益肾调督针法对脑缺血再灌注模型大鼠大脑海马神经元凋亡及JNK、p-JNK表达的影响

目的:研究益肾调督针法对脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经元凋亡的影响。方法:SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组和益肾调督针法组,每组10只。除假手术组外,其余各组均应用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型。益肾调督针法组予针刺百会、风府、大椎、命门及双侧肾俞和太溪穴,于缺血再灌注24 h后针刺1次。应用Zea-Longa评分法评估各组大鼠神经功能,应用HE染色观察大鼠海马神经细胞病理形态学变化,应用TTC染色法观察大鼠脑组织梗死情况,TUNEL法检测海马神经细胞的凋亡情况,免疫荧光技术检测JNK、p-JNK的表达情况。结果:与假手术组比较,模型组的神经行为学评分显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01),大鼠海马神经细胞排列散乱,核固缩、深染,脑组织相对梗死体积百分比增大,差异具有统计学意义(P<0.05),凋亡神经元数量、JNK及p-JNK阳性表达均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,益肾调督针法组大鼠的神经行为学评分显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01),海马神经细胞形态改善,脑组织相对梗死体积百分比明显缩小,差异具有统计学意义(P<0.05),凋亡神经细胞数目、JNK及p-JNK阳性表达明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:益肾调督针法能有效改善缺血再灌注大鼠神经功能缺损情况,下调海马区JNK和p-JNK的表达,减少神经细胞凋亡,这可能是其防治脑缺血再灌注损伤的机制。

p-JNK JNK和PPARγ在食管癌变过程中的表达及其意义

目的:探讨p-JNK/JNK和PPARγ蛋白在食管癌变过程中的表达及其意义。方法:采用免疫组织化学方法,研究食管正常鳞状上皮(15例)、食管鳞状上皮内瘤变(85例)和食管鳞状细胞癌(60例)组织中p-JNK/JNK和PPARγ蛋白的表达情况。结果:JNK在食管正常鳞状上皮、食管鳞状上皮内瘤变和食管鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为20.0%、37.6%和55.0%,而p-JNK的阳性表达率分别为33.3%、55.3%和73.3%,JNK和p-JNK在食管鳞状细胞癌中的阳性表达率均明显高于食管正常鳞状上皮和食管鳞状上皮内瘤变(P<0.05)。高级别食管鳞状上皮内瘤变中JNK、p-JNK的阳性表达率显著高于食管正常鳞状上皮和低级别食管鳞状上皮内瘤变(P<0.05)。PPARγ在食管正常鳞状上皮、食管鳞状上皮内瘤变和食管鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为73.3%、45.9%和45.0%,食管鳞状上皮内瘤变和食管鳞状细胞癌中PPARγ的阳性表达率明显低于食管正常鳞状上皮(P<0.05)。食管鳞状细胞癌中JNK、p-JNK和PPARγ的表达与肿瘤分化程度相关,JNK、p-JNK和PPARγ的表达均随肿瘤病理分级的增高而降低(P<0.05)。JNK、p-JNK和PPARγ的表达与临床病理特征不相关(P>0.05)。结论:在食管癌变过程中,JNK、p-JNK的表达呈增高趋势而PPARγ的表达呈下降的趋势。但食管鳞状细胞癌中JNK/p-JNK和PPARγ的表达均随肿瘤分化程度降低而降低。提示JNK、p-JNK和PPARγ在食管鳞状上皮癌变和进展过程中发挥不同作用,其机制比较复杂。

慢性坐骨神经结扎神经痛大鼠脊髓背角和背根神经节p-JNK表达及意义

目的:观察磷酸化应激激活蛋白激酶(p-JNK)在神经病理性疼痛大鼠脊髓背角和背根神经节表达的变化,探讨慢性神经痛的发生机制。方法:采用坐骨神经慢性结扎损伤(CCI)模型,18只SD大鼠随机分为3组(n=6)。对照组(Con组):不接受任何手术操作;假手术组(sham组):只分离坐骨神经;CCI组:结扎坐骨神经。于术前2d和术后1、3、5、7、10、14d测定机械痛阈(MWT)和热痛阈(TWL),术后3、7、14d取大鼠术侧L4、L5脊髓背角和背根节,免疫组化法分析脊髓背角和背根节p-JNK动态变化。结果:CCI组较Con组术后各时点TWL和MWL明显降低(P<0.05)。CCI组较Con组各时点脊髓背角和背根神经节p-JNK表达明显增加(P<0.01)。结论:初级感觉神经元中p-JNK表达可能是神经损伤的因素之一。

慈姑消脂丸对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织中p-JNK/p-c-Jun信号通路表达的影响

目的:探讨慈姑消脂丸对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝脏p-JNK/p-c-Jun信号通路表达的影响。方法:60只SPF级雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、JNK抑制组及慈姑消脂丸高、中、低剂量组,每组10只。使用高脂饲料饲喂大鼠建立NASH模型,于造模同时给予药物干预。实验结束处死全部实验动物,取动物肝脏。HE染色光学显微镜下观察肝脏的组织形态学特点;透射电子显微镜观察肝细胞的超微结构;免疫组织化学法检测肝组织p-JNK、p-c-Jun、Fas-L、Fas、Caspase-8蛋白的表达。结果:肝组织病理学检查显示模型组大鼠肝组织呈中重度脂肪变性并同时伴有炎症细胞浸润,p-JNK、p-c-Jun、Fas、Fas-L、Caspase-8蛋白表达较正常对照组显著升高(P<0.01)。各给药组大鼠肝小叶内空泡样变、脂肪样变显著减少,炎性细胞浸润得到改善;与模型组比较,慈姑消脂丸高、中剂量组p-JNK、p-c-Jun、Fas、Fas-L、Caspase-8蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:慈姑消脂丸可通过调节p-JNK、p-c-Jun、Fas、Fas-L、Caspase-8蛋白表达抑制肝细胞凋亡,对NASH起治疗作用。

大鼠局灶性脑缺血再灌注后p-JNK、Bcl-2的表达及米诺环素的保护作用

目的研究米诺环素对局灶性脑缺血再灌注后脑组织中c-Jun氨基末端激酶p-JNK,Bcl-2表达的影响,探讨米诺环素对缺血再灌注后神经元的作用及可能机制。方法参照Zea Longa线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞模型(MCAO),72只雄性Wistar大鼠被随机分成假手术组、缺血再灌组(IR组)和MC干预组。每组大鼠再随机分成4组:分别在再灌注后6 h、12 h、24 h、48 h处死。HE染色观察脑组织形态病理学变化,免疫组化法检测大鼠脑缺血再灌注不同时间p-JNK、Bcl-2蛋白表达的水平。结果①HE染色发现米诺环素干预组在再灌注各个时间点的梗死灶与缺血组比较均减小,呈点状分布并且神经元损伤也明显减轻。②缺血再灌注时缺血侧皮层可见p-JNK阳性表达,于缺血再灌注后6 h开始出现并随着时间的延长p-JNK表达逐渐升高,持续增高至再灌注48 h(P<0.01);MC干预组的p-JNK阳性表达在各时间点均明显减(P<0.01)。③与假手术组比较Bcl-2表达在缺血再灌注组明显升高,并随再灌注时间不同,其阳性表达率亦不同,于缺血1 h再灌注12 h时阳性表达达高峰(P<0.01),随灌注时间延长表达逐渐减少;MC干预组Bcl-2阳性表达在各时间点明显增加(P<0.01)。结论p-JNK和Bcl-2参与大鼠脑缺血再灌注时缺血性细胞损伤(包括细胞凋亡)的发生;米诺环素可能通过抑制p-JNK,上调Bcl-2的表达,减轻缺血再灌注对大鼠大脑皮层神经细胞的损伤。

低氧预适应对自体原位肝移植大鼠p-JNK蛋白表达的影响

目的:探讨低氧预适应(HP)对大鼠自体肝移植后p-JNK蛋白表达的影响及其保护作用。方法:采用改良的自体肝移植模型,将SD大鼠随机分为正常对照(NC)组、自体肝移植(AT)组和+AT(HP)组,每组32只。HP组术前用8%氮氧混合气体处理90min。分别于术后1、2、12和24h处死各组大鼠,每个时相点处死8只,取肝脏标本,抽血检测肝功能,免疫组织化学方法测定大鼠肝组织磷酸化的JNK(p-JNK)蛋白、细胞色素C的表达,并在透射电子显微镜下观察各组肝细胞形态学改变。结果:HP组血清ALT和AST水平显著低于AT组,差异有统计学意义(P<0.05);HP组各时相点的肝功能明显优于AT组;HP组各时相点p-JNK蛋白、细胞色素C的表达明显低于AT组,差异有统计学意义(P<0.05)。透射电子显微镜下AT组肝细胞出现典型的凋亡征象,而HP组肝细胞无明显凋亡形态。结论:HP对移植所导致的肝细胞凋亡有明显的抑制作用;其机制可能是通过抑制JNK信号通路的持续激活,下调p-JNK蛋白的表达、抑制线粒体细胞色素C的释放而发挥其保护作用。

普瑞巴林对CCI模型大鼠背根神经节p-JNK1表达的影响

目的观察不同剂量普瑞巴林对慢性坐骨神经压迫损伤所致神经病理性疼痛大鼠痛行为及背根神经节p-JNK表达的影响。方法雌性SD大鼠60只,随机分为5组,每组12只:假手术组(S组)、CCI组(C组)和不同剂量普瑞巴林P1组、P2组、P3组。S组仅分离坐骨神经不结扎,C组和P1、P2、P3组建立CCI模型,P1、P2、P3组于术后第1天开始至取材时点分别胃内灌注普瑞巴林7mg/kg、15mg/kg、30mg/kg,S组和C组灌相同体积生理盐水。各组大鼠分别于术前1d,术后1、3、7、15天测定热痛阈PWL值,且在术后第3、7、15天测定热痛阈后每组随机取4只大鼠术侧背根神经节,免疫组化法测定背根神经节p-JNK的表达。结果与术前1d比较,C组、P1组术后1、3、7、15dPWL值和p-JNK的表达有显著统计学差异(P<0.05)。与C组比较,P1、P2、P3组PWL值和p-JNK在术后3、7、15d的表达有显著性差异(P<0.05)。与P1组比较,P2、P3组术后1、3、7、15dPWL值和p-JNK的表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同剂量普瑞巴林对CCI模型大鼠致神经病理性疼痛有镇痛作用且呈剂量依赖性,其机制可能与抑制p-JNK的活化有关。

氧化苦参碱对青霉素致痫大鼠学习记忆及海马p-JNK表达的影响

目的观察氧化苦参碱(Oxymatrine,OXY)对青霉素(Penicillin,PEN)致痫大鼠学习记忆和海马神经元p-JNK表达的影响。方法成年SD大鼠24只随机分为生理盐水对照组(Normal saline,NS)、癫痫模型组(Epilepsy,EP)、OXY组和JNK抑制剂组(SP600125,SP),腹腔注射青霉素诱导大鼠癫痫发作,观察大鼠行为学改变,Morris水迷宫检测大鼠空间学习和记忆,免疫组化测定海马组织内p-JNK阳性细胞数。结果与EP组对比,OXY组大鼠逃避潜伏期和穿越平台次数明显减少(P<0.05);海马组织内p-JNK阳性细胞数明显降低(P<0.05)。结论 OXY可能通过抑制JNK信号通路的活化发挥对癫痫大鼠在空间学习和记忆方面的保护作用。

小鼠脑缺血-再灌注损伤中神经细胞BCL2及p-JNK2的表达

目的探讨小鼠脑缺血-再灌注中BCL2蛋白和JNK2蛋白的表达。方法 6周龄C57小鼠20只,随机分为对照组(n=10)和脑缺血再灌注组(n=10),采用动脉夹反复夹闭双侧的颈总动脉的方法建立脑缺血-再灌注模型。免疫组织化学方法检测BCL2和JNK2蛋白的定位,Western blot检测BCL2、JNK2和p-JNK2(磷酸化JNK2)蛋白的表达情况。结果免疫组织化学可见,BCL2和JNK2蛋白在大脑皮质处表达,定位于细胞核及细胞质。与对照组比较,BCL2蛋白在脑缺血再灌注组阳性表达降低,JNK2和p-JNK2蛋白阳性表达增多(P<0.05)。Western blot检测也发现,脑缺血再灌注组BCL2蛋白的表达较对照组降低,JNK2和pJNK2蛋白的表达增加(P<0.05)。结论小鼠脑缺血-再灌注后,通过BCL2/JNK2信号通路致使大脑皮质细胞凋亡。

壮骨镇痛胶囊对乳腺癌细胞迁移运动信号通路关键蛋白P-JNK和Rac-1表达的影响

目的:研究壮骨镇痛胶囊对高转移人乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移及其运动信号通路关键蛋白p-JNK和Rac-1表达水平的影响。方法:采用划痕法测定高(5.0%)、中(1.25%)、低(0.63%)不同浓度壮骨镇痛胶囊含药血浆对MDA-MB-231细胞迁移的影响,采用免疫细胞化学法检测不同浓度壮骨镇痛胶囊对MDA-MB-231细胞p-JNK和Rac-1蛋白表达水平的影响。结果:高、中浓度壮骨镇痛胶囊含药血浆显著抑制了乳腺癌MDA-MB-231细胞的迁移和p-JNK、Rac-1蛋白表达,低浓度血浆对细胞迁移和p-JNK、Rac-1蛋白表达无显著影响。结论:壮骨镇痛胶囊可通过改变运动信号通路关键蛋白p-JNK和Rac-1的表达来抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的迁移,且该作用与浓度密切相关。

P-JNK在A_(2A)R敲除新生小鼠HIBD细胞凋亡中的表达研究

目的:探讨腺苷A2A受体(A2AR)敲除的新生小鼠在缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后海马CA1区磷酸化c-jun氨基末端激酶(P-JNK)激活的动态变化及其与神经细胞凋亡的关系。方法:参照经典Rice-Vannucci法建立7日龄新生小鼠HIBD模型。A2AR敲除(KO)小鼠及同窝野生型(WT)小鼠80只,设假手术(S)组,模型组(M)分1 d,3 d,7d,共8小组。采用三种发育反射(翻正反射、趋地反射和悬崖逃避反射)对小鼠进行短期神经功能评定,苏木精-伊红(HE)染色、尼氏染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色法观察敲除A2AR对新生小鼠HIBD后神经细胞凋亡的影响,免疫组化检测P-JNK阳性细胞的表达。结果:敲除A2AR加重HIBD模型小鼠神经功能缺损、脑组织病理学损伤,增加神经细胞凋亡;HIBD后缺血侧海马CA1区P-JNK阳性细胞的表达迅速增加,与S组比较均有显著差异(P<0.01),模型组于1 d达高峰,且在相应的时间点(1 d,3 d,7 d)KO组P-JNK阳性细胞的表达显著高于WT组(P<0.01,P<0.05,P>0.05);直线相关分析表明新生小鼠HIBD后神经细胞凋亡与P-JNK阳性细胞的表达呈显著正相关(r=0.837,P<0.01)。结论:敲除A2AR增加新生小鼠HIBD神经细胞的凋亡及加重脑损害的过程,其作用机制可能与早期P-JNK的持续激活有关。

高血压伴高同型半胱氨酸大鼠血管平滑肌细胞IRE1α和p-JNK表达对血管重构的影响及依叶片干预机制

目的研究高血压伴高同型半胱氨酸血症(hyperhomocysteinemia,HHcy)大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)时,激活相关因子IRE1α和p-JNK的表达与高血压血管重构的关系及依那普利叶酸片(依叶片)对其干预效果。方法 60只成年雄性SD大鼠行腹主动脉缩窄术(PAAC),术后2周选收缩压(SBP)>140 mm Hg(1 mm Hg=0.133 k Pa)大鼠36只随机分为对照组、模型组和依叶组,n=12。对照组和模型组分别给予普通饲料和25 g/L蛋氨酸饲料喂养,依叶组用25g/L蛋氨酸饲料喂养并依叶片[10 mg/(kg·d)]灌胃。于术后2周、术后6周、术后10周测尾动脉SBP和血清同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy),术后10周HE染色观察胸主动脉形态变化,Image Pro Plus 6.0图像分析软件观察胸主动脉中层厚度变化,免疫组化和Western blot检测血管平滑肌细胞IRE1α和p-JNK的表达。结果术后10周,模型组大鼠尾动脉SBP、血清Hcy值、胸主动脉中层厚度、血管平滑肌细胞IRE1α和p-JNK表达均高于对照组(P<0.05);依叶组大鼠尾动脉SBP、血清Hcy值、胸主动脉中层厚度、血管平滑肌细胞IRE1α和p-JNK表达均低于模型组(P<0.05)。结论高血压伴HHcy大鼠血管平滑肌细胞ERS因子IRE1α和p-JNK被激活,以促凋亡因子p-JNK的表达占优势;依那普利叶酸片具有降低血压和血清Hcy的双重效果,减轻血管平滑肌细胞ERS,恢复内质网稳态,逆转血管重构。

芪桂益脉灵对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠P-JNK表达影响

目的:观察芪桂益脉灵对心脏缺血再灌注损伤中JNK和P-JNK的影响,探讨其对急性心肌缺血再灌注损伤保护的作用机制。方法:取SD大鼠50只,随机分为5组,空白对照组(10只)灌服生理盐水后不做任何处理,假手术组(10只)灌服生理盐水后,开胸暴露左冠状动脉,穿线但不作结扎,其余30只大鼠分别分成单纯缺血再灌注组、芪桂益脉灵低剂量组和芪桂益脉灵高剂量组,分别给生理盐水、芪桂益脉灵(大、小剂量,即1.2 g/kg和0.6 g/kg),连续灌服7 d,并且结扎冠状动脉左前降支造成急性心肌梗死模型,造模成功后,取其心脏组织用中性福尔马林固定。实验结束后采用HE染色观察心肌组织形态结构;免疫组化法检测心肌组织JNK、P-JNK的蛋白表达水平。结果:芪桂益脉灵组JNK蛋白表达水平与空白组、假手术组和单纯缺血再灌注组比较无显著性差异(P>0.05);单纯缺血再灌注组与空白组和假手术组相比,P-JNK表达显著升高(P<0.05),有统计学意义;芪桂益脉灵组P-JNK表达与单纯缺血再灌注组对比明显降低(P<0.05),其中高剂量组降低更加明显(P<0.05)。结论:芪桂益脉灵能够抑制JNK通路,降低P-JNK蛋白表达水平,减轻炎症因子的产生,减少心肌细胞的凋亡,对急性心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。

乳腺癌中p-JNK蛋白的表达及其临床意义

目的研究磷酸化应激活化蛋白激酶(p-JNK)在乳腺癌癌变过程中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测118例乳腺石蜡包埋组织中p-JNK蛋白的表达情况,采用Western blot检测30例乳腺浸润性导管癌及癌旁乳腺组织中p-JNK的表达情况。结果免疫组化结果显示,在乳腺癌癌变过程中p-JNK蛋白表达阳性率呈递减趋势;乳腺浸润性导管癌中p-JNK蛋白与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移无相关性,与组织学分级和临床分期相关(P=0.015,P=0.012)。Western blot结果显示,乳腺浸润性导管癌中p-JNK蛋白的表达明显低于癌旁正常组织(P=0.014)。结论p-JNK蛋白在乳腺癌癌变过程中发挥重要的作用。

益气润目汤对干眼小鼠眼表组织IL-1β及P-JNK表达的影响

目的观察益气润目汤对高渗盐水诱导的干眼模型小鼠眼表组织中促炎因子白细胞介素-1β(IL-1β)、磷酸化氨基末端蛋白激酶(P-JNK)的影响。方法将雌性BALB/c小鼠随机分为6组:空白对照组、模型组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、西药组,每组10只,除空白对照组,剩余小鼠均采用高渗盐水点眼诱导干眼动物模型,中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组分别灌胃给予含生药0.754 g·ml^(-1)、0.377 g·ml^(-1)、0.188g·ml^(-1)的中药益气润目汤,西药组给予玻璃酸钠滴眼液持续点眼,治疗7 d、14 d后检测每组角结膜组织中IL-1β、P-JNK的变化。结果免疫组化结果显示,中药各剂量组治疗7 d、14 d后,角结膜上皮IL-1β、P-JNK阳性表达(免疫组化)明显低于模型组(P<0.05);反转录聚合酶链反应(RT-PCR)结果显示,各中药组角结膜中IL-1β mRNA的表达水平亦较同期模型组明显减少(P<0.05)。结论益气润目汤能明显减少炎症相关因子的分泌,抑制炎症,减少眼表损伤,稳定泪膜。

p-JNK/p-c-Jun通路参与大鼠杏仁核点燃癫痫模型

目的:研究杏仁核点燃癫痫模型中c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路的活化。方法:雄性Wistar大鼠20只,随机分为对照组10只和模型组10只。将电极植入大鼠右侧杏仁核,对照组不给予电刺激,模型组每天给予500μA的电流刺激,大鼠连续10 d在刺激后达到5级发作视为点燃成功。成功点燃的大鼠,在最后1次5级发作后2 h处死。Western blot检测2组海马JNK、p-JNK、c-Jun、p-c-Jun的表达。结果:模型组刺激侧海马p-JNK、p-c-Jun表达明显高于对照组(P<0.05)。结论:p-JNK/p-c-Jun通路可能参与杏仁核癫痫模型点燃。

雷公藤红素下调p-p38、p-JNK、NF-κB减轻脑梗死后的炎症反应

目的探讨脑缺血后磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、核因子-κB(NF-κB)的表达变化,观察雷公藤红素的脑保护作用及机制。方法用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉永久性脑梗死(pMCAO)模型。实验分为3组:溶剂对照组,假手术组和雷公藤红素组(3mg·kg^(-1)腹腔注射)。采用RT-qPCR和Western blot观察p-p38、p-JNK、NF-κB基因和蛋白表达变化,比较各组的患侧脑水肿、脑梗死体积和神经功能评分。结果与溶剂对照组相比,雷公藤红素组脑水肿明显低于溶剂对照组(P<0.05);梗死体积明显小于溶剂对照组(P<0.05);神经功能评分明显小于溶剂对照组(P<0.05);p-p38、p-JNK、NF-κB的表达明显低于溶剂对照组(P<0.05)。结论雷公藤红素对脑梗死大鼠具有脑保护作用,雷公藤红素通过调节p-p38,p-JNK和NF-κB的表达可能是其脑保护作用机制之一。

BiP、CHOP和p-JNK在多囊卵巢综合征患者血白细胞中的表达

目的:探讨内质网应激(ERS)标志性蛋白中免疫球蛋白结合蛋白(BiP)、C/EBP同源蛋白(CHOP)及磷酸化-氨基末端激酶(p-JNK)在多囊卵巢综合征(PCOS)患者血白细胞中的表达。方法:选择PCOS不孕就诊的患者44例(PCOS组)和因男方因素或输卵管因素不孕就诊的患者50例(对照组)为研究对象。PCOS组根据胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)分为胰岛素抵抗组(22例)与非胰岛素抵抗组(22例)。应用RT-PCR和Western Blotting方法检测患者血白细胞中BiP、CHOP、JNK、磷酸化-氨基末端激酶(p-JNK)的表达水平。结果:PCOS组BiP mRNA水平(1.67±1.02)及蛋白水平(0.76±0.12)均明显高于对照组(分别为1.04±0.54、0.65±0.09),差异有统计学意义(P<0.05)。PCOS组CHOP mRNA水平(0.79±0.49)及蛋白水平(0.75±0.30)均较对照组(分别为0.63±0.47、0.71±0.25)有增高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。PCOS组JNK蛋白水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。PCOS组p-JNK蛋白水平(0.87±0.17)明显高于对照组(0.71±0.09),差异有统计学意义(P<0.05)。PCOS患者中胰岛素抵抗组和非胰岛素抵抗组的BiP、CHOP mRNA水平及蛋白水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:PCOS患者血白细胞中ERS标志性蛋白BiP、p-JNK的表达异常,提示ERS可能通过活化JNK信号通路参与PCOS的发病。

加巴喷丁对糖尿病性神经痛大鼠机械痛敏和背根神经节神经元JNK及p-JNK表达的影响

目的观察加巴喷丁(GBP)对糖尿病性神经痛(PDN)大鼠皮肤机械痛敏以及背根神经节(DRG)神经元c-Jun氨基末端蛋白激酶(JNK)以及磷酸化JNK(p-JNK)表达的影响。方法制作链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠模型,成模后6周,测定机械痛阈,出现疼痛行为(痛觉过敏)为PDN大鼠,纳入实验对象,并随机分为PDN组和GBP组。GBP组给予GBP干预,按100mg/kg,1次/日,连续14天,腹腔注射给药,同时PDN组腹腔注射等量生理盐水。实验期间各组大鼠均隔天测定机械痛阈一次并做记录,实验结束后采用免疫荧光标记方法观察各组大鼠L5-DRG,L6-DRG和S1-DRG神经元JNK和p-JNK的表达变化。结果实验观察期内PDN组大鼠皮肤机械痛觉阈值呈现进行性下降,GBP组痛觉阈值稳中有升,但不能恢复至正常水平,和PDN组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。L5-DRG,L6-DRG和S1-DRG内JNK和p-JNK标记阳性神经元大多为中小型细胞,阳性标记主要位于胞质内,分别呈深红色和深绿色,PDN组JNK和p-JNK标记阳性神经元的数量明显多于GBP组,二者比较差异有显著意义(P<0.05)。结论加巴喷丁具有减轻糖尿病性神经痛大鼠皮肤机械痛敏的作用,其机制可能通过抑制初级感觉神经元JNK和p-JNK的表达有关,本研究亦提示阻断或抑制JNK/SAPK通路活化可以起到缓解糖尿病性神经痛作用。

乳腺癌中P-JNK与beclin 1的表达及临床意义

目的分析人乳腺组织中P-JNK和beclin 1的表达变化,探讨二者在乳腺癌鉴别诊断及治疗中的临床作用。方法应用免疫组化SP法检测20例乳腺正常上皮、30例乳腺导管原位癌和70例乳腺浸润性导管癌中P-JNK和beclin 1蛋白的阳性率,Western blot检测乳腺浸润性导管癌及正常乳腺组织中P-JNK和beclin 1蛋白的表达量。结果 1在正常乳腺组织、乳腺导管原位癌和乳腺浸润性导管癌中P-JNK阳性率分别为80%、43.3%和18.6%,beclin 1阳性率为85%、46.7%和24.1%。2乳腺癌中二者阳性率与组织学分级相关(P<0.05),与患者临床分期、淋巴结转移、ER和PR阳性率无关(P均>0.05)。370例乳腺癌组织中,P-JNK和beclin 1表达呈正相关性(P<0.01)。4Western blot结果表明,P-JNK和beclin 1蛋白在乳腺癌组织中蛋白表达量低于二者在乳腺正常组织中的蛋白表达量(P<0.05)。结论在乳腺癌中P-JNK和beclin 1均低表达,P-JNK和beclin 1具有正相关性,二者可能在乳腺癌发生、发展过程中受到抑制,因此推断联合检测P-JNK和beclin对于乳腺良、恶性病变的鉴别以及对乳腺癌的治疗、评价预后有重要参考价值。