ABCD2评分联合血清泛连接蛋白、微小RNA-20b对头晕患者发生缺血性卒中有预测价值

目的:探讨年龄、血压、单侧肢体无力和言语障碍、持续时间、糖尿病(ABCD2)评分联合血清泛连接蛋白、微小RNA(miRNA)-20b对头晕患者发生缺血性卒中(IS)的预测价值。方法:收集148例头晕患者,根据是否发生IS分为IS组(109例)和非IS组(39例)。比较分析2组患者一般资料、ABCD2评分和血清泛连接蛋白、miR-20b水平。多因素Logistic回归分析头晕患者发生IS影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析ABCD2评分联合血清泛连接蛋白、miR-20b水平对评估头晕患者发生IS的预测价值。结果:IS组年龄、高血压史比例、ABCD2评分、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、泛连接蛋白水平明显高于非IS组,miR-20b水平明显低于非IS组(P均<0.05)。LDL-C升高(OR=2.575,95%CI:1.497~3.353)、ABCD2评分>3分(OR=3.069,95%CI:2.242~5.408)、泛连接蛋白升高(OR=1.089,95%CI:1.018~1.187)为头晕患者发生IS独立影响因素(P均<0.05),miR-20b为独立保护因素(OR=0.351,95%CI:0.220~0.559,P<0.05)。3个指标联合预测头晕患者发生IS的曲线下面积(AUC=0.859,95%CI:0.791~0.926)明显大于ABCD2评分(AUC=0.759,95%CI:0.669~0.849)、泛连接蛋白(AUC=0.656,95%CI:0.554~0.759)、miR-20b(AUC=0.821,95%CI:0.750~0.893)单独预测(P均<0.05)。结论:ABCD2评分和血清泛连接蛋白、miR-20b水平为头晕患者发生IS独立影响因素,3个指标联合对头晕患者IS风险有预测价值。

利用pET-20b克隆与表达多功能半纤维素酶

将来源于嗜热厌氧乙醇菌(Thermoanaerobacter ethanolicus,JW200)的双活性阿拉伯/木糖苷酶(XarB)构建到pET-20b(+)上,得到质粒pET-20b-xarB。将来源于疏棉状嗜热丝孢菌(Thermomyces lanuginosus DSM 5826)木聚糖酶A(XynA)构建到pET-20b-xarB上,得到表达质粒pET-20b-xarB-xynA。将重组质粒pET-20b-xarB-xynA转入大肠杆菌Escherichia coli JM109(DE3)进行表达。SDS-PAGE结果显示,该重组酶的分子量为108 kDa,与理论值相符。

猴痘病毒B20R蛋白原核表达及其多克隆抗体的制备

【目的】构建猴痘病毒B20R蛋白原核表达系统,并评价原核表达获得的融合蛋白免疫原性,为后续的猴痘病毒检测及新型治疗方法开发提供技术支撑。【方法】参照GenBank已公布的猴痘病毒基因组序列,按照大肠杆菌密码子偏好性对B20R基因DNA序列进行优化,人工合成B20R基因并将其分别克隆至表达载体pET-28a和pET-32a以构建原核表达载体;以构建的2种原核表达载体分别转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导表达后使用SDSPAGE和Western blotting检测融合蛋白B20R的表达情况。通过控制变量法优化融合蛋白B20R的诱导表达条件,使用Ni柱亲和层析进行纯化;以纯化的融合蛋白B20R经腹腔注射免疫昆明小鼠,定期采集昆明小鼠血样,采用ELISA检测血清抗体效价。【结果】将B20R基因克隆至表达载体pET-32a能成功构建原核表达载体pET-32a-B20R,经IPTG诱导后,可在大肠杆菌BL21感受态细胞中表达出融合蛋白B20R,且主要以不可溶的包涵体形式进行表达。融合蛋白B20R最佳诱导表达条件为37℃下以0.6 mmol/L IPTG诱导12 h,Ni柱亲和层析纯化的最佳咪唑洗脱浓度为40 mmol/L。以纯化的融合蛋白B20R接种免疫昆明小鼠,可在短时间内引起昆明小鼠产生强烈的体液免疫,且至免疫第42 d仍然维持较高的抗体水平,抗体效价高达1∶409600。【结论】构建的猴痘病毒B20R蛋白原核表达载体可在大肠杆菌BL21细胞中以包涵体形式成功表达出融合蛋白B20R,且融合蛋白B20R具有良好的免疫原性,可在短时间内引起昆明小鼠产生强烈的体液免疫。

子痫前期患者血清miR-20b、miR-4443水平及与不良妊娠结局的关系

目的检测子痫前期(PE)患者血清微小RNA-20b(miR-20b)、微小RNA-4443(miR-4443)的水平,并探讨二者对PE患者妊娠结局的预测价值。方法选取2021年2月至2023年1月在本院接受治疗的212名PE患者为研究组,根据病情严重程度分为重度PE组(n=106)和轻度PE组(n=106);另选取同期106例孕检健康的孕妇作为对照组。根据重度PE组患者的妊娠结局分为妊娠结局良好组和妊娠结局不良组。采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测所有受试者血清中miR-20b和miR-4443的表达水平;使用多因素Logistic回归分析患者妊娠结局的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线评估miR-20b、miR-4443对重度PE孕妇妊娠不良结局的预测价值。结果对照组、轻度PE组、重度PE组血清miR-20b、miR-4443水平逐渐升高(F值分别为486.199和354.434,P<0.001),胎儿宫内窘迫和早产的发生率在各组之间差异显著(χ^(2)值为10.498和15.163,P<0.001)。重度PE组不良妊娠结局总发生率为48.11%,显著高于轻度PE组及对照组(χ^(2)=50.956,P<0.001)。妊娠结局不良组miR-20b水平及miR-4443水平均显著高于妊娠结局良好组(t=5.750,5.853,P<0.001)。多因素Logistic回归分析表明,miR-20b(OR=3.564,95%CI:1.546~8.214)、miR-4443(OR=2.365,95%CI:1.472~3.800)、收缩压(OR=2.869,95%CI:1.373~5.995)、尿蛋白(OR=3.837,95%CI:1.910~7.709)、甘油三酯(TG)(OR=4.236,95%CI:2.027~8.851)是患者发生不良妊娠结局的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,miR-20b、miR-4443联合预测重度PE妊娠结局的曲线下面积(AUC)为0.945(95%CI:0.901~0.989),显著高于miR-20b及miR-4443单独预测(Z值分别为2.412和2.055,P<0.05)。结论重度PE患者血清miR-20b、miR-4443呈高表达,与不良妊娠结局的发生风险有关,二者联合使用可作为重度PE患者不良妊娠结局的预测指标。

原发纵隔CD20阴性弥漫大B细胞淋巴瘤1例并文献复习

回顾性分析1例原发纵隔CD20阴性弥漫大B细胞淋巴瘤病例的临床资料,并复习相关文献。患者,男,26岁反复胸痛3个月,影像学检查提示纵隔巨大占位,于外科行纵隔占位活检,术后免疫组织化学提示:CD20(-)、CD19(+)、PAX-5(+)、CD3(-)、CD5(-)、CD10(-)、TdT(-)、MUM1(+)、CD30(个别+)、Ki-67(约60%+)、BCL-2(+)、C-MYC(10%~20%)。诊断为CD20阴性弥漫大B细胞淋巴瘤,予以多疗程联合化疗后,疗效欠佳,病情进展,失访。CD20阴性弥漫大B细胞淋巴瘤侵袭性强,诊治难度大,预后差。

团簇M_(2)B^(-)_(20)(M=Li,Na,K)几何结构和特性的第一性原理研究

结合卡利普索结构预测程序和密度泛函理论的第一性原理计算,详细研究了M_(2)(M=Li,Na,K)掺杂B^(-)_(20)团簇体系的几何结构、电子、热力学和光谱特性.结构分析表明,碱金属原子的掺杂完全改变了原B^(-)_(20)团簇几何结构.Li_(2)B^(-)_(20)和Na_(2)B^(-)_(20)团簇的全局极小结构拥有相似几何构型,结构由一个管(两个B_(9)环包含两个B)和管异侧的两个M原子构成.K_(2)B^(-)_(20)团簇的全局极小结构为高对称性的管状结构,掺杂的两个K原子分居两个B10环构成管的两侧.基于上述全局极小结构,分析了体系的电子特性(电荷转移和磁性)和热力学特性(定容热容和标准熵).最后,基于Multiwfn程序,拟合出了体系的光电子能谱、红外和拉曼光谱.本文工作为M_(2)B^(-)_(20)(M=Li,Na,K)团簇的实验和理论研究提供了指导和帮助.

SCCLG-ALL-2016方案治疗初诊CD20抗原阳性儿童B-ALL的临床特点及生存分析

目的 探讨华南地区儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)治疗协作组2016治疗方案(SCCLG-ALL-2016)对儿童B细胞起源ALL(B-ALL)中CD20抗原表达与一般临床特点以及预后之间的关系。方法 回顾性分析2016年10月至2023年12月期间在广东医科大学附属医院接受治疗的113例初诊B-ALL患儿的临床特点以及生存情况,分析其基本资料与临床特征、染色体核型、融合基因、临床危险度、骨髓缓解、复发情况及生存曲线。结果 113例初诊B-ALL患儿CD20阳性表达率23.01%;CD20阳性表达与性别、脾脏增大、初诊血小板计数以及融合基因方面存在显著统计学意义(P<0.05)。CD20抗原阳性组与CD20抗原阴性组患儿在初诊年龄、初诊白细胞计数、染色体核型、第15、33天骨髓残留情况以及复发方面的差异均无统计学意义(P>0.05)。生存曲线分析结果显示,CD20抗原阳性组患儿的3年无事件生存(EFS)率为(75.3±10.2)%,CD20抗原阴性组患儿的3年EFS率为(85.2±4.3)%;两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。CD20抗原阳性组患儿的总生存期(OS)率为(82.8±7.9)%,而CD20抗原阴性组患儿的OS率为(90.4±3.2)%,两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 在儿童B-ALL中,CD20抗原的表达与性别、脾脏情况、初诊血小板计数以及融合基因表达相关,但与其他一般临床特点和预后无关,CD20抗原不是B-ALL患儿预后的影响因素,脾脏是否增大、初诊白细胞计数、危险度及融合基因是影响B-ALL患儿预后的独立因素。

利拉鲁肽调控miR-20b及TXNIP对非酒精性脂肪性肝病的影响机制研究

目的探讨利拉鲁肽(LG)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的影响机制,以及其对微小RNA20b(miR-20b)和硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)的调控机制。方法人肝细胞L02购自通派(上海)生物科技有限公司。50只雄性成年SD大鼠,鼠龄9~10周,体质量275~300 g。细胞实验部分:采用棕榈酸(PA)诱导人肝细胞L02形成脂肪变性细胞;由油红O、Rh123染色依次检测各组细胞中脂质沉积和线粒体膜电位的变化;经miRNA生物芯片分析及聚合酶链式反应(PCR)实验确定LG的作用靶点。动物实验部分:大鼠被随机分为正常对照组(Normal组)、NAFLD组(Model组)、NAFLD+LG组(LG组)、NAFLD+LG+miR-20b-antagomiR组(LG+antagomiR组)、NAFLD+LG+miR-20b-antagomiR+siRNA-TXNIP组(LG+antagomiR+si组)。高脂饲料连续喂养12周构建大鼠NAFLD模型;生化分析仪检测大鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的含量;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测大鼠肝组织中miR-20b和TXNIP的表达;JC-1染色检测大鼠肝组织细胞的线粒体膜电位的变化;油红O检测大鼠肝组织中的脂质沉积;Western blot检测各组大鼠肝组织中TXNIP、硫氧还蛋白还原酶(TRXR)、线粒体融合蛋白2(MFN2)、视神经萎缩蛋白1(OPA1)和脂滴包被蛋白2(PLIN2)的表达。结果LG能明显降低PA诱导的L02细胞中脂滴沉积,升高其线粒体的膜电位;经miRNA生物芯片分析及PCR实验确定LG的作用靶点为miR-20b,双荧光素酶实验确定miR-20b靶向调控TXNIP的表达。LG能明显降低NAFLD大鼠血清中TC、TG的含量,升高肝组织中miR-20b、TRXR、MFN2、OPA1的表达及肝组织中的线粒体膜电位,降低肝组织中TXNIP和PLIN2表达及脂滴沉积。LG+antagomiR能部分逆转LG对肝组织的保护作用,LG+antagomiR+si能部分恢复药物这些作用,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论利拉鲁肽可以调控miR-20b的表达,靶向TXNIP的表达,改善NAFLD肝组织中线粒体的功能障碍,下调脂滴沉积。

基于Lab VIEW和DS18B20的智能恒温控制系统设计

设计基于Lab VIEW软件的上位机与STM32下位单片机连接串口通信,STM32单片机采用“一线总线”接口和DS18B20温度传感器组成温度控制部分,整个过程实现了数字通信方式传输与控制,极大提高了整个恒温控制过程的稳定性以及抗干扰性能。STM32单片机通过优化的控制算法能对温度精确的进行控制,可以显示在由LabVIEW软件编写的上位机上,通过LabVIEW软件可实现直观的温度控制显示以及趋势曲线的显示并能够存储温度数据,方便各种数据查询分析以及智能控制。

人β_2-微球蛋白在pET-22b(+)表达载体中的克隆、表达与纯化

目的 :构建人 β2-microglobulin( β2- M)基因的原核表达载体 ,在大肠杆菌中高效表达 β2 -M蛋白质并进行纯化 ,为构建MHC 肽四聚体奠定基础。方法 :从人外周血单核细胞中提取总RNA ,采用RT-PCR技术扩增出去除信号肽部分的 β2-M基因 ,克隆入pET-2 2b( + )表达载体进行诱导表达。采用离子交换层析和凝胶过滤方法对表达产物进行纯化 ,用ELISA和West ernblot法进行免疫学鉴定。结果 :成功地构建了表达载体pET-2 2b( + )- β2-M ,对表达产物进行了纯化 ,并对表达产物进行了鉴定。结论 :获得 β2- M蛋白的高效表达 。

20MHzB型超声与频域光学相干断层扫描在黄斑病变诊断中的对比观察

背景黄斑区病变的形态学检查在疾病的早期诊断中发挥着重要作用。频域光学相干断层扫描（OCT）在屈光间质混浊眼的检查受到限制，传统的10MHzB型超声检查对黄斑病变的分辨率较低，20MHzB型超声检查在黄斑区疾病中的应用是一种新的方法。目的应用频域OCT和20MHzB型超声对黄斑病变进行形态学对比观察，探讨20MHzB型超声对黄斑疾病的临床诊断价值。方法收集在天津医科大学眼科中心确诊的黄斑病变患者51例51眼，患眼均行频域OCT扫描，然后行20MHzB型超声检查。黄斑病变按频域OCT检查的形态学改变进行分类，分析20MHzB型超声的声像学特征，探讨病因。结果根据频域OCT检查检出黄斑裂孔10眼，B型超声显示黄斑区实性圆顶状回声表浅隆起，病变中央呈孔状凹陷。频域OCT检出的黄斑水肿16眼、神经上皮层脱离6眼和视网膜劈裂4眼，B型超声均显示黄斑区球壁表面的局限性带状表浅隆起，其下见液性无回声间隙。频域OCT检出的视网膜色素上皮（RPE）层脱离15眼，B型超声检查显示黄斑区球壁表面局限带状强回声表浅隆起，光带较厚，其下见液性无回声间隙。结论20MHzB型超声能对几种常见的黄斑病变进行初步鉴别，与频域OCT相比，黄斑病变B型超声表现的识别能力稍欠，但在屈光问质混浊的情况下，B型超声的诊断作用优于频域OCT。

20MHz B型超声探查在眼底疾病诊断中的应用价值分析

目的分析20 MHz B超声的声像特征及其诊断价值。方法选取来该院就诊,已明确诊断的眼底疾病患者以20 MHz B超采用直接法对其探查,并将声像图与其OCT检查结果进行对比分析。结果根据OCT检查结果分析相应的20 MHz B超声像特征,黄斑裂孔8眼,B型超声显示黄斑区圆顶带状表浅隆起回声,病变中央呈孔状断裂;中心性浆液性脉络膜视网膜病变17眼,B型超声图像表现为黄斑区形态规则的纤细条索扁平弧形或峰样隆起回声,越远离黄斑中心凹隆起越低;黄斑裂孔性视网膜脱离5眼、黄斑水肿20眼、视网膜劈裂2眼,B型超声均显示黄斑区表面局限性弧形或形态不规则的扁平弧形条索状表浅隆起回声,其下为液性无回声间隙;视网膜色素上皮层(RPE)脱离3眼,B型超声检查显示后极部表面局限性不规则带状强回声浅隆起,其下见液性无回声间隙。结论在屈光间质混浊及非后极部病变的情况下,20 MHzB超探查对眼底疾病能够进行初步鉴别,一定程度上弥补了OCT不足。

嵌合抗CD_(20) Fab′对B淋巴瘤细胞Raji细胞生长的影响

目的：研究嵌合抗CD_(20)基因工程抗体Fab′的抗肿瘤活性。方法：利用MTT法以及3H掺入法测定嵌合抗CD_(20) Fab′对Raji细胞生长的影响。结果：MTT法测定结果显示嵌合抗CD_(20) Fab′对Raji细胞的生长具有抑制作用，抑制作用成剂量依赖性，其IC50为24μg／ml；嵌合抗CD_(20) Fab′对3H－TdR掺入Raji细胞无抑制作用，表明抗CD_(20) Fab′不影响Raji细胞DNA的合成；但嵌合抗CD_(20) Fab′抑制3H－UdR掺入Raji细胞，表明嵌合抗CD_(20) Fab′对Raji细胞RNA合成具有抑制作用，其抑制作用成剂量相关性。结论：嵌合抗CD_(20) Fab′抑制Raji细胞生长，嵌合抗CD_(20) Fab′具有较好的抗肿瘤活性。

丁基罗丹明B-硫氰酸盐-吐温-20体系高灵敏分光光度法测定微量硒的研究

本文叙述了在吐温-20存在下用硫氰酸盐和丁基罗丹明B形成缔合型三元配合物测定微量硒(Ⅳ)。配合物的最大吸收波长为600nm,硒含量在0—5μg/25ml服从朗伯比尔定律,其ε_(600)=6.4×10~5,重现性好,选择性高,是目前测定微量硒的一种高灵敏度的新的分光光度法,已用于水样中微量硒的测定。

基于DS18B20的数字式温度采集报警系统设计

介绍了一种基于AT89S52单片机和DS18B20温度传感器的温度采集和报警系统,对方案设计、元器件选型、硬件结构和软件设计等几部分内容进行了详细说明。硬件结构由电源模块、测温模块、报警模块、显示模块和按键模块五大模块组成,软件给出了DS18B20初始化时序、读写时序和温度采集程序。该系统能实现温度采集、显示、报警和报警限设置功能,广泛应用于仓储、农业和运输等。经过测试,该系统具有良好的稳定性和精度,抗干扰能力强,易于扩展且实用。

基于STC12C系列单片机的DS18B20编程

针对新一代高性能单时钟/机器周期的STC12C系列单片机由于执行速度远高于传统的51单片机而不能直接使用原有单片机程序的问题,采用Keil软件的性能分析器来计算Atmel单片机的执行时间;通过手工计算修改程序段的执行时间,使STC12C系列单片机的执行时间满足数字温度传感器DS18B20的时序要求。测试结果表明STC12C2052能正确读取DS18B20的温度转换值,此方法对于具有时序要求的可编程器件的使用具有一定的参考价值。

基于DS18B20温度传感器的温度测量系统设计

设计了一种基于DS18B20温度传感器的温度测量系统,该系统由DS18B20温度传感器、STC89C516RD+单片机与LCM液晶显示屏组成。构建了实验电路图并实现了仿真实验。结果显示本系统的测量结果与温度计的实际测量结果基本吻合,符合预期仿真结果。

伊马替尼抑制Jurkat T细胞增殖与影响A20和NF-κB表达相关

目的研究伊马替尼(IM)对T细胞Fyn、A20和NF-κB转录的影响及意义。方法 50 nmol/L浓度IM作用Jurkat细胞24 h后,以K562细胞为对照,应用实时荧光定量PCR技术检测Fyn、A20和NF-κB基因表达水平变化;Western blot技术检测A20和NF-κB蛋白水平变化。结果 IM明显上调Jurkat细胞A20基因表达水平,明显下调NF-κB基因表达水平,而Fyn基因表达水平没有明显变化。K562细胞受到IM处理后,A20和NF-κB的表达水平改变与Jurkat细胞相似,但Fyn基因水平明显下调。Fyn基因表达下调与IM下调BCR/ABL融合基因表达有显著的相关性。A20和NF-κB蛋白水平变化与mRNA变化一致。结论 IM不仅通过抑制BCR/ABL融合基因表达下调Fyn转录水平,而且也可通过上调A20和下调NF-κB表达抑制T细胞增殖作用。

基于ARM9和DS18B20的汽车空调系统设计

采用ARM9内核芯片S3C2410为控制器,设计了一种嵌入式汽车空调温度控制系统,可实现现场显示、实时控制等功能。传感器使用了单总线数字式温度传感器DS18B20测量温度值。阐述了系统的构成原理和实现流程,重点介绍了系统的硬件结构。结合温度模糊控制算法,实验表明系统的硬件电路简单、控制精度好、可靠性高,且易于扩展。

利妥昔单抗免疫化疗联合自体外周血干细胞移植治疗CD20~＋B细胞性非霍奇金淋巴瘤的临床研究

目的分析和探讨利妥昔单抗联合自体外周血造血干细胞移植(APBSCT)序贯维持治疗对CD20+B细胞非霍奇金淋巴瘤(NHL)的疗效。方法搜集2005年1月-2011年1月诊断为侵袭性和(或)难治复发性CD20+B细胞NHL并接受APBSCT治疗的60例患者的临床资料。分为2组:治疗组(n=25),APBSCT前应用利妥昔单抗3～4次,采集自体干细胞前1d加用利妥昔单抗治疗1次(375mg/m2)体内净化干细胞,移植后每3~6个月应用利妥昔单抗联合白细胞介素-2(100万U/次,缓慢静滴)维持治疗3～4次;对照组35例,除未用利妥昔单抗以外,其他处理与治疗组相同。结果利妥昔单抗在移植前、干细胞采集前及移植后巩固治疗中均未发现明显不良反应。治疗组和对照组采集单个核细胞数分别为(8.2±2.9)×108/kg和(8.4±3.9)×108/kg(P=0.822),CD34+细胞数分别为(12.3±12.7)×106/kg和(13.2±13.9)×106/kg(P=0.799)。治疗组均顺利完成造血重建,对照组3例造血重建失败。两组中性粒细胞恢复时间和血小板恢复时间差异无统计学意义。移植后所有病例均达完全缓解(CR),中位随访22(2～81)个月,治疗组2例复发,对照组6例复发。治疗组3年总体生存率有高于对照组的趋势(91.6%vs 69.5%,P=0.060)。结论侵袭性和(或)难治复发性CD20+B细胞NHL患者APBSCT前后应用利妥昔单抗不影响造血干细胞的采集和造血重建,且有望提高治疗效果、改善总体生存。