人剪切修复基因XPD对肝癌细胞中p8/TTDA基因的调控作用

目的探讨人剪切修复基因XPD对p8/TTDA基因的调控作用。方法用pEGFP-N2/XPD重组质粒、pEGFP-N2空载质粒分别稳定转染人肝癌细胞SMMC-7721,并用具有相同遗传背景和代数的SMMC-7721细胞作为空白对照。用RT-PCR、Western blot法检测转染前后p8、XPD、p53、c-myc表达量的变化,四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察细胞增殖活力。结果 (1)RT-PCR检测示:p8 mRNA在人肝癌细胞SMMC-7721是低表达的,稳定转染野生型XPD后,p8 mRNA和XPD mRNA表达量明显增高(P<0.001)。稳定转染重组质粒细胞组p53 mRNA表达量亦明显增高(P<0.05),c-myc mRNA表达量则明显下降(P<0.001)。(2)Western blot法检测示:p8蛋白在人肝癌细胞SMMC-7721是低表达的。稳定转染野生型XPD后,p8蛋白、XPD蛋白、p53蛋白表达量明显增高(P<0.05),c-myc蛋白表达量则明显下降,差异有统计学意义(P<0.001)。(3)MTT检测示:稳定转染重组质粒细胞组细胞增殖率明显减弱(P<0.001)。结论人剪切修复基因XPD可调控p8/TTDA基因的表达。野生型XPD转染后亦可上调p53表达,下调c-myc表达,从而在分子途径上抑制SMMC-7721细胞增殖,促进其凋亡。