异甘草素增强大鼠脑基底动脉平滑肌细胞BK_(Ca)电流

目的研究异甘草素(ISL)对Wistar大鼠脑基底动脉的影响。方法大鼠脑基底动脉依次给予1×10-5mol/L PE、1×10-5mol/L PE+1×10-4mol/L ISL和1×10-5mol/L PE灌流后,用压力型小动脉仪测量脑基底动脉的直径;用全细胞膜片钳观察1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4和3×10-4mol/L ISL对大鼠脑基底动脉平滑肌细胞(VSMC)电流的影响。结果 1)1×10-4mol/L ISL舒张脑基底动脉(P<0.05);2)ISL呈电压依赖性和浓度依赖性增强脑基底动脉VSMC外向电流(P<0.05),ISL增强脑基底动脉VSMC外向电流的EC50为9.5μmol/L;给予1×10-3mol/L四乙胺(TEA,BKCa通道阻断剂)3 min后,可抑制ISL对脑基底动脉VSMC外向电流的增强作用,并使外向电流减小到(86±22)p A,只有对照组的0.65±0.04倍(P<0.05)。结论 ISL通过增强BKCa通道介导的外向电流舒张Wistar大鼠脑基底动脉。

Effects of Arecoline on Calcium Channel Currents and Caffeine-induced Calcium Release in Isolated Single Ventricular

The effects of Arecoline (Are) on calcium m obilization were investigated. In isolated single ventricular m yocyte of guinea pig,patch clamp whole cell recording techniques were used to record the current of L - type calcium channel and cytosolic Ca2 + level ([Ca2 + ]i) labeled with fluo- rescence probe Fluo- 3/ AM was m easured under a laser scanning confocal microscope.Results re- vealed that Are(3- 10 0 μm ol/ L) could inhibit L- type calcium current in a concentration- depen- dent manner and the value of IC50 was33.73μm ol/ L (n=5 ) .In the absence of extracellular calci- um,the resting levels of[Ca2 + ]i was not affected by Are(n=6 ,P>0 .0 5 ) ,but pretreatment with Are(30 μmol/ L) could significantly inhibit the[Ca2 + ]i elevation induced by caffeine(10 m mol/ L,n=6 ,P<0 .0 1) .It was concluded that Are could inhibit not only calcium influx through L- type calcium channel but also calcium release from sarcoplasm ic reticulum.

阿魏酸钠对家兔心室肌细胞钾通道电流的影响

目的:探讨阿魏酸钠对家兔心室肌细胞膜延迟整流钾电流快速与缓慢激活成分(IKr、IKs)、内向整流钾电流(IK1)、瞬时外向钾电流(Ito)的影响。方法:酶解法分离单个家兔心室肌细胞,以经典的Ⅲ类药胺碘酮为对照,采用全细胞膜片钳技术记录浓度为3.0、10.0、30.0、100.0μmol/L的阿魏酸钠对IKr、IKs、IK1、Ito的作用。结果:阿魏酸钠的作用弱于胺碘酮,二者均可浓度依赖性抑制IKr、IKs时间依赖性外向电流及尾电流(IKr,tail、IKs,tail)。不同浓度的阿魏酸钠对IKr,tail的抑制率为:(12.1±2.5)%、(24.1±3.0)%、(47.0±5.8)%及(58.5±8.3)%(n=5,P<0.05);对IKs,tail的抑制率为:(15.6±6.4)%、(27.1±6.5)%、(45.6±5.8)%及(51.8±6.6)%(n=5,P<0.05),其对IKr,tail及IKs,tail的半数抑制浓度(IC50)均大于胺碘酮(43.6∶3.48μmol/L,44.9∶5.11μmol/L)。30.0、100.0μmol/L阿魏酸钠及10.0、30.0μmol/L胺碘酮可使IK1的I-V曲线左移,在-100mV及-20mV测试电压下,阿魏酸钠对IK1内向、外向电流抑制率小于胺碘酮(n=5,P<0.05)。阿魏酸钠与胺碘酮均不影响Ito及其I-V曲线。结论:阿魏酸钠复合阻滞复极期多种钾电流,可能是其抗心律失常作用的电生理机制之一。

2-氨基乙氧基二苯基硼酸对乙酰胆碱诱导的急性分离小鼠胰腺腺泡细胞Ca^2＋信号的机制

目的探讨2-氨基乙氧基二苯基硼酸盐（2APB）增强细胞内Ca^2＋振荡的机制。方法在急性分离的小鼠胰腺腺泡细胞中，使用Ca^2＋敏感染料（fluo-4）成像技术，直接监测细胞内Ca^2＋信号。使用膜片钳全细胞记录技术，检查2APB对乙酰胆碱（ACh）诱导的Ca^2＋振荡的作用特征和机制。结果（1）2APB浓度依赖性的增强了ACh诱导的Ca^2＋振荡，随着2APB浓度增高（1～100μmol／L），Ca^2＋振荡幅度及宽度增大。（2）2APB增强ACh诱导的Ca^2＋振荡也受到ACh浓度的影响。在100μmol／L2APB的条件下，当ACh低于5nmol／L时，通常没有作用；在ACh10-30nmol／L时，增强作用显著；而在ACh100～1000nmol／L时，出现抑制作用。（3）细胞内施加100μmol／L2APB对10nmol／LACh诱导的Ca^2＋振荡无影响（P=0．378，n=6），提示2APB增强ACh诱导的Ca^2＋振荡的作用靶点是在细胞外而不是细胞内。（4）2APB可明显阻断SOCE，能将3μmol／LTG引起Ca^2＋振荡的净电流（标准化后）减少至（3．0±4．8）％（P=0．000，n=6），提示SOCE可能是2APB增强Ca^2＋振荡的靶点。（5）SOCE阻断剂GSK可模拟2APB增强Ca^2＋振荡的作用（P=0．000，n=7）。（6）使用毒胡萝卜素使Ca^2＋池排空后，与给药前（为100％）比较，施加2APB引起Ca^2＋振荡的净电流（标准化后）为（93．0±9．5）％（P=0．427，n=7），即2APB增强Ca^2＋振荡作用被消除。结论在ACh低浓度（10～30nmol／L）的条件下，2APB通过阻断SOCE促进Ca^2＋从钙池进一步排空，导致了Ca^2＋振荡的增强，而在高ACh浓度（〉100nmol／L）的条件下，2APB通过阻断SOCE减少钙池从胞外得到Ca^2＋的补充，导致了Ca^2＋信号减弱。