbpC、ciaH、comD基因表达量均显著降低(均P<0.05);实验组组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论双歧杆菌BB-12后生元可能通过下调变形链球菌中与生物膜形成等相关基因的表达,抑制口腔变形链球在口腔黏膜上形成生物膜,防止口腔疾病的发生。

口腔链球菌对伴放线嗜血菌生长影响的体外实验

目的:研究变异链球菌、血链球菌、远缘链球菌、唾液链球菌对伴放线嗜血菌生长的影响。方法:制备伴放线嗜血菌BHI琼脂板,将4种口腔链球菌菌悬液滴注于其上,兼性厌氧培养48h,观察有无抑菌现象。分别将4种口腔链球菌与伴放线嗜血菌等体积等浓度混合制成双菌种悬液在液体BHI中培养,每隔4h取浮游菌悬液梯度稀释,接种于BHI琼脂板上培养48h,计数伴放线嗜血菌占菌落总数的百分比;扫描电镜观察双菌种生物膜生长情况。结果:琼脂扩散实验显示,变异链球菌、血链球菌、远缘链球菌周围出现抑菌圈,唾液链球菌周围未出现抑菌圈。伴放线嗜血菌所占双菌种混合细菌的比例随时间延长呈下降趋势(p<0.05)。生物膜观察显示,单菌种伴放线嗜血菌形成生物膜的时间较口腔链球菌时间长;双菌种混合培养时伴放线嗜血菌的量随时间推移而减少。结论:4种口腔链球菌抑制伴放线嗜血菌生长。

感受态与口腔链球菌多种表型间关系的研究进展

链球菌是人类口腔中最为常见的细菌类群之一,在口腔微生态平衡的维持与致病中发挥了重要作用。口腔链球菌中的大多数可以进入感受态,在此生理状态下,细菌可摄取环境中的DNA并整合进入自身基因组从而获得新的遗传表型或特性。大量研究表明,口腔链球菌的感受态调控通路不是孤立的,与生物膜形成、细菌素产生、耐酸、氧应激、细胞自溶和耐药性等多个表型的调控存在紧密关系,研究这些不同表型间的相互影响对理解口腔菌群稳态及防治疾病有重要意义。本文以变异链球菌、格氏链球菌、血链球菌和肺炎链球菌4种典型的口腔链球菌为代表,对感受态与口腔链球菌多种表型间关系的研究进展做一综述。