紫萍P143品系植物rbcS基因的cDNA克隆与表达

紫萍P14 3品系离体半叶状体在黑暗下培养 4d以后 ,rbcS基因的表达比完整植株显著降低 ;半叶状体在黑暗下培养 10d ,后再转移到长日照条件下培养 。

强配合力抗稻瘟病两系恢复系P143的选育与应用

P143是以扬稻6号为母本与从国际水稻研究所引进的IR69713-127-2-1-3-2R杂交选育而成的两系恢复系。该恢复系株叶形态好,花粉量大,千粒重大,配合力强,生育期适中,含Pi9和Pita 2个抗稻瘟病基因,穗期耐高温能力强。已配组Y两优143等5个杂交组合通过品种审定,并在南方稻区有较大推广面积。

灵芝提取物通过miR-143-3p对Aβ_(25~35)诱导的神经细胞损伤的影响

目的 探讨灵芝提取物对β淀粉样蛋白(Aβ)_(25~35)诱导的神经细胞损伤的影响及其可能的作用机制。方法 采用Aβ_(25~35)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞PC12建立阿尔茨海默病(AD)细胞模型,不同浓度的灵芝提取物处理PC12细胞,anti-miR-NC、anti-miR-143-3p分别转染至PC12细胞后进行Aβ_(25~35)处理24 h,miR-NC、miR-143-3p mimics分别转染至PC12细胞后加入10 mg/L灵芝提取物与Aβ_(25~35)处理24 h;采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;采用试剂盒检测丙二醛(MDA)的水平和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性;采用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-143-3p表达量。结果 Aβ_(25~35)作用条件下,灵芝提取物可明显降低细胞凋亡率、MDA水平、miR-143-3p表达量(P<0.05),明显升高细胞活力和SOD、CAT的活性,且呈剂量依赖性(P<0.05);转染anti-miR-143-3p后Aβ_(25~35)诱导的PC12细胞活力和SOD、CAT活性明显升高,细胞凋亡率及MDA水平明显降低(P<0.05);转染miR-143-3p mimics可明显逆转灵芝提取物对Aβ_(25~35)诱导的PC12细胞增殖、凋亡及氧化应激的作用。结论 灵芝提取物可通过抑制miR-143-3p表达减轻Aβ_(25~35)诱导的PC12细胞损伤。

hsa-circ-002179靶向miR-143-3p调控自噬-凋亡平衡在胃癌5-氟尿嘧啶化疗耐药性中的作用研究

目的探究hsa-circ-002179靶向miR-143-3p调控自噬-凋亡平衡对胃癌的5-氟尿嘧啶(5-Fu)化疗耐药性的影响。方法通过5-Fu处理AGS细胞构建5-Fu耐药细胞模型(AGS/5-Fu),采用CCK8法检测5-Fu对AGS和AGS/5-Fu细胞活性的影响,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中hsa-circ-002179和miR-143-3p的表达;通过流式细胞术和Western blot分别检测细胞凋亡水平与自噬相关蛋白LC3、Beclin-1和p62的表达。同时,通过软件预测hsa-circ-002179与miR-143-3p的结合位点,并采用RIP和双荧光素酶实验验证其结合作用。结果与对照组比较,耐药组的细胞活性[(172.33±9.53)%比(106.00±6.16)%,P<0.01]和自噬水平升高、凋亡率(20.5%比43.8%,P<0.01)降低,hsa-circ-002179表达升高[(4.46±0.34)比(1.05±0.66),P<0.01];转染si-002179后,耐药细胞活性降低[(80.00±2.45)%比(102.67±7.13)%,P<0.05],而凋亡水平升高(31.3%比21.8%,P<0.05)。RIP和双荧光素酶报告实验证实hsa-circ-002179与miR-143-3p直接结合,且与对照组比较,耐药细胞中miR-143-3p的表达降低[(0.38±0.05)比(1.04±0.07),P<0.01]。并且,hsa-circ-002179能够调控miR-143-3p的水平。同时,miR-143-3p抑制剂处理能够升高转染si-002179后的耐药细胞自噬水平。自噬抑制剂处理降低了耐药细胞的自噬水平和细胞活性,升高凋亡水平;在此基础上转染OE-002179则升高自噬水平和细胞活性,降低凋亡水平,进一步转染miR-143-3p模拟物可以逆转以上变化。结论hsa-circ-002179靶向miR-143-3p可能可以调控自噬-凋亡平衡,进而影响胃癌细胞的5-Fu化疗耐药性。

膀胱癌病人血清miR-143-3p、ATG2B水平与临床病理及预后生存的关系

目的探讨miR-143-3p、ATG2B在膀胱癌病人血清中的表达及其与临床病理和病人预后的关系。方法2017年1月~2019年1月在我院进行膀胱癌根治术的病人88例为研究组,本院行健康体检的志愿者80例为对照组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测病人术前、术后4周静脉血miR-143-3p、ATG2B水平;pearson分析二者的相关性。通过受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-143-3p、ATG2B对膀胱癌的预测价值。用Kaplan-Meier法绘制生存曲线;通过多因素Cox回归分析膀胱癌根治术病人预后的影响因素。结果miR-143-3p在膀胱癌病人血清中表达水平较对照组降低(0.68±0.12 vs.0.87±0.26),ATG2B表达水平升高(1.02±0.30 vs.0.61±0.18),差异有统计学意义(P<0.05);病人术后血清中miR-143-3p水平较术前升高(0.77±0.23 vs.0.68±0.12),ATG2B水平较术前降低(0.85±0.26 vs.1.02±0.30),差异有统计学意义(P<0.05);研究组miR-143-3p与ATG2B表达呈负相关(r=-0.454,r=-0.407,P<0.01);miR-143-3p对膀胱癌的诊断AUC为0.846(95%CI:0.783~0.897),敏感度、特异度分别为79.55%、78.75%;ATG2B对膀胱癌诊断AUC为0.883(95%CI:0.824~0.927),敏感度、特异度分别为78.41%、81.25%;二者联合诊断膀胱癌的AUC为0.939(95%CI:0.891~0.970),敏感度、特异度分别为87.50%、88.75%。miR-143-3p低表达组3年生存率(34.88%,15/43)低于高表达组(77.78%,35/45),ATG2B高表达组3年生存率(40.91%,18/44)低于低表达组(72.73%,32/44),差异有统计学意义(Log-rankχ^(2)=18.055,8.658,P=0.000,0.003)。多因素Cox回归分析表明,淋巴结转移、远处转移、肿瘤病理分级、TNM分期、miR-143-3p、ATG2B是膀胱癌病人生存状况的影响因素。结论膀胱癌病人血清中miR-143-3p呈低表达,ATG2B呈高表达,二者表达与膀胱癌病人临床病理特征和预后密切相关。

miR-143-3p和miR-509-5p在儿童肺炎支原体肺炎疾病程度及预后评估中的应用价值

目的分析微小核糖核酸-143-3p(miR-143-3p)与微小核糖核酸-509-5p(miR-509-5p)在肺炎支原体肺炎患儿血清中的表达水平,及其与疾病严重程度和预后的关系。方法选取2020年5月至2022年4月邯郸市妇幼保健院收治的肺炎支原体肺炎患儿135例(肺炎支原体肺炎组),根据疾病严重程度分为轻症组84例和重症组51例,另选取同期体检健康儿童130例作为对照组,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清miR-143-3p与miR-509-5p水平;对肺炎支原体肺炎患儿进行肺功能检测,测定呼吸频率(RR)、潮气量(VT)、呼气时间(Te)、达峰时间(TPTEF)、达峰容积(VPTEF),计算TPTEF/Te、VPTEF/VT;采用Pearson法分析肺炎支原体肺炎患儿RR、VT、TPTEF/Te、VPTEF/VT与血清miR-143-3p、miR-509-5p的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-143-3p和miR-509-5p对重症肺炎支原体肺炎以及预后不良的预测价值。结果肺炎支原体肺炎组miR-143-3p水平为(0.25±0.04),miR-509-5p为(0.37±0.04),均低于对照组(P<0.05);与轻症组相比,重症组肺炎支原体肺炎患儿RR升高,VT、TPTEF/Te、VPTEF/VT、血清miR-143-3p及miR-509-5p水平均降低(P<0.05);肺炎支原体肺炎患儿血清miR-143-3p、miR-509-5p与VT、TPTEF/Te、VPTEF/VT均呈正相关(P<0.05);血清miR-143-3p、miR-509-5p预测重症肺炎支原体肺炎的曲线下面积为0.820(灵敏度为82.4%,特异度为83.3%)、0.849(灵敏度为72.5%,特异度为92.9%);血清miR-143-3p、miR-509-5p预测预后不良的曲线下面积为0.735(灵敏度为79.6%,特异度为63.0%)、0.859(灵敏度为81.5%,特异度为87.3%)。结论肺炎支原体肺炎患儿血清miR-143-3p、miR-509-5p水平降低,二者均对疾病严重程度和预后具有判别价值,有望作为临床病情评估以及预后判断的指标。

老年性白内障患者泪液中miR-223和miR-143-3p水平表达与术后干眼症的相关性研究

目的探究老年性白内障患者术后干眼与泪液中miR-223,miR-143-3p水平表达的相关性。方法选取2022年5月~2023年2月于贵港东晖医院眼科行白内障术的92例老年性白内障患者作为研究对象,根据术后7天内有无发生干眼将其分为干眼症组(n=42)和无干眼症组(n=50),另选取同期体检的92例健康者作为健康对照组。采用Pearson法分析泪液miR-223,miR-143-3p表达水平与干眼诊断指标:泪膜破裂时间(break-up time,BUT)、角膜荧光素染色(corneal fluorescein staining,FL)评分和泪液分泌试验(schirmers test,SIt)的相关性;采用多因素Logistic回归分析影响白内障术后干眼发生的相关因素;采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析泪液miR-223和miR-143-3p对白内障术后干眼的预测价值。结果无干眼症组患者BUT(12.27±1.69s)及SIt(9.17±1.66mm)高于干眼症组(8.95±1.02s,4.36±0.97mm),FL(0.74±0.11分)则低于干眼症组(2.52±0.37分),差异具有统计学意义(t=11.136,16.546,32.386,均P<0.05)。干眼症组患者泪液miR-223(0.87±0.08)表达水平低于健康对照组(1.02±0.03)和无干眼症组(0.92±0.13),泪液miR-143-3p(1.37±0.32)表达水平高于健康对照组和无干眼症组(1.01±0.02,1.15±0.26),差异具有统计学意义(t=15.772,2.170;10.793,3.638,均P<0.05)。泪液中miR-223表达水平与BUT,SIt呈正相关(r=0.587,0.503,均P<0.001),与FL呈负相关(r=-0.442,P<0.001),miR-143-3p与BUT,SIt呈负相关(r=-0.714,-0.549,均P<0.001),与FL呈正相关(r=0.667,P<0.001)。干眼症组有角结膜疾病史、手术切口长度≥3 mm的患者所占比例高于无干眼症组(χ2=12.583,6.505,均P<0.05),且干眼症组患者泪液miR-223表达水平低于无干眼症组,miR-143-3p表达水平则高于无干眼症组,差异具有统计学意义(t=2.170,3.638,均P<0.05)。角结膜疾病史(OR=1.982)、手术切口长度(OR=2.036)及miR-143-3p(OR=1.653)为白内障患者术后发生干眼的危险因素,miR-223(OR=0.574)则为保护因素(P<0.05);泪液miR-223和miR-143-3p单独检测预测白内障术后干眼发生的曲线下面积(area under the cure,AUC)分别为0.692,0.719,而二者联合检测的AUC为0.880,二者联合检测优于miR-223和miR-143-3p各自单独检测(Z=3.869,3.810,均P<0.001)。结论老年性白内障术后干眼的发生与泪液中miR-223和miR-143-3p表达水平有关。

miR-143-5p和miR-335-5p在宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的分析微小核糖核酸-143-5p(miR-143-5p)和miR-335-5p在宫颈癌组织中的表达及其临床意义。方法选择2018年7月—2020年6月康复大学青岛中心医院/青岛市中心医院肿瘤妇科二科手术治疗的宫颈癌患者120例,随访期间失访5例,根据随访结果将患者分为预后良好组78例和预后不良组37例;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测宫颈癌组织及其癌旁组织中miR-143-5p、miR-335-5p的相对表达量;多因素Logistic回归分析影响宫颈癌患者预后的因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-143-5p、miR-335-5p预测宫颈癌患者预后的价值。结果癌组织中miR-143-5p、miR-335-5p水平低于癌旁组织(t/P=22.710/<0.001、22.950/<0.001);FIGO分期为Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤中低分化、有淋巴结转移的宫颈癌患者癌组织中miR-143-5p、miR-335-5p水平低于FIGO分期为Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤高分化、无淋巴结转移的患者(miR-143-5p:χ^(2)/P=3.041/0.003、3.573/0.001、3.443/0.001;miR-335-5p:χ^(2)/P=5.769/<0.001、2.890/0.005、2.738/0.007);预后不良组癌组织miR-143-5p、miR-335-5p水平低于预后良好组(t/P=3.718/<0.001、3.150/0.002);预后良好组患者FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移比例高于预后不良组(χ^(2)/P=18.261/<0.001、9.635/0.002);FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期是影响宫颈癌患者预后的危险因素[OR(95%CI)=4.105(1.484~11.353)],而miR-143-5p高、miR-335-5p高是其保护因素[OR(95%CI)=0.196(0.084~0.458)、0.220(0.088~0.549)];癌组织miR-143-5p、miR-335-5p及二者联合预测宫颈癌患者预后的AUC分别为0.743、0.726、0.879,二者联合优于各自单独预测价值(Z/P=2.346/0.019、2.601/0.009)。结论miR-143-5p、miR-335-5p在宫颈癌组织中呈下调表达,二者联合预测宫颈癌患者预后的价值较高。

自身免疫性肝炎患者血清miR431-5-p和miR143-3-p表达与病情严重程度的关系研究

目的 分析自身免疫性肝炎(AIH)患者血清微小RNA(miRNA)miR-431-5p和miR-143-3p表达与患者病情严重程度的关系。方法 选取东莞市人民医院2021年1月至2023年6月收治的118例AIH患者(AIH组),根据不同分期分为活动期(62例)、缓解期(56例),并根据不同病情严重程度分为轻度(36例)、中度(47例)、重度(35例)。另选取同期118例体检健康志愿者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(q-PCR)检测血清中miR-431-5p和miR-143-3p表达水平;采用Pearson相关性分析血清miR-431-5p、miR-143-3p相对表达水平与临床资料的相关性分析;采用多因素Logistic回归分析影响AIH患者病情严重程度的因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-431-5p、miR-143-3p对AIH患者病情严重程度的诊断价值。结果 AIH组血清miR-431-5p、miR-143-3p相对表达水平低于对照组(P<0.05)。轻度、中度、重度患者血清miR-431-5p、miR-143-3p相对表达水平依次降低(P<0.05)。活动期患者总胆红素(TB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)高于缓解期患者(P<0.05),血清miR-431-5p、miR-143-3p相对表达水平低于缓解期患者(P<0.05)。经Pearson相关性分析显示,血清miR-431-5p、miR-143-3p与TB、ALT、AST水平呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,血清miR-431-5p、miR-143-3p相对表达水平为影响AIH患者病情严重程度的保护因素(P<0.05)。血清miR-431-5p、miR-143-3p联合诊断AIH患者病情严重程度的曲线下面积优于二者单独诊断(P<0.05)。结论 AIH患者血清中miR-431-5p、miR-143-3p均呈低表达,且与病情严重程度密切相关,二者联合检测对AIH患者病情严重程度有一定的诊断价值。

miR-143-3p靶向调控TLR2/NF-κB/NLRP3通路对溃疡性结肠炎细胞焦亡的影响

目的研究miR-143-3p对LPS+ATP诱导HCT-116细胞焦亡的影响。方法双荧光素酶检测miR-143-3p与TLR2基因靶向关系。转染miR-143-3p mimic后建立焦亡模型,流式细胞术检测细胞凋亡,生化法检测Caspase-1活性及LDH含量;ELISA法检测IL-1β、IL-18含量。q-PCR检测NF-κB、TLR2、NLRP3、GSDMD mRNA水平;免疫荧光检测NLRP3、ASC蛋白表达;Western blot检测TLR2、GSDMD、p-NF-κB p65、cleave Caspase-1蛋白表达。结果双荧光素酶检测发现miR-143-3p靶向调控TLR2表达。miR-143-3p mimic组和si TLR2组较模型组细胞中NF-κB、TLR2、NLRP3、GSDMD mRNA表达及TLR2、GSDMD、p-NF-κB p65、cleave Caspase-1、ASC、NLRP3蛋白表达降低;Caspase-1活性及LDH、IL-1β、IL-18含量降低。结论miR-143-3p靶向TLR2基因调控NF-κB/NLRP3/Caspase-1信号通路调控溃疡性结肠炎细胞焦亡。

miR-143-3p通过靶向integrinβ1抑制肝癌进展

目的探讨肝癌中miR-143-3p的表达及其对肝癌细胞恶性生物学行为的影响,并分析潜在的机制。方法收集肝癌组织,用RT-qPCR和Western blot法分别检测miR-143-3p和integrinβ1的表达。体外培养肝癌细胞,并用miR-143-3p mimics转染后,用XTT和EDU法检测过表达miR-143-3p对细胞增殖活力的影响,用Transwell法检测过表达miR-143-3p对细胞迁移与侵袭的影响,Western blot法检测过表达miR-143-3p对integrinβ1表达的影响。用荧光素酶活性法检测miR-143-3p与integrinβ1的靶向关系。用XTT、EdU和Transwell法检测过表达integrinβ1对已转染miR-143-3p mimics的肝癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响。结果与癌旁正常组织比较,肝癌组织中miR-143-3p表达降低,integrinβ1表达升高,且二者均随疾病分期进展进一步降低或增高。过表达miR-143-3p能抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭,并能下调integrinβ1表达。过表达integrinβ1能逆转miR-143-3p对肝癌细胞的抑制作用。integrinβ1为miR-143-3p的靶点。结论miR-143-3p在肝癌中表达下调,而上调miR-143-3p能通过靶向integrinβ1抑制肝癌细胞增殖、迁移与侵袭。

多囊卵巢综合征患者血清miR-29a、miR-143-3p表达及临床意义

目的分析多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清微RNA(miRNA)-29a、miR-143-3p表达与肥胖、糖脂代谢和胰岛素抵抗(IR)的关系。方法选取2019年6月至2022年6月厦门大学附属中山医院(以下简称“我院”)收治的86例PCOS患者为PCOS组,另选取我院同期49名体检健康志愿者为对照组。根据体重指数(BMI)将PCOS患者分为肥胖组(36例)与非肥胖组(50例),根据稳态模型评估(HOMA)-IR分为IR组(61例)与非IR组(25例)。比较各组血清miR-29a、miR-143-3p表达,肥胖指标[BMI、腰臀比(WHR)]、糖脂代谢指标[空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]及HOMA-IR;分析PCOS患者血清miR-29a、miR-143-3p表达与肥胖指标、糖脂代谢指标和HOMA-IR的相关性。结果PCOS组BMI、WHR、FBG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C、miR-29a、miR-143-3p高于对照组,HDL-C低于对照组(P<0.05)。肥胖组血清miR-29a、miR-143-3p表达高于非肥胖组(P<0.05)。IR组血清miR-29a、miR-143-3p表达高于非IR组(P<0.05)。PCOS患者血清miR-29a、miR-143-3p表达与BMI、WHR、FBG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C呈正相关(r/rs>0,P<0.01),与HDL-C呈负相关(r<0,P<0.01)。结论PCOS患者血清miR-29a、miR-143-3p高表达,与肥胖、糖脂代谢和IR密切相关。

布比卡因对肝癌细胞Hep3B增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的:探讨布比卡因对肝癌细胞Hep3B增殖、迁移及侵袭能力的影响及其可能作用机制。方法:体外培养人肝癌细胞Hep3B,分为空白对照组、100μmol/L布比卡因组、200μmol/L布比卡因组、400μmol/L布比卡因组,miR-阴性对照(NC)组、miR-143-3p组,抗miR-NC+400μmol/L布比卡因组、抗miR-143-3p+400μmol/L布比卡因组;分别采用MTT法、流式细胞仪、Transwell实验检测细胞增殖能力、细胞周期、迁移及侵袭能力;qRT-PCR法检测miR-143-3p表达情况;Western blot法检测CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达情况。结果:与空白对照组比较,100、200、400μmol/L布比卡因组细胞增殖能力和CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平逐渐降低,S期细胞比例逐渐降低,迁移及侵袭细胞数逐渐减少,miR-143-3p表达水平和G1期细胞比例逐渐升高(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-143-3p组细胞增殖能力和CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平降低,迁移及侵袭细胞数减少,S期细胞比例降低,G1期细胞比例逐渐升高(P<0.05)。与抗miR-NC+400μmol/L布比卡因组比较,抗miR-143-3p+400μmol/L布比卡因组细胞增殖能力和CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平升高,迁移及侵袭细胞数增多,S期细胞比例升高,G1期细胞比例降低(P<0.05)。结论:布比卡因可通过调控miR-143-3p抑制肝癌细胞Hep3B增殖、迁移、侵袭,诱导细胞周期阻滞。

灵芝提取物通过抑制miR-143-3p保护Aβ25-35处理PC12细胞损伤的机制研究

目的探究灵芝提取物通过抑制miR-143-3p对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导的PC12细胞损伤的影响。方法使用20μmol/L的Aβ25-35处理PC12细胞用于建立体外Alzheimer’s病模型,细胞分为空白组(未经Aβ25-35处理细胞)、模型组(经过Aβ25-35处理细胞24 h)、低剂量组(2.5 mg/L灵芝提取物和Aβ25-35处理细胞24 h)、中剂量组(5.0 mg/L灵芝提取物和Aβ25-35处理细胞24 h)、高剂量组(10 mg/L灵芝提取物和Aβ25-35处理细胞24 h)、miR-NC+高剂量组(转染miR-NC后,使用10 mg/L灵芝提取物和Aβ25-35处理细胞24 h)、miR-143-3p+高剂量组(转染miR-143-3p后,使用10 mg/L灵芝提取物和Aβ25-35处理细胞24 h)。用噻唑蓝检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;Western Blotting法检测剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax蛋白)的表达;ELISA检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、Aβ、TNF-α、IL-6水平;实时定量RT-PCR(qRT-PCR)检测miR-143-3p表达水平。结果与空白组相比,模型组细胞活性、SOD活性、CAT活性显著降低,凋亡率、Cleaved-caspase-3蛋白表达、Bax蛋白表达、MDA含量、Aβ、TNF-α、IL-6水平以及miR-143-3p表达水平显著增加(均P<0.05)。与模型组相比,低剂量组、中剂量组、高剂量组细胞活性、SOD活性、CAT活性显著增加,凋亡率、Cleaved-caspase-3蛋白表达、Bax蛋白表达、MDA含量、Aβ、TNF-α、IL-6水平以及miR-143-3p表达水平显著降低(均P<0.05)。与miR-NC+高剂量组相比,miR-143-3p+高剂量组miR-143-3p表达水平、Cleaved-caspase-3、Bax蛋白表达、凋亡率、MDA含量、Aβ、TNF-α、IL-6水平显著增加,细胞活性、SOD活性、CAT活性显著降低(均P<0.05)。结论灵芝提取物可能通过下调miR-143-3p减弱Aβ25-35诱导的神经细胞凋亡、氧化应激和炎症反应。

土木香内酯调控lncRNA PCAT19/miR-143-3p分子轴对瘢痕疙瘩成纤维细胞生物学功能的影响

目的探讨土木香内酯(alantolactone,AL)对瘢痕疙瘩成纤维细胞生物学功能的影响及其对lncRNA PCAT19/miR-143-3p分子轴的调控作用。方法原代分离培养人瘢痕疙瘩成纤维细胞,不同浓度的AL处理瘢痕疙瘩成纤维细胞,分别将si-NC、si-PCAT19、miR-NC、miR-143-3p mimics转染至瘢痕疙瘩成纤维细胞,分别将pcDNA、pcDNA-PCAT19转染至瘢痕疙瘩成纤维细胞后加入AL培养24 h;CCK-8实验、平板克隆形成实验、Transwell小室实验分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力;qRT-PCR法检测瘢痕疙瘩组织、正常皮肤组织与瘢痕疙瘩成纤维细胞中PCAT19与miR-143-3p的表达量;双荧光素酶报告基因实验检测PCAT19与miR-143-3p的靶向关系;Western blot法检测MMP-2、MMP-9蛋白表达量。结果AL能够以剂量依赖性的方式抑制细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭,并可抑制PCAT19、MMP-2、MMP-9的表达,而促进miR-143-3p的表达;瘢痕疙瘩组织中PCAT19的表达量高于正常皮肤组织,而miR-143-3p的表达量低于正常皮肤组织;PCAT19可靶向调控miR-143-3p;转染si-PCAT19可抑制细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;转染pcDNA-PCAT19可拮抗AL对细胞生物学行为的作用。结论土木香内酯可通过调控PCAT19/miR-143-3p分子轴而抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭。

子宫内膜异位症患者子宫内膜组织中miR-143-3p和TET1表达及临床意义

目的 探讨子宫内膜异位症患者子宫内膜组织中miR-143-3p和TET1的表达及临床意义。方法 前瞻性选取2021年5月至2022年6月入同济大学附属第一妇婴保健院行腹腔镜手术治疗的85例子宫内膜异位症患者的异位子宫内膜组织,并选取同期收治的85例子宫内膜异位症患者的在位子宫组织,同时选取85例同期卵巢囊肿手术治疗患者作为对照组。采用qRT-PCR法检测两组子宫内膜组织中miR-143-3p和TET1 mRNA表达量,分析miR-143-3p和TET1 mRNA表达量与子宫内膜异位症临床特征关系,Spearman秩相关分析miR-143-3p和TET1的相关性,应用受试者工作特征(ROC)曲线评价miR-143-3p和TET1以及miR-143-3p联合TET1对子宫内膜异位症功能的诊断价值。结果 异位内膜组织中miR-143-3p和TET1表达明显低于对照组和在位内膜组织,差异均有统计学意义(P<0.05),而对照组和在位内膜组织中miR-143-3p和TET1表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。不同分期子宫内膜异位症患者的miR-143-3p和TET1表达水平差异有统计学意义(P<0.05),而不同痛经情况和病灶分型miR-143-3p和TET1表达水平在子宫内膜异位症患者中比较,差异无统计学意义(P>0.05)。miR-143-3p和TET1的表达水平呈正相关(r=0.367,P<0.001)。在miR-143-3p预测子宫内膜异位症的ROC曲线中:当截断值为0.316时,曲线下面积(AUC)为0.846,敏感度为81.18%,特异度为62.79%;在TET1预测子宫内膜异位症的ROC曲线中:当截断值为0.384时,AUC为0.942,敏感度为89.41%,特异度为78.82%;在miR-143-3p和TET1联合预测子宫内膜异位症的ROC曲线中:AUC为0.956,敏感度为91.76%,特异度为72.94%。miR-143-3p和TET1联合预测子宫内膜异位症的AUC明显大于miR-143-3p和TET1单独诊断。结论 子宫内膜组织中miR-143-3p和TET1低表达与子宫内膜异位症的发生、发展关系密切,并且在组织中随着子宫内膜异位症分期增加,miR-143-3p和TET1表达水平逐渐降低,miR-143-3p和TET1可作为临床诊断子宫内膜异位症的早期标志物。

血清miR-143-3p联合Autar评分对老年股骨转子间骨折后深静脉血栓形成评估价值研究

目的 探讨血清miR-143-3p联合Autar评分对老年股骨转子间骨折后深静脉血栓形成(DVT)的评估价值。方法 选取自2020年12月至2022年8月收治的106例老年股骨转子间骨折患者为研究对象,根据是否合并DVT分为非DVT组(n=77)与DVT组(n=29)。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测血清miR-143-3p水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-143-3p、Autar评分对老年股骨转子间骨折后DVT的诊断价值;采用多因素Logistic回归分析影响老年股骨转子间骨折后DVT的危险因素。结果 DVT组患者血清miR-143-3p水平低于非DVT组,Autar评分高于非DVT组,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-143-3p水平、Autar评分预测老年股骨转子间骨折后DVT的曲线下面积(AUC)分别为0.843、0.782,两者联合预测的AUC为0.906。两组患者性别、体质量指数、吸烟、高血压史、冠心病史、纤维蛋白原、白蛋白比较,差异无统计学意义(P>0.05);非DVT组患者的年龄、受伤至入院时间、糖尿病史、血小板计数、D-二聚体、凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间与DVT组比较,差异有统计学意义(P <0.05)。受伤至入院时间≥24 h、D-二聚体升高、miR-143-3p≤2.62、Autar评分≥15.95分是老年股骨转子间骨折后DVT的危险因素(P<0.05)。结论 血清miR-143-3p及Autar评分可预测老年股骨转子间骨折患者DVT的发生风险,且两者联合预测的效能更高。

重症急性胰腺炎病人外周血微RNA-143-3p、环氧合酶-2表达水平与辅助性T细胞17/调节性T细胞平衡的关系

目的探究重症急性胰腺炎(SAP)病人血清微RNA-143-3p(miR-143-3p)、环氧合酶-2(COX-2)表达水平与辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的关系。方法选取2017年12月至2020年9月榆林市第一医院诊治的103例急性胰腺炎(AP)病人进行研究,按APACHEⅡ评分将其分为SAP组(45例)和轻症急性胰腺炎(MAP)组(58例),另选取同期55例体检健康者为健康组。比较各组血清miR-143-3p、维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)mRNA、COX-2 mRNA、叉头/翼状螺旋转录因子3(Foxp3)mRNA、Th17、Treg、Th17/Treg水平;分析SAP病人血清miR-143-3p、COX-2 mRNA表达水平与外周血Th17、Treg、Th17/Treg、RORγt mRNA、Foxp3 mRNA的相关性;分析SAP发生的影响因素。结果MAP组、SAP组病人血清miR-143-3p(0.70±0.23、0.42±0.14比1.04±0.35)、Foxp3 mRNA表达水平(0.56±0.19、0.31±0.11比1.03±0.34)及Treg细胞百分比[(6.13±2.04)%、(2.73±0.90)%比(8.74±2.91)%]低于健康组(P<0.05),COX-2 mRNA(1.68±0.48、2.37±0.54比1.01±0.34)、RORγt mRNA表达水平(1.72±0.57、2.44±0.81比1.05±0.35)及Th17细胞百分比[(3.87±1.29)%、(6.71±2.34)%比(1.99±0.66)%]、Th17/Treg(0.63±0.21、2.46±0.82比0.23±0.08)高于健康组(P<0.05);SAP组病人血清miR-143-3p、Foxp3 mRNA表达水平及Treg细胞百分比低于MAP组(P<0.05),COX-2 mRNA、RORγt mRNA表达水平及Th17细胞百分比、Th17/Treg高于MAP组(P<0.05);SAP病人血清miR-143-3p表达水平与Th17、RORγt mRNA、Th17/Treg及血清COX-2 mRNA表达水平与Treg、Foxp3 mRNA呈负相关(P<0.05),血清miR-143-3p表达水平与Treg、Foxp3 mRNA及血清COX-2 mRNA表达水平与Th17、RORγt mRNA、Th17/Treg呈正相关(P<0.05);SAP病人血清miR-143-3p表达水平与COX-2 mRNA呈负相关(P<0.05);miR-143-3p是影响SAP发生的保护因素(P<0.05),COX-2 mRNA、Th17/Treg是影响SAP发生的危险因素(P<0.05)。结论SAP病人血清miR-143-3p表达水平较低,COX-2 mRNA表达水平较高,二者均与Th17/Treg平衡相关,miR-143-3p可能为治疗SAP的新靶点。

miR-143-5p对镉致肾细胞凋亡的调控作用及其机制

目的 :探讨mi R-143-5p对镉诱导LLC-PK1细胞凋亡的调控作用及其机制。方法 :通过基因芯片技术筛选出由镉引起的差异表达mi RNAs,并用实时定量PCR方法验证基因芯片结果的可靠性;应用Lipofectamine 2000瞬时转染mi R-143-5p的模拟物和抑制剂建立mi R-143-5p高表达和低表达的模型,并结合q RT-PCR技术验证转染效果;Hoechst 33258染色和Annexin V-PI双染法检测细胞凋亡;生物信息学分析结合实时定量PCR和Western blot验证mi R-143-5p靶基因的表达;Western blot分析mi R-143-5p对细胞凋亡相关通路的调控作用。结果:镉可增强LLC-PK1细胞的mi R-143-5p表达水平(P<0.01);转染mi R-143-5p模拟物或抑制剂后,与对照组(mi R-NC)比较,mi R-143-5p表达明显上调或下调(P<0.01);mi R-143-5p的过表达可促进LLC-PK1细胞凋亡(P<0.01);mi R-143-5p在AKT3的m RNA和蛋白水平上发挥靶向调控作用;mi R-143-5p过表达能抑制pAkt和p-Bad蛋白表达,促进caspase-9和caspase-3蛋白上调。结论 :mi R-143-5p可能通过作用于靶基因AKT3,并抑制Akt/Bad信号通路,促进镉诱导LLC-PK1细胞的凋亡。

IncRNA MAFG-AS1及miR-143-3p对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响及机制研究

目的探讨lncRNA MAFG-AS1和miR-143-3p对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及其潜在的作用机制。方法MAFG-AS1和miR-143-3p表达载体转染至宫颈癌细胞Hela后,采用qRT-PCR检测宫颈癌组织及相应癌旁正常组织,宫颈癌细胞Hela和正常宫颈细胞株Ect1/E6E7中miR-143-3p和MAFG-AS1 mRNA的表达水平;Western blot检测增殖相关蛋白Bcl-2、Cyclin D1及凋亡相关蛋白Bax、Cleaved-Caspase-3、p21、p27的表达;MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测lncRNA MAFG-AS1与miR-143-3p的相互作用。结果与癌旁正常组织相比,宫颈癌组织中MAFG-AS1 mRNA表达升高(0.905±0.115 vs 2.835±0.164,t=43.091,P<0.001),miR-143-3p表达降低(0.944±0.075 vs 0.382±0.071,t=24.336,P<0.001);相较于正常宫颈细胞株Ect1/E6E7,宫颈癌细胞Hela中MAFG-AS1 mRNA的表达显著升高(P<0.001),miR-143-3p表达显著降低(P<0.001)。下调MAFG-AS1和过表达miR-143-3p均可抑制Hela细胞增殖活性,促进细胞凋亡;抑制Bcl-2和Cyclin D1蛋白表达,促进Bax、Cleaved、Caspase-3、p21、p27蛋白表达。MAFG-AS1可靶向调控miR-143-3p表达,且抑制miR-143-3p表达可逆转下调MAFG-AS1表达对Hela细胞抑制细胞增殖、促进细胞凋亡作用。结论 lncRNA MAFG-AS1可抑制宫颈癌细胞增殖,促进凋亡,其机制可能与靶向调控miR-143-3p有关。