P^53突变与VEGF在大鼠胃癌中的表达及中药胃康宁的防治作用

目的:了解P53基因突变与VEGF在大鼠实验性胃癌中的表达及中药胃康宁的防治作用.方法:Wistar ♂大白鼠,2-3月龄,体重120-140 g,用MNNG限期饲饮法诱导大鼠发生胃腺癌,设对照组,胃康宁1组、2组,用光镜、电镜观察大鼠胃黏膜细胞形态,用免疫组化法检测突变型P53及VEGF表达.结果:与对照组比较,胃康宁组大鼠胃黏膜细胞异形性、核浓染、核浆比增大等恶性表型轻微,能降低突变型P53蛋白表达(3.4905±1.5225),和VEGF表达(3.519±2.204),(P＜0.001).结论:以MNNG诱导大鼠实验性胃癌的发生与P53基因突变及VEGF高表达有关,中药胃康宁具有良好的防治作用,能显著抑制P53蛋白和VEGF表达.

逆转录病毒介导野生型P^53与反义mdm2融合基因对Mc3细胞凋亡的影响

目的探讨P^53与反义mdm2 cDNA序列真核表达载体诱导人黏液表皮样癌高转移细胞株Mc3细胞凋亡的影响。方法将P^53与反义mdm2 cDNA序列真核表达载体通过脂质体转染Mc3细胞，采用形态学观察凋亡细胞；琼脂糖凝胶电泳检测“梯状条带”；末端转移酶标记法（TUNEL）检测凋亡指数；透射电镜检测凋亡小体。结果转染48h后形态学观察到细胞体积缩小；核浓染碎裂成大小不等的碎片；核染色质成新月形，琼脂糖凝胶电泳可见180～200bp典型的凋亡带，TUNEL检测凋亡指数为25．22±1．01（转染后），与对照组2．01±1．10（转染前）比较差异有统计学意义（P〈0．05），转染空载体（2．02±1．11）与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05），透射电镜可见染色质浓集分布不均，形成由核膜包裹断裂的核碎片的凋亡小体。结论P^53与反义mdm2基因融合体真核表达载体能诱导和促使体外培养的人黏液表皮样癌高转移细胞株Mc3细胞发生凋亡。

盐酸小檗碱对人胃癌细胞凋亡与P^53、Bcl-2基因表达水平的影响

目的 探讨盐酸小檗碱对人胃癌细胞凋亡与P^53，Bcl-2凋亡基因mRNA及蛋白表达水平的影响。方法 以人胃腺癌细胞株SGC-7901为实验模型，用盐酸小檗碱大（8μg／ml）、小（4gg／ml）两个剂量进行干预，运用光镜、扫描电镜（SEM）、琼脂糖凝胶电泳，流式细胞术（FAC）、末端DNA标记法（TUNEL）对凋亡细胞进行定性与定量检测，免疫组化技术、逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）检测细胞中P^53和Bcl-2mRNA及蛋白表达水平。结果 盐酸小檗碱大，小剂量组作用72h，胃癌细胞DNA出现典型梯状改变，流式细胞仪DNA直方图出现典型的亚二倍体峰（凋亡峰），且随干预药物浓度增加，凋亡率增高，G0/G1期细胞百分比上升，S期细胞百分比下降，细胞阻滞于G0／Gl期。小檗碱作用72h，Bcl-2蛋白及mRNA、突变型p^53蛋白表达水平下调，野生型p^53 mRNA表达水平上调。结论 盐酸小檗碱能诱导人胃腺癌细胞凋亡，且随药物浓度增高，凋亡率亦增高，其机制可能与上调野生型P^53基因，下调Bcl-2基因、突变型P^53蛋白表达有关。

乳腺癌中P^53和C—erb B—2基因蛋白表达及意义

目的：探讨P^53和C-erb B-2基因蛋白在乳腺癌中的表达及意义。方法：收集乳腺癌标本98例，使用SP免疫组织化学方法，检测了P^53和C-erb B-2基因蛋白的阳性率。结果：P^53和C-erb B-2在乳腺癌中的阳性率分别为46．93%和54．08％。浸润性导管癌和浸润性小叶癌中P^53和C-erb B-2阳性率明显高于导管内癌及小叶原位癌(P<0.05)。结论：P^53和C-erb B-2过表达是乳腺癌预后不良的重要指标。

肝癌及癌旁组织中P^53基因及AFP、CEA表达异常及相关研究

目的：从分子生物及病理学角度对肝癌中抑癌基因P^53和瘤标志物AFP（甲胎蛋白）、CEA（癌胚抗原）的表达及相关性进行研究。方法：收集40例肝细胞肝癌（HCC）患者癌组织连带部分癌旁组织，用免疫组织化学法检测P^53基因、AFP、CEA等。结果：P^53基因癌内表达率为805，癌旁组织为505；AFP癌内表达率为87．55，癌旁组织为80％；CEA癌内表达率为55％，癌旁组织表达不明显，结论：检测P^53基因，并与其他肿瘤标志物和相关基因一起，在基因水平诊断肝癌、估计预后及制定术后治疗方案等方面有着重要作用。

金葡菌L型感染的C57小鼠诱发肿瘤中PCNA、P^53基因的表达及意义

目的：探讨增殖细胞核抗原(PCNA)和抑癌基因P^53蛋白及mRNA在诱发小鼠肿瘤及增生组织中的表达及意义。方法：应用动物实验、免疫组化和核酸原位杂文等方法检测感染金葡菌L型后发生肿瘤和癌前病变的小鼠组织中PCNA和抑癌基因P^53蛋白及mRNA表达。结果：金葡菌L型感染C57小鼠后，11．11％(10／90只)小鼠发生肿瘤，14．44％(13／90只)小鼠发生癌前病变。小鼠肿瘤小PCNA指数90%，癌前病变组织为46．15％；小鼠肿瘤中P^53蛋白阳性表达60%，mRNA50%，癌前病变组织中P^53蛋口和mRNA表达均为38．46％。免疫组化和核酸原位杂交结果无显著差异性。结论：金葡菌L型感染，P^53基因的异常表达与小鼠肿瘤的发生发展有密切关系，PCNA可作为判断小鼠肿瘤细胞增范殖活性的可靠指标。

血清P^53抗体检测在胃部疾病中的意义

目的：探讨测定血清P^53抑癌基因突变型抗体在胃部疾病中的意义。方法：对胃镜及病理检查证实的患有各种慢性胃炎，十二指肠球部溃疡，胃溃疡，胃癌的病人共150例。用快速尿素酶和^14C尿素呼气试验检测幽门螺杆菌（HP），并用ELISA法检测血清P^53抗体。结果：HP感染者的P^53抗体中位值明显高于未感染者（P＜0．05），胃癌中P^53抗体阳性占37．5％，萎缩性胃炎中位值1．1－1．6间明显增高，且大部分有不典型增生。结论：P^53突变基因与胃内HP感染具有相关性，胃癌中血清P^53抗体增高明显，萎缩性胃炎或伴不典型增生者抗体值也有增高趋势。

P^53、C-erBb-2在大肠癌中表达的病理研究

目的：研究P^53、C-erBb-2癌基因蛋白在大肠癌中的表达及其与组织学分级和预后的关系。方法：对已确诊的64例大肠癌用免疫组化SP法标记P^53、C-crBb-2蛋白。结果：发现P^53、CerBb-2蛋白在大肠癌中的阳性表达率分别为：53，l％(36／64)和48．4％(31／64)，在P阳性表达的34例在肠癌中C-erBb-2同时表达者26例。占76．4％；阴性表达者30例大肠癌中，C-erBb-2阳性表达者5例，占16.7％，两者之间差异显著(P<O．05)。结论：P^53,C-erBb-2蛋白在大肠癌中的过度表达具有相对特异性，其表达率随肿瘤的恶性程度增高而上升；两种癌基因蛋白在大肠癌中的发生中起协同作用，两种癌基因蛋白同时表达者预后评估不好。

雌激素受体、P^53蛋白、增殖细胞核抗原在乳腺癌的表达及意义

目的探讨雌激素受体(ER)与P53蛋白、增殖细胞核抗原(PCNA)在乳腺癌中的表达及意义.方法应用免疫组化S-P法,用抗ER、抗P53蛋白、抗PCNA单克隆抗体检测6 6例乳腺癌中ER、P53蛋白、PCNA的表达.结果 66例乳腺癌中ER阳性率为62.1%,P 53蛋白阳性率为34.8%,PCNA强阳性率为56.1%,PCNA弱阳性率为43.9%.28例高分化乳癌中E R阳性率为82.1%,P53阳性率为17.9%,PCNA强阳性率为32.1%;21例中分化乳癌中ER阳性率为61.9%, P53阳性率为38.1%,PCNA强阳性率为38.1%;17例低分化乳癌中ER阳性率为29.4%, P53阳性率为58.8%,PCNA强阳性率为70.6%.结论 ER阳性表达、P53蛋白阳性表达、PCNA强阳性表达与乳腺癌分化程度密切相关,且P 53可能抑制乳腺癌细胞中ER表达;ER阳性病例中的癌细胞增殖活性较ER阴性病例低.

脑温不同对大鼠缺血脑组织P^53表达的影响

目的：研究脑缺血后不同脑温对P^53蛋白表达的影响，探讨亚低温脑保护作用的机制。方法：Sprague-Dawley（SD）大鼠，随机分为常温（37℃－38℃）脑缺血、亚低温（31℃－32℃）脑缺血、高温（41℃-42℃）脑缺血和假手术组，每组6只动物。脑缺血动物模型采用改良的Pulsinelli四动脉阻断法。脑组织中P^53蛋白在大脑皮质的表达为：常温组和高温组明显高于亚低温组。大脑皮质锥细胞和神经胶质细胞的变性、坏死表现为：常温组和高温组严重于亚低温组。结论：脑缺血后即时开始亚低温可减少P^53蛋白的表达，大脑皮质锥体细胞和神经胶质细胞的变性、坏死是亚低温脑保护作用的机制之一。

大肠癌P^53蛋白的表达与定量检测

目的：对大肠肿瘤P^53的多参数进行检测，探讨其在大肠癌诊断中的应用价值。方法：应用计算机图像分析技术与免疫组化技术对大肠癌、大肠腺瘤及正常肠粘膜进行P^53多参数检测，并应用数学统计方法建立判别函数。结果：参数值大多随着正常肠粘膜→腺瘤→腺癌的顺序呈递增趋势，且组间差别有显著性（P＜0.01），显示这些参数均能较好反映肿瘤的演进过程，由此建立的判别函数回代符合率达86.02%。结论：应用图像分析及免疫组化技术对大肠癌及癌前病变进行P^53的定量分析，具有鉴别诊断的重要意义。为大肠癌的计算机诊断提供客观依据。

小细胞肺癌中P^53基因突变的检测及临床意义

应用聚合酶链反应－单链构象多态性分析的方法，检测了３２例手术切除、甲醛固定、石蜡包埋的小细胞肺癌组织第７、８外显子的突变情况，突变率达５３．１３％（１７／３２），且Ｐ＾５３突变与性别、吸烟史、临床分期及淋巴结转移情况无关（Ｐ〉０．０５）；对所有患者进行随访，发现Ｐ＾５３突变组与未突变组的３年术后生存率的差异有显著性（Ｐ〈０．０５），而１年、２年的术后生存率两组均无显著性差异（Ｐ〉０．０５）。

P^53和VEGF在肝细胞肝癌组织中的表达及其意义

目的研究P^53和VEGF在肝细胞肝癌（HCC）组织中的表达状况和意义。方法应用免疫组化SP法检测50例HCC组织、50例癌旁组织和20例正常肝脏标本组织石蜡切片中P^53和VECF的表达。结果D53和VEGF在正常肝脏组织中均无表达，在癌旁组织和HCC组织中的表达率分别为22％、52％和44％、87％，二者比较差异均有统计学意义（P〈0．01）；P^53和VEGF在HCC组织中的表达与患者的年龄、性别无明显相关性，但与肿瘤大小密切相关。结论P^53和VEGF的异常表达与HCC的发展密切相关，在HCC的发展过程中可能起重要的作用。

食管癌的P^53表达及预后分析

为探讨食管癌患者的预后因素了解食管癌细胞的增殖状态，作者采用Cox多因素回归模型对上海医科大学肿瘤医院1988年-1991年单纯根治性手术治疗的108例患者进行预后因素分析．井用许氏ABC法对其中50例患者的手术切除标本进行P^53表达的分析．结果：食管癌患者的预后与临床分期、淋巴结转、P^53的表达有关(P<0．05)：而与病变长度、部位、淋巴结大小、病理分级及弓上或弓下吻合无关关（P<o．05)；P^53在食管癌中阳性表达率为54．0%(27／50)．其表达强度与病理分级有关（P<0．05)。而与临床分期无关（P<0.05)。提示食管癌患者的临床分期、淋巴结转移和P^53的表达是重要的预后因素．P^53的表达与病理分级有关。

乳腺增生和乳腺癌中ER、PR、CerbB-2和P^53表达差异的临床意义

目的探讨乳腺增生和乳腺癌中ER、PR、CerbB-2和P^53蛋白的表达差异及其临床意义。方法采用免疫组织化学（ElivisionTM）法，检测68例乳腺增生和70例乳腺癌标本中ER、PR、CerbB-2和P^53蛋白的表达，并以统计学方法分析其差异。结果乳腺癌患者ER表达明显高于乳腺增生患者（P=0．01），分组分析显示绝经期乳腺癌患者ER表达高于乳腺增生患者（P=0．048），而与围经期患者无明显差异；乳腺癌患者Cer—B2受体表达水平明显高于乳腺增生患者（P〈0．01），分组分析显示绝经期及围经期乳腺癌患者Cer—B2受体表达水平均高于乳腺增生患者（P〈0．05）；乳腺癌患者P^53受体表达水平明显高于乳腺增生患者（P=0．016），分组分析显示绝经期乳腺癌患者P^53受体表达水平高于乳腺增生患者（P=0．041），而围经期患者差异无统计学意义。结论ER、PR、CerbB-2、P^53在乳腺增生与乳腺癌中表达有明显差异，可以用于乳腺癌的诊断和治疗。

胃癌组织P^53异常表达与预后相关性研究

目的 研究胃癌组织P^53异常表达与影响患者预后的相关性的因素。方法 采用免疫组织化学ABC法检测P^53的表达，并分析其与预后的关系。结果 P^53阳性表达率为65．18％(56／86)，P^53阴性表达率为34．88％(30／86)，表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移，远处转移及TNM分期密切相关。结论 P^53阳性表达率高的患者预后不佳。免疫纪织化学检测P^53的表达可为预测胃癌患者预后及选择合理治疗提供一个有实价值的指标。

HPV16／18、PCNA、P^53、ER在宫颈病变中表达的临床病理意义

目的 探讨HPV16／18、PCNA、P^53、ER在不同程度宫颈病变组织中的表达。方法将242例患有宫颈鳞癌、宫颈上皮内病变及慢性宫颈炎的组织，用原位杂交方法检测HPV16／18及采用免疫组织化学Supervision二步法检测其PCNA、P^53、ER蛋白的表达。结果HPV16／18、PCNA、P^53及ER在宫颈鳞癌组中的阳性表达率分别为96．77％、91．94％、90．32％、6．45％，以HPV16／18的表达阳性率最高，PCNA表达强阳性；在高级别上皮内瘤变中的阳性表达率分别为96．77％、100％、80．65％，41．94％，以PCNA的表达阳性率最高，并呈强阳性；在低级别上皮内瘤变中的阳性表达率分别为62．07％、100％、62．07％79．31％，以PCNA表达阳性率最高，并呈中等强度；在对照组慢性宫颈炎中只有ER表达为100％，HPV16／18表达只有3．33％，而PCNA和P^53表达均呈弱阳性及阴性。宫颈鳞癌、高级别上皮内瘤变、低级别上皮内瘤变各组HPV16／18、PC—NA、P^53及ER蛋白阳性表达率与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论HPV16／18病毒感染、PCNA细胞增殖指数、P^53突变与宫颈浸润性鳞癌、宫颈上皮内瘤变的发生、发展密切相关；HPV16／18、PCNA、P^53的升高与宫颈病变恶性程度呈正相关，ER的升高与其呈负相关。应用原位杂交检测技术与免疫组织化表达有统计学意义可以用于子宫颈病变方面的研究。

大肠癌患者外周血检测P^53表达及其临床意义

目的探讨大肠癌患者外周血检测P^53的表达情况及其临床意义。方法采用流式细胞术，于术前1d、术后1d及术后7d分别对109例大肠癌患者用外周血检测P^53表达，实验数据用SPSS统计软件处理。结果术前1d检测，P^53有异常表达，手术后1d和第7天检测，P^53表达阳性率较术前1d检测的阳性表达率增加，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论血循环中肿瘤细胞的存在是大肠癌的一种常见早期现象，外周血中可检出大肠癌细胞生物学标志物矿。突变表达；同时，手术刺激可增加肿瘤细胞向血循环中释放。

P^53和Bcl—2在非小细胞肺癌中的表达及相互关系

目的 探讨非小细胞肺癌中P^53和Bcl—2的表达及相互关系。方法 应用免疫组化的方法检测54例非小细胞肺癌石蜡切片中P^53和Bcl—2蛋白的表达情况。结果 54例非小细胞肺癌中，P^53阳性率57．41％，Bcl—2阳性率44．44％，其中P^53表达与淋巴结转移、肿瘤大小、分化程度及P—TNM分期有关，而Bcl—2表达仅与淋巴结转移及P—TNM分期有关(P<0．05)，而P^53和Bcl—2之问则呈显著负相关(P<0．005)。结论 P^53和Bcl—2都是非小细胞肺癌中细胞凋亡的重要因素。Bcl—2是肺癌发生的早期事件，而P^53则与许多不良因素有关。二者在凋亡调控中是相互作用，密切相关的。