青黛复方对K-562细胞Bcr/Abl融合基因及p210蛋白表达的影响

目的探讨青黛复方对K-562细胞调亡、Bcr/Abl融合基因及p210蛋白的影响。方法以不同浓度青黛复方(0、2.5、5、7.5、10和20mg/ml)处理K-562细胞24h后,采用半定量RT-PCR技术检测各组Bcr/Abl融合基因的表达,Western blot技术检测p210Bcr/Abl蛋白表达,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果随药物作用浓度升高,K-562细胞凋亡率呈浓度依赖性增加;Bcr/Abl在mRNA和蛋白水平均呈浓度依赖性下调,尤以10mg/ml和20mg/ml处理组更为显著。结论青黛复方能部分抑制K-562细胞Bcr/Abl的表达并呈浓度依赖关系,其对慢性髓细胞性白血病(CML)的疗效可能是通过促进细胞凋亡而实现的。

青蒿琥酯对原代慢性粒细胞白血病细胞生长抑制、凋亡诱导及bcr/abl融合基因、P210蛋白、磷酸化SHP-2蛋白表达的影响

目的探讨青蒿琥酯对原代慢性粒细胞白血病细胞生长抑制、凋亡诱导及bcr/abl融合基因、P210蛋白、Src同源区2含域磷酸酶-2(SHP-2)蛋白磷酸化的影响。方法分离培养原代慢性粒细胞白血病细胞,采用不同浓度青蒿琥酯(0、5、10、20μg·mL^(-1))进行干预,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞生长抑制情况;细胞计数法检测细胞生存情况;罗丹明123染色法检测细胞线粒体膜电位的变化;电镜观察细胞超微结构的变化;流式细胞术(FCM)检测青蒿琥酯对细胞凋亡及胀亡的影响;荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测bcr/abl融合基因mRNA表达;Western Blot检测P210、SHP-2及磷酸化SHP-2蛋白表达。结果青蒿琥酯可抑制原代慢性粒细胞白血病细胞的生长,降低细胞存活率和线粒体膜电位水平(P<0.05),且与药物浓度和时间呈现一定的依赖性;不同浓度药物和不同作用时间可导致细胞凋亡率及胀亡率明显升高(P<0.01),同时可降低bcr/abl融合基因mRNA、P210、SHP-2和磷酸化SHP-2蛋白的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论青蒿琥酯可通过抑制原代慢性粒细胞白血病细胞的生长,促进其凋亡和胀亡,以及降低bcr/abl融合基因mRNA、P210、SHP-2、磷酸化SHP-2蛋白在原代慢性粒细胞白血病细胞中的表达水平,达到治疗慢性粒细胞白血病(CML)的目的。

慢病毒介导shRNA稳定干扰P210^(bcr/abl)基因表达的体内外研究

P210bcr/abl融合基因在慢性髓系白血病(CML)发生、发展中起重要作用。针对P210bcr/abl融合基因的小分子抑制剂(如伊马替尼)治疗CML非常有效,但容易产生耐药性。P210bcr/abl基因的融合区为RNA干扰其表达提供了一个特异性靶点。本研究通过病毒载体建立能同时表达P210bcr/ablshRNA和P210bcr/abl基因的BaF3细胞系,并探讨慢病毒介导的shRNA对P210bcr/abl基因表达的作用。用荧光显微镜检测慢病毒对BaF3细胞的感染率,用台盼蓝拒染法检测细胞的增殖能力;用RT-PCR和Western blot分别检测P210bcr/ablmRNA和蛋白的表达。结果发现,P210bcr/ablshRNA能使BaF3-P210bcr/abl细胞中的P210bcr/ablmRNA及蛋白表达明显下降,并且能增强BaF3-P210bcr/abl细胞对伊马替尼的敏感性,与不表达P210bcr/ablshRNA的BaF3-P210bcr/abl细胞相比,伊马替尼对该细胞系的IC50下降50%以上。将该细胞由尾静脉移植到受致死剂量照射的裸小鼠体内,移植该细胞的小鼠生存期较移植BaF3-P210bcr/abl细胞的小鼠生存期明显延长。结论:稳定表达针对P210bcr/abl基因融合区的shRNA可能增强CML常规治疗的效果。

P210^(bcr/abl)融合蛋白的形成机制及作用的研究进展

慢性粒细胞白血病 ( CML )是以费城染色体 ( Ph)为特征的多潜能干细胞异常的骨髓恶性增殖性疾病。 Ph染色体是由 9号染色体 c-abl癌基因易位到 2 2号染色体的 bcr基因处 ,形成 bcr/abl融合基因 ,该基因经转录后 ,编码 8.5 kb的嵌合体 m RNA,翻译成分子量为 2 10 k D的蛋白质 ,即 P2 10 bcr/abl融合蛋白 ( P2 10 bcr/abl) ,该蛋白具有异常活跃的酪氨酸激酶活性 ( PTK) ,并活化细胞内相关的信号转导通路从而调控细胞的分裂与增殖 ,抑制细胞的凋亡。 P2 10 bcr/abl是 CML的特征性标志。因此 ,研究 P2 10 bcr/abl对研究与治疗 CML具有重要的意义。有关 P2 10 bcr/abl的形成机制及作用已部分阐明 ,现做综述如下。

人树突状细胞与K562细胞的融合以及体外诱导p210蛋白特异性CTL的研究(英文)

目的 :探讨人外周血单核细胞来源的树突状细胞 (Dendriticcells ,DC)与人白血病细胞K562融合后 ,能否诱导出 p210蛋白特异性的CTL ,为DC疫苗的临床应用提供理论基础。方法 :外周血来源的贴附单核细胞 ,在人GM CSF(1000U/ml)和IL 4(1000U/ml)作用下 ,培养5～7天后 ,与人白血病细胞K562进行融合 ,融合细胞再与自体的淋巴细胞共同孵育10～14天 ,采用乳酸脱氢酶释放试验分析其对 p210蛋白阳性细胞的杀伤效果。为显示融合效果 ,对照试验组K562细胞用绿色荧光蛋白 (GFP)进行标记。结果 :贴附的单核细胞在GM CSF和IL 4作用下 ,培养5天后 ,约有70 %的DC产生 ,流式细胞仪分析表明 ,这些细胞为HLA DR、HLA A ,B ,C以及CD1α阳性 ,并高表达共刺激分子CD80和CD86。DC与GFP标记的K562细胞融合24h后 ,表达GFP蛋白的细胞中约有60 %呈现出典型的DC形态特征。乳酸脱氢酶释放试验结果表明 ,融合细胞能激活淋巴细胞产生 p210蛋白特异性的CTL。结论 :树突状细胞与肿瘤细胞融合后 ,能诱导出肿瘤特异性的CTL ,显示出DC疫苗抗肿瘤作用的广泛前景。

汉防己甲素联合屈洛昔芬对K562细胞bcr/abl表达的影响

为了研究汉防己甲素 (Tet)联合屈洛昔芬 (DRL)对K5 6 2细胞株凋亡相关因子bcr ablmRNA及蛋白表达的影响 ,Tet(1μmol L)和DRL(5 μmol L)单用及联合应用于K5 6 2细胞一定时间后 ,分别采用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)和Westernblot方法检测K5 6 2细胞bcr ablmRNA和蛋白表达的变化。结果表明 :Tet和DRL单独应用对K5 6 2细胞bcr ablmRNA及蛋白表达均无影响 ,两药联合应用于 4 8小时K5 6 2细胞bcr ablmRNA表达开始下调 ,K5 6 2细胞P2 1 0 BCR ABL蛋白表达于 72小时开始下调。结论 :Tet和DRL联合应用可下调K5 6 2细胞bcr abl的表达 ,这可能是两药联用逆转耐药的机制之一。

靶向bcr/abl融合基因的RNAi对慢性粒细胞白血病K562增殖活性的影响

构建含bcr/abl RNAi慢病毒重组质粒载体并包装病毒,转染K562细胞,通过Real-time PCR及Western blotting验证干扰效应。采用CCK-8法、软琼脂细胞集落形成实验检测RNAi对K562细胞的增殖影响作用。结果表明,慢病毒介导bcr/abl基因RNAi明显下调K562细胞中bcr/abl mRNA及P210bcr/abl融合蛋白,显著抑制了K562细胞的增殖,这说明靶向bcr/abl融合基因的RNAi有望成为治疗慢性粒细胞白血病的有效方法。

定量检测bcr—abl（P210）转录本水平多中心比对研究

目的探讨国内不同医院bcr—abl（P210）转录本水平定量检测值的可比性。方法2010年4月至2011年8月，10家医院进行了4次样本派发以比对bcr—abl（P210）转录本水平定量检测值。由北京大学人民医院统一制备4个梯度（10倍系列稀释）的bcr—abl（P210）转录本水平细胞样本，加入TRIzol中，每个梯度每家医院各派发3份平行样品，每份样品细胞数为8×10^6，各单位分别按照自身实验方案采用实时定量PCR技术检测bcr—abl转录本水平。应用回归方程计算各单位转换系数（CF）。结果每次比对，各医院检测结果之间均存在差异。除个别医院外，各医院检测结果总体一致并与细胞稀释度一致。各家医院的CF均存在波动，其中3家医院比较稳定，4次比对CF范围分别为2．8～5．2、1．2—2．8和2．2～6．8；两家医院的CF变化较大，范围分别为0．76～7．0和2．1～18．7；三家医院各有1～2次检测结果明显偏离实际水平而无法计算出CF，能够算出的CF范围分别为1．9～19．2、3．6～7．6和0．18～14．7；一家医院因为中途更换主要试剂只有2次比对的CF（3．3和5．0）。结论通过比对获得CF能够实现不同医院bcr—abl转录本水平检测值的可比性。检测体系稳定可靠是获得准确CF的前提。

人参皂甙Rg1对人慢性粒细胞白血病p210 bcr/abl融合蛋白表达的影响

目的:研究人参皂甙Rg1对人慢性髓细胞白血病敏感株K562细胞p210bcr/abl融合蛋白表达的影响。方法:体外培养K562细胞,经人参皂甙Rg1处理不同时间后,用流式细胞仪检测细胞凋亡;用Western印迹技术检测细胞内p210bcr/abl融合蛋白表达。结果:人参皂甙Rg1可诱导细胞凋亡,凋亡率并随时间延长而升高;人参皂甙Rg1可下调p210bcr/abl蛋白表达量,并具时间依赖性。结论:人参皂甙Rg1可通过降低p210bcr/abl蛋白水平来诱导K562细胞凋亡,达到有效抗人慢性髓细胞白血病的效果。

趋化因子MIP-1α和MCP-1及其受体CCR-1和CCR-2在慢性髓系白血病细胞中的表达

本文旨在研究MIP-1α和MCP-1及其受体CCR-1和CCR-2在慢性髓系白血病细胞中的表达,同时观察P210bcr/abl融合蛋白中酪氨酸激酶对MIP-1α和MCP-1及其受体CCR-1和CCR-2mRNA表达的影响。在bcr/abl融合基因阴性和阳性慢性髓系白血病细胞中,采用半定量RT-PCR方法检测MIP-1α、MCP-1、CCR-1、CCR-2mRNA的表达水平。结果表明MIP-1αmRNA和CCR-1mRNA在bcr/abl融合基因阳性细胞中不表达,但在bcr/abl融合基因阴性细胞中表达,而MCP-1mRNA和CCR-2mRNA在bcr/abl融合基因阳性和阴性细胞中均不表达。当P210bcr/abl融合蛋白中酪氨酸激酶被抑制后,MIP-1α和CCR-1的mRNA表达水平恢复至正常水平。结论:P210bcr/abl融合蛋白抑制慢性髓系白血病细胞中MIP-1α和CCR-1mRNA的表达,但对MCP-1和CCR-2mRNA的表达无影响。

慢性髓系白血病细胞中SphK-1/S1P信号通路的初步研究

慢性髓系白血病(CML)是一种以髓系细胞受累为主的多能造血干细胞的克隆性疾病。为探讨SphK-1/S1P信号通路元件在CML细胞中的表达情况,研究P210bcr/abl是否涉及到SphK-1/S1P信号通路,首先采用RT-PCR检测bcr/abl阳性的K562细胞和bcr/abl阳性的原代CML细胞中SphK-1和S1P受体mRNA的表达。进一步利用P210bcr/abl特异抑制剂甲磺酸伊马替尼处理bcr/abl阳性的K562细胞和CML原代细胞,然后通过32P-ATP掺入法测定细胞内SphK-1的酶活性。结果表明:K562细胞经2.5μmol/L甲磺酸伊马替尼处理0.5、2、6、24和48小时后,对SphK-1活性抑制强度分别为0.007%、38.9%、34.6%、28.1%和76.1%;CML原代细胞在使用2.5μmol/L甲磺酸伊马替尼处理后SphK-1活性较对照下降(16.8-41.9)%。结论:CML细胞中存在SphK-1和S1P的表达,P210bcr/abl具有激活SphK-1的作用。

81例Ph染色体阳性急性淋巴细胞白血病患者的遗传学特征及疗效分析

目的:研究Ph染色体阳性急性淋巴细胞白血病(Ph+ALL)患者的遗传学特征,分析影响患者疾病缓解和复发以及患者生存状况的因素。方法:收集2002年1月至2020年5月期间于青大附院初诊的Ph+ALL患者共81例,收集患者的一般资料、遗传学相关检查、治疗方案等,分析不同遗传学特点和不同治疗方案患者的病情转归及生存状况。结果:81例患者中有46例(56.79%)患者为P210基因阳性,有34例(41.98%)患者为P190基因阳性,1例(1.23%)患者同时存在P190和P210基因阳性。在随访期内发生ABL激酶突变的患者有15例(18.25%),P210融合基因组的突变率为10.87%,P190融合基因组的突变率为29.41%,二者有显著性统计学差异(P = 0.036)。有42例患者在第一次诱导缓解化疗中加用酪氨酸激酶抑制剂(TKIs),该组患者的缓解率为69.05%,有39例患者在第一次诱导缓解治疗中单用传统化疗方案,缓解率为43.59%,二者有显著性统计学差异(P = 0.021)。随访期内获得完全缓解的患者有69例,其中伊马替尼治疗组的复发率为61.70%,达沙替尼治疗组的复发率为31.82%,二者有显著性统计学差异(P = 0.021)。根据患者的治疗方案进行分组,比较各组患者的生存曲线,其中伊马替尼治疗组和达沙替尼治疗组(P = 0.003)、随访期内行造血干细胞移植(HSCT)组和未移植组(P = 0.010)的生存曲线不同。结论:在Ph+ALL患者中,P210比P190更多见。BCR/ABL融合基因为P190可能为ABL激酶突变的危险因素。第一次诱导缓解化疗即加用TKIs的患者比单用传统化疗方案治疗的患者有更高的缓解率。伊马替尼治疗组的复发率高于达沙替尼治疗组的复发率。选用达沙替尼治疗、完全缓解后行HSCT治疗可以改善患者的生存状况。

木犀草素对白血病K562/ADR细胞多药耐药的逆转作用及机制研究

目的 探究木犀草素(Lut)对慢性髓系白血病K562/ADR细胞多药耐药性的逆转作用及其机制。方法K562和K562/ADR细胞经不同浓度阿霉素(ADR)处理24 h后,采用CCK-8实验检测K562/ADR细胞耐药倍数。Lut单独或联合ADR作用K562/ADR细胞24 h后,采用CCK-8实验检测Lut的细胞毒性及对ADR的增敏作用。取对数生长期K562/ADR细胞分为0μmol/L Lut组、2μmol/L Lut组、4μmol/L Lut组,采用流式细胞术检测细胞内ADR蓄积量的变化;RT-PCR法和Western blot法分别检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶pi(GST-pi)mRNA和蛋白的表达;谷胱甘肽(GSH)试剂盒检测细胞内GSH的含量。结果 与K562细胞相比,K562/ADR细胞株对ADR具有明显的耐药性,耐药倍数为53.69倍。与0μmol/L Lut相比,不同浓度Lut作用于K562/ADR细胞后,细胞生长均受到不同程度的抑制(P<0.05),其中2、4μmol/L Lut对K562/ADR细胞的增殖抑制率<10%,为无毒性的Lut浓度。与0μmol/L Lut组相比,2、4μmol/L Lut组可明显增强ADR对K562/ADR的细胞增殖抑制率,增加细胞内ADR蓄积量,提高逆转耐药倍数,降低细胞内GSH含量,下调细胞中MRP1、P-gp、GST-pi、Nrf2 mRNA及蛋白的表达(P<0.05);且4μmol/L Lut作用效果较2μmol/L Lut更显著。结论Lut可抑制K562/ADR细胞增殖,逆转其对ADR的耐药性,其机制可能与Lut下调Nrf2、MRP1、P-gp、GST-pi表达,进而增加细胞内ADR蓄积量有关。

硒化壳聚糖对慢性粒细胞白血病K562细胞bcr/abl融合基因表达的影响

目的:研究硒化壳聚糖对慢性粒细胞白血病K562细胞增殖的影响,探讨这种作用与bcr/abl融合基因表达的关系。方法:应用磺酰罗丹明B(SRB)法和集落形成法检测硒化壳聚糖对细胞增殖的影响;应用Western blot(免疫印迹)法检测细胞P210bcr/abl融合蛋白含量;应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测bcr/abl融合基因信使RNA(mRNA)水平。结果:50,100,200 mg·L-1硒化壳聚糖作用K562细胞48 h可明显抑制细胞增殖和降低其存活率(P<0.05,P<0.01);50,100,200 mg·L-1硒化壳聚糖作用48 h或200 mg·L-1硒化壳聚糖作用12,24,48 h后K562细胞内P210bcr/abl蛋白含量呈时间和剂量依赖性下降(P<0.05,P<0.01),而bcr/abl融合基因mRNA水平未见明显改变。结论:硒化壳聚糖可通过下调bcr/abl融合基因表达的P210bcr/abl融合蛋白对K562细胞增殖产生抑制作用。

bcr—abl基因真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

目的构建慢性粒细胞白血病bcr—abl融合基因的真核表达载体，并在哺乳动物细胞COS-7中高效表达。方法提取慢性粒细胞白血病K562细胞的RNA，经RT—PCR技术扩增得到bcr—abl基因后，将其克隆人真核表达载体pEGFP—N3中，并进行PCR和酶切鉴定。鉴定为阳性的克隆，再进一步进行测序分析。将构建成功的真核表达载体转入COS-7细胞中进行瞬时表达。结果反转录PCR扩增后的产物，经琼脂糖凝胶电泳可以在约874bp处看见一特异性的条带，序列分析证明扩增产物与GeneBank中的bcr-abl基因序列相同。将pEGFP—bcr-abl真核表达载体转入COS-7细胞后，经RT—PCR、Westernblotting检测证明表达产物正确。结论成功构建了含有bcr-abl融合基因的真核表达质粒，从而为进一步研究其结构和功能，寻找CML诊疗的新方法奠定了基础。

慢性粒细胞白血病的基因治疗策略

BCR/ABL融合基因及其表达产物p210^(BCR/ABL)对慢性粒细胞白血病(CML)的发生具有决定性作用。近年来对CML分子发病机制的深入研究,为治疗CML提供了多种思路,涌现出了包括生物治疗在内的许多新疗法,有些已进入临床试验或临床治疗。本文概述了针对CML BCR/ABL信号转导途径的各种基因治疗策略,大致可分为以下四类:抑制癌基因表达,抑制BCR/ABL信号通路下游重要分子基因表达,阻抑BCR/ABL蛋白产物的功能,免疫治疗。

RHBDD1基因在慢性髓系白血病患者骨髓细胞中的表达及临床意义

本研究旨在检测RHBDD1(Rhomboid domain containing 1)基因在慢性髓系白血病(CML)患者骨髓细胞中的表达水平并初步探讨其临床意义。采用实时定量PCR的方法检测RHBDD1在正常人和CML患者骨髓单个核细胞中的相对表达水平。结果表明,CML患者RHBDD1的表达水平明显高于正常人;BCR/ABL p210表达阴性的患者RHBDD1的表达水平显著高于BCR/ABL p210阳性的患者;≥50岁的患者RHBDD1表达水平低于<50岁的患者;RHBDD1的表达水平与患者的性别无明显相关性。结论:RHBDD1基因可能参与了CML的发生与发展,尤其在BCR/ABL p210阴性患者的发病中可能发挥重要作用。

小檗胺对人慢性粒细胞白血病细胞发生凋亡的诱导机制研究

目的研究新型p210 bcr／aN抑制剂小檗胺诱导人慢性粒细胞白血病细胞凋亡分子的机制。方法培养表达内源性p210 bcr／abl蛋白的Ph+人慢性粒细胞白血病细胞系K562,用小檗胺按指定时间和剂量干预细胞。应用膜联蛋白荧光素(Annexin-V-Fluos)／碘化丙啶(propidium iodide, PI)试剂盒和流式细胞术定量分析凋亡细胞百分比;用cytoperm／cytofix和天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白水解酶-3-McAb-PE定量检测含活化天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)细胞百分比;以免疫共沉淀技术(c-abl抗体)和Western印迹[p-Tyr(pY99)抗体]定量分析p2m bcr／abl蛋白磷酸化;p210 bcr／abl蛋白总量直接用Western印迹(c-abl抗体)检测;H8p90和Hsp70等分子伴侣蛋白水平的变化用Western印迹(Hsp90和Hsp70抗体)。结果48 h IC50浓度小檗胺(8μg／ml)作用48 h后,45．69％K562白血病细胞表达活化的Caspase-3凋亡分子和48．43％白血病细胞发生凋亡。免疫印迹和免疫共沉淀结果显示,低剂量小檗胺可明显抑制白血病细胞内p210 bcr／abl磷酸化:8μg／ml浓度小檗胺处理6 h后,白血病细胞磷酸化p210 bcr／abl蛋白含量仅为对照组的8．41％,而p210 bcr／abl蛋白总量并无变化。小檗胺还能直接下调p210 bcr／abl分子伴侣Hsp90蛋白水平:白血病细胞经8μg/ml浓度小檗胺处理24 h时的Hsp90水平只有对照组的18．37％,而且对能诱导白血病细胞产生凋亡抵抗的Hsp70蛋白水平影响不明显。结论(1)小檗胺是一种新型p210 bcr／abl蛋白磷酸化抑制剂,能通过抑制p210 bcr／abl蛋白磷酸化和诱导Caspase-3通路介导的Ph+白血病细胞发生凋亡; (2)与已知Hsp90抑制剂格尔德霉素(GA)不同,小檗胺能直接下调Hsp90蛋白水平,而对与肿瘤细胞凋亡抵抗有关的Hsp70蛋白表达影响不大,这提示小檗胺可能还是一种新型蛋白分子伴侣Hsp90抑制剂,值得进一步研究。

异硫氰酸苯己酯对K562／G01细胞伊马替尼耐药性的影响

目的体外观察异硫氰酸苯己酯（PHI）对人慢性髓性白血病细胞株K562／G01细胞伊马替尼耐药性的影响，探讨其可能的机制。方法采用MTT法检测不同浓度的PHI和伊马替尼单独或联合处理对K562／G01细胞增殖的抑制作用。流式细胞术检测不同浓度的PHI和（或）伊马替尼作用下K562／G01细胞的凋亡率。Westernblot检测PHI处理K562／G01细胞后P—gP、P210^bcr-abl蛋白、磷酸化P210^bcr-abl蛋白（p-P210^bcr-abl）表达水平的变化。结果PHI单独处理24h可抑制K562／G01细胞增殖，诱导细胞凋亡。PHI浓度由0增至40Ixmol／L，细胞增殖抑制率由0增至（51．22-4-1．41）％，凋亡率由（3．764-1．46）％增至（35．354-3．70）％。浓度分别为10、20、40txmol／L的PHI与不同浓度伊马替尼联合处理后，伊马替尼的IC50分别为（10．494-1．24）、（6．334-1．42）、（0．854-0．17）μmoL／L。PHI20txmol／L和浓度为10、20Ixmol／L的伊马替尼分别共同作用24h后，K562／G01细胞凋亡率分别为（43．624-4．23）％和（55．414-4．35）％，较单用伊马替尼组及单用PHI组均明显升高。PHI浓度由0增至40txmol／L分别作用7h后，K562／G01细胞P210^bcr-abl／β-actin比值由0．9444-0．034降至0．392±0．025，p-P210^bcr-abl／β-actin比值由0．9064-0．019降至0．3614-0．021，但P—gP表达无明显变化。结论PHI能抑制K562／G01细胞增殖，诱导细胞凋亡。PHI与伊马替尼联合有协同作用，可部分逆转细胞对伊马替尼的耐药，其机制可能与抑制P210^bcr-abl和p-P210^bcr-abl蛋白表达有关。