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应用Intein融合的鸡IL-2蛋白制备多克隆抗体
被引量:
3
1
作者
邓晨
于佩峰
+3 位作者
张鑫
王梦云
吕岩
艾永兴
《吉林农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第3期368-374,共7页
研究Intein标签与目的蛋白chIL-2融合作为抗原,进行高效价兔抗chIL-2蛋白多克隆抗体的制备,将去除去了N-端信号肽的chIL-2基因(366 bp)克隆连接到p TYB1原核表达载体,将chIL-2基因与1 362 bp的Intein基因融合在同1开放阅读框内,编码分...
研究Intein标签与目的蛋白chIL-2融合作为抗原,进行高效价兔抗chIL-2蛋白多克隆抗体的制备,将去除去了N-端信号肽的chIL-2基因(366 bp)克隆连接到p TYB1原核表达载体,将chIL-2基因与1 362 bp的Intein基因融合在同1开放阅读框内,编码分子量约为71 ku的chIL-2-Intein融合蛋白。诱导表达chIL-2-Intein融合蛋白,应用Chitin-Sepharose亲和层析进行融合蛋白纯化。用纯化的chIL-2-Intein融合蛋白免疫大白兔制备多克隆抗体。应用昆虫细胞表达系统纯化出的chIL-2-6His蛋白作为抗原,包被ELISA板用于抗体效价的检测,Western Blot分析抗体特异性。结果表明:应用纯化的chIL-2-Intein融合蛋白成功制备特异性chIL-2抗体,效价高达4 096 000,且该抗体也能用于Intein标签蛋白的检测。
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关键词
内肽酶
鸡白介素-2
ptyb
1
多克隆抗体
原文传递
题名
应用Intein融合的鸡IL-2蛋白制备多克隆抗体
被引量:
3
1
作者
邓晨
于佩峰
张鑫
王梦云
吕岩
艾永兴
机构
吉林大学动物科学学院
出处
《吉林农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第3期368-374,共7页
基金
国家自然科学基金项目(31272528)
教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET-12-0232)
教育部留学回国人员科研启动基金项目[教外司留(2013)693号]
文摘
研究Intein标签与目的蛋白chIL-2融合作为抗原,进行高效价兔抗chIL-2蛋白多克隆抗体的制备,将去除去了N-端信号肽的chIL-2基因(366 bp)克隆连接到p TYB1原核表达载体,将chIL-2基因与1 362 bp的Intein基因融合在同1开放阅读框内,编码分子量约为71 ku的chIL-2-Intein融合蛋白。诱导表达chIL-2-Intein融合蛋白,应用Chitin-Sepharose亲和层析进行融合蛋白纯化。用纯化的chIL-2-Intein融合蛋白免疫大白兔制备多克隆抗体。应用昆虫细胞表达系统纯化出的chIL-2-6His蛋白作为抗原,包被ELISA板用于抗体效价的检测,Western Blot分析抗体特异性。结果表明:应用纯化的chIL-2-Intein融合蛋白成功制备特异性chIL-2抗体,效价高达4 096 000,且该抗体也能用于Intein标签蛋白的检测。
关键词
内肽酶
鸡白介素-2
ptyb
1
多克隆抗体
Keywords
intein
chicken IL-2
ptyb 1 vector
polyclonal antibody
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
S831.2 [农业科学—畜牧学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
应用Intein融合的鸡IL-2蛋白制备多克隆抗体
邓晨
于佩峰
张鑫
王梦云
吕岩
艾永兴
《吉林农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
3
原文传递
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