奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌ClfA活性基因核酸疫苗的构建及免疫试验

为了研制奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌DNA候选疫苗,试验采用PCR方法扩增奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌主要抗原ClfA活性基因,将其亚克隆至真核表达载体pVAX1启动子下游,构建真核表达质粒,通过体外细胞转染试验进行抗原性初步确认;同时进行Balb/c小鼠免疫试验,分别检测免疫后的ELISA抗体水平、Th1/Th2类细胞因子及T淋巴细胞增殖情况。结果表明:外源基因能在真核细胞中表达并被金黄色葡萄球菌抗体特异性识别。用构建的核酸疫苗pVAX1-pClfA免疫小鼠后,ELISA抗体水平提高,Th1/Th2类细胞因子含量提升,T淋巴细胞增殖能力增强。说明所构建的重组DNA候选疫苗具有抗原性、免疫原性及预防奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌的潜力和应用前景。