血清p185蛋白和CA153对乳腺癌患者的临床应用价值研究

目的检测乳腺癌患者血清p185蛋白表达及肿瘤标志物CA153水平,分析血清p185蛋白与肿瘤标志物CA153的相关性,探讨二者检测在乳腺癌患者中的临床应用价值。方法收集2010年至2012年间在我院住院治疗的乳腺癌55例患者术前、手术后一周血清各一份,应用免疫PCR法检测血清p185蛋白表达,化学发光法检测血清CA153水平。结果乳腺癌患者血清p185蛋白表达和血清CA153水平与临床分期均显著相关(P<0.05),血清p185蛋白表达与淋巴结转移情况无关系(P﹥0.05),血清CA153水平与淋巴结转移情况相关(P<0.05);乳腺癌患者血清p185表达与手术无关(P>0.05),手术前后血清p185蛋白表达无差异,乳腺癌患者血清CA153水平和手术相关(P<0.05),手术前血清CA153水平明显高于术后;乳腺癌患者术前血清CA153水平和p185蛋白表达相关(P<0.05),乳腺癌血清p185蛋白表达阳性患者,血清CA153水平高于阴性患者;乳腺癌患者复发或转移与血清p185蛋白表达及患者术前血清CA153水平相关(P<0.05),血清p185蛋白阳性患者复发或转移率明显高于阴性患者,术前CA153水平高的患者,复发或转移率高。结论乳腺癌患者血清p185蛋白表达与肿瘤标志物CA153水平有相关性,肿瘤标志物CA153可用于术后随访,术前检测乳腺癌患者血清p185蛋白表达与肿瘤标志物CA153水平可用于乳腺癌的预后判断。

原癌基因HER2/neu表达产物p185蛋白免疫原性研究

用表达ｐ１８５蛋白ＨＥＲ２／ｎｅｕ转基因３Ｔ３－ＨＥＲ２／ｎｅｕ细胞裂解物免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，经３次免疫后，免疫小鼠脾细胞对表达ｐ１８５蛋白的３Ｔ３－ＨＥＲ２／ｎｅｕ细胞呈现较强的增殖反应（平均刺激指数分别为ＳＩ＝３．１５±１．８８），而对未转染ＨＥＲ２／ｎｅｕ基因的３Ｔ３细胞的应答较弱（ＳＩ＝１．１４±０．９７）。并检测到１号免疫鼠脾细胞对３Ｔ３－ＨＥＲ２／ｎｅｕ细胞有特异杀伤作用。免疫鼠血清中出现高水平的抗ｐ１８５抗体（ＯＤ均值＝１．０２±０．１６），较正常对照组（ＯＤ均值＝０．３６±０．１０）有显著差异（Ｐ＜０．００１），表明ＨＥＲ２／ｎｅｕ表达产物ｐ１８５蛋白具有免疫原性，用于免疫小鼠可诱导出对ｐ１８５蛋白的特异免疫应答反应。

p16^(INK4)、p21^(ras)及p185^(C-erbB-2)蛋白在子宫内膜癌的表达及临床病理意义

目的:研究p16 INK4 蛋白在子宫内膜增殖症和子宫内膜癌的表达特征,以探讨其与p2 1ras、p185 C erbB 2 蛋白的相互关系及在子宫内膜癌发生发展中的作用。方法:应用免疫组化SP法检测6 5例子宫内膜癌及2 0例子宫内膜增殖症组织中p16 INK4 、p2 1ras及p185 C erbB 2 蛋白的表达。结果:子宫内膜增殖症组织p16 INK4 蛋白表达率为85 .0 0 % (17/ 2 0 ) ,子宫内膜癌组织p16 INK4 蛋白表达率为6 0 .0 0 % (39/ 6 5 ) ,其表达与组织分级及p185 C erbB 2 蛋白表达呈负相关。结论:p16 INK4 蛋白失表达与子宫内膜癌分化差有一定关系,与p2 1ras、p185 C erbB 2 蛋白的联合检测可反映肿瘤的分化。

肿瘤抗原p185蛋白的纯化及其鉴定

目的：从转染HER2／neu基因的3T3／neu细胞中纯化p185蛋白，研究其免疫原性和作为肿瘤疫苗的可能性。方法：采用溴化氰活化的Sepharose4B为基质，通过交联520C9单克隆抗体（杂交瘤腹水中沉淀γ-球蛋白），用亲和层析的技术纯化p185蛋白。经梯度盐溶液解离与抗体结合的p185蛋白，收集到蛋白洗脱峰，用ELISA检测p185的免疫反应性，并经SDSPAGE和WesternBlot进一步鉴定。结果：经过亲和层析所收集的蛋白吸收峰与p185活性峰重合，SDS-PAGE和WesternBlot进一步证实纯化蛋白的分子量约为185kD，是HER2/neu编码的肿瘤抗原。从肿瘤细胞中纯化p185肿瘤抗原的收获率约为1．129×10-5）mg／mg蛋白浓度的细胞裂解上清。结论：从转基因细胞中成功获取p185肿瘤抗原，将用于后续研究。

p185蛋白在乳腺癌中的研究进展

p185蛋白是癌基因C-erbB-2编码的跨膜糖蛋白受体,p185蛋白的高表达在乳腺癌的发生、发展及治疗方面起着非常重要的作用.本文对p185蛋白的过度表达及对乳腺癌的发生、发展、诊断、治疗及预后意叉进行了综述.

P185蛋白表达与血清CA153联合监测在乳腺癌治疗中的意义

目的探讨乳腺癌组织中P185蛋白表达与血清糖蛋白抗原153(CA153)的相关性及联合监测的临床意义。方法通过免疫组化法和放射免疫法监测2005年6月至2007年5月间110例乳腺癌P185表达情况及血清CA153的水平,分析P185蛋白、CA153与乳腺癌临床特征之间的关系。结果乳腺癌患者治疗前血清CA153的水平明显高于治疗后的水平(P<0.01),乳腺癌Ⅲ、Ⅳ期患者的血清CA153的水平明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者的水平(P<0.01),P185蛋白高表达患者的血清CA153水平高于低表达患者(P<0.05)。结论联合监测P185蛋白与血清CA153可以用于乳腺癌的预后判断,指导辅助治疗方案的制定。

葡萄胎p53、p21^(CIP1)及p185蛋白表达与恶变的关系

目的 :探讨葡萄胎p5 3、p2 1CIP1及p185蛋白表达与恶变的关系及其临床特点。方法 :免疫组化法检测葡萄胎标本中p5 3、p2 1CIP1及p185蛋白的表达 ,以侵蚀性葡萄胎及绒癌为对照 ,并回顾性分析其临床资料。结果 :葡萄胎组p5 3、p2 1CIP1、p185蛋白阳性表达率分别为 35 % (35 / 10 0 ) ,71% (71/ 10 0 )及 36 % (36 / 10 0 ) ,与恶性对照组相比均有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;而完全性与部分性葡萄胎 ,完全性葡萄胎恶变组与非恶变组之间差异均无显著性 (P >0 .0 5 ) ,但恶变组p2 1CIP1表达有降低趋势。结论 :p5 3、p2 1CIP1及p185蛋白表达改变与葡萄胎恶变无确定关系 ,但可作为晚期现象出现于恶性滋养细胞肿瘤中 ,其中p2

胃癌、胃黏膜不典型增生和胃炎组织中p185和p21蛋白的表达及其临床意义

目的研究胃癌、胃黏膜不典型增生和胃炎组织中c-erbB-2和ras癌基因产物p185和p21蛋白的表达,以探讨p185和p21蛋白在胃癌发生、发展过程中的作用。方法采用免疫组化S-P法检测39例胃癌组织、24例胃黏膜不典型增生组织和33例胃炎组织p185和p21蛋白的表达。结果p185蛋白在慢性胃炎、轻度胃黏膜不典型增生组织中不表达;在中、重度胃黏膜不典型增生组织中的表达率分别为11.8%和66.7%,差异有显著性(P<0.05),表达程度明显增强(P<0.05);在高、中、低分化胃癌组织中的表达率分别为77.8%、50.0%和29.2%,差异有显著性(P<0.05),高分化胃癌组织中p185蛋白的表达程度明显高于中、低分化胃癌组(P<0.05)。p21蛋白在胃黏膜不典型增生及胃癌组织中的表达率和表达程度较慢性胃炎组明显增高,差异有显著性(P<0.01);在轻、中、重度胃黏膜不典型增生组织中的表达率分别为25.0%、82.4%和100.0%,差异有显著性(P<0.05),表达程度明显增强(P<0.05);在高、中、低分化胃癌组织中的表达率分别为44.4%、66.7%和95.8%,差异有显著性(P<0.01),表达程度明显增强(P<0.05)。p185和p21蛋白在胃癌组织中的表达呈负相关(r=-0.450,P<0.01)。结论c-erbB-2和ras癌基因产物p185和p21蛋白在胃癌致病机制中起重要作用,p21蛋白作用于胃癌发生的早期阶段,p185蛋白可能作用于胃癌发生的较晚期。

大肠癌中p185^(erbB2)、p21^(ras)、p53的表达及其临床病理意义

目的 研究大肠癌中p185 erbB2 、p2 1ras、p5 3的表达及其临床病理意义。方法 采用S P法检测 80例大肠癌组织中p185 erbB2 、p2 1ras、p5 3的表达。 结果 大肠癌原发病灶中 p185 erbB2 、p2 1ras、p5 3的阳性表达率分别为 5 8.8%、71.3 %及 5 3 .8%。癌组织同时有 2种以上蛋白表达者占 6 3 .7% (5 1/80 ) ,有 3种蛋白同时表达者占 30 % (2 4/80 )。p185 erbB2 的阳性表达与肿瘤组织学类型有关 ;p2 1ras的阳性表达与肿瘤组织学类型、浸润深度、淋巴结转移有关 ;p5 3的阳性表达与临床病理指标无相关性。 结论 c erbB 2、p2 1ras及 p5 3可能与大肠癌的发生有关 ,在大肠癌的发生中可能起协同作用 。

p185、ras p21、p53、p21、Rb蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及其意义

目的 研究与细胞周期G1→S调控点相关的p185、rasp2 1、p5 3、p2 1、Rb蛋白在子宫内膜癌组织中的表达及相互间的关系 ,并探讨其临床应用价值。方法 应用LSAB免疫组化法 ,检测 2 1例正常子宫内膜、19例子宫内膜上皮内瘤样病变 (EIN )及45例子宫内膜癌组织中 p185、rasp2 1、p5 3、p2 1、Rb蛋白的表达。 结果 p185、rasp2 1、p5 3蛋白在正常子宫内膜、EIN至内膜癌组织中的表达率依次增高 ,p2 1、Rb蛋白表达率则依次降低 ;在子宫内膜癌组织中 ,p185蛋白表达与rasp2 1蛋白表达呈正相关 (γ =0 .36 3) ,与 p5 3、p2 1表达呈负相关 (γ =-0 .448;γ =-0 .30 3) ,rasp2 1,p5 3蛋白表达与p2 1蛋白表达均呈负相关 (γ =-0 .36 5 ;γ= -0 .32 2 ) ,p2 1蛋白与Rb蛋白表达呈正相关 (γ =0 .441)。p185蛋白的表达与子宫内膜癌病理分级有关 ,单因素分析其为 1个预后保护性因素 (P <0 .0 5 ) ;p5 3蛋白的表达与各临床病理因素均有关 ,其单因素及多因素分析均提示预后差 (P <0 .0 5 )。 结论 与细胞周期G1→S调控相关的 p185、rasp2 1、p5 3、p2 1、Rb蛋白均参与子宫内膜癌的发生、发展过程 ,且部分基因相互关联 ;p5 3可作为其独立的预后因素。

涎腺肿瘤组织中P185蛋白的表达

目的 :探讨涎腺肿瘤组织P185蛋白的表达及其与肿瘤生物学特性的关系。方法 :采用免疫组化SP法检测了 2 0例多形性腺瘤 (PA) ,12例腺淋巴瘤 (AL) ,19例恶性多形性腺瘤 (MPA)和 2 5例腺样囊性癌 (ACC)中neu基因的表达产物P185蛋白。结果 :PA组织中P185蛋白的阳性率为 10 .0 % (2 / 2 0 )。MPA组织中的阳性率为 5 7.9% (11/19) ,2组比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;有淋巴结转移的恶性涎腺肿瘤中P185的阳性率为 10 0 % ,无淋巴结转移的阳性率为 48.6 % ,2组比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :neu基因的表达产物P185蛋白在PA恶变过程中起着一定作用 ;P185蛋白检测可作为判断涎腺恶性肿瘤有无淋巴结转移的参考指标 ,为临床外科选择术式提供参考依据。

乳腺癌患者p185蛋白的表达

目的探讨p185蛋白对乳腺癌的诊断意义.方法采用免疫组化方法对乳腺癌、乳腺增生患者乳腺组织进行p185蛋白检测.结果 30例乳腺癌组织p185蛋白表达,其中12例阳性,阳性率为40%,26例乳腺增生组织未发现p185蛋白表达.结论乳腺癌与乳腺增生组织p185蛋白的表达有显著差异(P<0.05),因此组织p185蛋白表达在鉴别乳腺癌和乳腺增生方面具有重要意义.

p21、p185、p53蛋白表达对卵巢交界性浆液性肿瘤的鉴别诊断价值

目的： 探讨ｒａｓ、ｃｅｒｂＢ２、ｐ５３ 基因产物ｐ２１ 、ｐ１８５ 、ｐ５３ 蛋白表达对卵巢浆液性肿瘤中良性瘤、交界性瘤和癌的鉴别诊断价值。方法： 采用ＬＳＡＢ免疫组化法。结果：３ 种蛋白在良性瘤、交界性瘤和癌中的单一表达均呈递增趋势，差异显著；联合表达，２ 种以上蛋白同时阳性率后两组高于良性瘤组，差异显著，Ｐ＜ ０００５ ；３ 种蛋白同时阳性率癌组高于前两组，差异显著，Ｐ＜ ００５ 。结论：３ 种蛋白的表达可以作为卵巢浆液性肿瘤中良性瘤、交界性瘤和癌的鉴别诊断的客观指标。

富含二硫键的膜蛋白p185胞外区在大肠杆菌中的可溶性表达和性质鉴定

Her2/c_erbB_2基因(其产物为膜蛋白p185)是表皮生长因子受体(EGFR)基因家族的一员,在约30%的乳腺癌中发现了其过量表达。为了鉴定抗p185单克隆抗体的抗原表位并进一步研究它们的相互作用,采用PCR的方法从含Her2/c_erbB_2基因的pBabe/erbB_2质粒中扩增了p185胞外区的富含二硫键的第一、二结构域和第四个结构域。产物克隆到pGEX/4T_1载体后,转化大肠杆菌OrigamiB(DE3)pLysS菌株,用低浓度IPTG进行低温过夜诱导后将菌体压力破碎,SDS_PAGE检测表达上清,得到了可溶性表达的融合有GST的目的蛋白。经ELISA、Westernblot等方法鉴定,可溶性表达产物具有完全的抗体结合活性,且当用凝血酶把GST切掉后该活性仍然保留。p185胞外区融合蛋白的成功表达将为二硫键富含类蛋白的表达提供参考;并为将来具有肿瘤细胞生长抑制活性的抗p185单克隆抗体的抗原表位鉴定,以及为EGFR家族受体的结构和功能关系的研究打下基础。

阿那曲唑联合依维莫司治疗乳腺癌的效果及对血清HER-2/neu、p185水平的影响

目的探究阿那曲唑联合依维莫司用于治疗乳腺癌的临床疗效及其对患者血清中人类表皮生长因子受体2蛋白(HER-2/neu)、p185水平的影响。方法选取2013年1月至2018年12月广元市第一人民医院治疗的符合纳入标准的患者1000例,按照随机数字表法分为对照组(n=500)和观察组(n=500)。对照组给予口服阿那曲唑片,观察组在对照组的基础上给予口服依维莫司片。治疗3个月后,观察比较2组患者的临床疗效及不良反应发生率,比较2组患者雌激素、HER-2/neu、p185水平。结果观察组的临床缓解率为60.60%,要明显高于对照组(54.20%),差异有统计学意义(χ^2=4.190,P=0.041)。治疗前,2组患者的雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、HER-2/neu、p185水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。经过3个月的治疗,观察组的E2、LH、HER-2/neu、p185水平均明显低于对照组(t=8.148,P=0.000;t=85.170,P=0.000;t=20.209,P=0.000;t=16.109,P=0.000)。治疗过程中,对照组和观察组患者不良反应发生率分别为8.60%和7.60%,差异无统计学意义(χ^2=0.340,P=0.562)。结论阿那曲唑联合依维莫司治疗乳腺癌具有良好的临床疗效,可抑制肿瘤细胞的生长发育,降低患者体内雌激素水平,且安全性高。

血清TSH、TSGF与p185蛋白联合诊断乳腺癌的临床意义

目的探讨血清促甲状腺激素(TSH)、肿瘤特异性生长因子(TSGF)水平、p185蛋白阳性率与乳腺癌疾病的相关性。方法选择2016年8月至2018年10月应城市人民医院收治的60例乳腺癌患者作为研究对象,按照TNM分期分为Ⅰ-Ⅱ组(Ⅰ-Ⅱ期患者)36例和Ⅲ-Ⅳ组(Ⅲ-Ⅳ期患者)24例,另选取我院同期健康体检人群60例作为对照组。对比分析3组患者血清TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率及不同病理特征下患者TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率之间的差异,分析联合检测和单独检测之间的差异。结果3组间TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,Ⅰ-Ⅱ组和Ⅲ-Ⅳ组患者血清中TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率更高,差异有统计学意义(P<0.05)。不同组织分级、TNM分期以及淋巴结转移情况的乳腺癌患者的TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05);而不同肿瘤直径和分子分型的乳腺癌患者的TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Spearman相关性分析显示,组织分级、TNM分期、淋巴结转移、病理状态与乳腺癌患者的TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率呈显著相关性(P<0.05)。Logistic多因素分析结果显示,血清TSH(OR=1.019,P=0.001)、TSGF(OR=1.632,P=0.001)、p185蛋白阳性率(OR=1.089,P=0.000)是乳腺癌发生的独立危险因素。ROC诊断曲线结果显示,联合血清TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率的诊断效能显著高于单独指标的诊断效能(P<0.05)。结论乳腺癌患者的血清TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率与病理分期显著相关,且联合检测诊断效能更高,可作为诊断的依据。

焦虑、抑郁与乙肝病毒感染预后的癌基因研究

目的探讨焦虑、抑郁不良情绪与慢性乙肝发展和转归的关系。方法采用ＬＳＡＢ免疫组化和ＥＬＩＳＡ方法，检测了５２例慢性ＨＢＶ感染者肝细胞Ｃ－ｅｂｂＢ－２Ｐ１８５癌基因蛋白及血清ＨＢｅＡｇ，同时进行了ＳＡＳ和ＳＤＳ调查，结果与国内常模对照。结果Ｃ－ｅｒｂＢ－２Ｐ１８５癌基因蛋白阳性患者ＳＡＳ和ＳＤＳ总标准分均值Ｘ分别为４４．２１０±６．１２和４９．１３±９．８７，分数升高与国内常模之间有显著差异，（Ｐ＜０．０１）。结论提示焦虑、抑郁情绪在慢性乙肝的发生发展中可能起重要作用。

c-erbB2 ASODN-Folato(FA)诱导乳腺癌细胞凋亡的体外研究

目的本研究通过癌基因反义寡脱氧核苷酸抑制癌基因表达的原理,研究c-erbB2癌基因反义寡脱氧核苷酸对乳腺癌细胞SK-Br-3凋亡和蛋白表达的影响。方法采用DNA末端原位标记染色和Annexin-V荧光标记法检测ASODN-FA对乳腺癌细胞凋亡的作用,用免疫组化法检测对p185蛋白表达的影响。结果DNA末端原位标记染色实验表明,c-erbB2 ASODN-FA能诱导SK-Br-3细胞晚期凋亡,其凋亡指数AI为(17.37±2.78)%,与对照组[(4.60±1.76)%]比较有显著差异(P=0.000)。Annexin-V检测发现,c-erbB2 ASODN-FA能诱导SK-Br-3细胞早期凋亡,早期凋亡细胞阳性率为(18.62±1.80)%,与对照组[(2.75±1.09)%]比较有显著差异(P=0.000)。免疫组化测定细胞p185表达情况,ASODN-FA组的平均光密度为0.11±0.02,与对照组(0.31±0.06)比较明显降低(P=0.000)。结论c-erbB2反义寡脱氧核苷酸能诱导乳腺癌细胞SK-Br-3的早期和晚期凋亡,使p185蛋白表达降低。

p185抗体可致小鼠流产的研究

目的通过体内实验进一步验证ｐ１８５蛋白的免疫原性，旨在研究该蛋白作为肿瘤疫苗的可能性。方法用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ２００层析柱分离的ｐ１８５蛋白组分与佐剂混合免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，经ＥＬＩＳＡ验证血清中出现ｐ１８５抗体后与健康的同品系雄性鼠交配，以阴栓形成提示交配成功，观察雌鼠产仔率，子宫形态及免疫病理。结果免疫鼠产仔率明显低于仅用佐剂免疫的对照组（Ｐ＜０．０５），子宫内发现胚胎坏死，病检显示子宫组织有弥散性中性粒细胞浸润和局灶性坏死，并有免疫复合物沉积，提示ｐ１８５免疫能诱导小鼠流产。结论这一实验结果从体内进一步证实ｐ１８５的免疫原性。为该蛋白作为肿瘤疫苗提供实验资料。

p185^(HER-2)蛋白胞外区的表达及其结合肽的筛选

目的 :构建p185 HER -2 蛋白胞外区的原核表达载体 ,实现p185 HER -2 蛋白胞外区的表达。以纯化p185 HER -2 蛋白胞外区为靶 ,从噬菌体肽库中筛选其结合肽 ,用于肿瘤导向治疗。方法 :从含有HER 2全长cDNA的质粒psv2 -cerbB -2 中克隆了人p185 HER -2 蛋白胞外区cDNA ,将此cDNA克隆到pET 30a +表达载体中 ,构建p185蛋白胞外区的表达载体。表达的p185 HER -2 蛋白胞外区通过Zn2 + 螯合层析柱进行纯化。以纯化的p185 HER -2 蛋白胞外区为靶 ,通过淘洗方法进行噬菌体肽库筛选。结果与结论 :构建了p185 HER -2 蛋白胞外区的原核表达载体 ,实现了p185 HER -2蛋白胞外区的高表达。通过Zn2 + 螯合层析柱实现一步纯化 ,p185 HER -2 蛋白胞外区的纯度达到 95 %。从噬菌体随机环七肽库中找到了一组具有核心序列p185 HER -2 蛋白胞外区结合肽。这些p185 HER -2 蛋白胞外区结合肽有可能成为肿瘤治疗的新的候选分子。