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VEGF特异siRNA对骨肉瘤细胞凋亡和仿血管发生的影响 被引量:7
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作者 张立智 蔡宣松 +3 位作者 钱志康 梅炯 黄煌渊 黄伟达 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第4期352-356,共5页
目的:探讨VEGF特异siRNA在骨肉瘤细胞株(MG63)增殖、凋亡以及仿血管发生中的作用。方法:以pSilienc-er载体构建VEGF特异siRNA质粒pSilencer-VEGF siRNA,并转染骨肉瘤细胞MG63;将细胞分为pSilencer-VEGF siRNA质粒组(试验组)和空siRNA质... 目的:探讨VEGF特异siRNA在骨肉瘤细胞株(MG63)增殖、凋亡以及仿血管发生中的作用。方法:以pSilienc-er载体构建VEGF特异siRNA质粒pSilencer-VEGF siRNA,并转染骨肉瘤细胞MG63;将细胞分为pSilencer-VEGF siRNA质粒组(试验组)和空siRNA质粒组(对照组),Western blotting在蛋白水平检测转染重组质粒后MG63细胞VEGF表达情况;MTT比色法、光镜、流式细胞仪结合Annexin V-FITC/PI染色和H-E染色观察质粒转染后骨肉瘤细胞增殖、凋亡和仿血管发生情况。结果:测序证实成功构建了针对VEGF的siRNA重组质粒。转染pSilencer-VEGF siRNA重组质粒后的试验组培养液中及骨肉瘤细胞内VEGF蛋白表达下降;转染后48、72、96h骨肉瘤细胞的增殖抑制率分别为41.67%、43.92%、35.32%,并发生了早期凋亡,凋亡率为28.27%。转染pSilencer-VEGF siRNA重组质粒的骨肉瘤细胞未见仿血管发生,转染空质粒的对照组骨肉瘤细胞则有仿血管发生。结论:RNA干扰VEGF基因能抑制骨肉瘤细胞增殖,促进骨肉瘤细胞早期凋亡,干扰骨肉瘤细胞仿血管发生,为临床基因治疗骨肉瘤提供了新的思路。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 小干扰RNA 骨肉瘤细胞 仿血管发生 凋亡 增殖
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1,25(OH)_2D_3对人骨肉瘤细胞增殖以及Cofilin信号转导通路的影响 被引量:6
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作者 李振华 王岩 +1 位作者 赵建武 高忠礼 《中国实验诊断学》 2008年第1期29-31,共3页
目的研究1,25(OH)2D3对人骨肉瘤U2OS细胞系增殖以及Cofilin信号转导通路的影响。方法体外培养人骨肉瘤U2OS细胞,采用CCK-8活细胞计数试剂盒检测经10-7mol/L 1,25(OH)2D3处理后U2OS细胞的增殖变化;用Western Blot法检测Cofilin及P-cofili... 目的研究1,25(OH)2D3对人骨肉瘤U2OS细胞系增殖以及Cofilin信号转导通路的影响。方法体外培养人骨肉瘤U2OS细胞,采用CCK-8活细胞计数试剂盒检测经10-7mol/L 1,25(OH)2D3处理后U2OS细胞的增殖变化;用Western Blot法检测Cofilin及P-cofilin表达情况。结果10-7mol/L浓度的1,25(OH)2D3对U2OS细胞株的增殖有明显的抑制作用,并呈时间依赖性。Western blot检测结果显示1,25(OH)2D3对Cofilin的总蛋白表达没有影响,但随着作用时间的延长,P-cofilin的表达水平呈一过性增强(24 h)、然后下降(48-72 h)的趋势。结论1,25(OH)2D3对U2OS细胞的生长增殖有明显的抑制作用,这一作用可能与改变胞内P-cofilin的表达水平有关。 展开更多
关键词 1 25(OH)2D3 COFILIN 骨肉瘤细胞系
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噻莱昔布(celecoxib)对人骨肉瘤细胞MG-63增殖与凋亡的影响 被引量:3
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作者 冯尔宥 夏仁云 +2 位作者 张怡元 盛健 林焱斌 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期853-855,共3页
目的:研究环氧化酶2(cyclooxygenase2,COX2)抑制剂celecoxib对人骨肉瘤细胞MG63抑制增殖及诱导凋亡的作用。方法:MTT比色观察celecoxib的细胞毒性作用及其浓度依赖性;Hoechst33258荧光染色、透射电子显微镜和TUNEL观察细胞凋亡的形态学... 目的:研究环氧化酶2(cyclooxygenase2,COX2)抑制剂celecoxib对人骨肉瘤细胞MG63抑制增殖及诱导凋亡的作用。方法:MTT比色观察celecoxib的细胞毒性作用及其浓度依赖性;Hoechst33258荧光染色、透射电子显微镜和TUNEL观察细胞凋亡的形态学变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率及其时间依赖性。结果:celecoxib分别以10、20、40、80μmol/L作用后,细胞生长受到不同程度抑制;荧光显微镜、电镜和TUNEL观察到细胞胞浆浓缩、核凝聚、核碎裂和凋亡小体形成。流式细胞仪显示celecoxib40μmol/L作用24、48、72h后,细胞凋亡率分别与对照组比较有非常显著性差异(P<0.01)。结论:celecoxib能抑制人MG63细胞增殖,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 环氧化酶2 骨肉瘤MG-63细胞 凋亡
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MiR-490-3p靶向HMGA2在骨肉瘤细胞凋亡中的作用 被引量:3
4
作者 刘伟 刘华强 许国星 《临床骨科杂志》 2018年第2期238-241,共4页
目的以人骨肉瘤MG-63细胞为研究对象,探讨miR-490-3p诱导MG-63细胞凋亡的作用及其分子机制。方法分别设立miR-490-3p mimics组(对照组)、慢病毒lenti-sh miR-490-3p组(药物组),每组设6个复孔。采用MTT法检测miR-490-3p对细胞生长抑制作... 目的以人骨肉瘤MG-63细胞为研究对象,探讨miR-490-3p诱导MG-63细胞凋亡的作用及其分子机制。方法分别设立miR-490-3p mimics组(对照组)、慢病毒lenti-sh miR-490-3p组(药物组),每组设6个复孔。采用MTT法检测miR-490-3p对细胞生长抑制作用;采用AnnexinV-FITC/PI双染法检测不同实验条件下miR-490-3p对MG-63细胞凋亡率的影响;Western blot检测miR-490-3p对HMGA2、Bcl-2、BAX和Caspase-3蛋白表达的影响。结果 MiR-490-3p能抑制MG-63细胞增殖,药物组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。经3次实验结果,药物组的早期凋亡的细胞比例为58.90%±0.89%,明显高于对照组的5.34%±0.34%,差异有统计学意义(P<0.05)。通过Western blot检测MG-63细胞中HMGA2、Bcl-2、Bax、Caspase-3、Survivin蛋白表达,结果显示miR-490-3p转染后,促进凋亡蛋白Bax表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低,Bax或Bcl-2比率增高,而线粒体凋亡途径下游的Caspase-3蛋白被激活,表达量降低。结论 MiR-490-3p能显著抑制肿瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡,其作用机制可能与靶向HMGA2的表达、上调Bax/Bcl-2蛋白表达比例、激活Caspase-3蛋白级联反应和调控Survivin蛋白表达有关。 展开更多
关键词 miR-490-3p HMGA2 骨肉瘤细胞增殖 凋亡
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亚甲蓝衍生物光化学反应对人成骨肉瘤细胞细胞株灭活作用的实验研究 被引量:2
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作者 周芳 吴文知 +3 位作者 张兰 黄毅 王艳萍 刘进 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期223-226,共4页
目的探讨光化学反应中不同浓度亚甲蓝衍生物(M007)对人成骨肉瘤细胞(MG-63)的灭活作用,提供将M007应用于肿瘤手术血液回收的前期研究基础。方法实验设空白(c)对照组、单纯光照(P)对照组、不作红光光照的M007对照组及实验组(M0... 目的探讨光化学反应中不同浓度亚甲蓝衍生物(M007)对人成骨肉瘤细胞(MG-63)的灭活作用,提供将M007应用于肿瘤手术血液回收的前期研究基础。方法实验设空白(c)对照组、单纯光照(P)对照组、不作红光光照的M007对照组及实验组(M007-PCT)。将10^6个/ml的MG-63单细胞悬液与不同浓度的M007混匀反应,经震荡暗反应及可见红外光照射(M007-PCT)后,采用台盼蓝染色检测肿瘤细胞死亡率。结果M007-PCT组,M007为(2~4)μmol/L时,MG-63细胞株死亡率随光敏剂浓度增加而增大(P〈0.05);M007在(4~32)μmol/L内,MG-63细胞的死亡率达到较高水平(〉93%),且不再随M007浓度增加而增大(P〉0.05)。M007对照组的MG-63细胞株死亡率随M007浓度增加有增加的趋势,但明显低于相同光敏剂浓度M007-PCT组肿瘤细胞死亡率(P〈0.05)。结论新型光敏剂M007对MG-63细胞具有有效的灭活作用,是肿瘤手术术中血液回收方面极具应用前景的光敏剂。 展开更多
关键词 光化学治疗(PCT) 光敏剂 人成骨肉瘤细胞 台盼蓝 肿瘤手术 血液回收
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塞来昔布促进顺铂诱导人骨肉瘤细胞MG-63凋亡的作用 被引量:1
6
作者 史晓红 黄朝梁 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第11期992-994,共3页
目的探讨塞来昔布促进顺铂诱导人骨肉瘤细胞MG-63凋亡的作用。方法将人骨肉瘤细胞分为塞来昔布组、顺铂组和联合组,分别加入不同浓度的塞来昔布、顺铂和塞来昔布+顺铂,采用MTT法检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡比例;吖啶橙/溴化乙... 目的探讨塞来昔布促进顺铂诱导人骨肉瘤细胞MG-63凋亡的作用。方法将人骨肉瘤细胞分为塞来昔布组、顺铂组和联合组,分别加入不同浓度的塞来昔布、顺铂和塞来昔布+顺铂,采用MTT法检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡比例;吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双染色观察细胞并计算凋亡率。结果塞来昔布单独作用于MG-63细胞后,细胞抑制率随药物浓度的升高而升高;联合组细胞抑制率均较顺铂组明显升高;FCM分析联合组细胞凋亡比例明显上升;AO/EB染色结果显示,联合组的细胞凋亡率明显高于塞来昔布组和顺铂组。结论塞来昔布和顺铂均可引起人骨肉瘤细胞的凋亡,两者联合使用可明显增强对人骨肉瘤细胞的凋亡作用。 展开更多
关键词 骨肉瘤 塞来昔布 顺铂 细胞凋亡
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对顺铂耐药的骨肉瘤细胞干细胞特性变化及其与Notch信号通路的关系 被引量:1
7
作者 李提 方硕 +2 位作者 余铃 杨俭 郭卫春 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第48期1-4,共4页
目的探讨对顺铂耐药的骨肉瘤细胞干细胞特性变化及其与Notch信号通路的关系。方法取对数生长期的对顺铂耐药的人骨肉瘤143B-TK细胞作为观察组,以未经顺铂作用的人骨肉瘤143B-TK细胞作为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测两组干细胞相... 目的探讨对顺铂耐药的骨肉瘤细胞干细胞特性变化及其与Notch信号通路的关系。方法取对数生长期的对顺铂耐药的人骨肉瘤143B-TK细胞作为观察组,以未经顺铂作用的人骨肉瘤143B-TK细胞作为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测两组干细胞相关基因(TERT、Sox2、Oct4、NANOG)、Notch信号通路相关基因(Hey L、Hey2、Hey1、Hes5、Hes1)mRNA相对表达量;两组加入或不加入Notch信号通路特异性抑制剂DAPT,采用悬浮克隆球试验检测成球能力(以悬浮克隆球数量表示)。结果两组NANOG、Hey2 mRNA相对表达量比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。观察组TERT、Sox2、Oct4、Hey L、Hey1、Hes5、Hes1 mRNA相对表达量均高于对照组(P<0.05或<0.01)。不加入DAPT的观察组悬浮克隆球数量明显多于加入DAPT的观察组和不加入DAPT的对照组(P均<0.01)。结论对顺铂耐药的骨肉瘤细胞干细胞特性增强;Notch信号通路激活可能是导致其干细胞特性增强和细胞耐药的主要原因。 展开更多
关键词 骨肉瘤 顺铂耐药 肿瘤干细胞 NOTCH信号通路
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鹿瓜多肽体外活性测定方法的探讨研究 被引量:8
8
作者 王灿 董闪闪 +2 位作者 王自强 邵泓 陈钢 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1196-1201,共6页
目的:建立鹿瓜多肽体外活性测定方法。方法:根据鹿瓜多肽药理作用机制,选用敏感骨细胞株作为试验对象,CCK-8比色法探讨鹿瓜多肽对骨细胞株的增殖促进作用。同时对试验条件,包括培养基、细胞接种密度、药物作用时间、胎牛血清(FBS)浓度... 目的:建立鹿瓜多肽体外活性测定方法。方法:根据鹿瓜多肽药理作用机制,选用敏感骨细胞株作为试验对象,CCK-8比色法探讨鹿瓜多肽对骨细胞株的增殖促进作用。同时对试验条件,包括培养基、细胞接种密度、药物作用时间、胎牛血清(FBS)浓度等进行探讨,建立鹿瓜多肽体外活性测定方法。对该方法线性、重复性进行验证,同时用该方法对2个厂家分别生产的鹿瓜多肽注射液和注射用鹿瓜多肽样品进行活性测定。结果:鹿瓜多肽对大鼠骨肉瘤细胞株(UMR106细胞株)具有增殖促进作用。选用不含谷氨酰胺,含1%FBS的DMEM培养液进行试验,细胞接种密度为2×10~4个·m L^(-1),药物作用细胞72 h,药物质量浓度在0.5~4 mg·m L^(-1)范围内,鹿瓜多肽对UMR106细胞株具有增殖促进作用,刺激指数可达2.97。对该方法进行方法学验证:鹿瓜多肽质量浓度在0.5~4 mg·m L^(-1)范围内,以药物浓度为横坐标,吸收度值为纵坐标进行线性拟合,相关系数(R^2)分别为0.971和0.968,均大于0.95,线性良好;对2个厂家生产的鹿瓜多肽注射液和注射用鹿瓜多肽样品重复测定3次,刺激指数平均值分别为2.72和1.86,RSD分别为9.6%和3.9%。结论:该方法可用于鹿瓜多肽体外活性测定。 展开更多
关键词 鹿瓜多肽 大鼠骨肉瘤细胞株 CCK-8比色法 活性测定
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异体大鼠骨肉瘤细胞RNA电转染树突状细胞瘤苗诱导的特异性抗骨肉瘤免疫学效应 被引量:9
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作者 于哲 张婷 +2 位作者 张云飞 马保安 范清宇 《中华骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期728-733,共6页
目的本研究旨存探时异休大鼠骨肉瘤细胞RNA电转染树突状细胞(dendritic cells,DC)瘤苗在大鼠肿瘤动物模型诱导的抗骨肉瘤免疫学效应。方法本研究采用UMR108细胞RNA通过电穿孔的方法转染至SD大鼠骨髓来源的DCs制备瘤苗。将该瘤苗应用... 目的本研究旨存探时异休大鼠骨肉瘤细胞RNA电转染树突状细胞(dendritic cells,DC)瘤苗在大鼠肿瘤动物模型诱导的抗骨肉瘤免疫学效应。方法本研究采用UMR108细胞RNA通过电穿孔的方法转染至SD大鼠骨髓来源的DCs制备瘤苗。将该瘤苗应用于骨肉瘤荷瘤大鼠,观察其特异性抗肿瘤效应,并对瘤苗诱导的细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTLs)杀瘤效应加以评估。结果异体骨肉瘤RNA转染DC瘤苘可诱导UMR106特异性的CTLS效应,其杀瘤效果显著。在体内实验中,80%的异体RNA—DC瘤薪接种大鼠可以有效地抵抗肿瘤细胞攻击,而得以长期存活,存活大鼠产生了长效免疫效应,町以抵抗同一肿瘤的二次攻击,但是对其他肿瘤细胞不具有免疫性。结论该研究为异体骨肉瘤细胞RNA转染DCs瘤苗可以有效地刺激T淋巴细胞增殖及诱导显著的细胞毒T淋巴杀瘤活性提供了证据,并通过动物实验证实了该瘤苗良好的主动免疫治疗效应,从而表明异体瘤苗为以树突状细胞为基础的免疫治疗领域提供了新的策略,针对临床骨肉瘤患者具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 树突细胞 骨肉瘤 免疫疗法 T淋巴细胞 细胞毒性
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华蟾素诱导骨肉瘤细胞凋亡及其机制 被引量:3
10
作者 马秀才 熊蠡茗 +2 位作者 傅德皓 林松 邵增务 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2015年第8期6-10,13,共6页
目的:探讨华蟾素诱导骨肉瘤U2OS细胞凋亡的效果及其可能机制。方法:体外培养人骨肉瘤细胞系U2OS,将其分为第1,2,3,4,5组,于其培养基内分别加入0,0.5,1.0,1.5,2.0μg/mL华蟾素,每组分别于培养的第24,48,72h进行检测。MTT法检测各组骨肉... 目的:探讨华蟾素诱导骨肉瘤U2OS细胞凋亡的效果及其可能机制。方法:体外培养人骨肉瘤细胞系U2OS,将其分为第1,2,3,4,5组,于其培养基内分别加入0,0.5,1.0,1.5,2.0μg/mL华蟾素,每组分别于培养的第24,48,72h进行检测。MTT法检测各组骨肉瘤细胞生长的抑制率,TUNEL染色观察第4组细胞凋亡程度并计算其凋亡率,免疫荧光染色检测第4组凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的含量并计算其比值,RT-PCR检测Bax和Bcl-2的表达。结果:MTT试验显示,随着各组华蟾素浓度的增加,细胞生长抑制率明显增加,其中第5组48h生长抑制率增加至(59.56±1.95)%,相当于第2组同期(22.85±1.34)%的2.5倍(P<0.01)。随着培养时间的延长,各组细胞生长抑制均有不同程度的增加,以第5组72h最为显著。Tunel染色显示,随着华蟾素干预时间的延长,U20S细胞凋亡率显著上升,与华蟾素作用于细胞24,48时相比,作用72h后凋亡率达到(32.35±1.57)%,凋亡率明显增加(P<0.01)。免疫荧光和RT-PCR提示,随着华蟾素作用时间的延长,第4组Bax的表达逐渐增加,而Bcl-2的表达逐渐减少,同时Bax/Bcl-2含量的比值也逐渐增加。结论:华蟾素具有抑制骨肉瘤U2OS细胞增殖和诱导其凋亡的作用,其疗效呈剂量和时间依赖性,而其机制可能与华蟾素影响Bax和Bcl-2的表达有关。华蟾素具有治疗骨肉瘤的潜力,值得进一步研究探讨。 展开更多
关键词 华蟾素 骨肉瘤细胞 细胞凋亡 BAX Bcl-2
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CIK/NK细胞对荷骨肉瘤NOD/SCID小鼠肺转移瘤的杀伤作用 被引量:2
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作者 杨洁文 王潇娉 +2 位作者 冯东华 梁新军 吴燕峰 《中国骨与关节损伤杂志》 2013年第8期743-745,共3页
目的制备骨肉瘤U-2OS细胞NOD/SCID小鼠肺转移模型,探讨CIK/NK细胞对肺转移瘤的杀伤作用。方法 60只NOD/SCID小鼠随机分为3组(每组20只),A组:每只鼠经尾静脉接种U-2OS细胞2×106(0.2 ml)后24 h,输注CIK/NK细胞(2×107/0.2 ml);B... 目的制备骨肉瘤U-2OS细胞NOD/SCID小鼠肺转移模型,探讨CIK/NK细胞对肺转移瘤的杀伤作用。方法 60只NOD/SCID小鼠随机分为3组(每组20只),A组:每只鼠经尾静脉接种U-2OS细胞2×106(0.2 ml)后24 h,输注CIK/NK细胞(2×107/0.2 ml);B组:每只鼠经尾静脉接种U-2OS细胞2×106(0.2 ml)后24 h,注射生理盐水0.2 ml;C组:每只鼠经尾静脉注射生理盐水0.2 ml后24 h,注射生理盐水0.2 ml。比较各组小鼠生存时间及肺部肿瘤负荷情况。结果 B组接种U-2OS细胞后29 d内小鼠全部死亡,其中16只肺部出现肉眼可见瘤块;A组接种U-2OS细胞后60 d内小鼠死亡8只,肺部均发现肉眼可见瘤块,余12只肺部均无瘤块。A组平均生存时间显著高于B组,差异有统计学意义(P<0.05),而与C组比较差异无统计学意义(P>0.05)。B组小鼠死亡时体重明显低于A组,而肿瘤细胞比例明显高于A组(P<0.05)。结论 CIK/NK细胞在NOD/SCID小鼠体内有肯定的抗骨肉瘤肺转移瘤效果。 展开更多
关键词 细胞因子诱导的杀伤细胞 骨肉瘤 NOD SCID小鼠
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骨肉瘤精准医学的实践与进展 被引量:13
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作者 陈瑞玲 王刚阳 +3 位作者 孙梦熊 郑颖 蔡郑东 华莹奇 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1190-1194,共5页
骨肉瘤(OS)是具有高转移潜能的恶性骨肿瘤。随着化疗药物的应用,OS的临床疗效有了大幅度的改善,5年生存率由不足20%提高到70%。然而近三十年来,旨在提高OS化疗有效率的研究工作进展甚微。肺转移、术后复发、化疗耐药仍是0s临床治... 骨肉瘤(OS)是具有高转移潜能的恶性骨肿瘤。随着化疗药物的应用,OS的临床疗效有了大幅度的改善,5年生存率由不足20%提高到70%。然而近三十年来,旨在提高OS化疗有效率的研究工作进展甚微。肺转移、术后复发、化疗耐药仍是0s临床治疗亟待解决的问题。OS之所以缺乏治疗新药物的重要原因之一即OS异常复杂的遗传学背景,至今未明确特定的驱动基因和相关发病机制。近年来,以基因测序为基础的生物医学发展迅速,生物信息分析技术得到进一步完善,患者来源的移植瘤模型的构建与应用,带动了精准医学的快速发展,将有望在提高OS患者的生存率和生活质量上取得突破性进展。本文将从OS驱动基因的探索、精准诊断与监控预后和OS移植瘤模型的精准研究这三个方面阐释OS在精准医学方向的实践与进展。 展开更多
关键词 骨肉瘤 精准医学 驱动基因 循环肿瘤细胞 患者来源的移植瘤模型
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脑糖原磷酸化酶小干扰RNA对人骨肉瘤细胞MG63增殖的抑制作
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作者 李景峰 陈舒振 +2 位作者 杨阳 查圆瑜 张树威 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第11期1843-1846,共4页
目的观察脑糖原磷酸化酶(PYGB)对人骨肉瘤细胞株MG63的细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期分布的影响。方法通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)方法检测35例骨肉瘤和15例骨囊肿标本的PYGB表达水平。采用Western blot法挑选PYGB高... 目的观察脑糖原磷酸化酶(PYGB)对人骨肉瘤细胞株MG63的细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期分布的影响。方法通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)方法检测35例骨肉瘤和15例骨囊肿标本的PYGB表达水平。采用Western blot法挑选PYGB高表达的骨肉瘤细胞株。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)方法测定细胞增殖,使用流式细胞仪检测MG63细胞凋亡和细胞周期,Western blot法分别检测细胞凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)的表达。结果骨肉瘤组的PYGB表达(0.105±0.945)水平明显较骨囊肿组(0.062±0.038)高(P=0.006)。小干扰RNA沉默PYGB后的骨肉瘤细胞的增殖明显降低,PYGB干扰组的G1期细胞比例从(49.74±1.54)%增加至(69.41±2.35)%(P=0.004),而S期细胞比例从(21.04±2.59)%下降至(14.15±0.98)%(P=0.028)。G2期百分比从(25.62±0.64)%减少至(8.19±0.11)%(P=0.002),表明细胞周期受阻断在G1期。PYGB干扰组的bax的表达水平显著增加,而bcl-2的表达水平显著降低。结论PYGB的小干扰RNA通过靶向抑制半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)/bcl和细胞周期蛋白依赖激酶1(CDK1)信号通路而抑制人骨肉瘤细胞MG63细胞的增殖。 展开更多
关键词 脑糖原磷酸化酶 小干扰RNA 骨肉瘤 细胞周期
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