核糖体S6蛋白激酶p90^(rsk)与卵母细胞减数分裂

丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)信号途径对减数分裂有重要调节作用 ,p90 rsk是迄今研究最清楚的MAPK下游靶分子 ,介导MAPK途径在卵母细胞减数分裂中的多种功能 ,包括卵母细胞减数分裂的启动、MⅠ /MⅡ期转化和MⅡ期阻滞的维持等 .p90 rsk的磷酸化是MAPK激活的结果 ,而细胞退出减数分裂时 ,p90 rsk的去磷酸化也发生在MAPK失活以后 .介绍了在卵母细胞中 p90 rsk的研究进展 .

MAPK和p90^(rsk)在大鼠卵泡发育中的表达与活性

利用免疫组织化学方法研究丝裂原激活蛋白激酶 (mitogen activatedproteinkinases,MAPK)及其底物之一p90 rsk在大鼠卵泡发育过程中的表达与活性。结果表明 ,非活性形式的MAPK存在于大鼠各生长期卵泡的卵母细胞和颗粒细胞中 ,但磷酸化活性形式的MAPK只存在于部分具有分裂增殖活性的颗粒细胞中。MAPK的作用底物p90 rsk只在各期卵泡的卵母细胞中表达 ,在颗粒细胞中无着色 ,说明MAPK信号级联在卵母细胞和颗粒细胞中具有不同的作用方式。另外 ,胎鼠卵巢的免疫组化染色结果显示 ,MAPK在卵原细胞增殖过程中具有活性 ,表明MAPK信号级联在这一过程中起作用。

CD38和p90RSK/CREB/Bcl-2信号通路在丙泊酚预处理星形胶质细胞减轻谷氨酸神经毒性中的作用

目的:探讨CD38和p90RSK/CREB/Bcl-2信号通路在丙泊酚预处理星形胶质细胞减轻谷氨酸神经毒性中的作用。方法:将PC12细胞随机分为4组:对照组(C组)PC12细胞不做任何处理;谷氨酸组(G组)用3.5 mmol/L谷氨酸孵育PC12细胞6 h;丙泊酚预处理组(PG组)先用100μmol/L丙泊酚预处理星型胶质细胞6 h,收集培养液,并将其加入到3.5 mmol/L谷氨酸处理的PC12细胞中孵育6 h;CD38基因沉默组(CPG组)先将CD38 siRNA转染入星形胶质细胞,再用100μmol/L丙泊酚预处理星型胶质细胞6 h,收集培养液,并将其加入到3.5 mmol/L谷氨酸处理的PC12细胞中孵育6 h。应用ROS和ATP检测试剂盒测定各组PC12细胞ROS和ATP的含量变化,采用蛋白质免疫印迹实验(Western blotting)检测PC12细胞p90RSK、pCREB、Bcl-2蛋白的表达,流式细胞仪检测PC12细胞的凋亡情况。结果:与C组比较,G组ROS含量升高,ATP含量降低,p90RSK、pCREB和Bcl-2蛋白表达下调,PC12细胞凋亡增多(均P<0.05);与G组比较,PG组ROS含量降低,ATP含量升高,p90RSK、pCREB和Bcl-2蛋白表达上调,PC12细胞凋亡减少(均P<0.05);与PG组比较,CPG组ROS含量升高,ATP含量降低,p90RSK、pCREB和Bcl-2蛋白表达下调且凋亡增加(均P<0.05)。结论:丙泊酚预处理星形胶质细胞可以减轻谷氨酸的神经毒性,其机制可能与激活星形胶质细胞膜上的CD38蛋白,从而上调PC12细胞的p90RSK/CREB/Bcl-2信号通路有关。

电针联合饮食控制对胰岛素抵抗模型大鼠InsR和P90^(rsk)蛋白表达的影响

目的研究电针联合饮食控制对胰岛素抵抗模型大鼠InsR和P90rsk蛋白表达的影响,探讨其增强胰岛素抵抗模型大鼠对胰岛素敏感性的机制。方法 SD雄性大鼠70只,随机分为普食组(n=10)和高脂高糖组(n=60),分别给予普通饮食及高脂高糖饮食。8周后选取40只成功造模的大鼠随机分为:HFHCD 1、HFHCD 2、EA 1、EA 2组(n=10)。HFHCD 1组和EA 1组高脂高糖饮食,HFHCD 2组和EA 2组普食。EA组针刺1次/d,20 min/次,共14 d。观察大鼠体质量、血糖和胰岛素变化情况,Western blot检测各组大鼠InsR和P90rsk的蛋白表达量。结果 InsR和P90rsk蛋白表达:HFHCD组较CD组明显降低(P<0.01),EA组较HFHCD组明显升高(P<0.01),HFHCD 2组较HFHCD 1组、EA 2组较EA 1组均明显升高(P<0.01)。结论电针联合饮食控制能升高InsR和P90rsk蛋白表达水平,从而恢复胰岛素信号的正常传导,增强胰岛素敏感性。

鞘内注射ERK1/2抑制剂SCH772984对骨癌痛大鼠疼痛行为学的影响

目的鞘内置管后建立大鼠骨癌痛模型,鞘内注射SCH772984（细胞外调节蛋白激酶ERK1/2 抑制剂）,观察其对骨癌痛大鼠疼痛行为学的影响,探讨SCH772984的镇痛作用及其可能机制.方法用PE-10导管经大鼠L6-S1 行鞘内置管,将Walker 256 乳腺癌细胞注入胫骨骨髓腔建立大鼠骨癌痛模型.第一部分 雌性SD大鼠 40 只,随机分成5 组（n=8）：空白组、Sham组、鞘内置管组、骨癌痛组、鞘内置管＋骨癌痛组. 鞘内置管后5d建立骨癌痛模型,测定置管后5d以及造模后1、3、6、9、12、15、18d大鼠机械缩足阈值、2 min 自发缩足情况,并行X线摄片以及病理 HE染色.第二部分 鞘内置管后5d的雌性SD大鼠 40 只,随机分为5 组（n=8）：Sham 组、BCP 组、BCP＋SCH0.1 组、BCP＋SCH1.0 组和BCP＋SCH10组.在造模后第9天,Sham组给SCH772984 10μg,其余四组鞘内分别给5%DMSO10μl、SCH0.1、1.0、10μg.测定给药前以及给药后1、3、6、9、12、15、18、24hMWT、2 min自发缩足次数以及抬足时间.结果第一部分 大鼠MWT变化情况：与空白组和Sham组相比,BCP 组大鼠造模后第 6天出现明显的机械痛敏（P 〈 0.01）,造模后 9、12、15、18d MWT进一步下降（P 〈 0.01）,鞘内置管组各时间点MWT值无显著差异（P〉0.05）.大鼠2min自发缩足次数和抬足时间变化情况：与空白组比较,BCP 组与鞘内置管＋BCP 组自造模后第6d起自发缩足次数和抬足时间明显增加（P〈0.05）,到第15d自发缩足次数减少（P〈0.05）,但是抬足时间在第 15d仍然增加（P〈0.05）;与鞘内置管组比较,BCP 组各时点的自发缩足次数与抬足时间均显著增加（P〈0.05）.造模后第 9d和 18d,大鼠胫骨X线片显示骨质破坏,病理HE染色显示骨髓腔内充满肿瘤细胞.第二部分 大鼠MWT变化情况：Sham组大鼠鞘内注射 SCH772984 10 μg后对MWT没有影响.SCH1.0 组在用药后6 h、SCH10组用药后3 h、6 h 和 9 h 与Sham组MWT比较有明显差异.大鼠2min自发缩足次数和抬足时间变化情况：BCP组自发缩足次数较Sham组明显增多.BCP＋SCH1.0组、BCP＋SCH10组用药后6h、9h和12h,其自发缩足次数减少,抬足时间缩短.结论1.胫骨注射 Walker256细胞可引起大鼠机械痛和自发痛.2.鞘内注射ERK1/2 抑制剂SCH772984可抑制骨癌痛大鼠自发痛和机械痛.

Protein Expression of Goat Follicular Fluid （GFF）

Oocyte maturation process is very complex. Until now synthesis and protein function as well as pathway mechanism in oocyte maturation process are not yet well understood. The mechanism of goat follicular fluid （GFF） in maturation in vitro medium needs to be deeply studied before it is implemented widely. The aim of the research was analyzing the GFF to know protein expression of ERK1, ERK 2, p90rsk, Cyclin-Bl and cdc25A by Western Blotting method. GFF collection by aspiration from small follicle （〈 4 mm） and big follicle （4-8 mm） by using needle with spuit size of 18 G. It was concluded that there was protein expression of ERK2 and p90rsk, at 42 kDa and 22 kDa respectively.

NHE-1磷酸化激酶RSK及其抑制剂的研究进展

目的综述钠氢交换蛋白1(NHE-1)磷酸化激酶p90核糖体S6激酶(RSK)及其抑制剂的最新研究进展。方法结合近期国内外的文献,综合介绍了RSK的结构、介导NHE-1活性的关系以及RSK抑制剂的研究现状和发展趋势。结果与结论NHE-1是一类分布广泛的膜蛋白,具有调节细胞内的pH值和细胞容量的功能,在心脑血管疾病的发生和发展中起着重要的作用。RSK是NHE-1的重要调节蛋白,针对RSK设计的抑制剂,可间接地抑制NHE-1磷酸化激活而发挥心脑血管治疗的作用。为针对NHE-1药物的研发提供了新的方向。