柴术理胃饮对肝郁脾虚型功能性消化不良大鼠胃肠动力及p-NF-κBp65通路的影响

目的探讨柴术理胃饮对肝郁脾虚型功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)大鼠胃肠动力及p-NF-κBp65通路的影响。方法60只SD大鼠按随机数字表法分为正常组(n=10)和模型储备组(n=50),模型储备组采用复合因素刺激法复制肝郁脾虚型FD模型,模型复制成功后将50只大鼠按随机数字表法分成模型组、中药高、中、低剂量组和多潘立酮组,每组各10只。各组分别给予相应的药物灌胃后,观察大鼠的一般状态;计算大鼠进食量、体质量、胃排空率和小肠推进率;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法测定大鼠胃窦组织白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;Western blot法检测和实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)方法检测大鼠胃窦组织中p-NF-κBp65蛋白表达及p-NF-κBp65 mRNA表达情况;HE染色观察胃窦组织形态。结果与正常组比较,模型组大鼠进食量、体质量、胃排空率和小肠推进率均减低,胃窦组织IL-6、TNF-α水平、p-NF-κBp65蛋白表达及p-NF-κBp65 mRNA表达均升高(P<0.05);与模型组比较,中药高、中、低剂量组和多潘立酮组大鼠进食量、体质量、胃排空率和小肠推进率均提高,胃窦组织IL-6、TNF-α水平、p-NF-κBp65蛋白表达及p-NF-κBp65 mRNA表达均降低(P<0.05);中药高剂量组IL-6、TNF-α水平低于多潘立酮组(P<0.05);中药高、中剂量组p-NF-κBp65蛋白表达低于多潘立酮组(P<0.05)。结论柴术理胃饮治疗肝郁脾虚型FD的机制可能与降低大鼠胃窦组织IL-6、TNF-α水平、p-NF-κBp65蛋白表达及p-NF-κBp65 mRNA表达,改善胃肠运动功能有关。

运动训练对2型糖尿病大鼠肾脏NF-κB-p65和相关蛋白表达的影响及机制研究

目的:研究运动训练对2型糖尿病大鼠肾脏NF-κB-p65及相关蛋白表达的影响,以探讨运动改善2型糖尿病大鼠肾损伤的可能作用机制。方法:SD大鼠通过高脂饲料喂养6周和低剂量腹腔注射STZ的方法复制2型糖尿病大鼠实验模型。实验分为正常对照组(A),糖尿病安静组(B)和糖尿病运动组(C)。C组进行6周的有氧游泳训练,其余两组不施加干预。实验结束后,测试随机血糖、24 h UAE、T-SOD、MDA、NF-κB-p65、Activated Caspase-3和Nephrin蛋白表达,并进行电镜观察肾脏显微结构的改变。结果:1)电镜下,运动干预的C组大鼠可见滤过膜3层结构较清晰,基底膜未见明显增加,足突稍肿大、足细胞融合等症状较B组大鼠均有所改善。2)运动干预后,C组大鼠的血糖浓度、24h UAE排泄量均降低,与B组比较,均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。3)运动干预后,C组大鼠肾皮质T-SOD活性上升而MDA含量下降,与B组比较,亦有明显差异(P<0.05或P<0.01)。4)运动干预后,C组大鼠肾皮质NF-κB-p65和Activated Caspase-3蛋白表达均明显降低,而Nephrin蛋白表达明显增加,与B组比较,差异均呈显著性(P<0.05或P<0.01)。结论:运动能降低2型糖尿病大鼠血糖,减轻肾脏病理损伤,并提高肾功能,其机制可能与运动的下调氧化应激介导的2型糖尿病大鼠肾脏核转录因子NF-κB-p65的表达,以改善效应蛋白Activated Caspase-3异常表达和恢复足细胞特异标志物-Nephrin蛋白的表达,而改善大鼠肾脏损伤的保护作用有关。

有氧运动加螺旋藻补充对2型糖尿病大鼠肾脏TLR4/NF-κB-p65的表达及炎性因子的影响

本文旨在研究有氧运动加螺旋藻补充对2型糖尿病大鼠肾脏TLR4/NF-κB-p65的表达及炎性因子的影响,以TLR4/NF-κB-p65炎症信号通路为靶点探讨运动加螺旋藻补充改善2型糖尿病大鼠肾脏损伤的可能机制。采用4周高脂饲料喂养和低剂量STZ腹腔注射的方法建立2型糖尿病大鼠实验模型,成模后将大鼠随机分为糖尿病安静对照组(DM)、糖尿病运动组(DE)、糖尿病+螺旋藻组(DS)、糖尿病运动+螺旋藻组(DES),另设正常安静对照组(NC)。运动方式采用8周的无负重游泳训练。实验末,测随机血糖、微量白蛋白、肾脏测TNF-α、TLR4和NF-κB-p65蛋白表达,并采用光镜观察肾脏微细结构的改变。结果表明:(1)光镜下可见DE组、DS组和DES组大鼠肾小球毛细血管袢面积增加;肾小管扩张、上皮细胞空洞变性、细胞聚集增加和炎症细胞稍浸润等病理变化均较DM组有所改善。(2)DE组、DS组和DES组大鼠的血糖浓度、尿微量白蛋白含量均较DM组降低(P<0.05或P<0.01);与DES组比较,DE组和DS组的血糖浓度、尿微量白蛋白含量均升高明显(P<0.05或P<0.01)。(3)DE组、DS组和DES组大鼠肾脏TNF-α、TLR4和NF-κB-p65蛋白表达均明显降低,与DM组比较,差异均呈显著性(P<0.01);与DES组比较,DE组和DS组的肾脏TNF-α、TLR4和NF-κB-p65蛋白表达明显增加(P<0.05或P<0.01)。因此,有氧运动、螺旋藻及两者联合使用有降低2型糖尿病大鼠血糖,改善肾功能,减轻肾脏损害的功效,但两者联合使用效果要好于单独使用,其机制可能与有氧运动联合螺旋藻降低TLR4/NF-κB-p65信号蛋白表达发挥抗炎作用的效果要好于单纯的有氧运动或螺旋藻使用。

针康法对糖尿病缺血性脑卒中大鼠外周血清NF-κB-p65、TNF-α表达的影响

目的:通过建立糖尿病缺血性脑卒中大鼠模型,探讨针康法对大鼠外周血清NF-κB-p65、TNF-α表达的影响。方法:将192只大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、针刺组、康复组、针康组。采用高脂高糖饲料结合STZ注射及改良线栓法建立糖尿病缺血性脑卒中模型。观察不同的治疗方法对外周血清NF-κB-p65、TNF-α表达的影响。结果:与针康组比较,术后7天针刺组、康复组NF-κB-p65含量下降低于针康组(P<0.01,P<0.05);术后14天、21天针刺组含量下降低于针康组(P<0.05)。与针康组比较,术后7天TNF-α针刺组、康复组含量明显下降(P<0.05);术后14天针刺组含量下降明显低于针康组(P<0.05)。结论:针康法能够降低糖尿病脑卒中大鼠血清炎性因子的表达,进而改善缺血性脑卒中后神经功能缺损及胰岛素抵抗。

三氧化二砷联合维生素C对多发性骨髓瘤患者MMP-13、NF-κB-p65、C/EBPα表达及预后的影响

目的探讨三氧化二砷联合维生素C对多发性骨髓瘤患者基质金属蛋白酶(MMP)-13、核因子(NF)-κB-p65、CCAAT增强子结合蛋白(C/EBP)α表达及预后的影响。方法选择多发性骨髓瘤患者102例,依据随机表法随机分为观察组51例与对照组51例。对照组采用常规化疗方案,观察组采用三氧化二砷联合维生素C治疗。两组疗程均为12 w。比较两组治疗效果,治疗前后血浆MMP-13水平、NF-κB-p65蛋白阳性表达和C/EBPαmRNA表达及预后情况。结果观察组总有效率(86.27%)明显高于对照组(66.67%,P<0.05)。两组治疗后血浆MMP-13水平较治疗前均明显降低(观察组:t=18.270,对照组:t=10.805,均P<0.05);观察组治疗后血浆MMP-13水平明显低于对照组(t=10.549,P<0.05)。两组治疗后NF-κB-p65蛋白表达阳性率较治疗前均明显降低(观察组:χ2=28.990,对照组:χ2=11.492,均P<0.05);观察组治疗后NF-κB-p65蛋白表达阳性率明显低于对照组(χ2=5.830,P<0.05)。两组治疗后C/EBPαmRNA表达较治疗前均明显升高(观察组:t=24.277,对照组:t=8.913,均P<0.05);观察组治疗后C/EBPαmRNA表达明显高于对照组(t=8.570,P<0.05)。观察组PFS和OS均明显长于对照组(均P<0.05)。结论三氧化二砷联合维生素C对多发性骨髓瘤患者疗效良好,可下调MMP-13和NF-κB-p65蛋白表达,上调C/EBPα蛋白表达,且预后良好。

大黄牡丹汤对炎症相关性结直肠癌的治疗作用及对TLR4/My D88/NF-κB-p65信号通路的影响

目的:探讨大黄牡丹汤(DHMD)对炎症相关性结直肠癌(CAC)的治疗作用,以及对TLR4/MyD88/NF-κB-p65通路的影响。方法:构建小鼠CAC模型,给予DHMD处理,对小鼠一般状况进行观察和评估;ELISA检测小鼠IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α表达,Western blot和免疫组化染色法检测小鼠结直肠组织TLR4、MyD88和NF-κB-p65表达。结果:与模型组相比,DHMD干预后,小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低,而IL-10水平升高,且小鼠结直肠中TLR4、MyD88、NF-κB-p65表达降低。结论:DHMD可改善炎症反应、减轻CAC症状,抑制结肠癌发生,且对TLR4/MyD88/NF-κB-p65信号通路激活具有调节作用。

青藤碱对PKC-α/NF-κB-p65通路的抑制作用及机制

目的:探讨过表达蛋白激酶C-α(protein kinase C-α,PKC-α)对HEK-293T细胞中核因子-κB-p65(nuclear factor-κB-p65,NF-κB-p65)磷酸化水平的影响,并检查青藤碱(sinomenine,SIN)对PKC-α/NF-κB-p65信号通路的抑制作用。方法:采用PCR技术扩增大鼠PKC-α基因蛋白质编码区(complete sequence coding,CDS)序列,将其插入到pIRES2-EGFP空载质粒中,构建野生型(wide type,WT)PKC-α过表达质粒(pIRES2-PKC-α-WT,PKC-α^(WT));在PKC-αWT质粒的基础上,将PKC-α第25位丙氨酸(A)与368位赖氨酸(K)分别突变为谷氨酸(E)和精氨酸(R),即构建持续活化(constitutively active,CA)突变型PKC-α过表达质粒(pIRES2-PKC-α-A25E,PKC-α^(CA))和显性负性(dominant negative,DN)突变型PKC-α过表达质粒(pIRES2-PKC-α-K368R,PKC-α^(DN))。本课题组前期构建的大鼠野生型NF-κB-p65过表达质粒(pIRES2-NF-κB-p65,p65^(WT))分别与上述各PKC-α过表达质粒共同转染HEK-293T细胞,免疫印迹法检测PKC-α、NF-κB-p65的表达及磷酸化水平。再将上述不同质粒转染HEK-293T细胞,46 h后予50 ng/mL SIN处理细胞2 h,再行免疫印迹实验分析SIN对PKC-α、NF-κB-p65磷酸化的影响。结果:菌液PCR及测序证实,上述PKC-α过表达质粒构建成功。在HEK-293T中过表达PKC-αWT或PKC-αCA可促进NF-κB-p65的磷酸化,且过表达PKC-αCA时尤为显著,而过表达PKC-αDN后NF-κB-p65的磷酸化无明显变化。SIN处理可抑制PKC-α^(WT)、PKC-α^(CA)和PKC-α^(DN)转染组HEK-293T细胞中PKC-α的磷酸化,同时也能抑制过表达PKC-α^(WT)上调的NF-κB-p65磷酸化修饰,但不影响过表达PKC-αCA和PKC-αDN对NF-κB-p65的磷酸化作用。结论:过表达PKC-α可促进HEK-293T细胞中NF-κB-p65的磷酸化,SIN处理HEK-293T细胞后可通过抑制PKC-α的磷酸化下调NF-κB-p65的磷酸化修饰。

NF-κB-p65、ICAM-1和细胞凋亡在力竭性运动诱发延迟性心肌损伤中的作用

目的:观察反复力竭性游泳运动后,不同时相大鼠心肌组织中核转录因子-κB(NF-κB)-p65、细胞间黏附因子-1(ICAM-1)和细胞凋亡的动态变化,以评价在运动延迟性心肌损伤中的作用。方法:采用反复力竭性游泳运动建立延迟性心肌损伤大鼠模型。将无训练的80只Wistar雄性大鼠随机分为安静对照组和反复力竭性运动后即刻组、3 h组、6 h组、12 h组、24 h组、48 h组和96 h组。每组10只大鼠(n=10)。分别于末次运动后即刻、3、6、12、24、48 h和96 h快速取出心脏,应用免疫组化染色法和DNA原位末端标记(TUNEL)法检测大鼠心肌组织中NF-κB-p65和ICAM-1表达的水平和细胞凋亡的动态变化。结果:与安静对照组比较,反复力竭性运动后不同时相大鼠心肌细胞中NF-κB-p65和ICAM-1蛋白的表达及细胞凋亡指数均显著增加(分别为P<0.05和P<0.01),其中心肌细胞中NF-κB-p65的表达和细胞凋亡于运动后48 h达高峰,ICAM-1蛋白的表达于运动后即刻达高峰,运动后96 h有所减轻。结论:反复力竭性运动可以造成早期心肌缺血缺氧损伤,刺激心肌细胞中NF-κB-p65和ICAM-1表达的水平的升高,促进炎症反应,并诱导心肌细胞凋亡,进一步加重运动后早期心肌损伤,诱发延迟性心肌损伤。

吴茱萸碱通过NF-κB-p65信号通路抑制人结肠癌细胞SW480的迁移和侵袭

目的探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对人结肠癌细胞SW480迁移与侵袭的影响,并初步探究其潜在的分子机制。方法以CCK-8法测定不同浓度(0、0.375、0.75、1.5、3、6、12μmol/L)的EVO对SW480细胞处理不同时间(24、48、72 h)的增殖抑制作用;以划痕实验检测EVO对SW480细胞迁移的影响;Transwell实验检测EVO对SW480细胞侵袭的影响;Western blot检测IκBα、p-IκBα、NF-κB-p65、p-NF-κB-p65、MMP-9、MMP-2、MMP-13等蛋白的表达水平;免疫荧光实验检测EVO作用于SW480细胞后p-NF-κB-p65和MMP-9的蛋白表达情况;NF-κB-p65的激活剂LPS预处理SW480细胞后,Western blot检测EVO对IκBα、p-IκBα、NF-κB-p65、p-NF-κB-p65、MMP-9、MMP-2等蛋白表达的影响。结果 EVO呈时间及浓度依赖性抑制SW480细胞的增殖;经EVO作用后,SW480细胞的迁移能力下降(P<0.01),侵袭能力下降,呈浓度依赖性(P<0.01);EVO可以抑制NF-κB-p65信号通路(P<0.05);EVO对NF-κB-p65的抑制作用能被LPS削弱(P<0.05)。结论 EVO能抑制SW480细胞的迁移和侵袭,其机制可能是通过抑制IκBα的磷酸化,进而抑制NF-κB-p65的磷酸化,最终抑制下游基因MMP-9的表达。

桃红四物汤对大鼠肢体缺血-再灌注损伤骨骼肌长链非编码RNA H19、核因子κB-p65表达的影响

目的:观察桃红四物汤对大鼠肢体缺血-再灌注损伤骨骼肌长链非编码RNA H19(LncRNA H19)、核因子κB-p65(NF-κB-p65)表达的影响。方法:选取2月龄雄性SD大鼠78只,随机分成空白组、模型组、桃红四物汤组、LncRNA H19阻滞剂组,其中空白组6只,其余每组24只。除空白组外,其他各组均阻断血流复制左后肢缺血-再灌注损伤模型,桃红四物汤组在造模前予以桃红四物汤灌胃,LncRNA H19阻滞剂组予以LncRNA H19阻断剂尾静脉注射预处理。HE染色法观察复灌后4 h腓肠肌形态及病理性改变,DAPI法观察复灌后4 h各组腓肠肌细胞凋亡变化。RT-qPCR检测复灌后(0、2、4、8 h)腓肠肌LncRNA H19、NF-κB-p65 mRNA表达,Western blot法检测0、2、4、8 h腓肠肌NF-κB-p65表达。结果:HE染色结果显示,桃红四物汤组和LncRNA H19阻断剂组肌纤维破坏及炎症浸润程度较模型组减轻。DAPI荧光染色结果显示,桃红四物汤组、LncRNA H19阻断剂组细胞凋亡率低于模型组;桃红四物汤组细胞凋亡率明显低于LncRNA H19阻断剂组,差异有统计学意义(均P<0.05)。RT-qPCR和Western blot法检测结果显示,与同一时间点空白组比较,模型组、桃红四物汤组、LncRNA H19阻断剂组LncRNA H19、NF-κB-p65表达上调,差异有统计学意义(均P<0.05)。与同一时间点模型组比较,桃红四物汤组、LncRNA H19阻断剂组、NF-κB-p65表达下调,差异有统计学意义(均P<0.05),并且不同时间点显示相同倾向性。结论:桃红四物汤可降低肢体缺血-再灌注损伤骨骼肌中LncRNA H19-NF-κB信号通路表达,减少骨骼肌细胞凋亡,减轻肢体缺血-再灌注损伤。LncRNA H19可能是大鼠肢体缺血-再灌注骨骼肌损伤病理机制中的关键上游分子。NF-κB-p65蛋白可能是大鼠肢体缺血-再灌注骨骼肌损伤病理机制中的关键蛋白。

MMP-13、IL-17、NF-κB-p65在多发性骨髓瘤患者血清中的表达及其临床应用价值

目的探讨基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、白细胞介素-17(IL-17)、核转录因子kppa B-p65(NF-κB-p65)在多发性骨髓瘤(MM)患者血清中的表达及其临床应用价值。方法选取2018年10月至2019年9月期间我院收治住院的86例MM患者作为研究对象,依据MM患者入院后的X线检查有无MM骨病,将患者划分为有MM骨病的MM骨病组(58例)和无MM骨病的MM组(28例);另选取于我院行健康体检正常的人群40例作为对照组,对MM患者及对照组的临床资料及血清MMP-13、IL-17、NF-κB-p65水平进行分析,探讨血清中MMP-13、IL-17、NF-κB-p65水平在MM及相关骨病临床诊断中的意义。结果MM骨病组和MM组血清MMP-13、IL-17、NF-κB-p65水平明显高于对照组,且MM骨病组以上三指标的血清表达水平均高于MM组(P均<0.001);单因素分析结果显示,MM骨病组与MM组在年龄、CRP水平、血清MMP-13、血清IL-17和血清NF-κB-p65水平方面存在明显差异(P<0.05);多因素回归分析结果显示,血清MMP-13≥7.5 pg/mL、血清IL-17≥30 pg/mL和血清NF-κB-p65≥2100 pg/mL是MM患者发生骨病的独立预测因素;ROC曲线分析结果显示,血清MMP-13、IL-17、NF-κB-p65水平联合预测MM骨病的AUC值明显高于三者单独诊断时的AUC值(P<0.05);经治疗后,依据MM患者治疗疗效划分为有效组(45例)和无效组(41例),发现有效组血清MMP-13、IL-17、NF-κB-p65水平均明显低于无效组(P<0.05)。结论血清MMP-13、IL-17、NF-κB-p65水平在MM及相关骨病患者血清中呈较高表达,血清三项指标联合检测对于临床上预测与诊断MM骨病具有较好的应用价值,且可能用于MM临床疗效的评估。

摄涕止鼽颗粒对变应性鼻炎患者IL-5和NF-κB p-p65的影响

目的：观察摄涕止鼽颗粒对肺肾气虚型AR患者血清IL-5和鼻腔黏膜NF-κB p-p65表达的影响,揭示摄涕止鼽颗粒治疗AR的作用机制。方法：选择肺肾气虚型AR患者为研究对象,分为试验组和安慰剂组,试验组予摄涕止鼽颗粒治疗,安慰剂组予安慰剂治疗。ELISA检测治疗前后血清IL-5水平,免疫组化、Western Blot检测鼻腔黏膜NF-κB p-p65的表达。结果：试验组治疗后血清IL-5水平及鼻腔黏膜NF-κB p-p65水平比试验组治疗前低,试验组治疗后血清IL-5水平及鼻腔黏膜NF-κB p-p65水平比安慰剂组治疗后低。结论：摄涕止鼽颗粒能降低鼻腔黏膜NF-κB p65蛋白的磷酸化水平,抑制Th2细胞因子IL-5的表达,纠正AR患者Th1/Th2细胞因子网络的失衡状态。

PKGIα通路抑制剂DT-3对胃癌细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨PKGIα信号通路特异性抑制剂DT-3对胃癌细胞增殖和迁移的影响。方法:利用生物信息学分析,基于GEO、TCGA、HPA、Kaplan-Meier plotter数据库和GEPIA在线分析网站对PKGI在组织中的表达进行差异分析并探讨PKGI和PKGIα在胃癌患者中的预后情况。采用CCK-8、克隆形成实验检测DT-3对细胞增殖的影响,划痕愈合实验观察DT-3对细胞迁移的影响;Western blot-ting法验证PKGIα的蛋白表达和相关性分析。结果:胃腺癌组织中PKGI mRNA表达增高,在42种胃癌细胞株里有27种能检测到PKGI mRNA的表达,高表达PKGIαmRNA的胃癌组织更具肿瘤侵袭性;免疫组织化学(IHC)结果展示PKGI蛋白表达情况,12例胃癌组织中观察到6例存在中、高强度的细胞质染色阳性反应;PKGI和CDH1的表达呈负相关(r=-0.74,P<0.05);生存分析显示PKGI和PKGIαmRNA高表达对胃腺癌患者的总生存期(OS)有统计学意义(HR>1,logrank P<0.05)。实验结果表明PKGIα蛋白在人胃癌细胞株AGS中的表达增加;DT-3抑制细胞增殖迁移(P<0.05),使NF-κB磷酸化p65表达降低,且PKGI和NF-κB p-p65的表达呈极强正相关(r=0.957,P<0.05)。结论:通过抑制PKGIα信号通路,可以有效抑制胃癌细胞增殖迁移。

磷酸化ERK1/2对MPTP帕金森病模型小鼠黑质NF-κB p65表达的影响

目的研究磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致帕金森病(PD)小鼠模型黑质NF-κB p65的表达调控作用。方法应用MPTP建立PD小鼠模型,观察小鼠行为学变化;采用免疫组织化学和免疫蛋白印迹法观察小鼠黑质抗酪氨酸羟化酶(TH)、NF-κB p65及p-ERK1/2的表达变化;并观察给予ERK特异性抑制剂U0126后对上述变化的影响。结果模型组小鼠于MPTP第3次注射后1h,黑质区p-ERK1/2阳性细胞数多于NF-κB p65阳性细胞,第5次注射后24h,NF-κB阳性细胞增多,p-ERK1/2阳性细胞减少,同时伴有TH阳性神经元丢失;给予ERK特异性抑制剂U0126后,上述变化明显减轻。结论在MPTP所致PD小鼠模型中ERK1/2信号通路可能通过调控NF-κB p65活化从而导致多巴胺能神经元变性丢失。

E2F-1、NF-κB/P65、P-gp在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及意义

目的研究E2F-1、NF-κB/P65和P-gp在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的表达及意义。方法应用免疫组织化学SP法检测E2F-1、NF-κB/P65和P-gp在61例DLBCL和15例反应性增生淋巴结中的表达,分析E2F-1、NF-κB/P65、P-gp表达与DLBCL临床病理特征和预后的关系。结果①61例DLBCL中,E2F-1表达的阳性率为42.6%,明显低于反应性增生的淋巴结(P<0.05);NF-κB/P65和P-gp表达的阳性率分别为52.5%和54.1%,均高于淋巴结反应性增生(P<0.05)。②61例DLBCL中,E2F-1的表达与NF-κB/P65和P-gp的表达呈负相关,NF-κB/P65和P-gp的表达呈正相关。③在DLBCL中,E2F-1的表达与患者的性别、年龄、Ann Arbor分期、IPI评分、LDH值及B症状均无关(P>0.05);NF-κB/P65的表达与患者的Ann Arbor分期及IPI评分有关(P<0.05),与患者的性别、年龄、LDH值及B症状无关(P>0.05);P-gp的表达与患者的IPI评分有关(P<0.05),而与患者的性别、年龄、Ann Arbor分期、LDH值及B症状无关(P>0.05)。④E2F-1阳性表达者5年生存率明显高于E2F-1阴性表达者,差异有统计学意义(P=0.03);NF-κB/P65阳性表达者5年生存率明显低于NF-κB/P65阴性表达者,差异有统计学意义(P=0.01);P-gp阳性表达者5年生存率虽然低于P-gp阴性表达者,但差异无统计学意义(P=0.12)。结论①部分DLBCL患者存在原发性多药耐药。②在DLBCL中,E2F-1、NF-κB/P65和P-gp之间存在相关性,提示三者在弥漫性大B细胞淋巴瘤中可能存在一定的相互作用,共同参与了肿瘤耐药。③E2F-1低表达和NF-κB/P65高表达是DLBCL预后不良的指标。

心痛泰对动脉硬化兔主动脉NF-κBp65、TNF-α、IL-10的影响

目的:观察心痛泰对动脉粥样硬化(AS)兔的血脂及主动脉组织NF-κB-p65、TNF-α和IL-10的影响。方法:120只清洁级日本大耳白兔随机分为6组,空白组、模型组、心痛泰高剂量、中剂量及低剂量组、瑞舒伐他汀钙组,采用高脂喂养加免疫损伤造模,造模同时予以相应药物灌胃。60 d后,采血测定血脂,取胸主动脉用免疫组化法测定TNF-α、IL-10,用Rt-PCR法测定NF-κB-p65的m RNA表达,Western Blot法测定NF-κB-p65的蛋白表达。结果:心痛泰各组和瑞舒伐他汀钙组降低血脂的差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,心痛泰中、高剂量组和瑞氟伐他汀钙组动脉组织中的NF-κB-p65、TNF-α、IL-10的变化的差异有统计学意义(P<0.01)。结论:心痛泰能减轻AS炎症反应,作用机制可能是通过降低血脂、减少NF-κB-p65和TNF-α的表达,提高抗炎因子IL-10,从而减轻血管炎症,达到治疗AS的目的。

清肺通络敷胸膏对流感病毒肺炎大鼠肺组织ERK/NF-κB p65蛋白表达的影响

目的探讨清肺通络膏对流感病毒诱导的肺炎大鼠肺组织中ERK/NF-κB p65信号通路的调控机制。方法将30只Wister大鼠随机分为正常组、模型组、清肺通络敷胸膏组,每组10只。除正常组外,采用鼻腔接种流感病FM1株诱导Wister幼龄大鼠肺炎,在感染后各治疗组采用清肺通络膏贴敷于大鼠背部肺脏投影区治疗。观察各组大鼠的一般状态(饮食量、进水量、毛发、活动量、精神状态、呼吸频率);光镜下观察肺组织形态学;采用免疫组织化学法检测各组大鼠肺组织磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK),核转录因子(NF-κB p65)的表达水平。结果与正常组相比,模型组大鼠肺组织中p-ERK,NF-κB p65蛋白表达显著增高,差异有统计学意义(P<0.05),清肺通络膏组p-ERK、NF-κB p65蛋白的表达较模型组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论清肺通络膏通过抑制ERK磷酸化,使NF-κB p65表达降低,从而减轻了肺组织的病理损伤,达到治疗目的。

Expression of SODD and P65 in ALL of Children and Its Relationship with Chemotherapeutic Drugs

The expression of silience of death domains (SODD) and its clinical significance and relationship with phospho-NF-κB-p65 proteins in bone marrow cells of childhood acute lymphoblas- tic leukaemia (ALL) were explored, and the expression of SODD and phospho-NF-κB-p65 in Jurkat cells treated with chemotherapeutic drugs was detected in order to find a new chemotherapeutic target. The expression of SODD and phospho-NF-κB-p65 proteins in bone marrow cells was detected by immunohistochemistry in 25 children with ALL. The apoptosis rate was measured by An- nexin-V-Fluorescence/PI double-labeling flow cytometry and the expression of SODD and phos- pho-NF-κB-p65 proteins determined by Western blotting in the Jurkat cells. It was found that the ex- pression of SODD and active P65 in ALL was significantly higher than that in normal control group (P<0.05). The expression of the SODD and phospho-NF-κB-p65 proteins in the high-risk (HR) group was significantly higher than that in the standard-risk (SR) group (P<0.05). The Pearson rank correla- tion analysis revealed that there was a positive correlation between SODD and phospho-NF-κB-p65 expression (P<0.01, r=0.69). VCR could effectively induce the apoptosis of Jurkat cells, and down-regulate the expression of SODD and phospho-NF-κB-p65 proteins in a time-dependent man- ner, but DNR could not down-regulate the expression of SODD effectively. It was concluded that SODD may be closely related to the clinical classification and prognosis of ALL in children. The ex- pression of SODD and phospho-NF-κB-p65 had a definite synergistic relationship with the onset and development of ALL. VCR could down-regulate the expression of SODD and inhibit the NF-κB ac- tivation, which could recover the sensibility of apoptosis in leukemic cells.

栀子柏皮汤及含栀子配伍组对免疫性肝损伤小鼠的保护作用

目的探讨栀子柏皮汤各及含栀子配伍组对刀豆蛋白(ConA)诱导免疫性损伤小鼠的保护作用及可能作用机制。方法观察栀子柏皮汤及各含栀子配伍组对尾静脉注射刀豆蛋白(ConA,20 mg·kg^(-1))诱发的免疫性肝损伤小鼠肝脏病理变化及血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性、肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响。酶联免疫吸附实验(ELISA)测定血清中干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-6(IL-6)的水平。Western blot法检测与免疫炎症相关的NF-κB-p65的蛋白表达情况。结果栀子柏皮汤及各含栀子配伍组均能够降低血清ALT、AST及肝组织中MDA的含量;提高肝组织中SOD活性;降低NF-κB-p65及NF-κB-p-p65的表达,其中栀子柏皮汤全方组对免疫性肝损伤小鼠保护作用最佳。结论栀子柏皮汤对ConA诱导的免疫性肝损伤小鼠具有保护作用,其作用机制可能与调控免疫反应的NF-κB通路有关。

淫羊藿苷对自发性高血压大鼠肾损伤的改善作用及机制研究

目的:观察淫羊藿苷(ICA)对自发性高血压大鼠(SHR)肾组织病理损伤的影响,并基于核因子κB(NF-κB)信号通路研究其作用机制。方法:将21只SHR随机均分为模型组和ICA低、高剂量组(20、40 mg/kg,记为ICA-L、ICA-H组),另取7只同源京都大鼠(WKY)为对照组。各组大鼠ig给药,每日2次,连用11周;对照组和模型组大鼠ig等体积双蒸水。观察各组大鼠肾组织病理学变化;蛋白质印迹法检测肾组织磷酸化NF-κB-p65(p-NF-κB-p65)、NF-κB抑制蛋白(IκB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白的表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠肾结构出现紊乱,肾小球囊腔狭窄且不规则;IκB蛋白的表达明显下调,p-NF-κB-p65、TNF-α蛋白的表达均明显上调(P<0.01)。与模型组比较,ICA-L、ICA-H组大鼠肾组织上述病理变化有所改善;ICA-L、ICA-H组IκB蛋白的表达均明显上调(P<0.05或P<0.01),ICA-H组大鼠p-NF-κB-p65、TNF-α蛋白的表达均明显下调(P<0.01),ICA-L组大鼠p-NF-κB-p65蛋白表达明显下调(P<0.05),而ICA-L组大鼠TNF-α蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ICA具有改善SHR肾病理性损伤的作用,其机制可能与抑制NF-κB信号通路相关。