人子宫平滑肌肿瘤的雌、孕激素受体和p^(53)蛋白表达

目的：探讨子宫平滑肌瘤与雌、孕激素受体的关系；了解ｐ５３蛋白在不同组织学类型肌瘤细胞内的表达情况。方法：直接荧光组织化学法和免疫组化法。结果：子宫肌瘤雌、孕激素受体阳性率为６５．５２％，高于子宫肌壁的雌、孕激素受体３６．３６％的阳性率。两组差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。６０例子宫平滑肌瘤ｐ５３蛋白总阳性表达率为１８．８３％，良性平滑肌瘤组、富细胞型及子宫肉瘤组ｐ５３蛋白阳性率分别为１３．３３％、１５％和４０％。肉瘤组ｐ５３蛋白阳性率明显高于良性肌瘤组，但差异无显著性。结论：雌、孕激素对子宫平滑肌瘤的发生均有一定作用。人子宫平滑肌瘤ｐ５３蛋白阳性表达率低于女性生殖道上皮源性肿瘤，而与人纤维源性肿瘤的ｐ５３蛋白阳性表达率接近。

康尔爱片诱导人胃腺癌SGC-7901细胞凋亡及对P^(53)基因表达影响的研究

目的 :观察康尔爱片诱导人胃腺癌SGC - 90 1细胞凋亡及对P5 3基因表达的影响。方法 :应用流式细胞仪检测康尔爱片体外给药后人胃腺癌SGC - 790 1细胞DNA含量变化和P5 3基因表达情况。结果 :康尔爱片中、大剂量组细胞凋亡百分率分别为 9.0 6 %、96 .32 % ,与对照组相比有明显差异 (P <0 .0 1) ;小、中、大 3个剂量组P5 3基因表达率分别为 95 .0 9%、89.47%、5 2 .0 4% ,与对照组相比有明显差异 (P <0 .0 1)。结论 :康尔爱片中、大剂量组可以明显诱导人胃腺癌SGC - 790 1细胞凋亡 ,且小、中、大 3个剂量组均可降低突变型P5 3基因表达率。

羊栖菜多糖对肿瘤细胞P^(53)基因蛋白表达的影响

采用Westernblot法测定P^(53)基因表达，研究羊栖菜多糖对肿瘤细胞P^(53)基因表达的影响。表明羊栖菜多糖组P^(53)基因表达阳性率明显高于阴性对照组。羊栖菜多糖可显著诱导肿瘤细胞野生型P^(53)水平的增加，从而达到抗肿瘤的作用。

胃癌组织中Survivin、PTEN、P^(53)基因的表达及意义

目的 探讨凋亡抑制基因 Survivin和抑癌基因 PTEN、P53在胃癌组织中的表达及其与胃癌发生发展、临床病理特征之间的关系。方法 应用免疫组织化学链霉亲和素方法 (SABC) ,检测 Survivin、PTEN和 P53基因在 6 5例胃癌、2 6例不典型增生胃黏膜、10例浅表性胃炎和 30例正常胃黏膜组织中的表达。结果 胃癌组织中Survivin、PTEN、突变型 P53基因的阳性表达率分别为 70 %、4 8%、6 5 % ,不典型增生胃黏膜中分别为 4 2 %、85 %、31% ,Survivin和突变型 P53基因在正常胃黏膜和浅表性胃炎组织中不表达 ,PTEN基因在正常胃黏膜和浅表性胃炎组织中全部呈阳性表达。胃癌组织中 PTEN基因的表达与正常胃黏膜组织中的表达差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ,胃癌组织、不典型增生胃黏膜以及正常胃黏膜中 Survivin和突变型 P53基因的表达差异均有显著性 (P<0 .0 5 )。随临床分期增加、胃癌分化程度降低、浸润深度加深、淋巴结的转移 ,突变型 P53基因的阳性表达率逐渐上升 (P<0 .0 5 ) ,PTEN基因的阳性表达率逐渐降低 (P<0 .0 5 )。在胃癌组织中 Survivin与突变型 P53基因的表达呈正相关 (P<0 .0 5 ) ,与 PTEN基因的表达呈负相关 (P<0 .0 5 ) ,PTEN基因与突变型 P53基因的表达呈负相关 (P<0 .0 5 )。结论 Survivin、PTEN和

人小细胞肺癌P^(53)基因突变的研究

为探讨小细胞肺癌（SCLC）发生的分子机制，应用免疫组化和聚合酶链反应─-单链构象多态性（PCR－SSCP）技术，对14例SCLC的石蜡切片标本进行了P53基因突变研究。结果显示：P53蛋白免疫组织化学反应有9例出现阳性，其中2例为十，7例为～，阳性率为64．3％（9／14）。P53基因第5、6、7、8外显子突变率分别为21．4％（3／14）；14，3％（2／14）;14．3％（2／14）；7．1％（1／14），总突变率为57．1％（8／14）。提示：SCLC中存在较高的P53基因突变率，P53基因突变在人类肺癌的发生发展过程中起着重要的作用。

PCR-SSCP分析法检测宫颈癌中H-ras、p^(53)基因突变与HPV感染

我们对40例宫颈癌活检组织同时进行HPV、H－ras、p53基因的检测，应用GP－PCR技术检测了多型HPV的感染，发现阳性率为85％（34／40）。HPV16转化基因E7占61．8％（21／34）。此外，利用PCR－SSCP（单纯DNA构象多态性）分析方法，对宫颈癌中H－ras、p53基因点突变进行了检测，H－ras突变占22．5％（9／40），p53占2．5％（1／40），而H－ras突变在HPV感染阳性组织中占14．7％（5／34），其中3例的病程分期为Ⅲ期以上。结果表明：HPV16E7转化基因在宫颈癌的致癌过程中为关键基因，H－ras突变很可能与有关报道相一致，属于“迟发”事件，与肿瘤的恶性程度及浸润有关。而p535—6外显子基因突变在HPV感染的宫颈癌中发生率很低。

舌鳞状细胞癌组织中p^(53)、p^(21)和bcl-2基因蛋白的表达

【目的】研究 p5 3、p2 1和bcl 2基因蛋白在舌鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。【方法】用免疫组化SP法检测 5 4例舌鳞状细胞癌组织标本p5 3、p2 1和bcl 2癌基因蛋白表达。【结果】舌鳞状细胞癌组织中p5 3、p2 1和bcl 2蛋白阳性率分别为 46 %、6 1%、46 % ;p5 3和 p2 1蛋白表达与肿瘤细胞分化程度及颈淋巴结转移有关 (P <0 0 5 ) ;p5 3蛋白表达与 p2 1蛋白表达有关 (P <0 0 5 ) ,bcl 2基因蛋白表达与 p5 3或p2 1基因蛋白表达无关 (P >0 0 5 )。【结论】舌鳞状细胞癌组织中具有较高的 p5 3、p2 1和bcl 2癌基因蛋白表达 ;p5 3和 /或p2 1蛋白阳性病例恶性程度高 ,易发生颈淋巴结转移。p5 3和 /或 p2

人野生型P^(53)与反义mdm_2基因融合体真核表达载体的构建及其在Mc3细胞中的表达

目的构建P53与反义mdm2cDNA序列真核表达载体,并探讨其在人黏液表皮样癌高转移细胞株Mc3细胞中的表达。方法应用分子克隆技术,将mdm2cDNA序列反向插入到含有P53基因序列pDOR-Neo中的P53基因序列下游,构成含有P53基因与反义mdm2基因融合基因的逆转录病毒表达载体。经酶切分析鉴定后命名为pDOR-Neo-P53-Fmdm2并将重组载体通过脂质体转染Mc3细胞,通过G418筛选转染阳性细胞,并采用Westernblot方法检测P53蛋白表达。结果酶切鉴定证实重组载体含有P53与反义mdm2cDNA片段,实验结果表明:转染后P53蛋白(1.35±0.14)较对照组P53蛋白(6.26±0.11)含量显著减低(P<0.01),转染空载体P53蛋白(6.24±0.12)与对照组比较无统计学差异(P>0.05)。结论P53与反义mdm2基因融合体真核表达载体构建成功,并表达野生型P53蛋白和封闭mdm2基因,为今后进一步研究打下了基础。

胰腺癌P^(53)与细胞凋亡相关性研究

目的研究胰腺癌P53 基因表达与细胞凋亡的关系及其临床意义。方法采用原位DNA末端标记技术和SP免疫组织化学方法分别对 15 0例异常和正常胰腺组织石蜡包埋标本 (其中包括 97例胰腺癌、32例胰腺炎和 2 1例正常胰腺组织 )进行P53 基因表达和细胞凋亡检测。结果 (1)P53 基因阳性表达率在胰腺癌、胰腺炎和正常胰腺组织中分别为 5 9 8%、3 1%和 0 % ,P53 基因表达在胰腺癌组织中明显高于胰腺炎和正常胰腺组织 (P <0 0 5 ) ,细胞凋亡平均指数分别为 13 15± 8 3、14 2 1± 9 0和 11 6 7± 7 9,三种组织内细胞凋亡指数无显著性差异 (P >0 0 5 )。 (2 )P53 基因表达与肿瘤分化程度、转移和TNM分期相关 ,而与病人年龄、性别、肿瘤部位和大小无关。低分化、转移和TNMⅢ与Ⅳ期肿瘤细胞的P53 基因阳性表达率显著高于高分化、未转移和TNMⅠ与Ⅱ期肿瘤病人的胰腺癌细胞P53 基因阳性率 (P <0 0 5 ) ,P53 基因阳性表达胰腺癌患者术后平均生存期为 2 8 7± 6 9个月 ,明显低于P53 基因阴性表达患者 (39 5± 3 4个月 ) ,P <0 0 5。高分化、TNMⅠ与Ⅱ期肿瘤细胞凋亡指数明显高于低分化和TNMⅢ期与Ⅳ期病人细胞凋亡指数 (P <0 0 5 )。 (3)胰腺癌P53 基因表达与细胞凋亡指数呈负相关关系 (r = 0 5 0 16 ,P <0 0 5 )。

唾液腺腺样囊性癌P^(53)基因蛋白表达与临床病理特征的关系

目的 探讨唾液腺腺样囊性癌(ACC) P53基因蛋白表达与临床病理特征的关系。方法 选择38例唾液腺ACC病理标本,采用免疫组织化学法进行P53基因蛋白检测。分析P53基因蛋白表达与ACC病理类型、局部复发、远处转移及临床分期的关系。结果 P53基因蛋白检出率为6 0 .5 % ,其过度表达与唾液腺ACC的复发、远处转移及术后生存有关(P均<0 .0 5 ) ,与肿瘤病理类型、临床分期无关(P均>0 .0 5 )。结论 P53基因蛋白过度表达在唾液腺ACC中有较高的检出率。

肾上腺肿瘤P^(53)基因表达的实验研究

目的：对各类肾上腺肿瘤的Ｐ５３基因作对比性实验研究，以探索其各自的发病机理，并试图以临床检测Ｐ５３蛋白表达及点突变作鉴别诊断。方法：３４例肾上腺恶性肿瘤及２５例良性瘤的病理标本行Ｐ５３蛋白表达，ＳＰ法ＤＡＢ显色见异常细胞颗粒者为阳性。ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术对５～９外显子作观测，显示一带或多带异常型者为阳性。两者结合分析，并与１２份肾上腺非瘤组织对照。结果：恶性瘤的Ｐ５３蛋白表达及点突变率分别为４７％及２９％阳性，而良性瘤为８％及４％，对照组为０％。浸润转移癌阳性率显著增高。恶性嗜铬细胞瘤的阳性率高达约７０％＋及６０％－。ＳＰ、ＰＣＲ合并阳性率＞单项阳性率。结论：各类肾上腺癌的发病与Ｐ５３基因突变相关联。恶性嗜铬细胞瘤阳性率高于皮质癌。浸润转移癌阳性率最高。Ｐ５３基因突变与有无皮、髓质激素分泌无关。

中国儿童白血病中P^（53）基因失活突变的研究

目的通过对中国儿童白血病患儿外周静脉血及骨髓标本的Ｐ５３基因失活突变的分析，探讨Ｐ５３基因突变在儿童白血病中的作用机制，及其突变类型在中国人群中的分布频率。方法用聚合酶链反应分别扩增Ｐ５３基因的外显子４，５，６，７，８；用单链构象多态性对扩增片段进行点突变检测。结果２２例儿童白血病人中９例在不同的外显子内发现了点突变，其中外显子７内的点突变发生频率最高。１例在血液系统外的体细胞中亦存在点突变，被证明是遗传性的突变，其他８例则是获得性突变。结论儿童白血病与其他实体肿瘤一样，普遍存在Ｐ５３基因的失活，因此对疾病的发生有重要意义。突变发生的频率与国外报道相同，因此是人类不同类型肿瘤的一个基本致变因素。

转染P^(53)基因对胶质瘤细胞株SHG44裸鼠致癌性的作用研究

探讨转染野生型P^(53)（wt一P^(53)）和突变型P^(53)（mtP^(53)）基因，对人胶质瘤细胞株SHG44裸鼠致瘤性的影响及意义。方法：采用质脂体介导法，分别将wt一P^(53)和mt一P^(53)基因导入人胶质瘤细胞株SHG44，体内外检测转导细胞的生长状况和裸鼠致瘤性。结果：转染mt一P^(53)基因的细胞株，G418筛选细胞集落数、软琼脂平皿细胞集落数以及裸鼠瘤组织重量和体积，均显著高于对照组（P＜0．01）；而转染Wt一P^(53)基因的细胞株均显著低于对照组（P＜0．01），表明导入wt一P^(53)基因的细胞株，瘤细胞生长速度明显低于对照细胞株和导入。mt一P53基因的细胞株，即导入mt一P^(53)基因的细胞株瘤细胞生长速度最快，而导入Wt-P^(53)基因的细胞株瘤细胞生长速度最慢。结论：Wt一P^(53)基因能有效地抑制人胶质瘤细胞生长；mt一P^(53)基因则可以明显地促进瘤细胞生长。

西南地区原发性肝癌抗癌基因P^(53)点突变的研究

本文采用PCR－RFLP技术对西南地区原发性肝细胞癌P53基因第248和249位密码子点突变进行了研究。约17．4％的肝癌存在第249位密码子点突变。没有发现248位密码突变。本研究结果提示癌基因P53点突变在该地区肝癌发病中起有一定作用；西南地区肝癌的发生可能有AFB1的参与。

应用聚合酶链反应—单链构象多态技术检测大肠癌P^(53)基因的研究

为探讨Ｐ５３基因突变在大肠癌发生过程中的分子机制，应用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）技术对３０例大肠腺癌组织中Ｐ５３基因外显子５、６、７和８分别进行检测。结果发现１６例（５３３３％）大肠癌组织出现了反映Ｐ５３基因突变的异常条带。高、中、低分化腺癌中Ｐ５３基因突变率分别为３３３３％、５０％和７０％。提示Ｐ５３基因突变与大肠癌的发生和发展有关。ＰＣＲ－ＳＳＣＰ能在ＤＮＡ片段的不同部位检测ＤＮＡ多态性和点突变，且灵敏、快速。

p^(53)与C-erbB_2、C-ras、C-myc在卵巢粒层细胞瘤中的过度表达及其临床意义

目的：了解ｐ５３及Ｃ－ｅｒｂＢ２、Ｃ－ｒａｓ、Ｃ－ｍｙｃ在卵巢粒层细胞瘤中的表达及与此瘤发生、发展的关系。方法：采用单克隆抗体免疫组化技术，对２５份卵巢粒层细胞瘤组织进行ｐ５３、Ｃ－ｅｒｂＢ２、Ｃ－ｒａｓ及Ｃ－ｍｙｃ表达的检测，分析基因表达与临床－病理指标及患者预后的关系。结果：２５例卵巢粒层细胞瘤中ｐ５３、Ｃ－ｅｒｂＢ２、Ｃ－ｒａｓ、Ｃ－ｍｙｃ的过度表达率分别为５６％、５６％、４８％、４８％。Ⅲ～Ⅳ期ｐ５３的过度表达高于Ⅰ～Ⅱ期；有残余瘤者较无残余瘤者显著增高。Ⅲ～Ⅳ期的Ｃ－ｅｒｂＢ２过度表达率显著高于Ⅰ～Ⅱ期者。高分化组的Ｃ－ｒａｓ基因过度表达率显著高于低分化组。未发现Ｃ－ｍｙｃ的表达与临床－病理各指标有关。两种及两种以上基因同时表达者显著高于单基因表达者。ｐ５３与Ｃ－ｅｒｂＢ２及Ｃ－ｍｙｃ过度表达间呈正相关。临床分期及Ｃ－ｅｒｂＢ２的过度表达是独立影响患者预后的因素。结论：ｐ５３及Ｃ－ｅｒｂＢ２、Ｃ－ｒａｓ、Ｃ－ｍｙｃ的表达对卵巢粒层细胞瘤的发生、发展及患者预后有一定的影响。

槲皮素对心肌肥厚大鼠心肌P^(53)mRNA表达的影响

大鼠腹主动脉部分狭窄 5周后 ,形成实验性心肌肥厚模型 ,心肌和左心室重量明显增加 ,运用逆转录多聚酶链反应方法结合图像分析技术检测到模型组大鼠心肌 P5 3 m RNA的表达减少。给槲皮素 75 mg/ kg和 15 0 mg/ kg后均能明显降低心肌和左心室重量 ,增加大鼠心肌 P5 3 m RNA的表达。提示槲皮素抗心肌肥厚作用与增加大鼠心肌 P5 3 m RNA的表达有关。

逆转录病毒介导野生型P^53与反义mdm2融合基因对Mc3细胞凋亡的影响

目的探讨P^53与反义mdm2 cDNA序列真核表达载体诱导人黏液表皮样癌高转移细胞株Mc3细胞凋亡的影响。方法将P^53与反义mdm2 cDNA序列真核表达载体通过脂质体转染Mc3细胞，采用形态学观察凋亡细胞；琼脂糖凝胶电泳检测“梯状条带”；末端转移酶标记法（TUNEL）检测凋亡指数；透射电镜检测凋亡小体。结果转染48h后形态学观察到细胞体积缩小；核浓染碎裂成大小不等的碎片；核染色质成新月形，琼脂糖凝胶电泳可见180～200bp典型的凋亡带，TUNEL检测凋亡指数为25．22±1．01（转染后），与对照组2．01±1．10（转染前）比较差异有统计学意义（P〈0．05），转染空载体（2．02±1．11）与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05），透射电镜可见染色质浓集分布不均，形成由核膜包裹断裂的核碎片的凋亡小体。结论P^53与反义mdm2基因融合体真核表达载体能诱导和促使体外培养的人黏液表皮样癌高转移细胞株Mc3细胞发生凋亡。

P^(53)基因PCR-SSCP银染检查痰标本诊断肺癌初步探索(英文)

目的 :为了解痰标本检测肺癌患者 P53 基因突变的可行性及其对临床诊断的意义。材料与方法 :采用改良 Saccomanno法浓缩及保存痰标本 ,部分涂片找癌细胞 ,其余标本进行痰细胞 DNA提取及多聚酶链反应 ( PCR) -单链构象多态性分析 ( SSCP) ,共检测 2 2例病人 ,其中确诊肺癌病人 1 5例 (涂片或活检找到癌细胞 )、临床高度怀疑肺癌病人 5例 (涂片或活检均阴性 )、2例非肿瘤病人 ( 1例为结节病 ,另 1为左中叶肺炎 ) ,同时采用正常肺组织标本作对照。结果 :P53 外显子 6,7,8的 PCR-SSCP银染阳性率在肺癌组及癌疑组分别为 6/ 1 5 (40 % )和 2 / 5 (40 % )。非肿瘤患者痰标本及正常肺组织均未发现 P53基因异常。结论 :改良 Saccomanno法不仅能贮存、浓缩痰细胞 ,而且方便痰标本 DNA提取 ;PCR-SSCP银染方法可用来检测肺癌患者痰细胞的 P53基因突变。

白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞p^(53)基因表达的影响

目的研究白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞p53基因表达的影响,以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法用不同浓度的白花蛇舌草含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞p53基因表达的影响。结果经白花蛇舌草含药血清作用的PG细胞p53基因表达水平明显上调。结论白花蛇舌草抗肿瘤作用机制可能与p53基因表达增多有关。