出芽短梗霉菌株PA-2胁迫下藜qRT-PCR内参基因的筛选与验证

为筛选适合出芽短梗霉菌株PA-2胁迫下藜中稳定表达的内参基因,在转录组数据(NCBI登录号为:SRA:SRR12674257)分析的基础上,以PA-2不同时间胁迫的藜叶片为材料,分析藜中ACT-1、TUB-1、GAPDH、eEF1α、eIF3、UBQ、PTB、COX10、UPL6、TIP41L、RAN-B1和IDH-5等12个内参基因的表达水平,并利用ΔCt、GeNorm、NormFinder、BestKeeper及RefFinder分析候选内参基因的表达稳定性。结果表明,内参基因COX10是PA-2不同时间胁迫下藜中最稳定的内参基因,最优组合是COX10+eEF1α。通过分析藜ACC基因的相对表达水平,验证了内参基因的可靠性,为今后杂草藜胁迫响应基因的表达分析提供了参考基因和理论依据。

乳酸片球菌R-4细菌素PA-1原核表达及其理化特性

为实现原核表达产出细菌素并检测其理化特性,作者将乳酸片球菌R-4细菌素pedA基因进行扩增回收,与pMD19-T载体连接后转入E.coli DH5α感受态细胞进行克隆。提取克隆后的pedA基因与表达载体pET-32a(+)连接,形成重组质粒pET-32a-pedA并转入E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经异丙基硫代半乳糖苷诱导,乳酸片球菌R-4细菌素PA-1在大肠杆菌细胞进行表达。表达蛋白质经Ni-NTA柱纯化后,以金黄色葡萄球菌为指示菌检测其理化特性。结果表明,在E.coli BL21(DE3)细胞中成功表达相对分子质量为26000的乳酸片球菌R-4细菌素PA-1并完成纯化。纯化后的乳酸片球菌R-4细菌素PA-1在40~121℃作用20 min、在pH 2~12、紫外线照射0~10 h、过氧化氢酶作用2 h后,其抑菌范围分别为14.7~15.6 mm、14.0~16.5 mm、15.1~15.8 mm和14.9 mm,而分别经胃蛋白酶和胰蛋白酶作用2 h均失去抑菌作用。这表明乳酸片球菌R-4细菌素PA-1对高温、强酸强碱、紫外线和过氧化氢酶均具有较好的稳定性,而胃蛋白酶和胰蛋白酶会使其失活。

离聚体Surlyn对PET/PA-6共混物的相容性及形态结构的影响

通过偏光显微镜（ Ｐ Ｌ Ｍ ）观察、扫描电镜（ Ｓ Ｅ Ｍ ）观察、动态力学分析（ Ｄ Ｍ Ａ）和广角 Ｘ 射线衍射分析（ Ｗ Ａ Ｘ Ｄ），研究了离聚物 Ｓｕｒｌｙｎ 对 Ｐ Ｅ Ｔ／ Ｐ Ａ６ 共混物的相容性及形态结构的影响。实验结果表明，在以 Ｐ Ｅ Ｔ 为主体的 Ｐ Ｅ Ｔ／ Ｐ Ａ６ 简单共混物中，两者的相容性很差。 Ｐ Ｅ Ｔ、 Ｐ Ａ６ 是分别结晶的，不生成共晶。加入离聚体 Ｓｕｒｌｙｎ 后，改善了共混物无定形区和晶区的相容性，增加了界面粘接力，使分散相 Ｐ Ａ６ 的尺寸减小、分布趋向均匀。当 Ｓｕｒｌｙｎ的含量达到 ６％ 时，其增容效果最好。

苦参碱抑制人卵巢恶性畸胎瘤细胞株PA-1体外增殖的研究

目的探讨苦参碱(matrine,MAT)对人卵巢恶性畸胎瘤细胞株PA-1体外增殖的影响。方法体外培养人卵巢恶性畸胎瘤细胞株PA-1,分组予不同浓度苦参碱作用。MTT法检测0.25、0.50、1.0 mg/mL不同浓度苦参碱对细胞增殖的抑制作用以及药物作用的量效和时效关系;流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;半定量RT-PCR检测bcl-2/bax mRNA表达水平的变化。结果MTT法显示药物作用后,细胞有明显的抑制增殖作用,且呈时间依赖性和剂量依赖性;流式细胞仪检测不同浓度的苦参碱作用后PA-1细胞的凋亡率依次上升,并与作用时间正相关;细胞周期结果显示苦参碱对PA-1细胞具有明显的G_1期阻滞作用,且具有剂量依赖性。结论苦参碱能使PA-1细胞bcl-2 mRNA和bax mRNA的比值下调,产生G_1期阻滞,从而调节细胞周期,最终导致PA-1细胞在体外的增殖受到明显抑制。

结核分枝杆菌对PA-824耐药的体外诱导及稳定性研究

目的体外诱导并获得结核分枝杆菌(MTB)对PA-824的耐药菌株。方法选取MTB标准株H_(37)Rv,在PA-824浓度二倍递增的含药培养基上进行传代培养,逐步诱导菌株对PA-824耐药,测定多种抗结核药物对PA-824耐药株的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),并对耐药株测序鉴定ddn和fgd1基因的突变情况。将耐药株在无药固体培养基上连续传代培养10代以观察耐药稳定性。结果 H_(37)Rv经逐步诱导后得到5株MTB单克隆,它们对PA-824的MIC值是诱导前8倍以上,且对TBA-354同时发生交叉耐药。测序结果显示fgd1基因未发生突变,但5株均检测到ddn基因突变。耐药株在无药固体培养基上连续传代10代后,MIC值无明显变化。结论通过二倍递增体外诱导可以获得对2种硝基咪唑类(nitroimidazoles)药物均耐药的MTB菌株;MTB对硝基咪唑类药物的耐药可能与ddn基因突变有关;MTB对硝基咪唑类药物的耐药稳定性较强,不易复敏。

多孔n-HA／PA-6复合材料的制备及性能

采用注塑方法制备了多孔纳米磷灰石／聚酰胺-6（n—HA／PA-6）复合材料，采用SEM、XRD、IR、力学性能测试考察了多孔材料的性能。结果发现：多孔纳米磷灰石／聚酰胺-6复合材料的孔隙分布均匀，贯通性良好，孔的尺寸约为100～700μm，平均孔径约300～500μm，大孔壁上有丰富的微孔；所得多孔复合材料的孔隙率可控，总孔隙率最高可达88．6％；多孔材料的总孔隙率降低，则开孔率随之降低；多孔纳米磷灰石／聚酰胺-6复合材料的抗压强度为1．1～15．6MPa，压缩模量为0．4～1．4GPa；在总孔隙率相近的条件下，多孔材料的抗压强度随n—HA质量分数增加而升高；发泡剂和发泡过程对组成纳米磷灰石／聚酰胺-6复合材料的两组元材料的性质和结构无影响。这种多孔材料可望作为人体非承重部位的植入骨修复体和组织工程支架使用。

工艺条件对HDPE/PA-6共混体系形态结构影响的研究

通过测试HDPE、PA 6的流变性能和对共混物进行显微镜法 (PCM)分析 ,研究了加工温度和剪切速率等工艺条件对HDPE/PA 6共混体系形态结构的影响。结果表明 :改变加工温度可以调节HDPE/PA 6共混组成粘度比。PA 6和HDPE的粘度比较大时 ,PA 6相呈层状分布结构 ,剪切作用有利于共混体系两相的分散 ,剪切速率过低易使PA 6相区尺寸大 ,分散不均匀。较高的剪切速率使PA 6相尺寸减小 ,分散更均匀 ;适合的加工温度和剪切速率可以获得具有耐油性的层状HDPE/PA

PA-6/UHMWP/EHDPE-g-MAH共混合金的形态结构与性能的研究

通过SEM观察和机械性能测试,研究了PA 6 UHMWPE HDPE g MAH共混合金的形态结构和性能。结果表明:加入HDPE g MAH可有效地改善共混物的相容性,增强两相界面间的粘结强度,降低分散相尺寸;同时还改善了共混物的机械性能,降低了熔体流动速率,提高了常温和低温冲击强度,降低了吸水率。

聚酯含量对PBT/PET/PA-6三元共混物性能影响

采用ＤＳＣ、ＳＥＭ等方法对ＰＢＴ／ＰＥＴ／ＰＡ６三元共混物中聚酯含量的变化与共混物性能之间的关系进行了研究。实验结果表明，共混物中ＰＥＴ含量的增加有利于提高该三元共混物的热性能和结晶性能；另外，ＰＢＴ含量的增加则大大提高了共混物的抗冲击能力。

抗结核新药SQ109、PA-824、OPC-67683与R207910研究进展

近10余年来，由于HIV／AIDS的流行、移民、多种耐药结核菌的增多，以及不少国家和地区对结核病控制的忽视等因素，全球结核病形势急剧恶化，无论发达国家或发展中国家，结核病病人数都在增加。据世界卫生组织估算，全球已有近20亿人口受结核菌的感染，有2000万结核病人，每年新发生的结核病病人数为800～1000万人。结核病是一个全球性的严重公共卫生问题，现已引起国际社会的极大关注。

Pediocin PA-1的结构、生物合成与作用机制

乳酸菌素是乳酸菌通过核糖体合成机制产生的一类具有生物活性的蛋白质、多肽或前体多肽。最近将乳酸菌素分为三大类,其中Ⅱa类类片球菌素是研究的热点,它的典型代表是Pediocin PA-1。Pediocin PA-1具有较强的抗单增李斯特菌特性和热稳定性,是一种具有广阔应用前景的食品添加剂。本文综述了Pediocin PA-1的结构、生物合成和作用机制,概述了国内外对Pediocin PA-1的研究进展和发展方向,以期对细菌素的深入研究和广泛应用起到抛砖引玉的作用。

出芽短梗霉菌PA-2发酵培养基及发酵条件优化

【目的】优化出芽短梗霉菌(Aureobasidium pullulans)PA-2菌株产孢发酵培养基和发酵条件,以提高PA-2菌株的产孢量,为该菌的开发和生产应用提供理论依据。【方法】以PA-2菌株发酵液中的产孢量为检测指标,采用单因子优化PA-2菌株发酵培养基和最佳发酵条件,通过中心组合设计(Central composite design,CCD)筛选培养基成分最佳配比;用PA-2菌株制成可湿性粉剂用于杂草藜田间防除试验。【结果】经优化后,PA-2菌株产孢最佳培养基配方为葡萄糖84.60 g/L、大豆粉46.35 g/L、NaCl 2.59 g/L、MgSO4 0.52 g/L、KCl 0.78 g/L、K2HPO4 6.50 g/L、(NH4)2SO4 0.52 g/L;最佳发酵条件为pH 7、温度25 ℃、装液量60 mL/250 mL、转速180 r/min、接种量8%、培养时间120 h。田间防除试验结果表明,PA-2可湿性粉剂对杂草藜的鲜重防效最高可达75.0%。【结论】优化后的培养和发酵条件可有效提高PA-2菌株的产孢量,降低发酵成本,适合发酵放大试验及相关剂型的开发研究;可采用PA-2菌株生产菌剂应用于杂草防除。

抗结核候选新药PA-824的研究进展

结核病严重危害人类健康,近年来在临床上频繁出现的多药耐药结核菌株使得结核病再次成为公共卫生的重大威胁,然而现有的治疗药物,治疗周期长,对结核耐药菌无效。美国全球抗结核药物开发公司联盟发现一系列具有抗结核活性的硝基咪唑吡喃类化合物,临床前研究表明,其中一个名为PA-824的先导化合物的药效好、毒性小、作用机制新,对多药耐药菌株和潜伏态的结核杆菌都表现出极强的杀菌效果,有着良好的临床应用前景。

PA-6/碳纤维复合材料性能研究

采用熔融共混法制备出了PA-6/碳纤维复合材料,研究了碳纤维对复合材料性能的影响;利用扫描电镜(SEM)分析了PA-6/碳纤维复合材料的断面形貌。结果表明:加入碳纤维后,PA-6的熔融指数降低;处理过的碳纤维与PA-6基体间界面粘结性较好,使得PA-6的冲击强度有所增加,拉伸强度、弯曲模量及力学性能的稳定性显著提升,吸水性明显降低。

中高温清洁压裂液体系PA-VES120的研发

为提高清洁压裂液的耐温性能,通过实验合成了阳离子双子表面活性剂PA-S18,并利用红外光谱和核磁共振技术对其分子结构进行了表征。以PA-S18为主剂,配制了中高温清洁压裂液体系PA-VES120,并对其耐温抗剪切性能、破胶性能及对地层伤害程度进行了实验评价,结果表明:该体系在120℃、170 s^(-1)下剪切60 min,粘度保持在40 mPa·s以上,可满足悬砂性能要求;该体系破胶简单,利用2%的原油、柴油、混苯作为破胶剂,2 h内均能完全破胶;该体系对岩心基质渗透率损害率和动态滤失渗透率损害率均在10%左右,对地层伤害较小。PA-VES120清洁压裂液体系的成功研发,对于提高海上低渗油气藏中高温地层压裂增产效果具有重要意义。

PA-130/CA合金膜材料的研制及其性能

采用溶液共混和液-固相转变法(L-S)制备了用于高效液相色谱(HPLC)柱填料的共聚尼龙/醋酸纤维素共混物(PA-130/CA)。以小分子量化合物为探针分子,用HPLC数据表征了PA-130/CA合金膜材料的界面性能,并研究了其合金膜材料的相容性和热稳定性。结果表明:PA-130与CA有很好的相容性;该合金膜的热稳定性比纯CA膜的有所提高;质量比为30/70的PA-130/CA合金膜对不离解极性有机物的分离效率更高。

LDPE-g-MAH/PA-6共混合金的制备与性能

通过选择适当的配方和工艺条件,采用熔融接枝方法制备了马来酸酐接枝低密度聚乙稀样品(LDPE-g-MAH);并用反应挤出的方法制备了LDPE-g-MAH/PA-6(60/40)共混合金,采用IR、DMA、扫描电镜等手段对共混合金性能进行了表征,并进行了拉伸性能的测试.结果表明,LDPE-g-MAH/PA-6共混合金提高了LDPE接枝物的拉伸强度和抗蠕变性;共混合金形态具有双连续相的互琐结构.

PA-1型抗静电剂应用于涤棉织物的研究

对PA 1型抗静电剂进行机理分析 ,论证PA 1型抗静电剂在涤棉纱中的应用 ,给出结论。

PA-1010/ABS合金的性能研究

研究了以自制的马来酸酐 (MAH)接枝改性ABS(MABS)作为PA 10 10 /ABS增容剂所形成的PA 10 10 /ABS合金的性能。研究结果表明 ,随ABS中马来酸酐接枝量的上升 ,PA 10 10 /ABS合金的冲击强度提高 ,保持PA 10 10与ABS用量在某一恰当配比范围内 ,可得到冲击强度高 ,维卡软化温度较高的合金。

人恶性畸胎瘤PA-1细胞染色体特性及其影响因素的探讨

目的 :探讨人类恶性畸胎瘤PA - 1细胞株染色体特性及其影响因素。方法 :采用G带核型分析、DNA碱基序列分析及Westernblot(蛋白印迹分析 )等方法对经 2 0余年 4 0 7- 4 4 5继代培养的PA - 1细胞株染色体核型及p5 3基因状态进行了研究。结果 :PA - 1细胞株 80 %以上仍然保持近乎二倍体的核型 ,30代以后的细胞由于第 15号染色体与 2 0号染色体间的相互易位形成了M1及M2标识染色体。RT -PCR产物DNA定向序列分析显示具有野生及突变两个带 (p5 3密码子 2 39突变 ) ,Westernblot未检测出突变的p5 3基因蛋白 ,而p2 1蛋白的表达水平比正常成纤维细胞低。结论 :人卵巢恶性畸胎瘤PA - 1细胞株经 2 0年的继代培养后 ,一个p5 3等位基因发生错义突变 ,另一个仍然是野生型的。仅一个p5 3等位基因发生突变 。