紫杉醇棕榈酸酯的合成及其脂质体的制备与处方研究

目的通过对紫杉醇(PTX)的结构改造联合相应脂质体的构建,改善肿瘤细胞摄取,增加药物疗效。方法通过酯化反应制备了紫杉醇前药PTX-PA,并建立含量方法学研究。采用单因素筛选,结合粒径、包封率等指标评价不同方法、条件下制备的PTX-PA/Lip,确定其最佳处方和制备工艺。结果通过酯化反应成功制备PTX-PA,且建立的HPLC定量分析方法符合方法学要求。利用单因素筛选,确定了PTX-PA/Lip的最佳处方和制备工艺,通过最优处方制备的PTX-PA/Lip纳米粒径为(2.75±1.81)nm,PDI为(0.076±0.020),药物包封率达到90%以上。结论基于纳米技术成功制备出棕榈酸修饰的紫杉醇脂质体,增强了紫杉醇在靶细胞的递送,为PTX-PA的药效学研究奠定基础。

UPLC-MS/MS法测定小鼠血浆中紫杉醇脂肪酸酯前药及其药代动力学研究

目的建立小鼠血浆中紫杉醇肉豆蔻酸酯(PTX-MA)、紫杉醇棕榈酸酯(PTX-PA)和紫杉醇硬脂酸酯(PTX-SA)等3种紫杉醇脂肪酸酯的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)测定方法,并初步考察其脂质体的小鼠体内药代动力学特性。方法采用EclipsePlus C_(8)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm),0.2%甲酸水溶液(A)和甲醇(B)的不同比例混合液为流动相,梯度洗脱,三重四极杆串联质谱多重反应监检测(MRM),流速:0.3 ml/min,柱温:30℃,进样量:10μl。结果PTX-MA、PTX-PA和PTX-SA在5.0~500.0 ng/ml范围内均呈良好的线性关系(r>0.9950),日内和日间精密度、稳定性、提取回收率和基质效应试验结果的RSD均小于10%;3种紫杉醇脂肪酸酯脂质体PTX-MA-L、PTX-PA-L和PTX-SA-L在小鼠体内的半衰期(t_(1/2))分别为14.78、44.49和69.32 h,清除率(CL)分别为29.06、24.94和13.74 L·kg/h。结论该方法专属性高、灵敏、操作简便、稳定性好,可用于小鼠血浆中紫杉醇脂肪酸酯的含量测定。小鼠体内药代动力学研究结果表明,随脂肪酸碳链增加,紫杉醇脂肪酸酯在小鼠体内t_(1/2)呈大幅延长,清除率则显著降低,提示紫杉醇经不同链长饱和脂肪酸酯化修饰可改变其体内药代动力学特性,从而为紫杉醇脂肪酸酯前药的纳米制剂研发提供科学依据。

水溶性紫杉醇前药的制备及抗肿瘤活性的研究

目的紫杉醇是具有良好抗肿瘤疗效的化学药物,由于紫杉醇本身化学结构复杂,难溶于水,在一定程度上限制了紫杉醇药物在临床上的广泛应用,因此改善紫杉醇水溶性是解决紫杉醇药物不足的关键问题。方法本实验选用水溶性叶酸配体作为"导向基团",谷氨酸为连接叶酸和紫杉醇的Linker,氨基PEG(MW:350)为药物增溶剂和稳定剂,制备水溶性叶酸-PEG-谷氨酸-紫杉醇前药。用LC-MS鉴定前药的化学结构,通过对前药溶解性及释药动力学曲线的测定,确定前药的理化性质。用MTT实验分析并对比紫杉醇原药与前药在不同肿瘤细胞(MCF-7、MDA-MB-231、A549)和正常细胞HELF(人胚肺成纤维细胞)中的毒性和药效作用。用荧光标记法直观观察紫杉醇前药在肿瘤细胞和组织中的靶向性。结果实验结果证明已成功合成叶酸-PEG-谷氨酸-紫杉醇前药,并具有较好的溶解性和原药释放动力学曲线,细胞实验表明在叶酸受体-配体作用的介导下,叶酸-PEG-谷氨酸-紫杉醇前药靶向叶酸受体高表达的肿瘤细胞,减少对叶酸受体低表达正常细胞的毒副作用。结论叶酸-PEG-谷氨酸-紫杉醇前药具有良好的抗肿瘤活性。

基于透明质酸-紫杉醇前药的载药胶束的制备及大鼠体内药代动力学

以两亲性透明质酸-紫杉醇高分子前药(HA-PTX)为载体,制备包载PTX的高载药量纳米胶束;分别使用HPLC、动态光散射法(DLS)、透射电子显微镜(TEM)、原子力显微镜(AFM)和X线粉末衍射法(XRD)等手段对其载药量、包封率、粒径分布和胶束形态等进行测定或表征;采用荧光芘探针法测定HA-PTX的临界胶束浓度(CMC);以市售紫杉醇注射剂(Taxol)为对照,通过大鼠体内药代动力学实验考察载药胶束的体内过程。载药胶束PTX-HA-PTX化学偶联药物和物理包载药物总量高达41.8%,包封率高达95.4%,平均粒径为213.2 nm,Zeta电位为-15.5 mV;XRD结果确证药物以分子状态或无定型状态存在于胶束内部;TEM和AFM显示胶束呈类球形;大鼠药代动力学结果显示,相对于Taxol,PTX-HA-PTX胶束组的血药浓度时间曲线下面积(AUC)显著提高(P<0.01),而清除率(CL)显著下降(P<0.05),说明PTX-HA-PTX胶束可延缓PTX在体内的消除,延长滞留时间,提高药效。结果表明HA-PTX可作为优良的增溶载体,具有良好的应用前景。

紫杉烷类抗肿瘤药物临床研究进展

紫杉醇是一种重要的抗肿瘤药物,它能特异地作用于微管蛋白,促进微管蛋白的聚合并阻止其解聚,从而阻断有丝分裂过程,导致细胞凋亡。紫杉醇抗肿瘤谱广,疗效确切,在临床上已广泛应用。然而,由于不溶于水、选择性差等原因,紫杉醇存在着诸如毒副作用大(骨髓抑制、周围感觉神经病变)、使用不便以及易产生耐药性、无法透过血脑屏障等缺陷。针对这些问题,药物学家们从化合物结构以及制剂等角度着手研究,获得了一些疗效显著的紫杉醇类似物、紫杉醇前药及紫杉醇新剂型。本文对这些新型紫杉醇衍生物和新剂型单独给药或联合用药的最新临床研究进展进行了综述。

ROS响应性纳米前药的制备及其体外抗肿瘤研究

目的设计合成一类新的具有活性氧自由基(ROS)响应性的紫杉醇前药纳米粒,对其结构进行表征,并研究其稳定性、体外响应性释药行为、细胞摄取情况和体外抗肿瘤作用。方法通过硫醚间隔基(2S)连接亲水性的聚乙二醇(PEG)与疏水性的紫杉醇(PTX),得到前药聚合物PEG-2S-PTX单体,通过自组装制备前药纳米粒PEG-2S-PTX NPs。同时合成以丁二酸酐(SA)为间隔基的PEG-SA-PTX单体,并制备前药纳米粒PEG-SA-PTX NPs作为对照。利用核磁(1H-NMR)对前药进行结构表征,利用动态光散射(DLS)对纳米粒的粒径进行表征并考察其稳定性。采用高效液相色谱法(HPLC)研究纳米粒在氧化条件下的释放行为,通过荧光显微镜观察人乳腺癌MCF-7细胞对纳米粒的摄取行为,利用MTT法比较纳米粒对MCF-7的增殖抑制效果。结果 PEG-2S-PTX、PEG-SA-PTX能够分别自组装成粒径为(92.15±12.42)nm、(113.20±12.16)nm的纳米粒;在氧化条件下PEG-2S-PTX NPs能够快速响应性释放PTX,而PEG-SA-PTX NPs只产生微弱的响应性;PEG-2S-PTX NPs较PEG-SA-PTX NPs能被MCF-7细胞更快速地摄取,对MCF-7细胞增殖抑制均呈浓度依赖性,当浓度为0.05、0.1、5、10、50、100 mg/L时PEG-2S-PTXNPs体外细胞毒性强于PEG-SA-PTX NPs(P<0.05)。结论 PEG-2S-PTX NPs作为具有ROS响应性的紫杉醇前药纳米粒,能在被摄取进入细胞后以ROS响应的方式在肿瘤细胞内快速释放PTX,发挥良好的体外抗肿瘤作用。

紫杉醇前药的合成及其对肿瘤细胞活性抑制的研究

选用肿瘤细胞生长过程中的必需氨基酸——谷氨酸,作为修饰紫杉醇的Linker,并用FITC标记谷氨酸-紫杉醇,对紫杉醇前药进行结构鉴定、释药动力学曲线、毒性和细胞摄取量进行了研究,实验结果表明:与紫杉醇原药相比谷氨酸-紫杉醇可提高其水溶性,并具有较好的释药动力学曲线,对乳腺癌MDA-MB-231具有良好的药效,为进一步合成具有靶向性紫杉醇前药打好基础。

紫杉醇前药的研究概况

目的综述了治疗肿瘤的一线药物,紫杉醇前药的研究进展。方法通过查阅近年来国内外的相关文献,选取有代表性的学术期刊,专利进行分析评述。结果利用前药原理设计的小分子前药,高分子聚合物前药,大分子前药等改善了紫杉醇的应用状况。这些前药通过体内特异性的酶或PH值降解释放出原药。结论前药增大了紫杉醇的水溶性,可以达到靶向、控释、缓释的效果,降低毒副作用,提高了抗肿瘤活性,并且很多前药已经进入临床研究阶段。

紫杉醇二聚体纳米前药研究进展

差的水溶性以及严重的毒副作用限制了紫杉醇(PTX)在肿瘤治疗上的应用,纳米药物递送系统的出现有望解决这一难题。通过桥连基团,将PTX修饰成二聚体前药,从而在水环境中自组装为纳米聚集体,不仅可以改善PTX在水中的溶解度,提高与高分子载体的相容性,实现超高的药物含量,还可以通过调控桥连基团,实现肿瘤微环境响应性的药物释放。本文针对PTX二聚体纳米药物在肿瘤治疗中的研究进展,介绍了二聚体前药的具体策略以及几种内源和外源响应的二聚体前药,并对其在未来临床应用中的优势以及面临的问题进行了总结与探讨。

靶向肿瘤微环境的紫杉醇前药研究进展

紫杉醇前药(paclitaxel prodrugs)的设计是一种提高药物制剂成药性、降低其毒副作用、增强抗肿瘤效果的有效手段。随着对前药研究的深入,利用肿瘤过表达的受体、酶、转运蛋白、谷胱甘肽及活性氧自由基以及肿瘤组织弱酸性及低氧环境等作为靶标进行的紫杉醇靶向性前药的研究已取得极大进展。综述近年来以肿瘤微环境特殊的病理与生理特征为靶标的紫杉醇前药的研究进展。

自组装型紫杉醇键合物前药的合成与性能

以p-氨基苯乙酸(APA)和六亚甲基二异氰酸酯(HDI)为连接基团,将短链聚乙二醇单甲醚(mPEG)键合到紫杉醇(PTX)上,获得双亲型PTX前药mPEG-APA-PTX和mPEG-HDI-PTX。考察了这两种前药在自主装、体外药物释放动力学、体外细胞毒性和体内血浆清除速率等方面的表现。结果表明:两前药均能在水中自组装形成稳定的纳米颗粒,载药量高达28%;mPEG-HDI-PTX纳米颗粒在水溶液中非常稳定,细胞毒性很弱,在血液系统中清除很快,而mPEG-APA-PTX纳米颗粒在pH=7.4的环境下可缓慢释放出原药PTX,细胞毒性与临床用紫杉醇针剂Tax-ol相当,体内循环时间较Taxol明显延长;mPEG-APA-PTX是一种可自组装、载药量高、体内循环时间长的新型纳米前药。

水溶性紫杉醇类前药的研究进展

本文简要介绍了广谱抗癌药物紫杉醇的发展历史,紫杉醇具有良好的抗肿瘤活性,但其水溶性差影响了临床应用,开发水溶性紫杉醇前体药物具有重要意义。本文分类介绍了高分子和水溶性有机盐两种紫杉醇前药策略。

活性氧响应的紫杉醇前药用于成像引导的抗乳腺癌活性研究

目的合成活性氧响应的紫杉醇前药2-(benzothiazol-2-yl)-6-methoxyphenol-thioketal-paclitaxel(BT-TK-PTX),并探讨其在成像引导乳腺癌治疗中的作用和意义。方法基于缩硫酮键可对肿瘤细胞中高活性氧微环境产生特异性响应的原理,采用酮缩硫醇为桥梁,设计合成一种在活性氧作用下释放的荧光标记的紫杉醇前药;通过光学性能测试评估前药能否被活性氧识别,并监测识别过程的浓度及时间依赖性、选择性和干扰性;通过体外活性和聚焦成像实验评价前药的研究价值。结果合成了结构新颖的诊疗前药BT-TK-PTX,结构经^(1)H-NMR、^(13)C-NMR、MS谱确证;光谱学结果表明,前药BT-TK-PTX能够被过氧化氢特异性激活且荧光强度增强约12倍;细胞毒性实验结果表明,BT-TK-PTX在正常人乳腺细胞中具有安全性,在乳腺癌细胞中具有显著的杀伤性;共聚焦成像实验表明,BT-TK-PTX能够逐渐被细胞摄取且实现摄取过程的实时监测。结论设计合成的紫杉醇前药实现了在肿瘤微环境下的触发释放,可降低紫杉醇对正常细胞的毒性,同时利用荧光开关完成对药物活化和作用过程的实时监测,为紫杉醇应用于乳腺癌的临床治疗提供了新的可能途径。

紫杉醇饱和脂肪酸酯脂质体的药效学及组织分布研究

目的:制备3种紫杉醇(PTX)饱和长链脂肪酸酯脂质体,初步比较3种紫杉醇饱和脂肪酸酯脂质体在抗肿瘤方面的差异,通过组织分布研究,探讨造成疗效差异的原因。方法:采用薄膜分散法制备3种紫杉醇脂肪酸酯脂质体,分别测定粒径、Zeta电位、包封率以及载药量情况;构建小鼠乳腺癌模型,尾静脉分别注射紫杉醇注射液(Taxol^(Ⓡ))、紫杉醇肉豆蔻酸酯脂质体(PTX-MA-L)、紫杉醇棕榈酸酯脂质体(PTX-PA-L)和紫杉醇硬脂酸酯脂质体(PTX-SA-L),考察它们的抗肿瘤效果,同时通过血常规检测对制剂的安全性进行初步评价。最后,对3种前药脂质体进行体内组织分布实验,考察前药代谢情况。结果:成功构建了3种紫杉醇饱和脂肪酸酯脂质体,PTX-MA-L,PTX-PA-L,PTX-SA-L的粒径分别为(69.56±1.08),(72±0.86),(75±1.02)nm,聚合物分散性指数(PDI)分别为(0.185±0.009),(0.165±0.012),(0.171±0.024),Zeta电位分别为-(11.26±1.37),-(12.18±1.86),-(13.92±0.59)mV,包封率分别为(95±0.39)%,(97±0.28)%,(98±0.19)%。4T1乳腺癌移植瘤模型药效评价中,等剂量下PTX-PA-L的药效好于Taxol,PTX-MA-L和PTX-SA-L。血常规检测结果表明,紫杉醇脂肪酸酯脂质体的血细胞水平明显高于紫杉醇注射液。组织分布实验结果显示,PTX-MA-L代谢出的PTX速率最快,半衰期短,消除率快;PTX-PA-L代谢出的PTX随时间缓慢增加,半衰期在3种前药脂质体中最长,AUC最大,清除率最慢;PTX-SA-L代谢出的PTX最慢,在肿瘤中最大血药浓度最小。结论:饱和脂肪酸修饰的紫杉醇前药脂质体有较好的抗肿瘤疗效,能减轻传统紫杉醇剂型带来的不良反应。其中PTX-PA-L的抗肿瘤效果优于PTX-MA-L和PTX-SA-L,这与脂肪酸前药在体内的代谢有关。

基于磷脂基紫杉醇纳米前药的抗肿瘤应用研究

载体材料是影响药物体内递送效率和抗肿瘤活性的重要因素.本文应用2种不同结构的磷脂材料,包括聚乙二醇修饰的磷脂酰乙醇胺DSPE-PEG和磷脂酰胆碱DPPC,作为载体包裹紫杉醇二聚体(PTX_(2)-SS),制备了紫杉醇纳米颗粒.相比于DPPC,DSPE-PEG作为载体有利于得到均匀的纳米剂型.同时测定了DSPE-PEG作为载体制备的PTX_(2)-SS@DSPE-PEG NPs(DeP NPs)在稳定性、细胞毒性、体内分布和抗肿瘤疗效方面的表现.该工作为研发疏水药物的磷脂型载体提供了一个重要的参考.

紫杉醇类前药的研究进展

紫杉醇(paclitaxel)及其半合成类似物多西紫杉醇(docetaxel)是迄今为止发现的最为有效的抗癌药物之一,然而该类药物对正常组织、系统具有严重的毒性,而且水溶性较低以及对多药耐药(MDR)细胞几乎无活性等,使其临床应用受到限制。近年来,在提高紫杉醇类前药生物利用度和靶向性以及解决紫杉醇对于多药耐药肿瘤细胞无效等方面的研究和开发取得了很大进展。该文对近十几年来紫杉醇类前药的研究进展进行综述。

聚己内酯-紫杉醇高分子前药的合成及性能研究

利用侧链带有羧基的官能化两亲性聚己内酯基共聚物Pluronic-b-poly(ε-caprolactone-co-6-carboxylic-ε-caprolactone)[Pluronic-b-P(CL-co-CCL),FC]为底物,与紫杉醇(PTX)反应得到了一系列PTX的聚合物前药FCPTX.通过核磁共振(1H NMR)和高效液相色谱(HPLC)表征了聚合物前药结构并分析了前药中的PTX接枝率.通过聚合物前药胶束进一步物理包载PTX,得到载有PTX的聚合物前药胶束PTX/FCPTX,其载药量和包封率随着前药FCPTX中的PTX接枝率的增加而提高.利用荧光光谱(FS)、透射电镜(TEM)和粒径分析仪(DLS)表征了胶束的临界胶束浓度(CMC),形态和粒径.体外细胞评价表明,聚合物前药FCPTX具有较高的胞内累积量和良好的血液相容性、能有效降低紫杉醇的药物毒性.作为一种优秀的药物载体,聚合物前药FCPTX在联合化疗领域有着较大的应用潜力.

水溶性及靶向性紫杉醇前药的研究进展

获得美国FDA批准的第一个来自天然植物的化学药物紫杉醇(paclitaxel,PTX)是一个广谱抗肿瘤药物,具有良好的抗肿瘤活性。但由于其本身复杂的化学结构、水溶性差、吸收不好等缺点限制了其在临床上的广泛应用。因此,如何改善其水溶性,提高生物利用度及其在肿瘤组织的靶向性,是近年来亟待解决的难点与重点。本文就近年来以改善其水溶性及靶向性的紫杉醇前药的研究进展进行简单综述。

紫杉醇棕榈酸酯白蛋白纳米粒的制备及药效和骨髓抑制毒性评价

目的制备紫杉醇棕榈酸酯白蛋白纳米粒(Nab-PTX-PA)冻干粉,对其抑瘤效果和骨髓抑制毒性进行评价。方法采用纳米颗粒白蛋白结合技术(Nab^(TM)技术)制备Nab-PTX-PA冻干粉,对Nab-PTX-PA处方的形态、粒径和电位进行表征并比较Nab-PTX-PA冻干前和冻干复溶后粒径、电位的变化。通过构建4T1荷瘤小鼠模型,考察Nab-PTX-PA的抗肿瘤活性。荷瘤小鼠药效给药结束后取血进行血常规检测,考察该制剂的骨髓抑制毒性。结果本研究成功制备了外观平整饱满、生理盐水复溶后再分散性良好的Nab-PTX-PA冻干粉,且制备Nab-PTX-PA冻干粉粒径为(87.63±1.15)nm(n=3),Zeta电位为(-11.7±0.61)mV(n=3),冻干前和复溶后Nab-PTX-PA的粒径、电位均无明显变化。药效学研究结果表明,Nab-PTX-PA(51.16 mg·kg^(-1))的抗肿瘤作用高于Abraxane^(■)(20 mg·kg^(-1)),且具有统计学意义。骨髓抑制毒性结果表明,Nab-PTX-PA(25.58 mg·kg^(-1))对小鼠的骨髓抑制毒性低于等剂量市售药物Abraxane^(■),Nab-PTX-PA(51.16 mg·kg^(-1))对小鼠的骨髓抑制毒性与市售药物Abraxane^(■)(20 mg·kg^(-1))相当。结论采用Nab^(TM)技术制备的Nab-PTX-PA冻干粉性质稳定,Nab-PTXPA(25.58 mg·kg^(-1))与等剂量的Abraxane^(■)(20 mg·kg^(-1))相比,降低了骨髓抑制毒性,Nab-PTX-PA(51.16 mg·kg^(-1))和Abraxane^(■)(20 mg·kg^(-1))毒性相同时,抗肿瘤效果较为明显。

LC-MS/MS法测定SD大鼠血浆中紫杉醇前药含量及其在临床前药代动力学研究中的应用

本实验建立了一种液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法快速、灵敏测定Sprague-Dawley(SD)大鼠血浆中紫杉醇前药(Pro-PTX)及紫杉醇(PTX)的浓度。血浆样本以乙腈(0.1%甲酸)沉淀蛋白后,选用Ultimate AQ-C18色谱柱(50 mm×3.0 mm,3μm),以乙腈-1 mmol·L^(-1)甲酸铵(含0.1%甲酸)为流动相,选用三重四极杆串联质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行监测,选择监测离子反应分别为m/z 983.4→415.2(Pro-PTX)、m/z 854.4→286.1(PTX)和m/z 808.3→527.2(多西他赛,内标)。方法验证结果表明,血浆中Pro-PTX和PTX的线性范围分别为2.00~500 ng·mL^(-1)(r>0.99)和4.00~1000 ng·mL^(-1)(r>0.99),定量下限分别为2.00和4.00 ng·mL^(-1);Pro-PTX和PTX低、中、高三浓度的质控样本批内、批间相对标准差(RSD)均小于9%;相对偏差(RE)均在±9%的范围以内;稳定性实验中,血浆中Pro-PTX和PTX在各种贮存条件下均稳定。本方法灵敏度高,专属性、重现性好,成功用于Pro-PTX在大鼠中的药代动力学研究。本研究中实验动物的使用已获得中国医学科学院药物研究所实验动物管理与动物福利伦理委员会批准(批号:00003552)。