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Research progress on Helicobacter pyloriouter membrane protein
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作者 Shi-HeShao HuaWang +1 位作者 Shun-GenChai Li-MeiLiu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2005年第20期3011-3013,共3页
Helicobacter pylori (H pylori), one of the most common bacterial pathogens on human beings, colonizes the gastric mucosa. In its 95 paralogous gene families, there is a large outer membrane protein (OMP) family. It in... Helicobacter pylori (H pylori), one of the most common bacterial pathogens on human beings, colonizes the gastric mucosa. In its 95 paralogous gene families, there is a large outer membrane protein (OMP) family. It includes 32 members. These OMP are important for the diagnosis, protective immunity, pathogenicity of H pylori and so on. They are significantly associated with high H pylori density,the damage of gastric mucosa, high mucosal IL-8 levels and severe neutrophil infiltration. We introduce their research progress on pathogenicity. 展开更多
关键词 h pylori outer membrane protein OIPA Gastric carcinoma
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溶藻弧菌HY9901外膜蛋白OmpH的基因克隆及其生物信息学分析 被引量:2
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作者 周泽军 庞欢瑛 +2 位作者 丁燏 简纪常 吴灶和 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期116-122,共7页
根据已发表的溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)全基因组序列设计1对特异性引物,PCR扩增溶藻弧菌HY9901株外膜蛋白OmpH的全长基因。结果显示,该基因(GenBank登录号:JX855924)全长573 bp,共编码190个氨基酸残基。根据推导的氨基酸序列预测... 根据已发表的溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)全基因组序列设计1对特异性引物,PCR扩增溶藻弧菌HY9901株外膜蛋白OmpH的全长基因。结果显示,该基因(GenBank登录号:JX855924)全长573 bp,共编码190个氨基酸残基。根据推导的氨基酸序列预测其分子量约为21.1 kD,等电点为9.02。SignalP 4.0、TMHMM Server 2.0和SofiBerry-Psite预测结果显示,OmpH不存在信号肽与跨膜区,含有1个N-糖基化位点,6个磷酸化位点,1个内质网靶信号位点以及3个微体C末端靶信号位点。利用MAGE5.0软件,以邻位相连法构建OmpH系统进化树,结果显示,溶藻弧菌OmpH与副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、哈氏弧菌(Vibrio harveyi)等有较近亲缘关系。采用多种参数成功预测了OmpH可能的B细胞抗原优势表位,分别是第5-10、106-110、120-125、158-163和175-180区段。利用SWISS-MODEL软件,模拟了OmpH亚基三维结构模型,且与其同源蛋白大肠杆菌(Escherichia coli)Skp蛋白有相似构型。 展开更多
关键词 溶藻弧菌 基因克隆 omph基因 外膜蛋白 生物信息学分析
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贝氏柯克斯体外膜蛋白H(OmpH)原核表达载体的构建与鉴定
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作者 乔海燕 贾广乐 +2 位作者 林祥梅 张映 廖娟红 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第5期80-84,共5页
本试验旨在构建贝氏柯克斯体外膜蛋白H(outer membrance protein H,OmpH)的重组表达载体并分析该蛋白的免疫原性,以贝氏柯克斯体九里株为模板,通过PCR方法扩增出含798bp的贝氏柯克斯体的OmpH基因片段,并将其克隆至原核表达载体pQE-30,... 本试验旨在构建贝氏柯克斯体外膜蛋白H(outer membrance protein H,OmpH)的重组表达载体并分析该蛋白的免疫原性,以贝氏柯克斯体九里株为模板,通过PCR方法扩增出含798bp的贝氏柯克斯体的OmpH基因片段,并将其克隆至原核表达载体pQE-30,得到重组表达质粒pQE-30/OmpH。经IPTG诱导后,SDS-PAGE结果发现,该重组蛋白大小约为25ku。Western blotting试验结果显示,该方法所诱导产生的重组蛋白具有良好反应原性。 展开更多
关键词 贝氏柯克斯体 外膜蛋白h(omph) 原核表达 免疫原性
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禽巴氏杆菌C_(48-1)外膜蛋白H基因与鸡IL-18基因真核共表达载体的构建及表达 被引量:5
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作者 曹素芳 黄青云 +1 位作者 韩先干 邓宪方 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期382-384,共3页
根据鸡IL-18和真核质粒pcDNA 3的序列,设计1对特异性引物,以重组质粒pcDNA 3/IL-18为模板,扩增出具有完整真核表达结构的CM V-cIL-18-BGHpA片段。将此片段非定向插入重组表达质粒pcDNA 3/om pH中,经酶切分析、PCR鉴定及序列测定证实成... 根据鸡IL-18和真核质粒pcDNA 3的序列,设计1对特异性引物,以重组质粒pcDNA 3/IL-18为模板,扩增出具有完整真核表达结构的CM V-cIL-18-BGHpA片段。将此片段非定向插入重组表达质粒pcDNA 3/om pH中,经酶切分析、PCR鉴定及序列测定证实成功构建了共表达禽巴氏杆菌C48-1外膜蛋白H基因和鸡IL-18基因的重组表达质粒。将共表达质粒转染Cos7细胞,经RT-PCR、SDS-PAGE及W estern b lotting检测,证明了外膜蛋白H基因及鸡IL-18基因均获得了瞬时表达,为研究禽巴氏杆菌C48-1外膜蛋白H的免疫原性和鸡IL-18在基因疫苗中的免疫调节作用奠定了基础。 展开更多
关键词 外膜蛋白h基因 鸡IL-18 丙烯酰胺凝胶电泳 WESTERN BLOTTING
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牛多杀性巴氏杆菌外膜蛋白H的表达与纯化 被引量:4
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作者 胡旭 梁宏儒 +6 位作者 姜东君 赵达 高佳滨 陈为宏 尹辉 乔波 朱战波 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第11期38-41,共4页
试验对多杀性巴氏杆菌外膜蛋白H(OmpH)基因进行克隆、鉴定,并在原核系统中表达。以多杀性巴氏杆菌(CVCC448)强毒株基因组为模板,扩增OmpH基因,连接T载体,经测序鉴定正确后与表达载体pET-28a连接构建重组表达质粒OmpH-pET28a,将此重组质... 试验对多杀性巴氏杆菌外膜蛋白H(OmpH)基因进行克隆、鉴定,并在原核系统中表达。以多杀性巴氏杆菌(CVCC448)强毒株基因组为模板,扩增OmpH基因,连接T载体,经测序鉴定正确后与表达载体pET-28a连接构建重组表达质粒OmpH-pET28a,将此重组质粒转化入表达宿主E.coli BL21菌株内,抽提质粒,酶切鉴定正确后对转化菌株以IPTG进行诱导,表达产物通过镍离子亲和层析纯化,之后进行SDS-PAGE和Western blotting分析。结果显示,OmpH基因的编码区为978bp,编码326个氨基酸残基,融合蛋白分子质量约为37ku。Western blotting检测结果显示,表达的重组蛋白OmpH可与鼠抗多杀性巴氏杆菌全菌体多抗血清反应得到清晰的目的条带,表明表达的重组蛋白具有良好的免疫原性。多杀性巴氏杆菌OmpH基因的成功表达,为进一步研究其免疫作用奠定了基础。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌 外膜蛋白h 克隆 表达 鉴定
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禽多杀性巴氏杆菌C_(48-1)成熟外膜蛋白H重组亚单位疫苗免疫效果的研究 被引量:16
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作者 曹素芳 黄青云 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期464-467,共4页
将融合表达禽多杀性巴氏杆菌成熟外膜蛋白H(OmpmH)的重组菌pGEX-ompmH/ BL21大量培养,在最佳诱导条件下诱导表达,表达产物经蛋白酶剪切及亲和层析纯化,得到Ompm H基因的原核表达产物,将其与弗氏完全佐剂混合制成油乳剂亚单位疫苗,用该... 将融合表达禽多杀性巴氏杆菌成熟外膜蛋白H(OmpmH)的重组菌pGEX-ompmH/ BL21大量培养,在最佳诱导条件下诱导表达,表达产物经蛋白酶剪切及亲和层析纯化,得到Ompm H基因的原核表达产物,将其与弗氏完全佐剂混合制成油乳剂亚单位疫苗,用该疫苗肌肉注射接种5周龄鸡,首免后每周采血检测抗体,二免后第2周用10 LD50禽多杀性巴氏杆菌强毒菌株C48-1 进行攻击。结果显示,OmpmH具有良好的免疫原性,能诱导鸡体产生特异性抗体,可抵抗强毒菌株C48-1的致死性攻击,免疫效果优于禽多杀性巴氏杆菌弱毒疫苗。 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 成熟外膜蛋白h 亚单位疫苗 免疫原性
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禽多杀性巴氏杆菌C_(48-1)外膜蛋白H基因真核表达载体的构建 被引量:3
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作者 曹素芳 黄青云 +1 位作者 韩先干 邓宪方 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期117-120,共4页
应用限制性内切酶BamHⅠ将片段ompH从重组质粒pMDT-omp H切下,非定向插入真核表达质粒pcDNA3中,经酶切分析、PCR鉴定及序列测定,证实成功构建了禽多杀性巴氏杆菌C48-1外膜蛋白H基因的重组真核表达质粒pcDNA3-ompH。将重组表达质粒转染至... 应用限制性内切酶BamHⅠ将片段ompH从重组质粒pMDT-omp H切下,非定向插入真核表达质粒pcDNA3中,经酶切分析、PCR鉴定及序列测定,证实成功构建了禽多杀性巴氏杆菌C48-1外膜蛋白H基因的重组真核表达质粒pcDNA3-ompH。将重组表达质粒转染至 COS7 细胞,经RT-PCR、SDS-PAGE及Western-blotting检测,证明了外膜蛋白H基因获得了瞬时表达。 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 外膜蛋白h基因 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 蛋白质印迹法
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猪多杀性巴氏杆菌可视化LAMP检测方法的建立 被引量:1
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作者 许培文 《中国农学通报》 2018年第12期146-150,共5页
该研究旨在建立一种快速检测猪多杀性巴氏杆菌的LAMP方法。根据Gen Bank中猪多杀性巴氏杆菌外膜蛋白H基因(omp H)序列,在其保守区域设计了多套LAMP引物,通过LAMP反应,评价其特异性和敏感性,并加入SYBR GreenⅠ,对其进行肉眼判定。结果显... 该研究旨在建立一种快速检测猪多杀性巴氏杆菌的LAMP方法。根据Gen Bank中猪多杀性巴氏杆菌外膜蛋白H基因(omp H)序列,在其保守区域设计了多套LAMP引物,通过LAMP反应,评价其特异性和敏感性,并加入SYBR GreenⅠ,对其进行肉眼判定。结果显示:建立的LAMP方法在56℃水浴中1 h可对猪多杀性巴氏杆菌核酸进行高效扩增,在反应结束后加入SYBR GreenⅠ可肉眼进行判断;该方法具有很强的特异性,对其它相关猪病病原菌检测结果均为阴性;其DNA核酸的检测量为0.05pg,是PCR的100倍,显示出很高的敏感性。用建立的LAMP方法对5株猪多杀性巴氏杆菌阳性样品进行检测,结果表明LAMP法与PCR检测的结果是一致的。结果表明该研究建立了一种操作简便、快速、敏感、特异的可视化LAMP方法,适合在基层使用。 展开更多
关键词 猪多杀性巴氏杆菌 外膜蛋白h 环介导等温扩增技术 检测
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立氏立克次体外膜蛋白H基因片段的克隆表达与免疫原性分析 被引量:1
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作者 吴德平 焦留宏 +4 位作者 王加林 杨文娟 陈金拳 王猛 王颖 《现代生物医学进展》 CAS 2011年第6期1063-1067,共5页
目的:克隆表达立氏立克次体(Rickettsia rickettsii)外膜蛋白H基因(ompH)片段并对其进行免疫原性分析。方法:采用PCR技术从立氏立克次体基因组中扩增ompH基因片段,将该基因片段与原核表达载体pET32a连接,构建重组原核表达质粒pET32a/om... 目的:克隆表达立氏立克次体(Rickettsia rickettsii)外膜蛋白H基因(ompH)片段并对其进行免疫原性分析。方法:采用PCR技术从立氏立克次体基因组中扩增ompH基因片段,将该基因片段与原核表达载体pET32a连接,构建重组原核表达质粒pET32a/ompH;将pET32a/ompH转入大肠杆菌细胞内,用IPTG诱导转化大肠杆菌表达目的基因。结果:获得长为327bp的ompH基因片段,SDS-PAGE分析发现pET32a/ompH转化菌表达了大小约27kDa蛋白,该蛋白与立氏立克次体免疫豚鼠血清及斑点热患者血清在免疫印迹分析中呈阳性反应,经该重组蛋白免疫血清中和后的立氏立克次体感染VERO活力减低。结论:pET32a/ompH转化的大肠杆菌表达了ompH基因片段,所产生的重组蛋白具有良好的免疫反应性及保护性。 展开更多
关键词 立氏立克次体 基因重组 外膜蛋白h
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