食品工业中细菌生物被膜研究进展

生物被膜是细菌在环境中的主要存在形式,是具有三维结构的微生物群落及极强胁迫耐受性的特殊生态。在食品加工及贮藏过程中食源性致病菌生物被膜易引起消毒逃逸及细菌污染,进而造成毒素积累或食品变质,威胁消费者健康安全。在食品工业中,预防、抑制和清除食源性致病菌生物被膜是保证食品微生物安全的关键。因此,迫切需要找到高效阻控细菌生物被膜形成并有效清除生物被膜的方法和策略。本文综述了食品工业中生物被膜污染的现状及其胁迫耐受机制,并有针对性地讨论了食品加工领域中生物被膜阻控技术,有助于更清晰地认识由生物被膜造成的食品安全风险,为研发高效绿色的生物被膜清除技术提供了理论依据。

分消走泄法对代谢综合征患者代谢、应激、炎症状态的影响

目的探讨国医大师路志正“分消走泄法”治疗代谢综合征的临床疗效及对患者代谢、应激、炎症状态的影响。方法收集我院2018年3月-2020年4月湿热型代谢综合征患者200例,并随机分为对照组(盐酸吡格列酮)和试验组(祛湿降浊方),比较2组患者的疗效、治疗前后的中医症状评分、代谢相关指标[三酰甘油(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(glutamic oxaloacetic transaminase,AST)、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、尿酸(uric acid,UA)]、应激和炎症相关指标[谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、人单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)、脂联素(adiponectin,ADP)、脂蛋白(lipoprotein,LP)]。结果与对照组比较,试验组的总有效率明显增高(P<0.05)。治疗前,2组的主症评分、次症评分、中医症状总分、代谢、应激、炎症相关指标差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,与对照组比较,试验组主症评分、次症评分、中医症状总分、TG、TC、ALT、FBG、UA、MPO、MDA、IL-6、MCP-1、LP均降低(P<0.05),HDL-C、GSH-Px、T-AOC、ADP均增高(P<0.05)。结论路志正“分消走泄法”可用于治疗MS,可明显改善湿热型MS患者的症状、代谢、应激、炎症状态,值得临床推广。

生殖器念珠菌病患者致病菌分布情况和血清氧化应激因子表达水平及临床意义

目的探究生殖器念珠菌病患者致病菌分布情况,以及血清氧化应激因子表达水平及临床意义。方法选取2020年5月至2023年8月阜阳市妇女儿童医院收治120例生殖器念珠菌病患者作为研究对象,设为研究组,分析致病菌分布情况。另选取同期进行体检的86例健康者作为对照组。比较两组血清氧化应激因子水平,分析血清氧化应激因子水平对生殖器念珠菌病的诊断价值。研究组根据病情严重程度分为轻度组(n=63)、中度组(n=38)与重度组(n=19),比较三组的血清氧化应激因子水平,分析血清氧化应激因子水平与病情严重程度的相关性。结果120例生殖器念珠菌病患者分离致病菌主要为白色念珠菌(79例,65.83%),光滑念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌及近平滑念珠菌分别占15.00%(18例)、12.50%(15例)、6.67%(8例)。研究组总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物歧化酶(GSH-PX)和过氧化氢酶(CAT)等氧化应激因子水平均显著低于对照组(P<0.05);受试者工作特征(ROC)曲线结果显示,T-AOC、SOD、GSH-PX与CAT诊断生殖器念珠菌病的曲线下面积(AUC)分别为0.785、0.778、0.819、0.609。重度组T-AOC、SOD、GSH-PX与CAT等氧化应激因子水平低于中度组、轻度组,且中度组低于轻度组(P<0.05);Spearman相关性分析结果显示,T-AOC、SOD、GSH-PX与CAT等氧化应激因子水平与患者病情严重程度呈负相关(r=-0.534、-0.612、-0.438、-0.396,P<0.05)。结论生殖器念珠菌病患者的致病菌主要为白色念珠菌,患者体内氧化应激反应增强,氧化应激因子可用于患者病情诊断及病情严重程度评估。

新外来中药紫锥菊清泻肺热治疗急性肺炎及其机制研究

目的:研究新外来中药紫锥菊清泻肺热功效和归肺经的中药药性。方法:将56只Wistar大鼠分为空白组、模型组、地塞米松组、紫锥菊醇提物低剂量组、紫锥菊醇提物高剂量组、紫锥菊水提物低剂量组、紫锥菊水提物高剂量组,每组8只。除空白组外,其余各组大鼠灌胃相应药物14 d,最后1 d雾化吸入脂多糖制备急性肺炎模型。检测各组大鼠肺湿/干质量比、肺泡灌洗液中白细胞总数、外周血相关炎症细胞占比、血清炎症介质水平、环腺苷酸(cAMP)水平、氧化应激水平、大鼠肺部病理变化、大鼠右下肺组织TLR4、核因子κB(NF-κB)、血红素氧合酶1(HO-1)、核转录因子红系2相关因子2(Nrf2) mRNA表达水平。结果:与模型组大鼠比较,紫锥菊醇提物组大鼠肺部病理减轻,肺湿/干质量比显著降低(P<0.05),肺泡灌洗液和外周血中白细胞(WBC)显著降低(P<0.05),炎症介质肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6显著降低(P<0.05),抑炎因子IL-10显著升高(P<0.05),丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)显著升高(P<0.05),cAMP显著降低(P<0.05),NF-κB、HO-1、Nrf2 mRNA表达显著降低(P<0.05),TLR4mRNA表达无统计学意义;紫锥菊水提物高剂量组大鼠肺部病理表现为肺泡毛细血管轻度充血和扩张,炎症细胞浸润,局部性肺泡间隔增厚情况减少,肺湿/干质量比显著降低(P<0.05),外周血中WBC显著降低(P<0.05),炎症介质TNF-α、IL-1β、IL-6显著降低(P<0.05),抑炎因子IL-10显著升高(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05)、GSH-Px显著升高(P<0.05),cAMP显著降低(P<0.05),NF-κB、HO-1、Nrf2 mRNA表达显著降低(P<0.05),TLR4mRNA表达无统计学意义。结论:紫锥菊对急性肺炎有预防作用,作用机制与抑制TNF-α、IL-1β、IL-6含量及NF-κB、HO-1、Nrf2 mRNA表达水平有关。从中医理论分析,与紫锥菊归肺经、清泻肺热的特点有关。

基于整合方法分析茶树响应病原真菌胁迫的共有模式

为探讨茶树(Camellia sinensis)对病菌胁迫的共有响应模式和抗病机制,运用生物信息学方法对多组RNA-seq数据进行提取、整合及功能富集,结合多种工具和数据库资源对主要调控分子及蛋白互作模块加以分析。结果表明,病原真菌胁迫下,茶树有较多细胞色素P450家族成员表达显著上调;类固醇和激素的代谢过程、苯丙烷合成途径被激活,有丝分裂细胞周期调控、DNA甲基化等生物过程及光合作用途径受到抑制;主要调控分子如转录因子WRKY和NAC、激酶RLK-Pelle和CAMK等以上调为主。差异表达的蛋白互作模块分析表明,有丝分裂周期调控、基于微管运动、淀粉和蔗糖代谢、细胞壁多糖合成、光合作用、类黄酮代谢模块明显下调,木质素合成和萜类生物合成模块上调;且模块之间可能存在互作。病菌胁迫激活的木质素和萜类合成途径的关键基因包括阿魏酸-5-羟基化酶基因F5H、过氧化物酶基因POD和萜类合成酶基因HMGR等。细胞色素P450基因可能在病菌胁迫中起关键作用,增强木质素和萜类物质的合成、削弱光合作用可能是茶树响应真菌胁迫的核心模式。

基于情志致病理论探讨心理应激对斑秃的作用机制的研究进展

斑秃是一种非瘢痕性炎症性脱发,研究表明心理应激与斑秃的发生发展密切相关。中医情志致病理论与现代医学的心理应激具有相似和共通之处,七情内伤、气血失调是斑秃的重要因素。本文主要基于中医情志致病理论,从神经-内分泌-免疫网络紊乱、氧化应激与炎症反应、头皮微循环障碍3个方面阐述心理应激对斑秃作用机制的影响,同时强调个体化心理干预对斑秃治疗的重要性,以期为临床诊治斑秃提供新思路。

双组分系统resE/resD基因缺失对单增李斯特菌抗渗透压应激能力及致病性的影响

【目的】构建单增李斯特菌双组分系统resE/resD基因缺失株,并探究其抗渗透压应激能力及致病性。【方法】利用同源重组方法构建单增李斯特菌双组分系统resE/resD基因缺失株,通过不同环境生长曲线比较分析单增李斯特菌野生株10403S与缺失株ΔresE/resD的生存性能差异;通过应激存活试验探究resE/resD基因缺失对单增李斯特菌抗渗透压能力的影响;通过对结肠癌细胞Caco-2及胃腺癌细胞MGC803进行细胞黏附、侵袭试验以及小鼠毒力试验,评估resE/resD基因缺失对单增李斯特菌细胞黏附与侵袭能力及小鼠致病性的影响。【结果】生长曲线结果显示,resE/resD基因缺失不影响单增李斯特菌正常生长,在5%NaCl条件下缺失株ΔresE/resD生长能力弱于野生株10403S,平台期抗渗透压应激能力显著降低(P<0.05)。应激存活试验结果表明,在10%NaCl条件下应激处理1 h后,缺失株ΔresE/resD存活率极显著低于野生株10403S(P<0.01)。Caco-2及MGC803细胞侵袭试验结果显示,缺失株ΔresE/resD对细胞黏附能力显著减弱(P<0.05),且细胞侵袭能力极显著降低(P<0.01)。小鼠毒力试验结果显示,缺失株ΔresE/resD小鼠脾脏与肝脏中细菌载量极显著或显著低于野生株10403S(P<0.01;P<0.05)。【结论】双组分系统resE/resD基因缺失不影响单增李斯特菌野生株10403S正常生长,但缺失株ΔresE/resD表现出抗渗透压应激能力下降,且减弱了单增李斯特菌对细胞黏附侵袭力和小鼠致病性。

非编码小RNA对食源性致病菌的调控机制

细菌性食物中毒属食品安全问题,其主要由食源性致病菌所致。在食品加工及贮藏阶段,细菌为了适应残酷的生存环境,进化出复杂的调控机制。如:通过改变自身基因的表达水平而提高存活率。细菌体内大量存在的非编码小分子RNA(sRNA),在调控中起重要作用。sRNA能够通过多种方式促进或抑制蛋白的合成,这与细菌的生理机制表达、环境胁迫的耐受性等密切相关。因环境改变而诱导sRNA转录,进行调节的细菌,在生理与抗性上会产生显著性改变。可能导致细菌的抗性增强,难以被消灭,同时还会提高自身毒性而威胁人体的生命健康。本文主要综述sRNA对食源性致病菌致病性的影响,以及环境改变而受到胁迫时的调控方式,揭示细菌sRNA在生物适应性进化及生命活动中的作用。

放射性膀胱损伤病理机制及其治疗探析:基于“主客交”理论

放射性膀胱损伤是盆腔肿瘤放疗过程中出现的常见并发症之一,中医多认为该病病机为本虚标实,本虚为气阴两虚,标实为湿热、浊毒、瘀血胶着不解,其发生、发展与“主客交”正虚邪实、客邪胶固于血脉的病机相似。“主客交”理论中的邪实主要指的是湿浊、痰瘀等病理产物,与现代研究中射线、氧自由基、炎症细胞、炎性因子等性质相似,同时其侵袭血脉经络,造成了持续性损伤的渐进性加重,与放射性膀胱损伤机制相似,而正虚抗邪无力,毒邪伤正,正气亏虚,是进一步加重该病的根本原因之一。因此基于“主客交”理论结合现代分子机制研究,可以更好解析该病病理机制,为该病的中医临床治疗提供新思路。

Sigma B因子活性的调节及其在几种革兰氏阳性食源性致病菌中的作用

SigmaB(σB)是许多革兰氏阳性菌对环境胁迫产生应答反应的主要调控因子。不仅在芽孢形成中具有重要作用,而且σB也直接或间接地调控包括蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)、单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)在内的一些革兰氏阳性食源性致病菌毒力及毒力相关基因的表达。本文结合作者在国内外的相关工作,综述了σB活性的调节方式及其在上述革兰氏阳性食源性致病菌中相关作用的最新研究进展,为深入研究革兰氏阳性食源性致病菌的致病机理、预防和治疗细菌感染提供新的思路和理论依据。

植物应答病菌胁迫的抗性蛋白研究进展

病菌侵染是植物生长发育过程中遇到的主要环境胁迫因子之一,而植物响应病菌胁迫是一个多因素协同作用的过程,涉及到复杂的基因表达调控网络。因此,植物-病原菌的互作应答机制问题一直受到研究者的普遍关注。该文主要从蛋白应答角度入手,对最近几年植物-病菌互作抗性蛋白的研究进展方面进行了较为全面的综述,分析了病菌胁迫下植物常见抗性蛋白的应答情况,并讨论了对病菌可能的抗性机制,为抗病植物新品种的培育及后续相关基因功能深入研究和抗病植物新品种的培育提供理论参考。

氨氮胁迫下白斑综合征病毒对凡纳滨对虾的致病性

为了评价养殖水环境中氨氮(NH_4-N)对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的危害性,开展了NH_4-N胁迫对凡纳滨对虾感染白斑综合征病毒(WSSV)后的死亡率、WSSV增殖速率和对虾主要免疫相关酶活性影响的实验。在NH_4-N胁迫质量浓度为15.6 mg·L-1,分别注射2×105和2×106个WSSV粒子,结果显示,NH_4-N胁迫下注射2×105个WSSV粒子的凡纳滨对虾第144小时死亡率达到53.3%,显著高于无胁迫组(40.0%)。对虾鳃组织WSSV荧光定量PCR检测结果显示,NH_4-N胁迫下凡纳滨对虾鳃组织内WSSV的增殖加快。此外,免疫相关酶活性结果显示,NH_4-N浓度突变会促使对虾血清中酚氧化酶(PO)、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活性短暂升高后持续降低。由此可见,NH_4-N胁迫会加快WSSV在患病凡纳滨对虾体内的增殖,导致更高死亡率,这可能是因为胁迫造成了对虾免疫相关酶活性降低和抗病原感染能力下降。

玉米大斑病菌腺苷酸环化酶基因的克隆与功能分析

【目的】获得玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)cAMP信号转导途径中腺苷酸环化酶基因(StAC),利用基因敲除技术明确其在病菌致病过程中的功能。【方法】应用简并引物PCR和Genome Walking技术克隆玉米大斑病菌腺苷酸环化酶基因(StAC)DNA全长序列,并对该基因进行生物信息学分析;利用Southern blotting验证基因拷贝数;通过基因敲除技术创制StAC的缺失突变体,研究玉米大斑病菌cAMP信号转导途径中StAC的功能。【结果】StAC的DNA全长为6 816 bp,由5个外显子和4个内含子组成;ORF为6 018 bp,编码2 005个氨基酸,同源序列比对发现StAC与小麦黄斑叶枯病菌(Pyrenophora tritici-repentis)的AC基因有96%的同源性;Southern blotting证明StAC在玉米大斑病菌基因组中以单拷贝形式存在;基因功能分析表明,StAC缺失突变菌株Δstac气生菌丝灰白色,不产生分生孢子,毒素活性明显减弱,致病力下降,且在渗透胁迫条件下,菌株的抗逆能力增强,色素合成发生了改变。【结论】StAC主要调控玉米大斑病菌的产孢、致病性、高渗胁迫反应、毒素活性及色素的合成代谢。

苹果树腐烂病菌Argonaute基因鉴定及功能初步分析

Argonaute(AGO)蛋白作为沉默复合体RISC的重要组成部分,直接影响小RNA分子的调控功能。为了明确苹果树腐烂病菌(Valsa mali)AGO蛋白的生物学功能,以揭示苹果树腐烂病菌小RNA分子作用机制奠定基础。本研究从苹果树腐烂病菌基因组中比对出2个AGO蛋白的编码基因VMAGO1和VMAGO3,序列分析发现其均具有Argonaute的标志性功能结构域PAZ和PIWI,并与粗糙脉孢菌和构巢曲霉的AGO蛋白具有高度的同源性。基于同源重组原理成功获得了VMAGO1和VMAGO3的基因单缺失突变体,其菌落、菌丝形态及菌落生长速率与野生型03-8相比没有明显变化。此外,VMAGO1和VMAGO3的缺失不影响病菌对盐离子胁迫的响应,而VMAGO3能够参与病菌对pH、H2O2胁迫的响应,且VMAGO3的缺失能够影响病菌的致病力,其具体调控机理还需进一步验证。

拟松材线虫对黑松苗的致病性

测定来源于中国、日本、韩国、加拿大、挪威和法国的 2 0个拟松材线虫种群对 2年生黑松苗的致病力。根据其致病力大小分为 3类 :第Ⅰ类致病力很强 ,致死率大于 85 % ,RHS (相关寄主适生性 )系数大于 1 0 0 ,包括法国的 1个种群和中国的 3个种群 ;第Ⅱ类有较强的致病潜能 ,在环境适宜的情况下可能造成严重危害 ,这一类数量最多 ,包括中国的1 1个种群和加拿大的 1个种群 ;第Ⅲ类几乎没有致病力 ,其致死率和RHS系数都是 0 ,包括韩国的 2个种群及日本和挪威各 1个种群。试验证明法国BmFr种群致死速度最快 ,致病力最强。黑松苗在感染拟松材线虫后 ,用自然界水分胁迫和PEG胁迫处理 ,结果表明 ,干旱胁迫能明显加快黑松苗死亡速度 ,且大大提高死亡率。提示在高温干旱的年份拟松材线虫可造成松树的大面积死亡。

植物表观遗传修饰与病原菌胁迫应答研究进展

真核生物基因表达受到染色质结构的调控,组蛋白与DNA的共价修饰构成表观遗传标签,并在植物胁迫应答如防御病原菌侵染过程中起重要作用。病原菌侵染可引起基因组整体DNA甲基化模式变化及胁迫应答基因的位点特异性去甲基化,导致植物抗性基因表达上调或下调,并进一步调控植物对病原菌的胁迫应答;组蛋白去乙酰化酶HDAC通过茉莉酸途径增强植物对病原菌的胁迫应答;此外,染色质重塑复合物Swr1复合体通过识别DNA基元和组蛋白乙酰化修饰状态靶向基因启动子,负调控SA敏感基因。该文从DNA甲基化、组蛋白乙酰化、甲基化修饰,染色质重塑等方面着重阐述植物与病原菌互作过程中发生的主要事件的分子基础及其研究进展。

儿童呼吸道感染后咳嗽中医证素分布规律研究

目的:通过问卷调查的形式结合证素辨证方法学探讨儿童呼吸道感染后咳嗽(post infectious cough,PIC)的中医病位、病性证素特点及其组合规律,为提高儿童呼吸道感染后咳嗽临床辨证论治水平以及制定防治方案提供依据。方法:以本院儿科门诊部符合诊断标准的90例患者为研究对象,进行问卷调查,收集四诊资料,根据"证候辨证素"量表找到每一症状对各证素的权值,最后计算各症状对各证素权值之和,超过阈值100分的证素则判断成立,分析病位证素、病性证素以及病位与病性证素组合规律。结果:呼吸道感染后咳嗽中,病位证素共4个,肺为核心病位,其出现的频率(91.11%)明显高于其他病位证素,病位表(78.89%)为PIC相对常见病位证素,其他证素脾(11.11%)、胃(5.56%)出现频率较低;病位证素脾平均积分超过150;病位组合中,二病位组合最常见,共61例(67.78%),其次为单一病位19例(21.11%)。实性病性有9个,虚性病性4个。实性病性中,病性痰出现频率(24.44%)最高,其他病性证素依次为外风(8.89%)、寒(5.56%)、湿(3.33%)、气滞(2.22%)、热(2.22%)、饮(1.11%)、燥(1.11%)等。虚性病性证素依次为气虚、阴虚、血虚、阳虚,出现频率分别为40.00%、20.00%、13.33%、8.89%。虚性病性气虚、阳虚等证素平均积分超过150,提示阳气亏虚为重度病变;病性组合中,以单一病性最常见,共39例(43.33%)。病位与病性组合中,单一病性与二病位为主要组合特点,包括"气虚+肺、表""痰+肺、表"等组合形式。结论:呼吸道感染后咳嗽核心病位在肺,与表、脾、胃相关;其发病虚实互见,气虚、阳虚在本病发生、发展中具有重要意义;痰为主要实性病性,为主要病理产物,亦是主要病因。

基于“急慢性心理应激”论中医“思伤脾”

在现代社会中急慢性心理应激状态颇常见,"思伤脾"是中医的重要理论,基于"急慢性心理应激状态"认识到"思伤脾"理论的"思"是"思障",并从"思"对胃肠道运动与分泌的影响,"思"对免疫功能的影响,"思"对肠道微环境和微结构的影响,"思"对神经递质含量的影响,"思"与消化系统疾病相关性等方面探讨了"思伤脾"的相关机制,为进一步研究"思伤脾"理论提供参考。

应激性溃疡的发病机制研究进展

应激性溃疡(seress ulcer,Su)是临床危重疾病的严重并发症,在重症监护病房内的发生率达60%,有较高的死亡率。应激性溃疡的发生是多种因素综合作用的结果。本文就近年来国内外文献报道的SU发病机制及其研究现状进行阐述。

医务人员血源性传染病职业暴露后心理应激反应的纵向研究

目的:了解医务人员血源性传染病职业暴露后不同时间点的心理应激反应的发生状况与动态变化趋势。方法:本研究为纵向研究设计,选取血源性传染病职业暴露于乙肝病毒、丙肝病毒、艾滋病病毒、梅毒螺旋体的医务人员分别为67例、5例、4例和2例。选用压力知觉量表(PSS-4)、创伤后应激障碍量表(PCL-5)、医院焦虑抑郁量表(HADS)对血源性职业暴露的医务人员于暴露时、暴露后1个月、暴露后2个月、暴露后4个月4个时间点的感知压力、创伤后应激症状、焦虑、抑郁水平进行纵向调查分析。采用重复测量方差分析探讨暴露人群心理应激反应的时间效应。结果:职业暴露的医务人员PSS-4总分、PCL-5总分、HADS-A得分、HADS-D得分自暴露时均开始增高,暴露后1个月时达到最高,暴露后2个月、4个月的水平逐渐下降(Ps<0.05)。结论:提示医务人员接受暴露后预防后1个月的感知压力、创伤后应激症状、焦虑、抑郁等水平最高。