不同剂量日本血吸虫裸露DNA疫苗pCDSj32诱发小鼠保护性免疫力的初步研究

应用已构建的日本血吸虫裸露ＤＮＡ疫苗ｐＣＤＳｊ３２经骨骼肌免疫小鼠，获得了较好的保护性免疫效果。１００μｇ和２００μｇｐＣＤＳｊ３２免疫后，减成虫率分别为５２．４３％和３６．４７％；肝组织减卵率分别为５４．１９％和５７．７９％；并对各组小鼠肝脏虫卵肉芽肿的面积进行了测量。结果表明，ｐＣＤＳｊ３２免疫小鼠后可减少虫荷，降低血吸虫的产卵量，抑制肝脏虫卵肉芽肿的形成。

日本血吸虫DNA疫苗pCDSj32在小鼠皮肤组织内的表达及其保护性免疫效果观察

目的用皮内基因免疫注射的方法定位显示重组质粒ｐＣＤＳｊ３２在皮肤细胞的表达及其诱发小鼠抗日本血吸虫尾蚴攻击感染的保护性免疫效果。方法用生理盐水做媒体，将大量制备的质粒ｐＣＤＳｊ３２溶至１００μｇ／１００μ１，于小鼠尾根部远端１～２ｃｍ处进行皮内注射，４ｗｋ后取注射部位皮肤，石蜡包埋、切片，用间接免疫荧光法和免疫组化技术观察ｐＣＤＳｊ３２在皮肤细胞的表达。对照组和１００μｇ／１００μ１ｐＣＤＳｊ３２单剂量免疫组小鼠各１０只，于免疫后４ｗｋ，分别用４０条日本血吸虫尾蚴攻击感染，计数成虫数和每克肝组织虫卵数。结果ｐＣＤＳｊ３２皮内免疫注射后，可在朗罕细胞、表皮的角质形成细胞、真皮的成纤维细胞和毛囊基底细胞的胞浆内表达，表达产物具有免疫原性。与对照组相比，１００μｇ／１００μ１ｐＣＤＳｊ３２单剂量免疫后４ｗｋ，可产生较好的保护效果，减成虫率达３８．３０％，肝脏组织减虫卵率为５６．０１％。结论首次用皮内基因免疫的方法证明日本血吸虫ＤＮＡ疫苗ｐＣＤＳｊ３２可在皮肤多种细胞内表达，并可诱导小鼠产生较强的抗血吸虫感染的保护力。该免疫方法是继肌肉免疫注射之后又一种颇为有效的基因免疫途径，它将为抗血吸虫感染免疫提供一种模拟生理?

日本血吸虫裸露DNA疫苗pCDSj32免疫小鼠血清抗体的动态及免疫血清介导巨噬细胞杀伤童虫ADCC效应的体外观察

为了进一步探讨 p CDSj32诱发小鼠抗血吸虫感染的保护免疫机制 ,分别用 10 0 μg和 30 0 μg p CDSj32质粒免疫小鼠 ,观察血清 Ig G抗体滴度的动态变化。结果显示 ,单剂量免疫后 4wk,血清 Ig G滴度可达 1∶ 32 0以上 ,以后血清抗体滴度均维持在 1∶ 6 40～ 12 80 ,最少可持续 2 4wk。末次取血清后 ,用日本血吸虫尾蚴攻击感染后 7d,测定血清抗体滴度可骤升至 1∶ 2 5 6 0以上。抗体依赖细胞介导的细胞毒试验表明 ,10 0 μg p CDSj32质粒免疫后 4wk及