基于NF-κBp65信号通路探索PRMT5靶向调控RPA2对肺腺癌细胞活性和侵袭能力的影响

目的基于NF-κB p65信号通路探索蛋白精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)靶向调控复制蛋白A2(RPA2)对肺腺癌细胞活性和侵袭能力的影响。方法选择肺腺癌细胞株A549、H1299,随机分为空白对照组、质粒对照组、RPA2高表达组、PRMT5沉默组、PRMT5沉默+RPA2高表达组。质粒对照组予阴性对照siRNA转染,RPA2高表达组予pcDNA3.1/RPA2转染,PRMT5沉默组予PRMT5 siRNA转染,PRMT5沉默+RPA2高表达组予PRMT5 siRNA和pcDNA3.1/RPA2转染,然后用嘌呤霉素筛选获得稳定转染细胞。空白对照组常规培养,不予转染。收集各组细胞,采用CCK-8法检测细胞活性,采用Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,采用Western blotting法检测PRMT5、RPA2以及p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达。结果在A549细胞和H1299细胞中,RPA2高表达组PRMT5、RPA2蛋白表达及细胞活性、侵袭能力均高于空白对照组和质粒对照组,PRMT5沉默组PRMT5、RPA2蛋白表达及细胞活性、侵袭能力均低于空白对照组和质粒对照组(P均<0.05);PRMT5沉默组和PRMT5沉默+RPA2高表达组PRMT5、RPA2蛋白表达及细胞活性、侵袭能力均低于RPA2高表达组(P均<0.05);PRMT5沉默+RPA2高表达组PRMT5、RPA2蛋白表达及细胞活性、侵袭能力均高于PRMT5沉默组(P均<0.05)。在A549细胞和H1299细胞中,RPA2高表达组p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达均低于空白对照组和质粒对照组,PRMT5沉默组p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达均高于空白对照组和质粒对照组(P均<0.05);PRMT5沉默组和PRMT5沉默+RPA2高表达组p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达均高于RPA2高表达组(P均<0.05);PRMT5沉默+RPA2高表达组p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达均低于PRMT5沉默组(P均<0.05)。结论PRMT5可通过靶向调控RPA2增强肺腺癌细胞活性和侵袭能力,其作用机制可能与激活NF-κB p65信号通路有关。

青蒿鳖甲汤加减治疗癌性发热疗效及对NF-κB p65蛋白、IL-6、IL-10、TNF-α的影响

目的 探讨青蒿鳖甲汤加减治疗癌性发热疗效及对核因子κB p65(Nuclear factor-kappaBp65,NF-kappaB p65)蛋白、白细胞介素-10(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-6(interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)的影响。方法 选取诊治的癌性发热患者100例,随机分为对照组与观察组,每组50例,对照组常规西药治疗,观察组采用青蒿鳖甲汤加减治疗,治疗时间7 d,观察退热效果、治疗前血清总NF-κB p65蛋白及活性NF-κB p65蛋白、IL-6、IL-10、TNF-α变化。结果 观察组体温开始下降时间、体温恢复正常时间短于对照组,每次退热持续时间长于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗前血清总NF-κB p65蛋白及活性NF-κB p65蛋白水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗均下降,且观察组下降幅度大于对照组,比较差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗前血清IL-6、IL-10、TNF-α水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗均下降,且观察组下降幅度大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组不良反应发生率为18.00%(9/50)、对照组为14.00%(7/50),差异无统计学意义(P>0.05);观察组治疗疗效整体优于对照组(P<0.05),治疗总有效率为96.00%(48/50),高于对照组的80.00%(40/50)(P<0.05)。结论 青蒿鳖甲汤加减治疗癌性发热退热效果显著,能够缩短患者体温恢复正常的时间,改善NF-κB p65蛋白、IL-6、IL-10、TNF-α水平。

推拿按揉环跳穴对坐骨神经痛大鼠脊髓背角NF-κB p65蛋白的干预作用

目的:观察推拿按揉环跳穴对坐骨神经慢性压迫损伤(chronic constriction injury,CCI)模型大鼠的镇痛作用,探讨推拿对坐骨神经痛大鼠的镇痛机制。方法:选用32只体重180~220g SPF级别的SD雄性大鼠,随机分成空白组(不予以任何处理)、假手术组(只暴露不结扎坐骨神经)、模型组(结扎坐骨神经)和推拿组(结扎坐骨神经后予以手法干预)。通过结扎大鼠右侧坐骨神经制备CCI模型,于造模第3天开始对推拿组大鼠推拿按揉环跳穴干预,连续干预14 d,观察造模前及造模后第1、3、7、10、14、17天大鼠机械痛域(paw withdrawal threshold,PWT)、热痛阈(paw withdrawal latency,PWL);观察造模前、造模后第1和17天右侧坐骨神经功能指数(sciatic functional index,SFI)的变化;用苏木精伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色方法观察坐骨神经形态学的变化;并观察大鼠右侧脊髓背角NF-κB蛋白表达的差异。结果:在造模后,空白组和假手术组的PWT、PWL和SFI差异均无统计学意义(P>0.05),造模后模型组和推拿组的PWT、PWL和SFI显著下降(P<0.01)。在手法干预后,推拿组大鼠的痛阈值上升,在手法干预第8天(即造模第10天),推拿组较模型组PWT显著上升,差异有统计学差异(P<0.01);在手法干预第5天(即造模第7天),推拿组PWL较模型组显著上升,差异有统计学意义(P<0.01);推拿组大鼠痛阈值随着手法干预持续而继续上升。手法干预14天后,推拿组大鼠坐骨神经功能指数显著上升(P<0.01)。与空白组、假手术组比较,模型组大鼠坐骨神经有髓神经纤维排列紊乱,轴索、髓鞘密度不均匀;与模型组比较,推拿组大鼠神经纤维逐渐连续,轴索、髓鞘较模型组均匀。与空白组、假手术组比较,模型组大鼠右侧脊髓背角NF-κB蛋白表达显著增加(P<0.01);与模型组比较,推拿组大鼠右侧脊髓背角NF-κB蛋白表达显著下降(P<0.01)。结论:推拿按揉环跳穴能恢复神经纤维的排列;并通过降低脊髓背角的NF-κB p65蛋白表达来提高CCI模型的PWT、PWL和SFI,从而起到镇痛的作用,并改善大鼠步态。

运动训练对2型糖尿病大鼠肾脏NF-κB-p65和相关蛋白表达的影响及机制研究

目的:研究运动训练对2型糖尿病大鼠肾脏NF-κB-p65及相关蛋白表达的影响,以探讨运动改善2型糖尿病大鼠肾损伤的可能作用机制。方法:SD大鼠通过高脂饲料喂养6周和低剂量腹腔注射STZ的方法复制2型糖尿病大鼠实验模型。实验分为正常对照组(A),糖尿病安静组(B)和糖尿病运动组(C)。C组进行6周的有氧游泳训练,其余两组不施加干预。实验结束后,测试随机血糖、24 h UAE、T-SOD、MDA、NF-κB-p65、Activated Caspase-3和Nephrin蛋白表达,并进行电镜观察肾脏显微结构的改变。结果:1)电镜下,运动干预的C组大鼠可见滤过膜3层结构较清晰,基底膜未见明显增加,足突稍肿大、足细胞融合等症状较B组大鼠均有所改善。2)运动干预后,C组大鼠的血糖浓度、24h UAE排泄量均降低,与B组比较,均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。3)运动干预后,C组大鼠肾皮质T-SOD活性上升而MDA含量下降,与B组比较,亦有明显差异(P<0.05或P<0.01)。4)运动干预后,C组大鼠肾皮质NF-κB-p65和Activated Caspase-3蛋白表达均明显降低,而Nephrin蛋白表达明显增加,与B组比较,差异均呈显著性(P<0.05或P<0.01)。结论:运动能降低2型糖尿病大鼠血糖,减轻肾脏病理损伤,并提高肾功能,其机制可能与运动的下调氧化应激介导的2型糖尿病大鼠肾脏核转录因子NF-κB-p65的表达,以改善效应蛋白Activated Caspase-3异常表达和恢复足细胞特异标志物-Nephrin蛋白的表达,而改善大鼠肾脏损伤的保护作用有关。

依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围组织NF-κB p65蛋白表达的影响

目的探讨依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围组织NF-κB p65蛋白表达的影响。方法 108只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、脑出血组和依达拉奉治疗组,其中脑出血组和依达拉奉治疗组又分为3 h、6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d、7 d 8个亚组,每组6只。采用大鼠尾动脉自体不凝血50μL注入尾状核区建立脑出血模型。依达拉奉治疗组于模型制作成功后2 h开始腹腔内注射3 mg/kg依达拉奉,1次/d。免疫组化法检测NF-κB p65蛋白表达变化。结果与脑出血组相比,依达拉奉治疗组于出血后6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d、7 d血肿周围组织NF-κB p65蛋白表达均减少(P<0.05或P<0.01)。结论依达拉奉对脑出血后血肿周围脑组织损伤有保护作用,可能与其抑制NF-κB p65蛋白表达有关。

NF-κB(p65)蛋白核转位与唾液腺腺样囊性癌侵袭和转移关系的研究

目的检测NF-κB p65蛋白在唾液腺腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)临床组织标本中的表达水平和转位情况,分析其与ACC侵袭和转移之间的关系。方法应用免疫组织化学法,检测58例唾液腺腺样囊性癌石蜡标本中p65蛋白的表达和细胞定位,分析p65蛋白的表达、转位与ACC转移和其他临床病理参数的关系。结果在转移和非转移的ACC组,p65细胞表达阳性率无显著差异(P=0.2641);而p65蛋白的核阳性表达率ACC转移组明显高于非转移组(P=0.0261),并且与ACC神经浸润相关(P=0.0244)。结论 NF-κB通路的激活可能在唾液腺腺样囊性癌侵袭和转移中发挥重要作用。

p65及MMP-2、MMP-9、TIMP-2、TIMP-1在宫颈鳞癌的表达状态

目的探讨MMP-2、MMP-9、TI MP-2、TI MP-1在宫颈鳞癌组织的表达状态及其与宫颈鳞癌侵袭转移的关系,并初步了解p65表达与MMP-2、MMP-9表达状态之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测了10例正常宫颈组织、13例CINⅡ,11例CINⅢ,30例浸润性宫颈鳞癌组织MMP-2、MMP-9、TI MP-2、TI MP-1和p65的表达状态。结果浸润癌MMP-9、TI MP-2、TI MP-1阳性表达率明显高于其他几组,p65表达状态与MMP-9基本一致。与MMP-9、MMP-2阴性浸润癌病例相比,MMP-9、MMP-2阳性患者的TI MP-1、TI MP-2阳性表达强度并无明显差异。结论MMP-9、TI MP-1、TI MP-2表达增加在宫颈鳞癌侵袭过程中起着重要作用,宫颈鳞癌MMP-9高表达可能与p65蛋白高表达有关。

参苏饮对“肺气虚外感”小鼠肺组织BD-2、TLR4、NFκB p65蛋白的影响

目的:研究参苏饮对肺气虚外感小鼠肺组织BD-2、TLR4、NF-κB蛋白的影响。方法:将动物按体重随机分为空白组和模型组,用烟熏法建立小鼠"肺气虚外感"证模型,免疫组化(SP法)测定小鼠肺组织BD-2、TLR4、NF-κB蛋白的变化。结果:模型组小鼠肺组织中NF-κB p65、BD-2、TLR4蛋白的含量均显著升高(P<0.05);全方组、益气解表组、止咳化痰组小鼠肺组织中NF-κB p65、BD-2、TLR4蛋白的含量均显著地下降(P<0.05);全方组、益气解表组、止咳化痰组之间无统计学差异(P>0.05)。结论:参苏饮能促进"肺气虚外感"小鼠肺组织BD-2、TLR4、NFκB蛋白的表达,提示参苏饮能够促进"气虚外感证"BD-2的表达与"TLR4-NFκB"信号通路有相关性。

清热解毒扶正颗粒对内毒素大鼠肺肾组织NF-κBp65蛋白的影响

目的探讨清热解毒扶正颗粒对内毒素大鼠肺肾组织NF-κBp65蛋白的影响。方法 72只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、甲强龙组以及中药低、中、高剂量组,采用腹腔注射脂多糖法建立大鼠内毒素血症模型。正常组对照组、模型对照组予生理盐水1 m L/100 g灌胃,每天1次;甲强龙组给甲基强的松龙1.17 mg/100 g灌胃,每天1次;中药组给清热解毒扶正颗粒低、中、高剂量1 m L/100 g灌胃,每天1次;实验结束后,采用Western blotting法检测大鼠肺、肾组织NF-κBp65蛋白的表达。结果模型对照组NF-κBp65蛋白水平显著高于正常对照组,中药高剂量组与甲强龙组较好地降低内毒素大鼠肺、肾组织NF-κBp65蛋白水平,两组之间比较无统计学差异,中药低剂量组和中剂量组降低NF-κBp65蛋白水平的效果较差,与高剂量组和甲强龙组相比有统计学差异。结论清热解毒扶正颗粒能有抑制内毒素大鼠肺肾组织NF-κBp65蛋白表达的效果,降低内毒素血症的炎症反应,对内毒素有一定的治疗作用。

血管活性肠肽抑制帕金森病MPTP模型小鼠纹状体中核因子-κB p65、肿瘤坏死因子α和单核细胞趋化蛋白-1的上调

目的:研究血管活性肠肽(VIP)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)模型小鼠纹状体神经炎症及核因子-κB p65(NF-κB p65)水平的影响。方法:C57BL/6J雄性小鼠30只随机分为生理盐水(NS)组、MPTP组、MPTP+VIP组。免疫组织化学法观察纹状体酪氨酸羟化酶(TH)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和离子钙结合蛋白(Iba-1)的水平变化;ELISA法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量;免疫印迹检测NF-κB p65的水平变化。结果:与NS组相比,MPTP组小鼠纹状体TH水平显著减少,GFAP和Iba-1水平显著上升,TNFα和MCP-1的含量及NF-κB p65的水平显著升高。给予VIP后,纹状体TH水平明显增加,GFAP和Iba-1水平显著下降,TNF-和MCP-1的含量及NF-κB p65的水平明显降低。结论:VIP可能通过降低NF-κB p65的水平从而抑制MPTP诱导的PD小鼠纹状体的神经炎症反应。

平阳霉素诱导舌癌Tca8113细胞凋亡过程中p65信号转导通路的变化

目的观察平阳霉素诱导舌癌T ca8113细胞凋亡过程中p65信号转导通路的动态变化。方法在平阳霉素诱导T ca8113细胞凋亡过程中,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫组化、W estern b lot检测p65蛋白。结果平阳霉素能诱导T ca8113细胞凋亡,在凋亡发生时,p65蛋白由非活化状态转变为活化状态,从胞浆中穿过核膜进入细胞核,并调控靶基因表达。调控结束后,p65蛋白由胞核回到胞浆,并成为非活化状态。结论平阳霉素诱导T ca8113细胞凋亡过程中,p65信号转导通路被激活。

贲门腺癌组织中RKIP表达变化及其与血清NF-κB p65蛋白、T淋巴细胞亚群的关系

目的观察Raf激酶抑制蛋白(RKIP)在贲门腺癌组织中的表达变化,进一步探讨贲门腺癌的发生、发展机制。方法收集160例贲门腺癌患者(腺癌组)的腺癌组织及其癌旁组织,应用免疫组织化学SP法检测RKIP表达;采用ELISA法和流术细胞术分别检测腺癌组和50例查体健康者(对照组)的血清NF-κB p65蛋白、T淋巴细胞亚群水平。采用Spearman秩和相关分析法分析指标间的关系。结果贲门腺癌及癌旁组织中RKIP表达阳性率分别为38.7%、52.5%(P<0.05),在有、无淋巴结转移者中的表达阳性率分别为24.4%、53.1%(P<0.05,t=4.34);腺癌组血清总NF-κB p65蛋白水平高于对照组(P<0.05),但RKIP表达阳性与阴性者水平无显著差异(P>0.05),有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者(P<0.05);腺癌组细胞免疫功能低于对照组,尤以RKIP表达阴性者为著(P<0.05)。结论 RKIP在贲门腺癌组织中表达降低并与肿瘤发生、发展、浸润转移有关,可能机制为抑制NF-κB活性及细胞免疫功能,使肿瘤细胞逃避机体的免疫监视。

HAPLN1通过IKK/p65信号通路诱导大肠癌HT-29细胞产生MTX耐药

目的:研究甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)耐药前后人大肠癌(结直肠癌)HT-29细胞中透明质酸蛋白聚糖连结蛋白1(hyaluronan and proteoglycan link protein 1,HAPLN1)表达的变化及其对MTX耐药性的影响,并探究可能的分子机制。方法:采用浓度梯度递增法构建耐药细胞株HT-29/MTX;RT-PCR检测HAPLN1和多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance-associated protein 2,MRP2)的mRNA表达水平;采用脂质体介导法将人HAPLN1和MRP2基因的干扰质粒转染HT-29/MTX细胞并筛选出稳定表达的细胞系;采用CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;采用Western blot检测HAPLN1、MRP2、IκB激酶(IκB kinase,IKK)α/β、p-IKKα/β(Ser176/Ser177)、p65和p-p65(Ser536)的蛋白水平。结果:HT-29/MTX细胞中HAPLN1和MRP2的mRNA和蛋白表达水平都显著高于其亲代HT-29细胞(P<0.05),耐药倍数高达463.756。抑制HAPLN1和MRP2基因表达使MTX对HT-29/MTX细胞的IC_(50)从15.304μmol/L分别降至6.119μmol/L和7.801μmol/L,逆转倍数分别为2.501和1.962,并增强MTX诱导的细胞凋亡(P<0.05)。敲减HAPLN1基因表达和使用IKK抑制剂IKK16均可下调IKKα/β和p65蛋白磷酸化水平以及MRP2蛋白表达水平(P<0.05),但IKK16未对HAPLN1蛋白表达产生影响(P>0.05)。结论:敲减HAPLN1基因表达可在体外增强人大肠癌耐药细胞株HT-29/MTX对MTX的敏感性,这可能与其抑制IKK/p65信号通路活化,继而下调MRP2基因表达有关。

猪肺炎支原体P65蛋白的单克隆抗体的制备（英文）

P65蛋白是猪肺炎支原体的主要免疫优势蛋白,与其他支原体无交叉反应,常作为猪肺炎支原体检测的靶蛋白。本实验应用原核表达的重组P65蛋白免疫小鼠,用Mhp全菌蛋白和P65蛋白筛选,制备了1株特异性单克隆抗体3G12。鉴定结果表明,该株单克隆抗体可与P65蛋白和Mhp全菌蛋白反应,采用间接ELISA法测得3G12细胞培养上清与P65蛋白反应抗体的效价为1∶12 800,与全菌蛋白反应抗体的效价为1∶3 200;3G12腹水与P65蛋白反应的抗体效价为1∶4 000 000以上,与168全菌蛋白反应的抗体效价为1∶20 000以上,细胞经长期体外培养和冻存后复苏能稳定分泌抗体。本研究成功获得到1株针对P65和Mhp全菌的单克隆抗体,为猪肺炎支原体致病机制和检测方法的进一步研究提供了基础。

NF-κB p65蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达分析

目的探讨NF-κB p65蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达。方法选择贵州医科大学附属医院和赣南医学院第一附属医院2018年1月—2019年12月收治的50例皮肤鳞状细胞癌患者病理组织切片作为癌组织组,相对应癌旁组织50例进行对照。比较两组NF-κB p65蛋白的表达差异,并对NF-κB p65蛋白在皮肤鳞状细胞癌表达情况与患者性别、年龄、疾病临床分期和分化程度的关系进行分析。结果癌组织组的NF-κB p65蛋白表达阳性率高于癌旁组织组,差异有统计学意义(P<0.05)。患者不同性别、年龄情况下的NF-κB p65蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Ⅲ~Ⅳ期患者的NF-κB p65蛋白表达阳性率高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.05)。低分化患者的NF-κB p65蛋白表达阳性率高于高中分化患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论NF-κB p65蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的表达高于癌旁组织,且皮肤鳞状细胞癌的分期越高,则NF-κB p65蛋白表达越高;皮肤鳞状细胞癌的分化程度越低,则NF-κB p65蛋白表达越高。而NF-κB p65蛋白表达和患者的年龄、性别之间没有明显的关系。

食管鳞状细胞癌组织Raf激酶抑制蛋白和NF-κBp65表达及临床意义

目的探讨食管鳞状细胞癌组织中Raf激酶抑制蛋白(RKIP)和核因子κBp65(NF-κBp65)的表达,及其与食管鳞状细胞癌各临床病理因素之间的关系。方法用免疫组织化学法检测77例食管鳞状细胞癌和77例癌旁组织的RKIP和NF-κBp65表达,并分析其与食管鳞状细胞癌临床病理学特征关系。结果食管鳞状细胞癌组织中RKIP的表达低于正常癌旁组织,而NF-κBp65的表达则高于癌旁组织,二者比较有显著性差异(P<0.01);RKIP在食管鳞状细胞癌组织中的表达与有无淋巴结转移有关(P<0.05)。NF-κBp65在食管鳞状细胞癌组织中的表达与临床分期、有无淋巴结转移及肿瘤分化程度有关(P<0.05或0.01)。食管鳞状细胞癌组织中RKIP与NF-κBp65的表达呈负相关(P<0.05)。结论RKIP表达减少或缺失与食管鳞状细胞癌的发生、发展密切相关,RKIP表达减少或缺失可能通过上调NF-κBp65的表达促进食管鳞状细胞癌的侵袭和转移。

银杏叶提取物对高同型半胱氨酸血症血管内皮NF-κBp65、iNOS、MCP-1表达影响的实验研究

目的探讨银杏叶提取物(GBE)对高同型半胱氨酸血症(HHcy)、血管内皮核转录因子(NF-κBp65)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)表达的干预作用。方法雄性Wistar大鼠51只随机分为空白对照组、模型组、叶酸组和银杏叶4组,采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定血清同型半胱氨酸(Hcy)水平;免疫组化法观察MCP-1、iNOS、NF-κBp65的表达,HE染色观察主动脉组织形态学变化。结果模型组血清Hcy水平明显高于空白对照组(P<0.01)。模型组内皮细胞内NF-κBp65、iNOS及内皮下MCP-1呈较多棕黄色颗粒的表达,银杏叶组和叶酸组则呈较少棕黄色颗粒表达,空白对照组只有极少量棕黄色颗粒的表达。结论GBE可能通过减少HHcy主动脉内皮细胞NF-κBp65、iNOS及MCP-1表达,明显改善血管内皮功能,延缓HHcy动脉粥样硬化的进程。

p65、β-catenin表达在乳腺癌发生、发展中的相关性分析

目的探讨p65、β-catenin表达在乳腺癌发生、发展中的相关性。方法采用免疫组化Envision法检测p65及β-catenin在不同病理阶段的乳腺组织中的表达状况。乳腺囊性增生病27例,导管内乳头状瘤25例,导管上皮异型增生26例,导管内癌(或伴早期浸润)29例,浸润性导管癌58例。结果p65和β-catenin在乳腺导管内乳头状瘤、囊性增生病、囊性增生病伴异型、导管内癌(或伴早期浸润)和浸润性导管癌中的阳性表达率分别为8.0%、11.1%、42.3%、31.0%、48.3%和4.0%、3.7%、23.1%、72.4%、79.3%。两者在良性增生性疾病阶段无明显相关性(P>0.05),在囊性增生病伴异型、乳腺导管癌阶段呈正相关(P<0.05)。结论p65、β-catenin表达在乳腺增生性疾病无明显相关性,而在囊性增生病伴异型和乳腺癌中呈正相关。

抗癌防移片对结直肠癌肝转移BALB/c小鼠P65、STAT3、TNF-α因子的影响

目的通过研究抗癌防移片对结直肠癌肝转移小鼠模型肝脏组织中癌基因蛋白质p65(oncogene protein p65,P65)、信号传导转录激活因子3(signal transduction and activator of transcription 3,STAT3)蛋白表达,以及血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)浓度检测,探讨抗癌防移片预防结直肠癌肝转移的作用机制。方法采用脾脏注入CT26细胞的方法制备结直肠癌小鼠模型,按照随机分配的原则分为6组:模型组、阳性对照组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、中西药组,每组5只。模型组予以等体积生理盐水灌胃,1次/d;阳性对照组予以奥沙利铂甘露醇注射液(L-OHP)、氟尿嘧啶注射液(5-Fu)、亚叶酸钙注射液(CF),腹腔注射,1次/周;中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组裸鼠以抗癌防移片中药混悬液灌胃,1次/d;中西药组采用阳性对照组和中药高剂量组两种方式结合给药。分组干预3周后,采集肝脏组织和血清,采用HE染色法观察各组小鼠肝组织病理切片分析细胞结构,采用Western bolt检测P65及STAT3蛋白表达量,ELISA法检测血清中TNF-α蛋白浓度。结果给药后3周,与模型组比较,中药高剂量组、中西药组、阳性对照组小鼠的体质量均明显增加(P<0.05);小鼠肝组织瘤体质量均显著降低(P<0.05)。与模型组比较,阳性对照组、抗癌防移片高剂量组、中西药组小鼠组织细胞排列整齐,结构清晰,仅可见少许异型细胞。与模型组比较,抗癌防移片高剂量组P65、STAT3蛋白表达水平及TNF-α浓度含量降低(P<0.05)。结论抗癌防移片可能通过抑制P65、STAT3、TNF-α蛋白表达,改善组织炎症环境,从而发挥抑制结直肠癌肝转移的作用。

端粒酶逆转录酶与核因子κB/p65在喉鳞状细胞癌中的表达

目的探讨端粒酶逆转录酶(telomerasere-verse transcriptase,TERT)和核因子κB/p65(NF–κB/p65)在喉鳞状细胞癌中的表达及两者间可能存在的相互关系。方法采用免疫组化SP法检测41例喉鳞状细胞癌和10例声带息肉组织中TERT和NF-κB/p65的表达水平。结果TERT和NF-κB/p65在喉鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为78.05%和68.29%,声带息肉中几乎未见TERT和NF-κB/p65的表达。定性分析发现TERT与喉鳞状细胞癌的T分级﹑淋巴结转移和肿瘤临床分期有关。相关分析显示NF-κB/p65与TERT呈正相关。结论①TERT和NF-κB/p65参与了喉癌的发展过程;②TERT有望作为防止喉鳞状细胞癌进一步恶化的治疗靶点;③喉鳞状细胞癌中NF-κB/p65促进了TERT的表达。