NF-κB p50、NF-κB p65在甲状腺癌中的表达及意义

目的探讨NF-κB p50、NF-κB p65蛋白在甲状腺癌、甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿、正常甲状腺组织中的表达及二者与甲状腺癌的浸润、转移的关系。方法采用免疫组织化学染色法检测NF-κB p50和NF-κB p65蛋白在甲状腺癌组(60例乳头状癌、20例滤泡癌和20例髓样癌)及非甲状腺癌组(30例健康者、30例甲状腺腺瘤、30例结节性甲状腺肿)的甲状腺组织的表达,并检测NF-κB p50和NF-κB p65蛋白的表达的相关性。结果 NF-κB p50蛋白在甲状腺癌、甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿及健康者甲状腺组织中的阳性率分别为73.00%、30.00%、33.33%及6.67%。NF-κB p50蛋白在甲状腺非癌组织的阳性率明显低于癌组织。NF-κB p65蛋白在甲状腺癌、甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿及健康者甲状腺组织中的阳性率分别为74.00%、36.67%、40.00%及10.00%。NF-κB p65蛋白在甲状腺非癌组织的阳性率明显低于癌组织。NF-κB p50蛋白在肿瘤直径≥1.0 cm组及<1.0 cm组的阳性率分别为79.41%和56.25%,差异均有统计学意义(P<0.05);NF-κB p65蛋白在肿瘤直径≥1.0 cm组及<1.0 cm组阳性率分别为94.12%和81.25%,差异均有统计学意义(P<0.05)。NF-κB p50蛋白和NF-κB p65蛋白在淋巴结转移组的阳性率分别为85.19%和87.04%;在无淋巴结转移组的阳性率分别为56.52%%和69.57%。差异均有统计学意义(P<0.05)。NF-κB p50蛋白和NF-κB p65蛋白的表达呈正相关关系(r=0.712,P<0.05)。结论 NF-κB p50蛋白和NF-κB p65蛋白参与甲状腺癌的表达,并于甲状腺癌的发生、发展过程中发挥着重要的协同作用。

阻断IL-17A活化p50NF-κB抑制小鼠肺损伤引起的肺纤维化

探讨阻断IL-17A对小鼠肺损伤后肺纤维化发生的预防作用及其机制。博来霉素造成小鼠肺损伤7天后给予抗IL-17A中和性抗体治疗,第14天取材。利用HE和天狼星红染色法观察肺组织炎症及胶原沉积情况;利用生化检测试剂盒检测肺组织中羟脯氨酸及肺泡灌洗液中胶原含量;利用Kaplan-Meier法统计小鼠生存率;利用ELISA方法检测肺泡灌洗液中IL-17A、TGF-β1、IL-13、IFN-γ表达水平;利用免疫印迹分析方法检测肺组织中p65NF-κB、p50NF-κB、COX-2、5-LOX、15-LOX的表达或活化。结果显示:与模型对照组比较,阻断IL-17A能够降低胶原沉积、减少羟脯氨酸及胶原含量、提高小鼠生存率,并能抑制炎症反应,降低IL-17A、TGF-β1、IL-13,升高IFN-γ、COX-2、5-LOX、15-LOX表达水平,抑制p65NF-κB活化但促进p50NF-κB活化。结果提示,阻断IL-17A能预防肺损伤后肺纤维化发生,其机制与促进p50NF-κB活化及其下游分子表达、抑制急性炎症转变为慢性炎症反应有关。

TSA抑制NF-κB/p50而减轻缺血性脑损伤

目的:研究曲古菌素A(TSA)对缺血再灌注性脑损伤小鼠的保护作用及其可能的分子学机制。方法:小鼠侧脑室立体定位注射TSA;插线法制备局灶性大脑中动脉缺血再灌注模型;神经功能评分进行行为学研究;TTC染色检测脑梗死面积;Western blot测定COX-2、iNOS、NF-κB/p50的表达。结果:小鼠缺血再灌注损伤脑可出现明显的神经功能缺失,并出现较大面积的梗死灶,TSA能明显改善脑缺血再灌注损伤后的神经功能,减小脑梗死面积。缺血再灌注损伤脑组织COX-2、iNOS炎症蛋白和NF-κB亚单位p50蛋白表达增加,应用TSA后可显著抑制上述蛋白的表达。结论:TSA可通过抑制炎症反应对脑缺血再灌注损伤小鼠具有脑保护作用,此作用可能由NF-κB/p50途径介导。

大肠癌组织中NF-κB/p 50、Bcl-2的表达及相关性研究

目的研究NF-κB/p 50和Bcl-2在大肠癌组织中的表达,分析二者在大肠癌发生、发展进程中的作用及意义。方法运用免疫组化S-P法检测NF-κB/p 50和Bcl-2在42例大肠癌及5例正常粘膜组织中的表达。结果NF-κB/p50和Bcl-2在大肠癌组织中的阳性表达率为61.9%和52.4%,明显高于正常粘膜,差异有统计学意义(P=0.008;P=0.026)。NF-κB/p 50的表达与患者年龄、性别、肿块大小、Ducks分期、组织分化程度、淋巴结转移等临床病理参数均无统计学意义(P>0.05);Bcl-2的表达与Dukes分期和淋巴结转移差异有统计学意义(P=0.031;P=0.002);大肠癌中NF-κB/p50和Bcl-2的表达呈正相关(r=0.332,P=0.032)。结论NF-κB/p50的高表达很可能促进了大肠癌的发生;NF-κB/p 50可能通过调节Bcl-2基因来抑制肿瘤细胞的凋亡。

基于PbTiO_(3)表面原位纳米酶的生物传感平台用于NF-κB p50检测

该文介绍了一种通过将K_(4)Fe(CN)_(6)配位到PbTiO_(3)表面获得原位纳米酶的新策略。利用脱氧核糖核苷5′-单磷酸(dNMP)在PbTiO_(3)表面的结合,阻止K_(4)Fe(CN)_(6)在PbTiO_(3)表面原位形成纳米酶,构建了基于纳米酶的生物传感平台。当NF-κB p50存在时,dNMP难以产生,K_(4)Fe(CN)_(6)得以顺利结合到PbTiO_(3)表面,并在其表面自发形成纳米酶,催化TMB氧化以定量检测NF-κB p50。实验表明,该方法对NF-κB p50的检测线性范围为3.0 pmol/L~10 nmol/L,检出限(S/N=3)为1.2 pmol/L,对实际样品的加标回收率为99.1%~102%,相对标准偏差不大于5.3%。该方法为NF-κB p50的检测提供了一种无标记、无固定且具有信号放大作用的新策略,不仅灵敏度高、选择性好、操作简便,且在实际样品检测中具有潜在的应用价值。

鼻息肉中核因子κB亚单位P50活性与IL-4、γ-IFN因子表达的关系

目的测定鼻息肉中核因子κB亚单位P50的活性及其与IL-4、γ-IFN表达的关系,探讨P50对TH1/TH2细胞因子表达调节的可能机制。方法采用SP免疫组化染色法检测40例鼻息肉患者与20例正常钩突黏膜中IL-4、γ-IFN、P50的表达,以核染阳性率来评估P50活性。对P50活性与IL-4,γ-IFN因子行直线相关分析。结果①鼻息肉中P50胞浆、胞核均有阳性表达,主要位于上皮细胞、炎症细胞及腺上皮细胞胞浆,P50活性显著增强(P<0.001),IL-4表达亦明显增强(P<0.001),γ-IFN表达无明显改变(P>0.05);②Pearson相关性分析提示,P50活性与IL-4表达呈直线正相关关系(r=0.70,P<0.001),而与γ-IFN表达无相关性(r=0.14,P=0.40)。结论鼻息肉中P50的活性明显增强,P50的激活上调IL-4的表达可能是鼻息肉中Th1/Th2因子失衡的重要环节之一。

前列消汤对EAP湿热证模型前列腺内NF-κB表达的影响

目的通过观察前列消汤对实验性自身免疫性前列腺炎(EAP)(湿热证)小鼠模型前列腺组织核转录因子-κB(NF-κB)P65和P50表达的影响,探讨前列消汤干预EAP模型前列腺内NF-κB的作用机制。方法建立EAP(湿热证)模型,用Western Blot和荧光定量PCR法、免疫组化法检测前列消汤对NF-κB P65和P50表达的影响。结果Western Blot结果显示,模型组与正常组比较,前列腺组织内NF-κB P65和P50的表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,前列消高、中剂量组NF-κB P65的表达显著下降(P<0.05),前列消高、低剂量组NF-κB P50的表达显著下降(P<0.05)。荧光定量PCR结果显示,模型组与正常组比较,前列腺组织内NF-κB P65和P50的表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,前列消高、中、低剂量组NF-κB P65的表达显著下降(P<0.05),前列消高剂量组NF-κB P50的表达显著下降(P<0.05)。免疫组化法显示,模型组与正常组比较,前列腺组织内NF-κB P65的表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,前列消高、中剂量组NF-κB P65的表达显著下降(P<0.05)。结论前列消汤可通过抑制前列腺组织内NF-κB P65和P50的表达在CP的治疗中发挥作用。

摄涕止鼽方对AR患者鼻腔黏膜TLRs和NF-κB蛋白表达的影响

目的观察摄涕止鼽方对肺肾气虚型变应性鼻炎(AR)患者鼻腔黏膜Toll样受体2(TLR2)、TLR4、核因子-κB(NF-κB)p50、NF-κB p65和IκBα蛋白表达的影响。方法将2017年5月至2018年5月就诊于成都中医药大学附属医院耳鼻咽喉科门诊的50例肺肾气虚型AR患者分为观察组和安慰剂组,各25例。观察组予摄涕止鼽方治疗,安慰剂组予安慰剂干预。Western blotting检测治疗前后患者鼻腔黏膜TLR2、TLR4、NF-κB p50、NF-κB p65和IκBα蛋白表达水平。结果观察组治疗前后鼻腔黏膜TLR2、TLR4蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);安慰剂组治疗后鼻腔黏膜TLR2、TLR4蛋白表达水平较治疗前升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组与安慰剂组治疗前后鼻腔黏膜NF-κB p50、NF-κB p65蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论摄涕止鼽方能抑制肺肾气虚型AR患者鼻腔黏膜TLR2和TLR4水平的升高。

红景天苷调控PI3K/Akt信号通路对永久性脑缺血大鼠的保护作用

目的研究红景天苷(salidroside,Sal)通过调控PI3K/AKT信号通路对永久性大脑中动脉闭塞模型(pMCAO)大鼠的神经保护作用及其机制。方法健康成年雄性SPF级雄性SD大鼠70只,其中30只大鼠随机分为假手术组(sham组)、模型组(pMCAO组)、红景天苷给药组(pMCAO+Sal组),线栓法造模成功后,对sham组和pMCAO组大鼠腹腔注射生理盐水,pMCAO+Sal组按照50 mg·kg^(-1)·d^(-1)腹腔注射红景天苷(50 mg·kg^(-1)·d^(-1)),给药1 d。40只大鼠随机分为假手术组(sham组)、模型组(pMCAO组)、红景天苷给药组(pMCAO+Sal组)、抑制剂组(pMCAO+Sal+LY组);侧脑室注射PI3K抑制剂30 min后,制备pMCAO模型,1 h后腹腔注射红景天苷,给药1 d。免疫组织化学染色测定脑组织中NeuN表达,Western blot分析脑组织中NeuN蛋白、NF-κBp50核蛋白的表达,RT-qPCR检测IL-6和TNF-α的表达。结果与pMCAO组比较,红景天苷作用后,NeuN免疫荧光染色表达量明显增加,且能够促进NeuN蛋白,抑制NF-κB p50核蛋白及IL-6和TNF-αmRNA表达。经PI3K抑制剂LY294002作用后,红景天苷对上述指标作用不明显。结论红景天苷能够通过调控PI3K/AKT信号通路,抑制NF-κB p50核转录水平,进而抑制炎症因子,对pMCAO模型大鼠具有神经保护的作用。

基于LncRNA H19-P50 NF-κB信号通路探讨肢体缺血-再灌注损伤机制及桃红四物液的干预作用

目的观察桃红四物液对肢体缺血-再灌注损伤中LncRNA H19、NF-κB P50的表达影响,探讨肢体缺血-再灌注损伤的机制。方法51只2月龄雄性SD大鼠,按随机数表随机分为正常对照组(3只)、模型对照组(12只)、单纯H19阻断剂组(12只)、H19阻断剂组+桃红四物液组(12只)、桃红四物液组(12只),各组动物分别于再灌注0h、2h、4h、8h等不同时间点取相应的标本,用于Western-blot检测NF-κB P50蛋白的表达、RT-PCR检测H19、NF-κB P50的mRNA的表达。结果较正常对照组相比,模型对照组、单纯H19阻断剂组、H19阻断剂组+桃红四物液组、桃红四物液组的H19、NF-κB P50的mRNA表达均升高,NF-κB P50蛋白的表达亦增高,差异有统计学意义(P<0.05);较模型对照组相比,单纯H19阻断剂组、H19阻断剂组+桃红四物液组、桃红四物液组的H19、NF-κB P50的mRNA表达均降低,NF-κB P50蛋白的表达亦降低,差异有统计学意义(P<0.05);较H19阻断剂组+桃红四物液组相比,单纯H19阻断剂组和桃红四物液组的H19、NF-κB P50的mRNA表达均降低,NF-κB P50蛋白的表达亦降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:LncRNA H19是LIRI中的关键分子,NF-κB P50是LIRI中的关键蛋白,桃结论红四物液可以通过调控LncRNA H19影响NF-κB P50的表达,从而对肢体缺血-再灌注损伤产生作用。

子宫内膜癌患者CerbB-2、NF-κB P50、MIF和IκBα蛋白表达水平与疾病严重程度的相关性研究

目的探讨子宫内膜癌患者原癌基因Cerb B-2(Cerb B-2)、核因子κB(NF-κB) P50、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和核因子κB的抑制蛋白α(IκBα)表达水平与疾病严重程度的相关性。方法选取2015年8月至2019年3月间营口市妇产儿童医院收治的行手术切除治疗的93例子宫内膜癌患者的子宫内膜癌标本组织为观察组,另选取同期行宫腔镜检查的30例健康人群子宫内膜标本为对照组,比较两组受试者Cerb B-2、NF-κB P50、MIF、IκBα的mRNA蛋白表达水平和Cerb B-2、NF-κB P50、MIF、IκBα蛋白阳性率。结果观察组Ⅲ期组患者Cerb B-2、NF-κB P50、MIF和IκBα的mRNA相对表达量高于Ⅱ期组,Ⅱ期组高于Ⅰ期组,Ⅰ期组高于对照组,差异均有统计学意义(均P <0.05)。观察组Ⅲ期组患者Cerb B-2、NF-κB P50、MIF和IκBα蛋白表达水平高于Ⅱ期组,Ⅱ期组高于Ⅰ期组,Ⅰ期组高于对照组,差异均有统计学意义(均P <0.05)。Ⅲ期组Cerb B-2、NF-κB P50、MIF和IκBα蛋白阳性率高于Ⅰ期组和对照组,Ⅱ期组和Ⅰ期组Cerb B-2和MIF蛋白阳性率高于对照组,差异均有统计学意义(均P <0.05)。结论 Cerb B-2、NF-κB P50、MIF和IκBα蛋白表达水平与子宫内膜癌患者疾病严重程度呈正相关,可作为判断子宫内膜癌病情的参考指标。

高压氧治疗大鼠脑外伤后脑组织NF—κB（P50）表达的实验研究

目的探讨高压氧对颅脑外伤的治疗作用及与脑组织中NF—κB（P50）表达之间的关系。方法120只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组（仅开颅钻孔．不行打击）、外伤对照组（Feeney自由落体损伤模型制作法制造中度大鼠脑外伤模型，但不接受氧治疗）、常压氧治疗组（脑外伤模型制作成功后立即接受正常压力下纯氧吸入治疗、高压氧治疗组（脑外伤模型制作成功后立即接受0．2MPa压力下高压氧治疗），并于伤后6h、1d、3d、5d、7d五个时相点断头法取脑组织（每时相点6只），光镜下观察脑组织损伤水肿的病理变化以及采用免疫组化方法检测NF—κB（P50）在脑组织中的表达情况。结果高压氧十预使相同时相点高压氧治疗组大鼠脑水肿情况及损伤程度较外伤对照组明显减轻，而常压氧干预作用则不明显。假手术组各时相点仅见微量的NF—κB（P50）阳性表达或不表达，其他各组脑损伤后6h即发现损伤脑组织内NF-κB（P50）阳性表达上调，且持续呈增高趋势，伤后5d时达到最高值。高压氧治疗组与外伤对照组及常压氧治疗组相比在相同时相点NF—κB（P50）表达均有增强，差异有统计学意义（p〈0．05）。结论高压氧治疗对损伤神经细胞具有保护、修复的治疗作用，增加NF—κB（P50）在脑组织细胞中的表达可能是其神经保护途径之一。

聚普瑞锌治疗大鼠缺血性结肠炎的实验研究

目的探索聚普瑞锌(Polaprezinc,PZ)对缺血性结肠炎(ischemic colitis,IC)大鼠结肠黏膜损伤的修复作用及可能机制。方法40只大鼠随机分为3组:实验组(开腹+激光照射+PZ治疗)24只、对照组(开腹+激光照射)12只、空白组4只。光化学法建立IC大鼠模型,实验组造模后每天给予3000 mg/L的PZ溶液3 ml,余自由进食水。对照组造模后与空白组仅自由进食水。术后第5天处死大鼠,肉眼观察结肠黏膜大体表现,显微镜下进行结肠黏膜损伤程度评分,免疫组化方法评估结肠黏膜组织中HSP70和NF-κB p50的表达。结果实验组大鼠肉眼可见结肠损伤显著低于对照组(16.67%vs 58.33%,P<0.05)。实验组结肠黏膜糜烂、炎症及淋巴细胞浸润均较对照组轻,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组结肠损伤评分(1.125±1.262)分显著低于对照组(2.750±1.138)分(P<0.01)。实验组结肠黏膜HSP70表达显著高于对照组(P<0.01),实验组NF-κB p50表达显著低于对照组(P<0.01)。结论PZ能够减轻IC模型大鼠结肠黏膜炎症及糜烂,促进黏膜损伤修复;其机制可能是通过促进HSP70表达,降低NF-κB p50表达进而抑制其活性来实现。

microRNA-150对深静脉血栓形成大鼠模型炎症反应的调控作用

为了考察microRNA-150(miR-150)对深静脉血栓形成(DVT)大鼠模型炎症反应的调控作用,本研究建立了DVT大鼠模型,通过RT-PCR检测miR-150的表达,并对DVT大鼠注射miR-150过表达慢病毒或阴性对照慢病毒。利用ELISA试剂盒检测大鼠血清纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)和白介素8(IL-8)水平;并检测大鼠的血小板聚集抑制率和血栓烷B2(TXB2)含量,通过苏木精伊红(HE)染色评价血栓形成,应用miR-150模拟物、miR-150抑制剂和阴性对照转染大鼠血管内皮细胞。Western blotting检测了大鼠血管内皮细胞中NF-κB p50的表达且使用CCK-8法和流式细胞仪检测了细胞活力和细胞凋亡。研究结果显示,DVT大鼠的miR-150表达水平显著低于正常大鼠(p<0.05)。miR-150的过表达降低了DVT大鼠的血小板聚集抑制率、TXB2含量和血管阻塞程度评分(p<0.05)。miR-150的过表达显著降低DVT大鼠和血管内皮细胞中PAI-1、TNF-α、IL-6和IL-8的水平(p<0.05)。miR-150的过表达促进了血管内皮细胞的增殖,而抑制了细胞凋亡(p<0.05)。miR-150的过表达下调了血管内皮细胞NF-κB p50的表达水平(p<0.05)。本研究表明,miR-150的上调可通过抑制NF-κB p50信号通路来抑制血栓形成和炎症反应。