2个棒状杆菌质粒pXZ10142和pXZ10145.1及其转座子TN45的特征分析

对 1株棒状杆菌 10 14中分离到的 2个质粒 pXZ10 14 5 .1和 pXZ10 14 2进行了相互关系分析 .序列分析显示pXZ10 14 2源自 pXZ10 14 5 .1.pXZ10 14 5 .1包括 6个开放读码框 (openreadingframe ,ORF) ,其中ORF1编码 2 4 7个氨基酸 ,经缺失分析是复制酶 .在 pXZ10 14 5 .1上发现 1个转座子TN4 5 ,转座子上有CMR基因和TNP基因 .一对颠倒重复序列IR1a和IR1b位于 pXZ10 14 5 .1和 pXZ10 14 2的交互处 ,两边是顺向重复序列ATCTAG .

T_(32)终止子在棒状杆菌基因表达中的功能

分别构建成两个克隆了邻苯二酚双加氧酶基因（xylE）的棒状杆菌—大肠杆菌穿梭表达质粒pJL13和pJL23.质粒pJL23中xylE基因下游带有pJL13中没有的T32终止子.比较两个质粒的邻苯二酚双加氧酶表达活性，发现T32可在棒状杆菌中有效地促进外源基因的表达.

棒状杆菌表达载体pJL23的构建

质粒 pGA46 4带有从谷氨酸棒杆菌染色体上分离到的有启动功能的片段 ,用PCR技术从 pGA46 4中扩增了该片段的关键区域 :启动子PGL.将该启动子经EcoRⅠ BamHⅠ双酶切后 ,与大肠杆菌质粒 pJL0 1的EcoRⅠ BamHⅠ大片段连接 ,再接入XylEgene和棒状杆菌质粒pXZ 10 142 ,构建成棒状杆菌 大肠杆菌穿梭表达载体 pJL2 3.用邻苯二酚双加氧酶基因检测表明 ,该表达载体可在棒状杆菌中高效地表达外源基因 .