反相HPLC法测定13种芍药根中甙类和苯甲酸的含量

以阿司匹林为内标,在YWG-CN柱上用CH_3CN-(CH_3COOH-CH_3COONa-H_2O)CHCl_3(10:90:1)为流动相,用反相HPLC法测定了芍药、毛果芍药、草芍药、毛叶草芍药、川赤芍、毛赤芍、美丽芍药、窄叶芍药、块根芍药、新疆芍药、日本芍药、黄牡丹、及一种尚未定名的芍药的根中羟基芍药甙、芍药内酯甙、芍药甙和苯甲酸的含量,精密度实验CV(%)分别为2.34,3.40,2.88,3.31;回收率(%)分别为102.76(CV2.49%),99.39(CV1.03%),100.78(CV0.69%),100.93(CVL59%)。

HPLC波长切换法测定主产区与道地产区牡丹皮中的4种成分

目的建立HPLC波长切换法,对主产区与道地产区牡丹皮中没食子酸、氧化芍药苷、芍药苷、丹皮酚的含有量进行测定。方法牡丹皮提取液的分析采用Zorbax SB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;甲醇（A）-0.05%磷酸水溶液（B）为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;检测波长为270 nm（0~15 min,没食子酸）、230 nm（15~40 min,氧化芍药苷和芍药苷）、274 nm（40~70 min,丹皮酚）。结果没食子酸、氧化芍药苷、芍药苷、丹皮酚分别在0.010~0.300μg（r=0.999 7）、0.149~4.460μg（r=0.999 9）、0.088~2.640μg（r=0.999 9）、0.246~7.380μg（r=0.999 9）范围内与峰面积均呈良好的线性关系,加样回收率（n=6）分别为99.3%、98.9%、97.6%、102.9%,RSD分别为0.7%、0.8%、1.1%、0.6%。结论两个产区牡丹皮的质量相当,在亳州（主产区）引种该药材可行。

液相色谱/质谱/质谱联用鉴定赤芍中的一种新化合物

利用液相色谱 串联质谱联用技术 ,鉴定了赤芍中分子量为 4 96的两种化合物。研究了芍药甙的二级质谱断裂行为来帮助鉴定已知化合物氧化芍药甙。通过比较不同碰撞能量下的未知化合物子和氧化芍药甙的离子碎片 ,确定了未知化合物的基本结构单元。借助紫外光谱初步确定此未知化合物为邻位氧化芍药甙 ,是已报道活性成分对位氧化芍药甙的同分异构体。

六味地黄丸的高效液相色谱/电喷雾电离-质谱分析

建立了高效液相色谱/电喷雾电离 质谱定性分析六味地黄丸的方法,通过2级质谱识别了其中的9种化学成分。色谱条件为:ZorbaxSB C18色谱柱;乙腈 水二元高压梯度洗脱;二极管阵列检测器,设定波长254nm;流速1mL/min。质谱条件为:Agilent离子阱质谱仪;电喷雾电离(ESI)离子源;负离子检出模式。结果表明,六味地黄丸的总离子流色谱图比紫外色谱图具有更强的特征性,以质谱作为检测器是一种很好的研究中药指纹图谱的方法。

HPLC波长切换法同时测定理气散结颗粒中4个成分的含量

目的建立同时测定理气散结颗粒中氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷和α-香附酮的HPLC波长切换联合梯度洗脱法。方法采用Venusil MP C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~15 min,12.0%A;15~31 min,12.0%A→26.0%A;31~39 min,26.0%A→40.0%A;39~45 min,40.0%A→12.0%A),流速0.9 mL/min,波长切换(0~31 min,在230 nm波长下检测氧化芍药苷、芍药内酯苷和芍药苷;31~45 min,在242 nm波长下检测α-香附酮),柱温30℃,进样量为20μL。结果氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷和α-香附酮4个成分的质量浓度分别在5.15~103.00μg/mL(r=0.999 6)、8.99~179.80μg/mL(r=0.999 5)、19.83~396.60μg/mL(r=0.999 9)、6.35~127.00μg/mL(r=0.999 3)呈良好线性关系;平均加样回收率及相应的RSD(n=6)分别为96.83%(0.93%)、97.85%(1.31%)、99.71%(0.80%)、98.77%(1.59%)。结论所建立的方法灵敏度高、快速、专属性好、准确度高,为理气散结颗粒的质量控制提供了依据。

杭白芍化学成分的研究

自杭白芍（ＰａｅｏｎｉａＬａｃｔｉｆｌｏｒａＰａｌ）根中分离出６个化合物（Ⅰ～Ⅵ），经鉴定分别为β－谷甾醇、没食子酸、苯甲酸、芍药甙、羟基芍药甙和苯甲酰芍药甙．没食子酸为首次从白芍中分得．

川赤芍化学成分的研究

从川赤芍(Paeonia veitchii Lynch)根中分离出β—谷甾醇,β—谷甾醇—α—葡萄甙,芍药甙,氧芍药甙和蔗糖。其中β—谷甾醇—α—葡萄糖甙和蔗糖为首次从该植物中分得。脂溶性部位经GC-MS联用仪分析,鉴定出7种化合物:十九碳烷,棕榈酸乙酯,棕榈酸,顺△^(9.12)十八碳二烯酸,二十四碳烷,二十五碳烷和二十六碳烷。

HPLC法同时测定柔肝顺气丸中7种成分的含量

目的:建立HPLC法同时测定柔肝顺气丸中氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、丹参素、丹酚酸B、丹参酮ⅡA和α-香附酮的含量。方法:采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱,检测波长分别为230,280,242 nm,流速为1.0 ml·min-1,柱温为30℃。结果:7种成分,氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、丹参素、丹酚酸B、丹参酮ⅡA和α-香附酮分别在0.99~19.80,4.67~93.40,7.03~140.60,1.36~27.20,10.69~213.80,1.77~35.40,1.09~21.80μg·ml-1范围内线性关系良好(r>0.999 0);平均加样回收率分别为97.12%,99.10%,100.01%,98.51%,100.04%,98.69%,97.88%,RSD分别为1.54%,0.86%,0.47%,1.28%,0.66%,1.04%,1.20%(n=9)。结论:该方法操作便捷、重复性好,可更加快速全面地对柔肝顺气丸进行质量分析和质量控制。

HPLC法同时测定牡丹皮中芍药苷和氧化芍药苷含量

目的:建立同时测定牡丹皮中芍药苷和氧化芍药苷的RP-HPLC方法。方法:色谱条件为岛津-C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相:乙腈-0.05M KH2PO4(17∶83),流速1.0mL·min^(-1),检测波长243nm,柱温:25℃,进样体积20μL。结果:芍药苷和氧化芍药苷分别在9.52~95.20μg·mL^(-1)(r=0.999 3)和2.58~51.60μg·mL^(-1)(r=0.999 9)浓度范围内呈现良好的线性关系,芍药苷的平均回收率为97.30%(RSD=0.80%),氧化芍药苷的平均回收率为99.50%(RSD=0.88%)。结论:该方法准确可靠,重现性好,可用于该药材及其制剂原料中芍药苷和氧化芍药苷的定量分析。

赤芍中氧化芍药苷和芍药苷的含量测定

目的:建立同时测定赤芍中氧化芍药苷和芍药苷含量的HPLC方法。方法:采用反向高效液相色谱法,使用AglientZorbaxSB-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈—水,流速1mL/min,检测波长254nm,柱温35℃,进样量20μL。结果:氧化芍药苷回归方程为Y=41607X-164942,R=0.9994,线性范围为0.02525～0.20200mg/mL;芍药苷回归方程为Y=3641.6X+174622,R=0.9995,线性范围为0.2525～2.0200mg/mL。结论:建立了一个测定赤芍中氧化芍药苷和芍药苷含量的方法。

二基原赤芍HPLC指纹图谱的建立和5种成分的含量测定

目的:建立二基原赤芍HPLC指纹图谱,并同时测定5种指标性成分(没食子酸、羟基芍药苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、丹皮酚)的含量,评价其综合质量。方法:采用Agilent TC-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%冰醋酸溶液,梯度洗脱;检测波长260 nm;柱温30℃;流速0.8 mL/min。结果:建立了二基原赤芍HPLC指纹色谱图,其中北赤芍标定23个共有峰,川赤芍标定13个共有峰;5种成分中没食子酸在2.022～32.346μg/mL、羟基芍药苷在4.160～99.840μg/mL、芍药苷在47.934～287.602μg/mL、苯甲酰芍药苷在5.040～13.440μg/mL、丹皮酚在0.934～3.268μg/mL浓度范围内线性关系良好,r均>0.9990,加样回收率分别为101.5%、102.1%、98.4%、99.3%、101.8%。结论:HPLC指纹图谱结合相似度评价和5种成分定量测定分析法,可快速、准确地鉴别北赤芍与川赤芍;不同基原的赤芍化学成分存在较大差异,应制定规范的赤芍药材质量标准,指导临床合理、安全、有效用药。

耳聋左慈丸在大鼠体内的药代动力学

建立大鼠血浆中耳聋左慈丸中成分毛蕊花糖苷、氧化芍药苷、松果菊苷、苯甲酰芍药苷的共检测LC-MS/MS定量方法,并运用此方法评价耳聋左慈丸在大鼠体内的药代动力学行为。采用甲醇作为蛋白沉淀剂,用蛋白沉淀法处理血浆样本,以甲醇为有机相,0.1%甲酸水溶液为水相,在负离子模式下对毛蕊花糖苷、氧化芍药苷、松果菊苷、苯甲酰芍药苷进行定量分析方法的建立,并且对所建方法进行方法学考证。选取健康SD大鼠,单次灌胃20 mL/kg(相当于原药10 g/kg剂量)的耳聋左慈丸提取液,运用建立的方法测定在给药后不同时间间隔的待测物质血浆浓度,并利用Phoenix WinNonlin8.3软件经非房室模型拟合计算药代动力学参数。方法学验证结果表明,毛蕊花糖苷(r=0.9937)、氧化芍药苷(r=0.9946)在0.5~50 ng/mL范围内线性良好,松果菊苷(r=0.9936)、苯甲酰芍药苷(r=0.9926)在1~100 ng/mL范围内线性良好,4种物质的批间及批内精密度的RSD均小于15%,批间及批内准确度均在85%~115%之间。提取回收率、基质效应和稳定性均满足相关要求。在大鼠单次灌胃耳聋左慈丸提取液后,4种待测物质都发生了较快的吸收和消除,氧化芍药苷、松果菊苷、苯甲酰芍药苷的血药浓度-时间曲线中都出现双峰现象;与其他3种物质相比,氧化芍药苷在大鼠血浆中浓度较高,c_(max1)为(24.40±4.78)ng/mL,c_(max2)为(22.50±2.70)ng/mL。结果表明,该方法的验证结果符合生物样本分析方法指导原则,可用于评价耳聋左慈丸提取液在大鼠体内的药代动力学行为。

高效液相色谱法测定不同品系亳白芍中4种化学成分含量

目的:测定不同品系亳白芍中有效成分的含量。方法:采用液相色谱法测定“线条”“线蒲棒”“蒲棒”“马扎子”和“二糟”5种亳白芍中芍药苷、芍药内酯苷、氧化芍药苷及苯甲酰芍药苷4种有效成分的含量,并进行方法学考察。结果:5种亳白芍中,“二糟”的芍药苷、苯甲酰芍药苷、芍药内酯苷、氧化芍药苷含量均最大;该方法线性关系良好,精密度、稳定性和重复性高,加样回收率较好。结论:不同品系亳白芍中有效成分含量存在差异,该检测法可用于亳白芍的质量控制。

基于HPLC多指标成分含量测定结合化学计量学的小儿康颗粒质量评价

目的建立HPLC多指标成分定量测定与化学计量学相结合的小儿康颗粒质量评价方法。方法以Waters SunFire C 18(250 mm×4.6 mm,5μm)为液相色谱柱,柱温30℃;流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,体积流量:1.0 ml/min;检测波长分别为340 nm(牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷和金丝桃苷)、230 nm(氧化芍药苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷)和203 nm(太子参环肽B);采用SPSS 26.0统计软件聚类分析、主成分分析等对不同厂家生产的小儿康颗粒进行质量评价。结果牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷、氧化芍药苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、太子参环肽B分别在2.18~54.50、15.89~397.25、2.72~68.00、1.39~34.75、12.68~317.00、0.96~24.00、0.79~19.75μg/ml范围内线性关系良好(r≥0.9992);平均加样回收率分别为98.67%、100.11%、97.96%、97.68%、99.64%、96.86%、96.92%,RSD分别为1.48%、0.64%、1.27%、1.32%、0.91%、1.13%和0.87%;12批小儿康颗粒样品聚为3类,主成分分析结果显示,主成分1~3是影响小儿康颗粒质量评价的主要因子。结论该方法操作简便、重复性好,可用于小儿康颗粒的质量控制和综合评价。

氧化芍药苷在正常与抑郁大鼠体内代谢产物的比较研究

目的研究氧化芍药苷在正常和抑郁大鼠血浆、尿液、粪便中代谢产物的差异,并推测其主要的代谢途径。方法选取Wistar大鼠,复制慢性应激抑郁大鼠,分别连续ig给予正常和抑郁大鼠氧化芍药苷水溶液3 d,收集大鼠血清、尿液和粪便;利用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)技术结合UNIFI分析平台鉴定氧化芍药苷在正常和抑郁模型大鼠体内的原型成分及代谢产物。结果在正常和抑郁大鼠血浆中均检测到氧化芍药苷原型成分,且在抑郁大鼠血浆中的相对含量是正常大鼠血浆的10倍;在抑郁大鼠血浆、尿液和粪便中分别鉴定出4、13、2个代谢产物,在正常大鼠血浆、尿液和粪便中分别鉴定出1、12、3个代谢产物,其中11个共有代谢产物,主要发生的代谢途径为氧化、去饱和等I相代谢反应,甲基化、葡萄糖醛酸化、乙酰化等II相代谢反应。结论氧化芍药苷ig给药后主要以原型成分进入体内,且抑郁大鼠血浆中原型成分的相对含量较正常大鼠高10倍;在抑郁和正常大鼠中的代谢产物有差异,其中葡萄糖醛酸化为正常大鼠体内特有的代谢途径,乙酰化为抑郁大鼠体内特有的代谢途径。推测氧化芍药苷可能是以原型成分为主发挥药效作用,通过尿液和粪便以原型或代谢产物排泄。

高效液相色谱波长切换法同时测定紫斑牡丹籽壳中6种成分含量

目的建立高效液相色谱(HPLC)波长切换法同时测定紫斑牡丹籽壳中6种成分含量的方法。方法采用HPLC波长切换法同时测定紫斑牡丹籽壳中没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、白藜芦醇、木犀草素6种成分的含量。色谱柱为CAPCELLPAK C_(18)(250.0 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测器为二极管阵列检测器(DAD),检测波长分别为273,260,230,228,305,350 nm,柱温30℃,进样量10μL。结果没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、白藜芦醇、木犀草素的回归方程分别为:Y=30209X+193.54(r=0.9992),Y=16415X-118.55(r=0.9993),Y=8735.8X-5072.6(r=0.9992),Y=13658X-39219(r=0.9999),Y=82092X+25114(r=0.9990),Y=43038X+11152(r=0.9992),分别在0.2594~5.1886,0.7589~15.1782,1.2475~24.9500,11.7005~234.0093,3.3526~67.0513,2.7802~55.6032μg范围内线性关系良好;精密度、重复性、稳定性试验的RSD分别为0.7%~1.4%(n=6),0.7%~1.9%(n=6),0.5%~1.0%(n=8);平均加样回收率分别为99.87%,100.41%,99.60%,100.57%,100.29%,99.49%,RSD分别为2.0%,1.9%,1.8%,1.6%,1.8%,1.8%。结论该法具有提取简便、提取率高、重复性好、准确度高等特点,可作为紫斑牡丹籽壳中6种成分的定量分析方法。

基于UPLC-Q-TOF-MS^(E)结合多元统计方法的不同产地白芍药材质量评价

目的分析不同产地白芍药材质量差异及特异性化学成分,为白芍的产地判别和质量评价提供依据。方法采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MSE)对不同产地白芍样品全成分分析,应用主成分分析(principal component analysis,PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)及聚类分析(cluster analysis,CA)对安徽亳州、四川中江、浙江磐安3个产地共15批次白芍药材进行多元统计分析,根据VIP值>1和t检验(P<0.05)筛选不同产地白芍药材中具有显著差异的化学成分。结果从不同产地白芍药材中共鉴定出44个化学成分,以单萜类、鞣质类、三萜类、黄酮类、挥发油类等成分为主,其中以单萜类成分含量最高。不同产地白芍的化学成分差异明显,共鉴定出16个差异化学成分,其中牡丹皮苷G为安徽亳州产地特有成分,1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖为浙江磐安产地的特有成分,1-O-β-D-glucopyranosylpaeonisuffrone为四川中江产地特有成分;柠檬酸、1-没食子酸酰葡萄糖、去苯甲酰基芍药苷或异构体、没食子酸、氧化芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、没食子酸甲酯、没食子酰芍药苷或异构体、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、白芍苷R1、牡丹皮苷B为3个产地共有成分,但含量呈现不同的变化规律。结论不同产地白芍质量差异明显,在共有成分基础上,安徽亳州白芍含有特异成分牡丹皮苷G,浙江磐安白芍含有特异成分1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖,四川中江白芍的特有成分为1-O-β-D-glucopyranosylpaeonisuffrone,可作为产地鉴别的依据,共有成分及差异成分的含量可作为质量评价的依据。

基于药材-饮片-标准汤剂质量传递过程的白芍质量标志物研究

目的通过建立白芍药材、饮片、标准汤剂HPLC特征图谱对白芍生产过程的共有峰进行定性分析,结合白芍药材-饮片-标准汤剂质量传递过程筛选白芍质量标志物(Q-Marker)。方法采集10批白芍鲜药材,制备为药材、饮片和标准汤剂,采用HPLC建立白芍药材-饮片-标准汤剂特征图谱,结合相似度评价及正交偏最小二乘-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)等分析初步确定的指标成分在药材-饮片-标准汤剂过程的含量及转移率,探究白芍生产过程中的质量传递规律,综合筛选白芍Q-Marker。结果白芍药材、饮片、标准汤剂特征图谱的共有峰有9个,组内相似度较高,OPLS-DA结果显示,9号共有峰不能稳定传递;白芍药材-饮片传递过程中,没食子酸、氧化芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、芍药苷、没食子酰芍药苷、1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷8种成分转移率大于70%,可以传递稳定;饮片-标准汤剂传递过程中,芍药苷、芍药内酯苷、没食子酰芍药苷、氧化芍药苷、苯甲酰芍药苷等单萜及其苷类成分含量稳定且转移率大于60%,可以传递稳定;没食子酸转移率大于200%,未能充分体现白芍饮片中没食子酸的传递情况;儿茶素和1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖2种成分转移率小于25%。结论结合白芍药材、饮片和标准汤剂中特征图谱、含量及转移率变化等,综合筛选确定氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、没食子酰芍药苷、苯甲酰芍药苷5种成分作为白芍Q-Marker。

基于指纹图谱与化学计量学的白芍酒炙前后差异性标志物研究

目的基于HPLC指纹图谱与化学计量学探究白芍Paeoniae Radix Alba酒炙前后化学成分的差异性,筛选差异性标志物,为探究白芍酒炙前后炮制机制及建立质量控制标准提供参考。方法采用HPLC建立白芍饮片酒炙前后指纹图谱,标定共有峰并进行指认与相似度评价,以白芍饮片酒炙前后共有峰峰面积为指标,运用层次聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)等方法对白芍酒炙前后进行区分,并筛选出差异性标志物进行定量分析。结果生白芍与酒白芍HPLC指纹图谱相似度较高,但其酒炙前后峰面积有所差异;HCA与PCA可明显把生白芍与酒白芍分为2类,表明白芍酒炙前后化学成分存在一定差异;根据OPLS-DA分析筛选出峰1(没食子酸)、2(氧化芍药苷)、3、7(芍药苷)、8(没食子酰芍药苷)为酒炙前后主要差异性标志物;对其中可指认且含量较高的3个差异性标志物进行定量研究,结果显示,白芍经酒炙后没食子酸含量显著性增加,芍药苷、没食子酰芍药苷含量显著性减少,HCA可明显把白芍与酒白芍分为2类,进一步证实了选择该3种成分作为白芍酒炙前后差异性标志物的合理性。结论白芍酒炙前后差异性标志物的研究可以为完善白芍与酒白芍饮片的质量控制和品质评价提供参考。

氧化芍药苷联合运动对抑郁症大鼠的抗抑郁作用及其机制

本研究旨在探讨芍药根中的主要活性成分氧化芍药苷联合运动对抑郁症大鼠的抗抑郁作用及其相关机制。采用慢性不可预测性应激(CUMS)诱导抑郁模型,通过行为学测试、海马组织学染色和分子生物学方法,评估了氧化芍药苷和运动对抑郁症大鼠行为学、海马组织形态、氧化应激指标、Fe^(2+)含量和GPX4蛋白表达的影响。结果显示,氧化芍药苷和运动均显著改善了抑郁症大鼠的行为学,减轻了海马组织损伤,并抑制了海马神经元凋亡。此外,氧化芍药苷联合运动降低了海马组织的氧化应激反应和Fe^(2+)含量,并显著上调了GPX4蛋白的表达水平。因此,本研究提供了证据支持氧化芍药苷联合运动在抗抑郁疗法中的潜力,并揭示了其通过抑制氧化应激和铁死亡途径的作用机制。