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COX-2、p-Stat3及p-Stat5在食管癌组织中的表达及其意义 被引量:26
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作者 刘俊茹 王原 +3 位作者 左连富 李凤林 王莹 刘嘉琳 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第5期458-462,共5页
背景与目的:研究表明,环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)及信号转导和转录活化因子(signal transducers and activators of transcription,STAT)的活化均与肿瘤的发生、发展密切相关。本研究旨在检测COX-2、p-Stat3及p-Stat5在不同食... 背景与目的:研究表明,环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)及信号转导和转录活化因子(signal transducers and activators of transcription,STAT)的活化均与肿瘤的发生、发展密切相关。本研究旨在检测COX-2、p-Stat3及p-Stat5在不同食管病变组织中的表达,并探讨三者在食管癌组织中表达的意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测59例食管鳞状细胞癌、24例鳞状上皮非典型增生及18例正常鳞状上皮中COX-2、p-Stat3及p-Stat5的表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果:COX-2在食管正常鳞状上皮、非典型增生和鳞状细胞癌的免疫组化染色平均积分分别为0.83±0.46、1.85±1.24和2.10±1.77,鳞状细胞癌与非典型增生组织的COX-2表达高于正常鳞状上皮,差异有统计学意义(P<0.05);在正常鳞状上皮、非典型增生及鳞状细胞癌中,p-Stat3的平均积分分别为0、0.76±0.59、2.83±1.27,p-Stat5分别为1.98±0.78、3.92±0.41、5.02±0.34,三种组织间两两比较,p-Stat3和p-Stat5表达的差异均有统计学意义(P<0.05)。食管鳞癌中淋巴结转移者及分化较低者COX-2表达低(P<0.05),且不同浸润深度的组织中p-Stat3表达的差异有统计学意义(P<0.05)。不同临床病理特征的组织中p-Stat5表达的差异无统计学意义(P>0.05)。COX-2、p-Stat3及p-Stat5三者的表达之间呈正相关。结论:COX-2可能在食管癌变早期具有重要作用,COX-2高表达可能是食管癌变过程中的早期事件。Stat3的磷酸化与食管癌的进展相关。 展开更多
关键词 食管肿瘤 COX-2 p-stat3 p-stat5 免疫组织化学
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骨髓增殖性肿瘤患者外周血细胞中JAK2V617F突变和p-STAT5蛋白表达及其与临床特征的相关性 被引量:7
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作者 陈怡欣 李英 +2 位作者 张凌岩 刘新 单宁宁 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1398-1404,共7页
本研究旨在探讨骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者外周血细胞中JAK2V617F突变和p-STAT5蛋白表达的情况及二者与疾病临床特征之间的相关性,为临床实践及靶向治疗研究提供理论依据。选择山东大学附属省立医院血液科确诊的45名BCR-ABL阴性的MPN患者... 本研究旨在探讨骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者外周血细胞中JAK2V617F突变和p-STAT5蛋白表达的情况及二者与疾病临床特征之间的相关性,为临床实践及靶向治疗研究提供理论依据。选择山东大学附属省立医院血液科确诊的45名BCR-ABL阴性的MPN患者及15例健康成年人为研究对象,提取外周血单个核细胞的DNA及蛋白质,分别采用实时荧光定量聚合酶链反应和免疫蛋白印迹法定量检测研究对象的JAK2V617F突变比例及p-STAT5蛋白表达量,并结合收集的临床病例资料进行相关性分析。结果表明,MPN患者JAK2V617F突变总体阳性率为73.3%(33/45),其中真性红细胞增多症(PV)的JAK2V617F突变阳性率为83.3%(20/24),原发性血小板增多症(ET)的阳性率为68.8%(11/16),特发性骨髓纤维化(IMF)患者的阳性率为40.0%(2/5);PV、ET、IMF患者的JAK2V617F突变比例分别为0.472±0.245,0.216±0.162,0.435±0.239;p-STAT5蛋白表达灰度值分别为1.396±0.758,0.760±0.623,0.792±0.612;JAK2V617F突变负荷与p-STAT5蛋白表达灰度值呈线性相关(P<0.05);在PV患者中,JAK2V617F突变负荷越高,白细胞计数、血红蛋白水平及红细胞压积越高,血小板水平越低;ET患者中JAK2V617F突变负荷越高者,年龄越大,白细胞计数、血红蛋白水平及红细胞压积越高,与血小板水平无明显相关性;IMF患者中JAK2V617F突变负荷越高者白细胞、血小板计数、血红蛋白水平及红细胞压积均较低。JAK2V617F突变阳性者更易发生脾肿大、出血及血栓事件。结论:JAK2V617F突变在BCR-ABL阴性的MPN患者中阳性率较高,突变负荷越高者其下游p-STAT5蛋白的表达量越大,发生脾肿大、血栓事件的几率越高。 展开更多
关键词 骨髓增殖性肿瘤 外周血细胞 JAK2V617F突变 p-stat5蛋白
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COX-2和P-STAT_3、P-STAT_5在肝癌细胞株SMMC-7721中的表达及意义 被引量:3
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作者 赵军艳 郑艳敏 李轩 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2011年第2期144-147,共4页
目的观察COX-2和P-STAT3、P-STAT5在人肝癌细胞株SMMC-7721中的表达及其相互关系,探讨环氧合酶2表达与JAK/STAT信号转导通路之间的关系。方法培养人肝癌SMMC-7721细胞,应用免疫组化法检测COX-2抑制剂塞来昔布处理人肝癌细胞株SMMC-7721... 目的观察COX-2和P-STAT3、P-STAT5在人肝癌细胞株SMMC-7721中的表达及其相互关系,探讨环氧合酶2表达与JAK/STAT信号转导通路之间的关系。方法培养人肝癌SMMC-7721细胞,应用免疫组化法检测COX-2抑制剂塞来昔布处理人肝癌细胞株SMMC-7721前后COX-2、P-STAT3、P-STAT5表达的变化。结果COX-2、P-STAT3、P-STAT5在人肝癌细胞株SMMC-7721均呈高表达,并且COX-2与P-STAT3、P-STAT5的表达呈显著正相关;应用COX-2抑制剂塞来昔布后COX-2、P-STAT3、P-STAT5的表达均显著降低,用药前后相比差异有显著性(P<0.01);但用药后COX-2与P-STAT3、P-STAT5的表达无显著相关性。结论COX-2和JAK/STAT通路有密切联系,抑制COX-2的过度表达可能影响JAK/STAT细胞信号转导通路的活性。 展开更多
关键词 环氧合酶-2 塞来昔布 肝细胞癌 p-stat3 p-stat5
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电针对不同时间段局灶性脑缺血模型大鼠p-STAT5表达的影响
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作者 黄康柏 唐纯志 +2 位作者 钟国新 许能贵 易玮 《广州中医药大学学报》 CAS 2016年第4期515-519,共5页
【目的】观察电针对局灶性脑缺血大鼠缺血灶周围区不同时间段磷酸化信号传导转录活化因子5(p-STAT5)表达的影响,探讨电针治疗脑缺血疾病的可能作用机制。【方法】将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组(电针百会、大椎)、AG490(阻滞... 【目的】观察电针对局灶性脑缺血大鼠缺血灶周围区不同时间段磷酸化信号传导转录活化因子5(p-STAT5)表达的影响,探讨电针治疗脑缺血疾病的可能作用机制。【方法】将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组(电针百会、大椎)、AG490(阻滞剂)组和AG490+电针组,各组又分为术后2 h、l d、3 d、7 d、21 d 5个时段组。采用电凝闭大脑中动脉法复制局灶性脑缺血(MCAO)模型,AG490组及AG490+电针组于术前20 min行右侧脑室注射AG490进行干预。采用免疫荧光及蛋白印迹技术检测病灶侧皮质p-STAT5的表达含量。【结果】各组各时间段的p-STAT5表达在免疫荧光及蛋白印迹检测中具有相似的发展趋势。假手术组在各时间段的检测中均只有少量表达,模型组2 h至7 d时间段p-STAT5表达较假手术组显著升高(均P<0.01);电针组3 d至7 d时间段免疫荧光检测p-STAT5表达较模型组显著升高(P<0.05或P<0.01),在3d时间段蛋白印迹检测p-STAT5表达较模型组显著升高(P<0.01);AG490组和AG490+电针组2 h至3 d时间段免疫荧光检测p-STAT5表达较模型组与电针组均显著降低(P<0.05或P<0.01),7 d时间段p-STAT5表达较电针组显著降低(P<0.01);而在2 h至7 d时间段蛋白印迹检测p-STAT5蛋白表达较模型组与电针组显著降低(P<0.05或P<0.01)。【结论】电针改善缺血性脑损伤的内在机制可能与电针通过激活JAK2从而提高脑缺血病灶区p-STAT5的表达水平有关。 展开更多
关键词 脑缺血/针刺疗法 p-stat5 AG490 脑皮质/病理学 蛋白表达 疾病模型 动物 大鼠
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IL-15诱导CD4^+CD25^- T细胞向CD4^+CD25^+调节性T细胞转化的机制探讨 被引量:4
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作者 徐述雄 傅晓岚 +4 位作者 孙兆林 李晓伟 陈丽萍 刘宏 吴雄飞 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期759-762,共4页
目的初步探讨IL-15诱导CD4+CD25-T细胞向CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)转化的机制。方法采用免疫磁性细胞分离法分离人外周血中的CD4+CD25-T细胞,依据加入细胞因子不同分为4组:对照组、IL-15组、拮抗1组、拮抗2组,其中后3组均于培养的第... 目的初步探讨IL-15诱导CD4+CD25-T细胞向CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)转化的机制。方法采用免疫磁性细胞分离法分离人外周血中的CD4+CD25-T细胞,依据加入细胞因子不同分为4组:对照组、IL-15组、拮抗1组、拮抗2组,其中后3组均于培养的第1天加入IL-15,而拮抗1组和拮抗2组分别于培养第1、3天加入STAT5a封闭性肽。流式细胞仪检测细胞表型变化,3H-TdR掺入法检测IL-15诱导产生的Tregs抑制CD4+CD25-效应T细胞(Teff)增殖的免疫功能,Western blot法检测细胞内p-STAT5的变化。结果与对照组比较,IL-15能诱导CD4+CD25-T细胞中CD25和Foxp3表达上调,IL-15诱导生成的Tregs具有较天然Tregs稍弱的免疫抑制功能。Western blot检测结果显示,IL-15组p-STAT5表达较对照组明显上调。加入STAT5a封闭性肽后,拮抗1组和拮抗2组中CD4+CD25-T细胞中CD25和Foxp3表达下调,但拮抗2组[细胞表型分别为(47.9±6.0)%、(20.7±3.4)%]改变较拮抗1组[细胞表型分别为(30.7±8.5)%、(9.2±2.2)%]改变轻微。结论IL-15能诱导CD4+CD25-T细胞向Tregs转化,其机制可能是上调p-STAT5的表达。 展开更多
关键词 白介素-15 调节性T细胞 T细胞 p-stat5
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JAK2抑制剂AG490对EAE小鼠C57BL/6的Th17/Treg细胞平衡的影响
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作者 董梅 王彬 +3 位作者 辛立建 郭力 檀国军 刘瑞春 《中风与神经疾病杂志》 CAS 北大核心 2015年第8期680-683,共4页
目的探讨AG490对EAE小鼠Th17/Treg平衡的影响及其治疗作用。方法以MOG33-35多肽免疫C57BL/6小鼠建立EAE模型,观察AG490干预前后EAE组、AG490组和对照组小鼠脊髓组织炎性细胞浸润情况及p-STAT5、Foxp3和IL-17免疫组化染色阳性细胞数目。... 目的探讨AG490对EAE小鼠Th17/Treg平衡的影响及其治疗作用。方法以MOG33-35多肽免疫C57BL/6小鼠建立EAE模型,观察AG490干预前后EAE组、AG490组和对照组小鼠脊髓组织炎性细胞浸润情况及p-STAT5、Foxp3和IL-17免疫组化染色阳性细胞数目。结果 AG490组较EAE组小鼠炎症细胞浸润及IL-17阳性细胞数目减少(P<0.05),AG490组小鼠p-STAT5和Foxp3阳性细胞数目较EAE组增多(P<0.05),两组小鼠发病高峰期较发病初期炎症细胞浸润及IL-17阳性细胞数目增多,而p-STAT5和Foxp3阳性细胞数目减少(P<0.05)。结论 (1)AG490通过抑制JAK2-STAT3信号通路抑制炎症反应和免疫应答;(2)JAK2抑制剂可以通过JAK2-STAT3信号通路调节Th17/Treg细胞平衡。 展开更多
关键词 实验性自身免疫性脑脊髓炎 多发性硬化 AG490 IL-17 p-stat5 Foxp3
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不同时间头针对MCAO大鼠脑皮质JAK2/STAT5信号通路的影响 被引量:6
7
作者 梁超 陈邦国 +1 位作者 王静芝 姜涛 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1084-1087,共4页
目的:观察不同时间头针对MCAO大鼠脑皮质JAK2/STAT5信号通路的影响。方法:将100只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组和假手术组各10只,模型组和头针组各40只,采用大脑中动脉线栓法(MCAO)制备模型,电针头穴"顶颞前斜线"、&qu... 目的:观察不同时间头针对MCAO大鼠脑皮质JAK2/STAT5信号通路的影响。方法:将100只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组和假手术组各10只,模型组和头针组各40只,采用大脑中动脉线栓法(MCAO)制备模型,电针头穴"顶颞前斜线"、"顶颞后斜线"进行治疗。HE染色观察脑皮质病理形态,ELISA检测IL-6含量,Western Blotting法检测脑皮质P-JAK2、PSTAT5蛋白含量。结果:HE染色后见神经元和胶质细胞肿胀、缩小、变形,胞浆嗜伊红浓染,胞质疏松,微血管损伤,头针后损伤明显减轻;除IR 24 h外,头针组IL-6含量均多于模型组,特别是IR 48 h差异最明显;IR 12 h和IR 72 h,头针组P-JAK2蛋白含量较模型组明显增多;头针后MCAO大鼠P-STAT5蛋白表达较模型组增加明显。结论:头针能有效减轻脑缺血再灌注大鼠缺血局部脑皮质的早期炎症反应,这可能与其促进JAK2/STAT5信号通路磷酸化有关。 展开更多
关键词 MACO大鼠 头针 IL-6 P-JAK2 p-stat5
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姜黄素衍生物FM17对K562细胞增殖影响及其与P210^kcr/abl激活的信号途径关系
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作者 陈云艳 许建华 《世界肿瘤杂志》 2009年第1期17-20,共4页
目的探讨姜黄素衍生物FM17对体外培养的慢性粒细胞白血病(CML)急变期细胞K562细胞增生的影响,及其P210^kcr/abl激活的信号途径的关系。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测姜黄素衍生物不同时间点和不同的浓度对K562细胞增殖的抑制作用... 目的探讨姜黄素衍生物FM17对体外培养的慢性粒细胞白血病(CML)急变期细胞K562细胞增生的影响,及其P210^kcr/abl激活的信号途径的关系。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测姜黄素衍生物不同时间点和不同的浓度对K562细胞增殖的抑制作用。western blot的方法分析姜黄素衍生物FM17不同浓度、不同时间点对P210b刮ab0激活的信号的影响。结果2~8μg/mL浓度的FM17在12h、24h、36h及48h均可明显抑制K562细胞增殖,并在一定范围内呈时间和剂量依赖性;FM17可抑制P210^kcr/abl蛋白的含量,且可下调P210^kcr/abl激活的下游信号分子PKC和P-Erk。结论姜黄素衍生物FM17较姜黄素有更强的抗增殖能力,对P210^kcr/abl及其激活的信号途径也有较强的抑制作用。 展开更多
关键词 姜黄素衍生物 K562 P210^kcr/abl p-stat5 P-ERK
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姜黄素衍生物FM17对K562细胞增殖影响及其与P210^bcr/ab1激活的信号途径关系
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作者 陈云艳 许建华 《公共卫生与临床医学》 2009年第2期90-93,共4页
目的探讨姜黄素衍生物FM17对体外培养的慢性粒细胞白血病(CML)急变期细胞K562细胞增生的影响,及其-9p210^bcr/ab1激活的信号途径的关系。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测姜黄素衍生物不同时间点和不同的浓度对K562细胞增殖的抑制作... 目的探讨姜黄素衍生物FM17对体外培养的慢性粒细胞白血病(CML)急变期细胞K562细胞增生的影响,及其-9p210^bcr/ab1激活的信号途径的关系。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测姜黄素衍生物不同时间点和不同的浓度对K562细胞增殖的抑制作用。Western blot的方法分析姜黄素衍生物FM17不同浓度、不同时间点对P210b刊曲。激活的信号的影响。结果2-8μg/mL浓度的FM17在12h、24h、36h及48h均可明显抑制K562细胞增殖,并在一定范围内呈时间和剂量依赖性;FM17可抑制P210^bcr/ab1蛋白的含量,且可下调P210^bcr/ab1激活的下游信号分子PKC和p—Erk。结论姜黄素衍生物FM17较姜黄素有更强的抗增殖能力,对P210^bcr/ab1及其激活的信号途径也有较强的抑制作用。 展开更多
关键词 姜黄素衍生物 K562 P210^bcr/ab1 p-stat5 P-ERK
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大黄素对K562/ADM细胞阿霉素耐药的抑制作用 被引量:3
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作者 朱雅琪 严方 +3 位作者 狄斌 严佳 李佳常 李运曼 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期462-468,共7页
探讨大黄素抑制人慢性粒细胞白血病细胞耐阿霉素变异株K562/ADM的药效学及作用机制。以维拉帕米为阳性药,阿霉素为工具药,采用MTT法测定大黄素与阿霉素合用对细胞增殖的抑制作用;使用流式细胞仪考察了大黄素对于阿霉素诱导K562/ADM细胞... 探讨大黄素抑制人慢性粒细胞白血病细胞耐阿霉素变异株K562/ADM的药效学及作用机制。以维拉帕米为阳性药,阿霉素为工具药,采用MTT法测定大黄素与阿霉素合用对细胞增殖的抑制作用;使用流式细胞仪考察了大黄素对于阿霉素诱导K562/ADM细胞周期阻滞和凋亡的促进作用;并采用Western blot法检测了大黄素对P-gp、Bcr-Abl和STAT5蛋白表达的影响;进一步通过P-gp单克隆藻红蛋白键合UIC2抗体结合实验探讨了大黄素是否是P-gp的底物。实验结果显示,大黄素与阿霉素合用可显著抑制K562/ADM的增殖,并呈量效关系;可促进阿霉素诱导的K562/ADM细胞G2/M期周期阻滞和细胞凋亡;不同剂量的大黄素可有效抑制P-gp、Bcr-Abl、STAT5蛋白表达及磷酸化;UIC2抗体结合实验结果则表明大黄素可能不是P-gp的底物。因此,大黄素能够在体外有效抑制K562/ADM阿霉素耐药,其机制可能不是通过底物竞争性抑制作用,而是与大黄素直接降低P-gp、Bcr-Abl及STAT5蛋白表达和磷酸化有关。 展开更多
关键词 大黄素 K562 ADM 耐药抑制 P-gp BCR-ABL STAT5
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磷酸化STAT5、FOXP3在急性白血病患者骨髓中的表达及意义 被引量:1
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作者 张健 廖建军 +2 位作者 吴良银 钱春艳 何凤屏 《实验与检验医学》 CAS 2014年第5期514-516,共3页
目的观察急性白血病患者骨髓中单个核细胞磷酸化STAT5及FOXP3的表达水平及其临床意义。方法采用蛋白磷酸化流式细胞术分别检测45例急性白血病患者(AL)[急性髓系白血病(AML)29例,急性淋巴细胞白血病(ALL)16例]及12名对照组骨髓单个核细... 目的观察急性白血病患者骨髓中单个核细胞磷酸化STAT5及FOXP3的表达水平及其临床意义。方法采用蛋白磷酸化流式细胞术分别检测45例急性白血病患者(AL)[急性髓系白血病(AML)29例,急性淋巴细胞白血病(ALL)16例]及12名对照组骨髓单个核细胞磷酸化STAT5(P-STAT5)及FOXP3阳性细胞的百分率。结果 AL患者组骨髓单个核细胞PSTAT5表达(2.35±0.82)%较对照组(0.58±0.16)%增高,差异具有统计学意义(P<0.05);AL患者组FOXP3(3.98±1.17)%高于对照组(0.96±0.45),差异具有统计学意义(P<0.05);AML组P-STAT5及FOXP3水平(2.51±0.91)%,(3.72±1.12)%和ALL组(2.27±0.78)%,(4.03±1.18)%比较无显著差异(P>0.05)。AL患者P-STAT5及FOXP3表达水平显著正相关(r=0.81,P<0.05)。结论磷酸化STAT5及Foxp3可能共同参与了急性白血病的发生过程,同时检测可以提供有临床意义的实验依据。 展开更多
关键词 急性白血病 磷酸化STAT5 FOXP3 流式细胞术
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探讨蛎昆一号制剂对小鼠骨髓抑制的保护作用及其分子机制 被引量:1
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作者 靳艳玲 刘国彦 +4 位作者 张宇海 洪裕玲 刘磊 李龙 叶兰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1179-1183,共5页
目的 探讨蛎昆一号制剂对小鼠骨髓抑制损伤的保护作用及机制。方法 60只♂BALB/c小鼠,随机分为正常对照组、5-氟尿嘧啶(5-Fu)模型组、阳性对照组(rhG-CSF)、蛎昆一号制剂低、中、高剂量组。除正常组外,其余各组腹腔注射5-Fu 1次,建立骨... 目的 探讨蛎昆一号制剂对小鼠骨髓抑制损伤的保护作用及机制。方法 60只♂BALB/c小鼠,随机分为正常对照组、5-氟尿嘧啶(5-Fu)模型组、阳性对照组(rhG-CSF)、蛎昆一号制剂低、中、高剂量组。除正常组外,其余各组腹腔注射5-Fu 1次,建立骨髓抑制模型,给药7 d后血常规分析,ELISA检测血清TNF-α、IL-2水平,Western blot测定脾脏组织中p-JAK2、p-STAT5磷酸化水平。结果给予蛎昆一号制剂后,小鼠腹泻症状减轻,体质量升高(P<0.05),白细胞、血小板和淋巴细胞均升高(P<0.05);ELISA检测显示,蛎昆一号制剂中、高剂量组血清IL-2含量高于模型组(P<0.05),TNF-α含量低于模型组(P<0.05);Western blot检测显示,与模型组比较,蛎昆一号制剂各剂量组小鼠脾脏组织JAK2、STAT5磷酸化水平上调(P<0.05)。结论蛎昆一号制剂对5-Fu致小鼠骨髓抑制损伤有保护作用,其分子机制可能与蛎昆一号制剂增加JAK2、STAT5磷酸化水平,促进IL-2产生,减少TNF-α分泌有关。 展开更多
关键词 蛎昆一号制剂 骨髓抑制 5-氟尿嘧啶 炎症 p-JAK2 p-stat5
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NP-19 Regulation Mechanisms of Estrogen on the Growth Hormone JAK/STAT Signal Pathway
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作者 ZHANG Xue YAN Ting-ting Zhou Yan-meng 《神经药理学报》 2018年第4期116-117,共2页
Objective:To investigate the neuroprotective effects of estradiol(E2)may be related to the interact with Grow Hormone(GH).Method:The protective effect of GH in different dose level(5,25,125,250,500 ng·mL-1)was ob... Objective:To investigate the neuroprotective effects of estradiol(E2)may be related to the interact with Grow Hormone(GH).Method:The protective effect of GH in different dose level(5,25,125,250,500 ng·mL-1)was observed in primary culture of rat hippocampal neurons for 24 hours through CCK-8 colorimetry.Phosphorylated-STAT5(P-STAT5)and STAT5 protein levels were tested in primary culture of rat hippocampal neurons after 24 h of serum starvation and treated for 60 min with different doses of GH(0.1~20 ng·mL-1),or different time of GH(15~90 min)to observe GH the optimal concentration and action time.SOCS2 protein levels were tested in primary culture of rat hippocampal neurons after 24 h of serum starvation and treated for 60 min with different doses of E2(10-11~10-7 mol·L-1),or different time of E2(15~90 min)to observe E2 the optimal concentration and action time.P-STAT5 and STAT5 protein levels were tested in primary culture of rat hippocampal neurons after 24 h of serum starvation and treated for 60 min with GH(5 ng·mL-1),or E2(10-8 mol·L-1),or E2+GH.In this latter case E2 was added 60 min before GH.SOCS1,SOCS2 and SOCS3 mRNA and protein levels were detected in 24 h serum starved rat hippocampal neurons after 60 min treatment with E2(10-8 mol·L-1).SOCS2 mRNA and protein levels were detected in 24 h serum starved rat hippocampal neurons after 60 min treatment with GH(5 ng·mL-1),or E2(10-8 mol·L-1),or E2+GH.In this latter case E2 was added 60 min before GH.Result:It was testified that GH was nontoxic to rat hippocampal neurons in the range of 5~250 ng·mL-1.However,if GH concentration was over 250 ng·mL-1,the activity of hippocampal neurons began to decrease.STAT5 and P-STAT5 protein levels were response to increasing concentrations of GH(0.1~20 ng·mL-1)in rat hippocampal neurons after 60 min of treatment,which determined optimal concentration and effect time of GH.SOCS2 protein levels were response to increasing concentrations of E2(10-11~10-7 mol·L-1)in rat hippocampal neurons after 60 min of treatment,which determined optimal concentration and effect time of E2.P-STAT5 and STAT5 protein levels were tested in primary culture of rat hippocampal neurons after 60 min GH(5 ng·mL-1)or E2(10-8 mol·L-1)treatment.For the combined treatment with the two hormones,E2 pretreatment(10-8 mol·L-1)60 min before GH induced a significant increase of P-STAT5 and STAT5 compared with GH alone.Treatment for 60 min with E2(10-8 mol·L-1)did not modify neither protein levels nor RNAs of SOCS1 and SOCS3 in rat hippocampal neurons,while E2 significantly reduced SOCS2 protein level without affecting its mRNA level.Neither 60 min treatment with GH(5 ng·mL-1)or E2(10-8 mol·L-1)nor the combined treatment with the two hormones induced any modifi cation of SOCS2 mRNA,whereas E2 pretreatment 60 min before GH was able to induce a signifi cant reduction of SOCS2 protein levels.Conclusion:E2 amplifies intracellular GH signaling by favoring SOCS2 degradation through the proteasome machinery. 展开更多
关键词 ESTRADIOL growth HORMONE STAT5 p-stat5 SOCS2 primary culture
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