新型除草剂Oryzalin的浓度和处理时间对诱导彩色马蹄莲多倍体的影响

用新型除草剂Oryzalin作为彩色马蹄莲体细胞染色体加倍的诱导剂,以愈伤组织芽点为处理材料,研究了不同处理浓度和处理时间的除草剂对彩色马蹄莲染色体加倍的影响。结果表明:以0.001 6%的浓度处理36 h效果最好,变异率达34%。本研究为培育彩色马蹄莲四倍体新品种,以及进一步检测四倍体植株能否克服马蹄莲种间杂交障碍提供种质资源储备。

除草剂胺磺灵(Oryzalin)诱导椪柑四倍体的研究

以椪柑枝条为外植体,建立其无菌离体快繁体系,利用除草剂Oryzalin为诱变剂进行椪柑四倍体诱变处理,研究胺磺灵Oryzalin不同浓度和不同处理时间对椪柑四倍体诱导效果的影响,结果表明:椪柑四倍体诱导的最佳处理条件为40 mg/L浓度的Oryzalin浸泡茎段2 d,诱导率最高为13.3%。

ORYZALIN不同处理方法对西瓜四倍体诱变效果的影响

以不同西瓜二倍体自交纯系为实验材料,以播前除草剂ORYZALIN为诱变剂,比较了不同处理方法(浓度为25,40 mg/L和55 mg/L的ORYZALIN溶液田间滴苗;浓度为125,200 mg/L和275 mg/L的ORYZALIN羊毛脂浸膏涂抹;40 mg/L的ORYZALIN溶液浸种及浸芽处理)以及滴苗处理后不同整枝方式对西瓜四倍体的诱变效果。不同处理方法对四倍体诱变效果的综合比较结果表明:以40 mg/L,6 d滴苗处理和125 mg/L涂抹处理效果最佳,其诱变率分别达到17.39%和36.36%;浸芽处理诱变率最高仅为3.33%,干种子浸种处理未见明显变异。不同材料间的四倍体诱变效果具有一定差异。

Oryzalin离体诱导小果型西瓜四倍体及倍性鉴定研究

以3个二倍体小果型西瓜优良自交系048、032、047-1为试验材料,研究培养方式、Oryzalin浓度、处理时间对离体诱导西瓜四倍体的诱变效果,并对变异植株进行形态学比较、气孔测定及染色体鉴定。研究结果表明,采用液体培养的四倍体诱导率比固体培养高。在含50 mg/L Oryzalin的液体培养基中振荡处理2 d,四倍体诱导率最高达33.3%。变异植株通过染色体计数法鉴定得出染色体数为44,确定为四倍体植株。再生植株表现为叶片肥厚,叶色深绿,茎节缩短,株型紧凑矮小,茎蔓挺直,叶形指数变小;叶片气孔密度明显减小,保卫细胞体积增大,叶绿体数目增多;花瓣颜色深黄,且增宽、增厚。此结果说明Oryzalin对不同基因型的四倍体诱变效果存在一定差异。

Oryzalin诱导短葶飞蓬染色体加倍与三倍体创制研究

以短葶飞蓬种子为实验材料,采用60和90μM的oryzalin水溶液分别浸泡处理种子24、48、72 h,诱导染色体加倍,并用染色体加倍的四倍体变异植株与二倍体植株杂交,获得三倍体。结果表明,依据气孔大小,采用60和90μM的oryzalin水溶液分别浸泡处理种子24、48、72 h,可使不同程度诱导染色体加倍,变异率为12.81%~24.62%,其中90μM的oryzalin水溶液浸泡处理种子72 h诱变率最高;采用四倍体变异植株与二倍体杂交,结实率显著下降,千粒重增加;通过染色体计数和流式细胞分析,在杂交后代植株中发现0.00%~100.00%不同比例的三倍体（2n=3x=27）。

除草剂Oryzalin诱变西瓜四倍体及倍性鉴定

以两个二倍体西瓜自交系为实验材料,研究除草剂Oryzalin不同滴苗浓度(30,40,50,60 mg/L)和不同处理时间(1,2,4,6 d)对西瓜四倍体的诱变效果,同时进行变异植株的外部形态和气孔观察及染色体鉴定。结果表明:以50 mg/L浓度,2 d滴苗处理诱变效果最佳,两个材料四倍体诱变率分别达到15.63%和17.19%。其变异植株通过染色体计数法鉴定得出染色体数为44,确定为四倍体植株,植株表现为叶片钝圆而厚,叶色深绿,叶缘多锯齿,花瓣颜色深黄,花瓣增宽、增厚;叶片气孔密度明显减小,保卫细胞体积增大。Oryzalin对不同基因型的四倍体诱变效果具有一定差异。

Oryzalin在西番莲多倍体育种中的应用

西番莲属多年生藤本植物,有很高的开发利用价值,且市场前景十分广阔,但传统的种植方式及西番莲品种本身已经不能满足市场需要,因此,西番莲育种及其育种的改良尤为重要。由于西番莲染色体数目少,且未发现有自然的多倍体变异,所以西番莲多倍体育种是可能的。传统的多倍体育种依靠秋水仙素来完成,但秋水仙素存在很大的不足,许多国内外学者在这方面已进行了不少探索,如用除草剂类的Oryzalin取代秋水仙素作为诱导剂来诱导植物多倍体,并取得了一些进展。本研究对Oryzalin在西番莲多倍体育种中的应用进行探索,以期望取得预期的目的。

除草剂Oryzalin诱变西瓜四倍体的应用前景

着重介绍了无籽西瓜发展历程、目前无籽西瓜的原理、西瓜四倍体除草剂Oryzalin诱变的科研进展、Oryzalin诱变四倍体西瓜的前景以及分析了无籽西瓜科研与生产中存在的问题。在无籽西瓜生产和科研实践中,往往是重栽培,轻品种改良。Oryzalin是一种强有效的染色体加倍诱变剂,它通过与受体微管蛋白亲和,干扰植物细胞的正常有丝分裂,使细胞染色体加倍,且具有超越秋水仙碱的诸多优点。Oryzalin加倍技术的出现和应用,使工厂化、大通量、系统化研究和培育四倍体、三倍体西瓜育种成为现实,必将带来育种技术和品种的新突破,显示广阔的应用前景。

滇丁香化学诱变的多倍体及其鉴定研究

为获得滇丁香新种质、选育抗性新品种,用不同浓度的氨磺灵溶液浸泡滇丁香种子,以种子下胚轴膨大视为变异株,统计变异率和发芽率,通过形态学观察、气孔观察、染色体计数及流式细胞仪检测确定其倍性。结果表明:15μmol/L氨磺灵浸泡种子24 h为滇丁香多倍体诱导最佳方法,变异率达60.1%,发芽率为66.7%,获得2株四倍体植株;25μmol/L氨磺灵诱导24 h,变异率为50%,获得1株八倍体植株。滇丁香变异植株在株高、叶长、叶厚方面均与对照植株呈显著差异,多倍体滇丁香植株株型矮小、叶片畸形较圆润且变厚、叶色较深、叶毛茎毛粗长。多倍体植株气孔的长和宽及保卫细胞的长和宽均显著大于二倍体植株,且气孔密度显著小于二倍体植株。经流式细胞仪检测,不同倍性植株DNA含量近似倍数关系。经染色体计数,滇丁香二倍体植株染色体数目为2n=44,四倍体植株4n=88。四倍体滇丁香丙二醛含量极显著低于二倍体,而脯氨酸含量极显著高于二倍体。

Production of autotetraploid plants by in vitro chromosome engineering in Allium hirtifolium

Persian shallot has been propagated vegetatively through daughter bulbs and has a narrow genetic base.In the present study,to create genetic diversity in terms of ploidy level,the effects of in vitro polyploidization were investigated on morphological,physiological and phytochemical traits.Different colchicine treatments(0,0.3%,0.5% and 0.7% concentrations)for 24,36 and 48 h and oryzalin treatments(0,0.001%,0.002% and 0.004% concentrations)for 4,6 and 8 h were used.A sterile basal plate of bulbs was used for the induction of polyploidy in liquid and solid media.After obtaining plantlets,root tip chromosomes were counted for the determination of ploidy levels.Flow cytometry was performed to confirm the chromosome counting results.The regenerated diploid and tetraploid plantlets were transferred to ex vitro conditions.Colchicine and oryzalin were both successful in inducing polyploids and the polyploids induced were tetraploids and mixoploids.The highest induction of polyploidy was obtained in solid media using 0.5%(w/v)colchicine for 36 h(35.0% polyploidy induction)and in 0.001%(w/v)Oryzalin for 8 h(45.5% polyploidy induction).Differences in plantlet height and weight,bulblet weight,density,stomatal width and length,and chlorophyll content were observed between tetraploid and diploid plants.Chromosome duplication,as a result of tetraploid induction,significantly influenced the antioxidant content and enzyme activities.The results showed that total phenolic content,allicin,and antioxidant capacity were significantly higher in the tetraploid plantlets than that in the diploid plantlets.SRAP loci polymorphisms indicated that the 12 autotetraploid plants(with high allicin content)had different genotypes from the parental diploid plant.Besides,in vitro polyploidy induction not only duplicated chromosomes but also altered the DNA sequence in Allium hirtifolium.In vitro induction of tetraploids in A.hirtifolium can be a reliable way to obtain suitable plant material for breeding programs to generate new genotypic variations.

氨磺灵诱导滇杨多倍体及倍性鉴定

氨磺灵是一种三硝基苯胺类除草剂,在应用于植物多倍体的诱导中,取到了较好的诱导效果。本研究以氨磺灵为诱变剂,采用混培法对来自3个不同地点的滇杨材料进行多倍体诱导,探讨氨磺灵对滇杨的多倍化诱导效果,继而对诱导后的材料进行同质化处理,鉴定其倍性。结果显示:氨磺灵可诱导滇杨产生多倍体材料,变异率最高的处理组合为预培养4 d后,在添加50 mg/L氨磺灵的分化培养基(1/2 MS+TDZ 0.01mg/L+NAA 0.01mg/L)中培养2 d,变异率可达28.57%。多倍体植株与正常株形态差异明显,且染色体数目增加为76条,多倍体滇杨的荧光通道值约为二倍体滇杨的2倍,表明滇杨材料已加倍为四倍体。研究结果对滇杨乃至木本植物的多倍体育种具有重要的理论及实践意义。

不同抗有丝分裂剂诱导植物多倍体的成效对比

多倍体具有提高作物环境耐受性以及生物量的优势,因而人工诱导多倍体为作物育种和开发提供了新思路。使用抗有丝分裂剂获得多倍体,其效果取决于抗有丝分裂剂的种类、浓度和处理时间。本文对比了不同抗有丝分裂剂的作用原理及其诱导多倍体的处理条件和效果,以期帮助科研工作者选择合适的试剂,提高植物多倍体的诱导效率。

氨磺灵诱导人参果“圆果”多倍体初探

为探寻高效的人参果多倍体诱导条件,以“圆果”为供试品种,以0.02%的氨磺灵溶液为诱变剂,考察不同处理时间(3、6、9、12 h)对人参果组培苗死亡率和变异情况的影响,以变异植株的形态指标、叶片气孔状态和染色体倍性为指标确定最佳处理时间。结果表明:当氨磺灵浓度为0.02%时,随着处理时间的延长,人参果组培苗的死亡率逐渐增加,而变异率逐渐降低;以处理3 h的组培苗死亡率最低,为20%,变异率最高,为58.33%;经计算,0.02%的氨磺灵溶液对人参果“圆果”组培苗的半致死时间为19.40 h;在试验设置的处理时间(3~12 h)内,获得的变异植株呈现出植株矮小、茎段增粗、节间缩短、叶片大且增厚、颜色较深、根增粗、出现变形叶、气孔较二倍体大、单位面积上气孔数量变少等特征;经流式细胞仪分析初步判定变异植株为多倍体。综合结果表明,在0.02%氨磺灵溶液中浸泡3 h,诱导人参果“圆果”组培苗产生多倍体新种质的效果最好。

LC-MS/MS测定氨磺乐灵在水和土壤中的残留量

采用高效液相色谱质谱联用法建立氨磺乐灵在水和土壤等环境介质中的残留检测方法,为该除草剂在环境中的安全监测提供科学指导。样品经Agilent ZORBAX Extend C_(18)(2.1 mm×50 mm,3.5μm)色谱柱分离,以乙腈/0.1%甲酸水溶液(80∶20,体积比)为流动相,流速为0.4 mL/min,柱温为30℃,采用ESI MRM Negative的扫描模式进行检测。加标回收试验结果表明,在0.5~50.0μg/L范围内,线性关系良好,相关系数r大于0.999,定量限为0.5μg/L,水中平均加标回收率为104%~109%,RSD为2.40%~4.62%;土壤中平均加标回收率为85.4%~94.8%,RSD为3.53%~4.78%。该方法前处理简单、快速,检测结果准确、可靠、方法选择性强、灵敏度高,为农药污染及其有害因素监测提供技术支持。

氨磺乐灵在园艺植物倍性育种上的应用

氨磺乐灵(oryzalin)是一种抗微管物质,主要用于杂草的芽前除草。近年来,国外一些研究者将oryzalin应用于苹果、猕猴桃、梨、百合等植物的染色体加倍获得成功,认为oryzalin是除秋水仙碱外又一合适的植物染色体加倍药剂;且与秋水仙碱相比较,oryzalin具有低浓度、低毒性、低成本、高效率诱导染色体加倍等特点。本文介绍了新型诱变剂"oryzalin"在园艺植物倍性育种上的应用进展,阐述了oryzalin诱导染色体加倍的机理、方法和注意事项,并探讨其应用前景。

四种抗微管物质诱导毛新杨2n花粉粒的研究

该文揭示了 4种抗微管物质 ,秋水仙碱、戊炔草胺、安磺灵和氟乐灵都有能力诱导毛新杨 2n花粉 .秋水仙碱虽然诱导 2n花粉比率最高 ,但花粉量最少 .另外 3种除草剂 ,诱导 2n花粉效率比用秋水仙碱处理的结果要低 ,但花粉量较大 ,其中 ,用戊炔草胺处理效果最好 .其最佳处理为注射花芽 4次 ,药品浓度 2 0 0 μmol L ,这不仅能使 2n花粉比率达到 84 4 % ,花粉量达到 0 .70mg 序 ,而且注射处理 10个花芽的费用仅为 0 .0 84元 ,远远低于用秋水仙碱处理同样数量花芽的花费 .该文证明了在所采用的这 4种抗微管物质中 。

利用抗微管除草剂胺磺灵诱导黄瓜四倍体

用Oryzalin对黄瓜茎尖进行四倍体诱导试验，结果表明，浓度为100—200μmol／L Oryzalin处理24h对黄瓜茎尖离体四倍体诱导较为合适，可以有效代替秋水仙索。和秋水仙索相比，0ryzalin使用的浓度低，效果好，且毒性小，对人和环境比较安全，为诱导黄瓜染色体加倍的理想诱导剂。并用流式细胞仪对黄瓜离体诱导的幼苗进行了倍性分析试验。

杂交兰‘黄金小神童'四倍体诱导技术研究

以杂交兰‘黄金小神童'根状茎为材料,采用安磺灵和EMS(甲基磺酸乙酯)为诱导剂进行多倍体材料诱导,分别用安磺灵浓度为0、0.001%、0.002%、0.003%对其根状茎浸泡处理24、48、72 h后,接种到含有EMS浓度为0、20、50、70 mg/L的固体培养基中继续诱导,培养1个月后转接到无EMS的分化培养基上培养,经筛选及植株稳定后获得四倍体植株。结果表明:以安磺灵浓度为0.002%处理48 h,EMS浓度为50 mg/L加入培养基培养,变异效果最佳,变异率为52%,死亡率仅为6%。筛选出的四倍体株系经稳定后,在形态上表现出植株粗壮,叶片增厚、带革质、叶色深绿、叶片扭曲等特征;经气孔显微观察,气孔单位面积显著增大;经染色体数目鉴定,二倍体株系染色体数目为2n=2x=40,四倍体株系染色体数目为2n=4x=80,较二倍体加倍。

不同诱变剂对大蒜四倍体诱导的影响

为探讨不同诱变剂对大蒜茎尖试管苗成苗率和四倍体率的影响,采用二次饱和-D最优设计方法,以氨磺乐灵、二甲戊乐灵和秋水仙素作为诱变剂,以大蒜品种金乡紫皮茎尖为材料,采用流式细胞仪分析和根尖压片染色体计数相结合的方法进行染色体倍性鉴定。结果表明,氨磺乐灵、二甲戊乐灵对大蒜茎尖试管苗平均成苗率和四倍体率的影响均显著高于秋水仙素。分别为62.58%和20.92%、60.95%和23.20%、44.28%和12.25%,但3种诱变剂不同处理组合对大蒜茎尖成苗率影响存在显著差异,均以低浓度处理较短时间成苗率较高,而在较高浓度长时间处理下,成苗率降低。3种诱变剂诱导大蒜四倍体率的最佳处理浓度和时间也不同,且以氨磺乐灵、二甲戊乐灵诱变处理显著优于秋水仙素。经模拟运算,三者诱变大蒜茎尖的最佳处理浓度和时间分别为4.17~8.52 mg·L-1和71.14~118.03 h、4.68~8.90 mg·L-1和72.96~106.18 h、3.87~6.94 g·L^(-1)和67.92~114.43 h。本试验初步明确了3种诱变剂对大蒜茎尖试管苗四倍体的诱变效果,为进一步开展大蒜四倍体新品种选育奠定了基础。