污染肝素钠中多硫酸化硫酸软骨素测定方法新进展

介绍了污染肝素钠中多硫酸化硫酸软骨素的结构、性质及来源,并对其测定方法进行了综述。

毛细管电泳法对肝素钠注射液中杂质的测定

目的:在2008年国家食品药品监督管理局颁布的"毛细管电泳法分析肝素钠杂质的补充检验方法"的基础上优化毛细管电泳色谱条件,对全国评价性抽验肝素钠注射液样品进行测定。方法:采用毛细管电泳法,缓冲液为pH 3.0的400 mmol.L-1三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液;分离电压为-25 kV;检测波长为200 nm;进样压力3.447 kPa,进样时间为4 s;毛细管温度:25℃。结果:肝素主峰与多硫酸软骨素峰峰之间分离度为1.0,与硫酸皮肤素之间分离度为2.0,10批供试品的杂质含量结果与离子色谱法结果基本一致。结论:优化后的色谱条件使肝素与硫酸皮肤素、多硫酸软骨素的分离度增加,该方法使肝素钠样品中的杂质定性、定量更为准确。

阴离子交换HPLC法精确测定肝素钠中的多硫酸软骨素和硫酸皮肤素

目的:建立可同时测定肝素钠中的多硫酸软骨素(OSCS)和硫酸皮肤素(DS)等杂质的有关物质检测方法。方法:应用高效液相色谱-紫外可见光检测器,2种阴离子交换树脂为填充剂的色谱柱,在pH 3.0的酸性体系下,设计了5种由不同流动相体系、洗脱梯度和不同阴离子交换柱组成的分析方法,比较了其分离度。结果:5种方法中以方法 E灵敏度最高,理论塔板数和分离度也最高,多硫酸软骨素的检测限和定量限分别为0.025%和0.03%;硫酸皮肤素的检测限和定量限分别为0.03%和0.05%;多硫酸软骨素和硫酸皮肤素的加标回收率分别为102.5%和96.0%。结论:采用方法 E的弱阴离子交换HPLC法与现有药典标准方法相比,具有更好的灵敏度和准确度。

定量核磁共振氢谱法测定依诺肝素钠中多硫酸软骨素和硫酸皮肤素的含量

目的:建立测定依诺肝素钠中多硫酸软骨素(OSCS)和硫酸皮肤素(DS)含量的定量核磁共振氢谱(qHNMR)法。方法:采用Bruker AVANCE NEO 600 MHz核磁共振波谱仪采集核磁共振氢谱(1H NMR),90°脉冲,弛豫延迟时间为25 s,扫描次数为16次,测定温度为30℃,以2,2,3,3-d4-3-三甲基硅酸钠(TSP)作为内标物,对依诺肝素钠中的OSCS和DS进行定量分析。结果:OSCS、DS和TSP定量峰信号在1H NMR谱上分离度良好,OSCS和DS在各自线性范围内线性关系良好(r>0.9998),同时方法精密度(OSCS:1.4%;DS:1.5%)和重复性(OSCS:4.2%;DS:0.71%)好,测得依诺肝素钠产品中OSCS和DS含量分别为0.04%和0.06%~1.18%。结论:本文建立了测定依诺肝素钠中OSCS和DS含量的q HNMR法,简便快速,可作为依诺肝素钠中这2个杂质限度检查新的测定方法,也为其他低分子量肝素产品中OSCS、DS这2个杂质的测定提供参考。