p21^(waf1)、p53和PCNA在肺癌组织中的表达

目的 了解肺癌组织中p2 1waf1、p5 3和PCNA蛋白表达情况 ,研究肺组织良恶性增殖的不同机制。方法 运用免疫组织化学方法 ,检测 76例肺癌组织p2 1waf1、p5 3及PCNA的表达情况 ,分析三种蛋白表达与肺癌临床特征的关系 ,并与 5 9例肺良性疾病组织相关指标进行比较。结果 (1)肺癌组织p2 1waf1和p5 3蛋白表达阳性率分别为 75 %和47 37% ,PCNALI值为 0 44± 0 32 ,均显著高于肺良性疾病组织 (分别为 35 5 9%、3 39%和 0 0 9± 0 14)。 (2 )肺癌组织p2 1waf1、p5 3和PCNA蛋白表达与肺癌临床分期及细胞分化程度无关。各型肺癌之间p2 1waf1、p5 3蛋白表达也无明显差异。(3)肺鳞癌PCNALI值为 0 5 1± 0 32 ,明显高于小细胞肺癌(0 30± 0 36 )。 (4)肺癌组织p2 1waf1和p5 3蛋白表达与PCNA无关 ,p2 1waf1和p5 3蛋白表达之间也未发现相关性。而肺良性疾病组织p2 1waf1和p5 3蛋白表达与PCNA相关。结论 (1)肺癌组织p2 1waf1与p5 3蛋白表达明显上调。 (2 )肺癌细胞增殖程度很高。 (3)肺鳞癌细胞DNA损伤修复能力可能高于小细胞肺癌。 (4)肺良性疾病细胞增殖过程中 ,p2 1waf1、p5 3及PCNA三种蛋白有协调作用 ,而在肺癌细胞则否。

胃癌中p21^(WAF1)与p53基因的相关性研究

目的 探讨胃癌中 p2 1WAF 1与 p5 3基因的关系。方法 采用 S- P法检测 p2 1WAF 1和 p5 3在胃癌中的表达。结果 p2 1与 p5 3在正常胃黏膜、不典型增生、胃癌中的阳性表达率分别为 10 0 .0 %与 0 %、92 .5 %与 15 .0 %、39.8%与 5 6 .5 % ;40例不典型增生 ,p5 3阳性而 p2 1阴性者为 5 .0 % ,p5 3阴性而 p2 1阳性为 82 .5 % (P<0 .0 5 ) ;p2 1、p5 3阳性高分化腺癌各为 6 3.3%与 36 .7% ,与低分化腺癌 32 .7%与 78.2 %比较 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ;48.1%的胃癌 p2 1、p5 3蛋白表达相反 (P>0 .0 5 ) ;p2 1表达在侵犯浅肌层为 6 0 .0 %显著高于深肌层的 35 .2 % (P<0 .0 5 ) ;p2 1、p5 3在原发与转移癌中一致表达为 35 .3%与 70 .6 % ,皆与未转移癌 6 2 .5 %与 42 .5 %有显著性差异 (P<0 .0 5 ) ;p2 1在 TNM 期 6 0 .0 %、 期 5 6 .2 %显著高于 期 2 7.8%、 期 2 2 .2 % (P<0 .0 5 )。结论 正常胃黏膜和不典型增生 p2 1蛋白表达大部分依赖 p5 3蛋白 ,而胃癌在相当程度上不依赖。p2 1失表达和 p5 3异常表达与胃癌发生、分化程度、转移有关 ,而 p2 1失表达还与侵袭。

p21^(WAF1)基因介导诱发的人肝癌细胞系的细胞凋亡研究

目的研究外源性ｐ２１ＷＡＦ１基因超表达对ＨＣＣ－９２０４肝癌细胞系的作用和意义。方法通过脂质体介导方式将带有人全长ｐ２１ＷＡＦ１ｃＤＮＡ和潮霉素抗性基因的真核表达载体ＰＣＥＰ转入肝癌细胞中，用潮霉素筛选后，酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）法检测ｐ２１蛋白的表达情况，使用流式细胞仪检测细胞周期并判定有无细胞凋亡及程度。通过透射电镜进一步观察细胞的超微结构。结果ＥＬＩＳＡ法测定ｐ２１蛋白表达结果，对照组、空载体组和ＷＡＦ１组的吸光度（Ａ）值分别为０．１７５±０．０２、０．１８３±０．０３和０．３３±０．０４，提示转基因后ｐ２１蛋白量却明显增加（Ｐ＜０．０５）。流式细胞仪检测细胞周期表明Ｇ１期细胞显著增加，并在Ｇ１期前出现一凋亡峰，凋亡细胞占细胞总数的２２．５％。透射电镜可见ＷＡＦ１组部分细胞体积缩小，细胞完整，有出芽现象，细胞器结构完整，致密的染色体边集于核膜内侧，呈明显的凋亡细胞的形态。结论本实验成功地将ｐ２１ＷＡＦ１基因转入到培养的肝细胞中，获得了稳定表达ｐ２１蛋白的细胞株；外源性ｐ２１ＷＡＦ１基因的超表达可引起肝癌细胞自发凋亡。通过对该基因的进一步研究可为肝癌防治提供理论依据。

肝细胞肝癌p21^(WAF1)与p53的表达及其意义

目的 探讨HCC中p2 1WAF1与p5 3的表达及其意义。方法 应用免疫组化法检测 38例手术切取的HCC及其配对癌旁肝组织、5例正常肝组织中p2 1WAF1和p5 3的表达 ,并分析它们与病理形态的关系。结果 p2 1WAF1、p5 3在HCC中的表达明显高于癌旁肝组织 ,p2 1WAF1阳性 14例 (36 8% ) ,p5 3阳性 2 8例 (73 7% ) ,其中两者表达一致 (均阳或均阴 )的 18例 ,表达不一致的 2 0例。癌旁肝组织 1例 (2 6% )、正常肝组织 2例p2 1WAF1呈阳性表达 ,所有癌旁及正常肝组织中均未见p5 3表达。HCC中p2 1WAF1表达与p5 3表达无明显关系 (P >0 0 5 )。在不同组织学分级、有无肝内转移或门脉癌栓之间p2 1WAF1、p5 3表达差异均无显著性 (P >0 0 5 )。结论 p2 1WAF1与p5 3在癌内表达均高于癌旁 ,但两者间并无相关性 ,提示p2 1WAF1表达可能受p5 3依赖和p5

外源性p21^(WAF1/CIP1)基因转染对人胶质瘤细胞生长和细胞周期的影响

目的 :探讨外源性 p2 1 WAF1 /CIP1 基因对胶质瘤细胞生长和细胞周期的影响 .方法 :采用脂质体介导法将p2 1 WAF1 /CIP1 基因质粒转导入人胶质瘤细胞系SHG44细胞 ,然后用电镜、流式细胞仪等技术对细胞形态、生长及细胞周期进行观察 .结果 :酶切电泳和斑点杂交显示p2 1 WAF1 /CIP1 基因成功的转染至SHG44细胞 .转染p2 1 WAF1 /CIP1 基因的细胞光镜及电镜下可见凋亡产生 ;生长速度明显慢于亲代细胞 ,其倍增时间约是对照细胞的二倍 ;细胞周期发生明显改变 ,G1 期明显增多 ,S期明显减少 .结论 :外源性 p2 1 WAF1 /CIP1 基因对SHG44细胞的生长和细胞周期有明显的抑制作用 。

人前列腺癌中P21^(CIP1/WAF1),Rb的表达意义

目的 研究 P2 1CIP1 /WAF 1 及 Rb在人前列腺癌标本中的表达以及两者的相关性 ,以阐述它们与前列腺癌的病理分级及临床分期的关系 .方法 应用免疫组化 SABC法染色技术对 36例前列腺癌标本进行检测 ,观察 P2 1CIP1 /WAF 1 及 Rb在前列腺癌各病理分级 ,临床分期中的表达及相关性 .结果 在 36例人前列腺癌标本中 ,P2 1CIP1 /WAF 1和 Rb免疫组化阳性染色为棕黄色或棕褐色 ,分别定位于细胞质和细胞核 ,其中P2 1CIP1 /WAF 1阳性 19例 ,阳性率 5 2 .8% .Rb阳性 17例 ,阳性率47.2 % .在不同病理分级、临床分期之间差异均有显著性 ,但实验结果未发现 P2 1CIP1 /WAF 1 与 Rb有显著相关性 .结论 P2 1CIP1 /WAF 1 ,Rb的表达与前列腺癌组织的病理学分级、临床分期呈负相关性 ,在前列腺癌分子发病机制中可能涉及到P2 1CIP1 /WAF 1 。

p21^(WAF1)基因多态性及其蛋白表达与乳腺癌组织学分级的关系

目的 探讨p2 1WAF1基因多态性及其蛋白表达与乳腺癌组织学分级的关系。方法 分别采用聚合酶链反应单链构象多态性技术 (PCR -SSCP)和免疫组织化学LSAB法检测 10 0例乳腺癌组织p2 1WAF1基因多态性和蛋白表达。结果 具有p2 1WAF1DNA多态性和无多态性的乳腺癌组织p2 1WAF1蛋白表达阳性分别为 18例 (10 0 % )和 32例 (39 0 % ) ,前者明显高于后者 (P <0 0 1) ;在乳腺癌组织腺管形成 1,2 ,3组中具有p2 1WAF1DNA多态性改变和蛋白阳性的病例数分别为 1(5 0 % ) ,6 (14 0 % ) ,11(2 9 7% )和 7(35 0 % ) ,2 0 (4 6 5 % ) ,2 3(6 2 2 % ) ;在细胞核多形性 1,2 ,3组中具有p2 1WAF1DNA多态性改变和蛋白阳性的病例数分别为 1(5 9% ) ,2 (4 8% ) ,15 (36 6 % )和 5 (2 9 4 % ) ,15(35 7% ) ,30 (73 2 % ) ;在组织学分级 1,2 ,3组中具有p2 1WAF1DNA多态性改变和蛋白阳性的病例数分别为 3(8 8% ) ,4 (8 7% ) ,11(5 5 0 % )和 14 (4 1 2 % ) ,2 1(4 5 7% ) ,15 (75 0 % ) ,在核分裂象计数 1(<5个 ) ,2 (5～ 10个 ) ,3(>11个 )组中p2 1WAF1蛋白阳性例数分别为 7(36 8% ) ,19(4 3 2 % )和 2 4 (6 4 8% )。以上各指标组间比较差异有显著性 ,p2 1WAF1DNA多态性与其蛋白表达呈正相关关系 (P均 <0 0 1)。

p21^(WAF1)基因多态性与胃癌易感性关系

目的:探讨p21WAF1基因缺失与多态性及其意义。方法:采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)法和链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶(SP)法分别检测胃癌中p21WAF1基因缺失与多态性和p21蛋白表达。结果:PCR扩增显示,30例胃癌和45例非胃癌标本均无p21WAF1第二外显子缺失。PCR-RFLP发现胃癌和正常胃粘膜p21第二外显子多态性分别为26.7%(8/30)和8.9%(4/45),有显著性差异(P<0.05),且8例具多态性胃癌标本中的正常胃粘膜亦具有这种多态性。p21蛋白阳性表达率,胃癌为43.3%(13/30),非胃癌为100%(45/45),两者有显著性差异(P<0.05),具p21WAF1基因多态性胃癌为37.5%(3/8),与无多态性胃癌45.5%(10/22)无相关性(P>0.05)。结论:胃癌中p21WAF1基因无缺失,而存在多态性。p21WAF1基因多态性和p21表达与胃癌发生有关,但两者无相关性。

p21^(WAF1)在卵巢癌中的表达及其预后意义

目的 研究卵巢癌组织中 p2 1表达及其预后意义。方法 采用免疫组化检测 75例卵巢癌组织中 p2 1、p5 3表达情况 ,结合临床病理因素探讨 p2 1表达与卵巢癌预后的关系。结果 (1) p2 1与 p5 3表达与不相关 (P=0 .197) ;(2 )p2 1高表达率为 6 1.33% (46 /75 ) ,它与年龄、腹水、FIGO分期、病理类型、分化程度、残瘤大小、初复治等临床病理因素不相关 ;(3)多因素分析表明残留大小 (P=0 .0 316 )、p2 1表达 (P=0 .0 172 )、FIGO分期 (P=0 .0 198)是独立的危险因素。尤其在初治病例中 ,p2 1高表达者预后差。结论 p2

脑胶质瘤组织p21^(WAF1/CIP1)基因表达与p53基因的关系

目的 探讨抑癌基因、细胞周期调控与胶质瘤发生、发展的关系 .方法 采用免疫组织化学技术对 6 3例脑胶质瘤组织及 10例正常脑组织标本中 p2 1WAF1 /CIP1与 p5 3基因的表达状况进行检测 ,并进行相关性分析 .结果 110例正常脑组织均为 p2 1WAF 1 /CIP1阳性表达 ,6 3例脑胶质瘤组织中p2 1WAF1 /CIP1的表达阳性率与肿瘤分化程度呈正相关 ;2 10例正常脑组织中仅 1例为突变型 p5 3弱阳性表达 .脑胶质瘤组织中突变型 p5 3的阳性率与分化程度呈负相关 ;3大部分突变型 p5 3表达阳性标本中 p2 1WAF 1 /CIP1为阴性表达 ,而大部分突变型 p5 3表达阴性的标本中 p2 1WAF 1 /CIP1 为阳性表达 .结论 p2 1WAF1 /CIP1的突变或缺失可能与胶质瘤的发生、发展有关 ,p2 1WAF1 /CIP1表达的减弱或消失可能是由 p5 3突变引起 ,野生型p5 3基因的肿瘤抑制作用可能是通过 p2 1WAF 1 /CIP1

乙型肝炎病毒X基因经p53依赖性与非依赖性途径对p21^(WAF1)表达的影响

背景与目的研究表明,在不同情况下乙型肝炎病毒X基因(HBx)对p21WAF1的表达具有不同的影响,但作用机制仍不清楚。本研究的目的是探讨HBx对p53下游基因p21WAF1的影响。方法通过正、反义野生型p53(wtp53)与HBx单转染及共转染人肝癌细胞株SMMC-7721细胞,以及HBx转染不同内源性p53状态的肝癌细胞株,检测p21WAF1启动子荧光素酶基因表达,并用流式细胞仪观察细胞周期的变化,Westernblot法比较p53、p21WAF1表达水平的变化。结果正、反义wtp53与HBx单转染及共转染SMMC-7721细胞,HBx与正义wtp53共转染组(1.007±0.098)与单转染正义wtp53(0.490±0.012)相比,p21WAF1启动子荧光素酶基因表达明显升高(P<0.05),其余各组HBx均可导致p21WAF1启动子荧光素酶基因表达明显减少(P<0.05)。Westernblot法表明HBx可导致p53的表达增加,但p53表达较低的SMMC-7721细胞转染HBx后p21WAF1蛋白的表达减弱,p21WAF1启动子荧光素酶基因表达(0.053±0.010)也较对照组(0.094±0.013)明显减少(P<0.05),而p53表达较强的HepG2细胞转染HBx后p21WAF1蛋白的表达增强、p21WAF1启动子荧光素酶基因的表达(1.252±0.052)较对照组明显升高(0.767±0.031)(P<0.05)。细胞周期结果表明瞬时转染HBx的SMMC-7721和Hep3B细胞停滞在G0-G1期细胞数(42.31%、36.96%

人骨肉瘤p21^(WAF1)基因表达及其DNA序列分析

目的 检测人骨肉瘤组织中 p2 1WAF1基因的表达及其DNA序列变化。方法 采用原位杂交及免疫组化法检测p2 1WAF1mRNA及p2 1蛋白的表达 ,SSCP方法检测骨肉瘤 p2 1WAF1exon3DNA突变 ,双脱氧核苷酸末端终止法进行DNA的直接测序。结果 ①免疫组织化学结果显示 :p2 1蛋白表达阳性率在骨肉瘤中为17 7% (8/ 4 5 ) ;在骨纤维结构不良中为 5 0 % (5 / 10 )。二者的差异有统计学意义 (P <0 0 5 ) ;②原位杂交结果显示 :p2 1WAF1mRNA表达阳性率在骨肉瘤中为 4 2 % (19/ 4 5 ) ;在骨纤维结构不良中为 80 % (8/ 10 )。二者的差异有统计学意义 (P <0 0 5 ) ;③DNA序列分析结果显示 :骨肉瘤中 p2 1WAF1exon3的 6 0 9位碱基处发生C→T突变 ,突变率为 4 4 4 % (16 / 36 )。结论 ①随着骨肿瘤恶性度的升高 ,p2 1WAF1mRNA及p2 1蛋白的表达下降。②p2 1WAF1mRNA在骨肉瘤中的表达对预后有影响。③该实验对中国人群骨肉瘤中的 p2 1WAF1基因的DNA多态性位点进行了新的定位 。

p21^(WAF1)在丁酸钠诱导的人成纤维细胞凋亡中的表现

用丁酸钠 (NaBu)诱导了人胚肺二倍体成纤维细胞凋亡 (2BS) ,检测其诱导过程中凋亡相关基因的表达变化 ,结果表明 ,p2 1WAF1的表达在凋亡发生前即有明显下降 ,并持续至凋亡发生时 ,bcl 2的表达仅在凋亡发生时有所下降 ,c myc和c fos的表达有所上升 ,而 p5 3和HER 2的表达无明显变化 .用稳定转染了不同长度p2 1WAF1启动子片段和下游绿色荧光蛋白 (GFP)报告基因的 2BS WP系列细胞进一步研究发现 ,其GFP的表达水平在NaBu诱导过程中下降 ,主要调控区域为 p2 1WAF1启动子的TATAbox上游 0～ - 80 0bp .说明NaBu诱导的人胚肺二倍体成纤维细胞凋亡与p2 1WAF1启动子的转录活性下降与密切相关 ,并且可能不依赖于p5 3.

腺病毒介导的P21^(WAF1/CIP1)基因诱导血管平滑肌细胞凋亡

目的 应用重组腺病毒载体介导的P2 1WAF1/CIP1基因转染血管平滑肌细胞 (VSMC) ,探讨P2 1WAF1/CIP1基因对平滑肌细胞凋亡的诱导作用。材料与方法 P2 1WAF1/CIP1的重组腺病毒载体转染体外培养的猪主动脉平滑肌细胞 ,应用RT PCR检测外源性P2 1WAF1/CIP1基因的表达 ,并通过细胞形态、原位细胞凋亡分析、流式细胞仪和细胞生长曲线等方法观察P2 1诱导VSMC凋亡 ,抑制VSMC增殖的情况。结果 P2 1WAF1/CIP1基因的重组腺病毒载体可以有效地转入平滑肌细胞中 ,诱导平滑肌细胞凋亡 ,并能显著地抑制平滑肌细胞增殖。结论 外源性P2 1WAF1/CIP1基因转移可以诱导平滑肌细胞凋亡 ,显著地抑制平滑肌细胞增殖。

p15^(INK4B)和p21^(WAF1)基因联合转染对人食管鳞癌细胞系EC109的协同抑制作用

目的:探讨p15INK4B(p15)和p21WAF1(p21)基因联合转染对人食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖和凋亡的影响.方法:脂质体介导pcDNA3.1(+)-p15和pcDNA3.1(+)-p21转染EC109细胞,稳定筛选后用RT-PCR检测转染细胞p15与p21基因mRNA表达,Western blot检测转染细胞P15和P21蛋白的表达.用MTT法和透射电镜检测p15和p21基因分别及联合转染对EC109细胞增殖与凋亡的影响,流式细胞仪检测EC109细胞周期分布与凋亡率.结果:p15和p21转染组EC109细胞生长速度低于空载体组与未转染组,联合转染组与二者单独转染组相比,亦明显抑制EC109细胞体外生长速度.p15和p21转染组EC109细胞发生G1/S阻滞,G1期细胞比例显著高于空载体组和未转染组,S期则显著降低(G1期:60.52%±3.75%,63.12%±2.89%vs42.17%±5.30%,41.38%±6.54%;S期:22.67%±1.25%,17.96%±2.03%vs30.96%±3.33%,36.05%±1.78%,均P<0.01),并出现凋亡峰,透射电镜亦发现p15和p21转染组发生细胞凋亡,联合转染组发生更为明显的G1/S阻滞,G1期比例显著升高、S期比例明显降低(G1期:72.83%±2.31%vs60.52%±3.75%,63.12%±2.89%;S期:13.59%±2.59%vs22.67%±1.25%,17.96%±2.03%,均P<0.05),凋亡率明显升高(21.21%±1.78%vs4.32±1.74%,10.83%±2.40%,均P<0.01).结论:p15和p21基因联合转染在体外可以进一步增强对人食管鳞癌EC109细胞的抑制与诱导凋亡作用.

细胞周期蛋白D1和p21^(WAF1/CIP1)在喉癌癌变过程中表达及其意义

目的 :研究喉癌变过程中细胞周期蛋白 (cyclin)D1和p2 1WAF1/CIP1表达及其临床病理学意义。方法 :用免疫组化检测 2 0例正常黏膜、 40例不典型增生病变和 6 0例喉癌组织中cyclinD1和p2 1WAF1/CIP1的表达。结果 :①cyclinD1和p2 1WAF1/CIP1阳性表达定位于细胞核。②在喉癌癌变过程中 ,喉正常黏膜、不典型增生病变和喉癌中cyclinD1阳性表达率分别为 :5 0 % (1/ 2 0 ) ,30 ,0 % (12 / 40 ) ,5 3 3% (32 / 6 0 ) (P <0 0 0 1) ;p2 1WAF1/CIP1阳性表达率分别为 :95 0 % (19/ 2 0 ) ,75 0 % (30 / 40 )和 6 3 3% (38/ 6 0 ) (P <0 0 5 )。③p2 1WAF1/CIP1在高、中和低分化的喉癌中阳性表达率分别为 :76 2 % (16 / 2 1) ,6 5 5 % (19/ 2 9)和 30 0 % (3/ 10 ) (P <0 0 5 ) ;p2 1WAF1/CIP1阳性表达与肿瘤细胞的分化有关。④cyclinD1和p2 1WAF1/CIP1阳性表达显著相关。结论 :①喉癌癌变过程中cyclinD1阳性表达率呈逐渐升高的趋势 ,而p2 1WAF1/CIP1阳性表达率呈呈逐渐降低的趋势。②cyclinD1异常表达是喉癌发生中早期分子事件。③p2 1WAF1/CIP1表达与喉癌细胞分化程度有关。④cyclinD1和p2

p21 WAF1基因多态性与胃癌的关系

目的 探讨p2 1WAF1基因缺失与多态性及其在胃癌发生中的意义。方法 采用聚合酶链反应 -限制性片断长度多态性 (PCR -RFLP)法检测胃癌中p2 1WAF1基因缺失与多态性。结果 PCR扩增显示 ,30例胃癌和 4 5例非胃癌标本均无p2 1WAF1第 2外显子缺失。PCR -RFLP发现 ,胃癌和非胃癌p2 1WAF1第 2外显子多态性分别为 2 7% ( 8 30 )和 9% ( 4 4 5 ) ,差异有显著性 ( χ2 =4 .2 3,P <0 .0 5 ) ,且 8例具多态性胃癌标本中的正常胃粘膜亦具有这种多态性。结论 胃癌中p2 1WAF1基因无缺失 ,而存在多态性 ,p2 1WAF1基因多态性与胃癌发生有关。

喉鳞癌中P21^(WAF1/CIP1)、C-erbB-2的表达及其临床意义

目的:研究喉鳞癌组织中P21WAF1/CIP1、C-erbB-2的表达,探讨它们在喉鳞癌的增殖、侵袭、转移中的作用。方法:选取60例喉鳞癌作为研究对象,15例声带息肉组织作为对照,所有标本均切片作HE染色。用链霉素亲生物素-过氧化酶法(S-P法)研究肿瘤及声带息肉组织中P21WAF1/CIP1和C-erbB-2蛋白的表达,显微镜下计数阳性细胞,并分析阳性细胞百分率。结果:(1)P21WAF1/CIP1在声带息肉组织中低表达,在喉癌组织中高表达,二者阳性率差异有显著性(P<0．05);P21WAF1/CIP1在喉癌组织中的表达与肿瘤组织分级(P<0．05)及临床分期(P<0．05)有关,与年龄、性别、肿瘤部位及有无淋巴结转移无显著相关性;(2)C-erbB-2在声带息肉组织中低表达,在喉鳞癌中高表达,两者差异有显著性(P<0．05);C-erbB-2在喉癌组织中的表达与各临床病理因素无显著相关;(3)经Spearman等级相关分析,P21WAF1/CIP1、C-erbB-2在喉鳞癌中表达呈正相关(P<0．05)。结论:P21WAF1/CIP1可以作为一种独立的预后预测因子;C-erbB-2在某种程度上反应了肿瘤的生长特性,但不能判断喉癌预后;在喉鳞癌中P21WAF1/CIP1和C-erbB-2间存在正调控机制。

原发性肝细胞癌中p53、p16和p21^(WAF1)蛋白表达及临床意义

目的:研究p5 3、p16和p2 1WAF 1蛋白在原发性肝细胞癌中的表达及临床意义。方法:应用免疫组织化学S- P法检测原发性肝细胞癌4 1例,癌旁组织30例中p5 3、p16和p2 1WAF1 蛋白的表达。结果:p5 3蛋白的表达在PHC中显著高于癌旁(P<0 .0 1) ,其表达与病理学分级、有无肝内或门静脉转移有显著相关性(P<0 .0 5 )。p16蛋白的表达在PHC中显著低于癌旁(P<0 .0 1) ,其表达与病理学分级显著相关(P<0 .0 5 )。p2 1WAF 1 蛋白的表达在PHC中显著高于癌旁(P<0 .0 1) ,而在不同临床病理特征间差异无显著性。结论:p5 3、p16和p2 1WAF 1蛋白的表达情况与原发性肝细胞癌的发生、发展及恶性程度有关。

细菌内同源重组构建人p21^(WAF1)基因重组腺病毒

目的构建人p21WAF1基因重组腺病毒载体,并在293细胞中包装制备重组腺病毒。方法将人p21WAF1基因亚克隆连接到腺病毒转移质粒pshuttle-cmv,得到阳性重组转移质粒psh-p21。先将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1转化BJ5183菌,筛选得到AdBJ5183菌,再将PmeⅠ线性化的psh-p21转化AdBJ5183菌,经细菌内同源重组法构建重组腺病毒质粒pAdp21。经PacⅠ和BstXⅠ酶切及PCR鉴定,将正确的重组腺病毒质粒pAdp21转染293细胞包装病毒,用RT-PCR和PCR鉴定重组腺病毒及其稳定性。结果所构建的重组腺病毒质粒pAdp21,经PCR鉴定,可扩增出约500bp的片段,与预期大小相符。转染293细胞可包装成p21WAF1基因重组腺病毒,经电镜观察,具有典型的腺病毒特征。结论已成功地构建了重组腺病毒质粒pAdp21,并制备出重组腺病毒rAdp21。