五肽胃泌素对体外原代培养牛瘤胃上皮细胞DNA合成的影响

采用3 H -TdR掺入法 ,分 3个系列分别研究了不同剂量五肽胃泌素 ( pentagastrin)对体外原代培养的牛瘤胃上皮细胞DNA合成的影响 ,五肽胃泌素受体拮抗剂丙谷胺对五肽胃泌素营养作用的影响 ,以及五肽胃泌素对新生奶公牛瘤胃上皮细胞DNA合成的影响。结果如下 :1)用终浓度 10 -11,10 -10 和 10 -9mol·L-1的五肽胃泌素分别处理成年奶牛瘤胃上皮细胞 ,使3 H -TdR掺入量增加 30 4 2 % ,2 4 2 6 %和 4 7 16 % (P <0 0 5 ,n =3) ;在 10 -12 ,10 -11,10 -10 和 10 -9mol·L-1的五肽胃泌素作用下 ,成年黄牛瘤胃上皮细胞3 H -TdR掺入量提高了 34 2 5 % ,2 7 6 4 % ,2 6 4 7%和 39 0 8%(P <0 0 5 ,n =3) ;在 10 -12 ～ 10 -9mol·L-1范围内 ,3 H -TdR掺入量随五肽胃泌素剂量增加而呈上升趋势 ;在 10 -8mol·L-1时 ,3 H -TdR掺入量出现下降。 2 ) 10 -12 ,10 -11,10 -10 和 10 -9mol·L-1的五肽胃泌素均增加奶牛瘤胃上皮细胞3 H -TdR的掺入 (P <0 0 5 ) ,CCK 2 /gastrin受体拮抗剂丙谷胺抑制五肽胃泌素的营养作用。 3)用 10 -10 mol·L-1五肽胃泌素处理新生奶公牛瘤胃上皮细胞 ,未见其促进3 H -TdR掺入的作用。以上结果表明 ,胃泌素促进成年牛瘤胃上皮细胞DNA合成 。

五肽胃泌素调节瘤胃微生物代谢的体外研究

研究了五肽胃泌素对体外培养瘤胃微生物挥发性脂肪酸代谢和蛋白质合成 ,以及CCK2 /gastrin特异性受体阻断剂丙谷胺对其作用的影响。实验分两系列 :Ⅰ 经瘤胃瘘管从采食粗料的绵羊、山羊收集瘤胃液 ,分别加入 0、 1× 1 0 -1 2 、1× 1 0 -1 0 和 5× 1 0 -1 0 mol·L-1 的五肽胃泌素 ,厌氧培养 8h ,测定挥发性脂肪酸和微生物蛋白质 ;Ⅱ 经瘤胃瘘管收集采食粗料添加部分精料的水牛瘤胃液 ,分别加入含有丙谷胺 (1 0 -1 0 mol·L-1 )、五肽胃泌素 (1 0 -1 0 mol·L-1 )、丙谷胺 (1 0 -1 0mol·L-1 ) +五肽胃泌素 (1 0 -1 0 mol·L-1 )的培养基中 ,厌氧培养 6h ,样品测定同系列I。结果显示 ,经五肽胃泌素(1 0 -1 0 mol·L-1 )处理 ,瘤胃微生物总挥发性脂肪酸浓度提高 5 %～ 2 0 % (P <0 0 5 ) ,微生物蛋白增加 7%～ 1 5 % (P <0 0 5 ) ,水牛乙酸 /丙酸 (C2 /C3 )值 (3 4vs 2 9)呈升高的趋势。五肽胃泌素对瘤胃微生物代谢的促进作用可被丙谷胺阻断。上述结果表明 ,胃泌素有促进瘤胃微生物挥发性脂肪酸代谢 ,提高微生物蛋白合成的作用 ;

钙通道活性与胃泌素促人结肠癌细胞增殖间关系的研究

目的 探讨钙通道活性在胃泌素促人结肠癌细胞增殖中的作用。方法 运用流式细胞仪检测细胞内游离钙离子水平 ,MTT比色法测定细胞增殖情况。结果 2 5× 10 -6M的五肽胃泌素 (PG)可以引起HT2 9细胞内游离钙离子水平明显升高 (P <0 0 1) ,钙通道阻滞剂nifedipine(10 -5M)可以使PG引起的钙离子水平升高幅度明显下降 (P <0 0 1)。同时可以部分抑制PG促增殖作用 (P <0 0 5 )。钙通道激动剂Bayk86 4 4 (10 -6M)可以明显升高细胞内钙离子水平 (P <0 0 1)。并能促进HT2 9细胞增殖 (P <0 0 5 ) ,与PG的促增殖作用相比无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 钙通道作为调节细胞内钙离子变化的主要途径 ,在调控PG促HT2

胞内钙释放在胃泌素引起胃平滑肌细胞收缩中的作用

本研究用大鼠游离的胃平滑肌细胞，观察五肽胃泌素（G5）对胃平滑肌细胞的收编作用及胃泌索引起胃平滑肌细胞收缩时胞内游离钙释放作用。结果表明：（1）G5能够引起胃体、胃窦、幽门平滑肌细胞收缩，并对胃窦作用最强。在G54×10－8～16×10－8mol／L剂量范围内，呈剂量依赖性。（2）丙谷胺或抗胃泌素血清可以阻断G5对胃肌细胞的收缩反应，而阿托品则不影响G5的作用。（3）G5与乙酸胆碱对平滑肌细胞收缩有相加作用。（4）胞内钙释放阻断剂TMB-8可抑制G5对胃肌细胞的收缩作用。（5）G5作用于胃窦平滑肌细胞后胞内游离Ca2+显著上升。上述结果提示：胃泌素通过特异性受体引起胃平滑肌细胞收缩，其收缩作用通过胞内Ca2+释放介导。

胃泌素对胃食管反流病患者食管压力及pH的影响

目的观察五肽胃泌素 (pentagastrin ,G5 )对胃食管反流病 (gastroesophagealrefluxdisease ,GERD)患者下食管括约肌压力 (loweroesophagealsphincterpressure,LESP)和食管 pH的影响。 方法 4 2例GERD患者随机分为 7组 ,每组 6例 ,分别为正常对照组 (1组 )、生理盐水组 (2组 )、G5干预组 (3～ 7组 ) ,G5剂量依次为 0 .2 5 μg/kg、0 .5 μg/kg、1.0 μg/kg、2 .0 μg/kg、6 .0 μg/kg ,每组干预前、后均行LESP和食管 pH测定。结果①G5明显增加LESP ,剂量为 0 .5 μg/kg时增加LESP最高 ,同它组相比有统计学意义 (P<0 .0 5 )。②G5剂量在 1.0 μg/kg以下时对食管 pH无明显影响 (P >0 .0 5 )。结论G5能明显增加GERD患者LESP ,剂量为 0 .5 μg/kg时增加LESP最明显 ,但对食管

钙通道阻滞剂对胃泌素促人结肠癌细胞增殖的影响

目的 观察硝苯地平 ( Nif)对五肽胃泌素促人结肠癌细胞增殖的影响并初步探讨其作用机制。方法 采用流式细胞仪检测细胞内游离钙离子浓度水平 (〔 Ca2 +〕i) ,结合 MTT比色法测定细胞增殖情况。结果 2 .5× 10 - 6mol/ L的五肽胃泌素 ( PG)作用于 HT2 9细胞后 ,可引起〔 Ca2 +〕i 水平迅速升高 ( P<0 .0 1)。 10 - 5 mol/ L的 Nif可使 PG引起的〔 Ca2 +〕i 水平升高幅度明显降低 ( P<0 .0 1) ,同时 10 - 5～ 10 - 6mol/ L 的 Nif可以抑制 PG促 HT2 9细胞增殖的作用 ( P<0 .0 5 )。结论 Nif通过抑制胞外 Ca2 +内流 ,阻止〔 Ca2 +〕i 水平升高 ,是其抑制 PG促 HT2

迷走背核复合区微量注射五肽胃泌素对大鼠胃运动的加强作用

在清醒大鼠研究延髓迷走背核复合区(DVC)微量注射五肽胃泌素(G5)对胃窦运动的作用。用慢性植入胃腔外应力传感器记录胃窦运动。单侧DVC内注入G5 0.0025,0.005,0.01μg可明显刺激胃窦的运动,并有一定的剂量相关性,反应发生迅速,时间持续长。外周静脉注入中枢量G5无兴奋胃运动效应。DVC内注G5前20min预先注入抗胃泌素血清(1:100)可取消G5兴奋胃窦运动效应。静脉灌流阿托品(100μg·kg^(-1)·h^(-1))和切断膈下迷走神经可阻断DVC注G5兴奋胃窦运动的作用。DVC注G5对肝门静脉血浆胃动素含量没有影响。研究结果表明,DVC是G5兴奋胃窦运动的脑内作用部位。G5兴奋胃运动的中枢效应是经由迷走胆碱能神经传出的。

五肽胃泌素及其类似物对大鼠胃粘膜细胞DNA合成的作用

利用细胞培养的方法,测定五肽胃泌素(Boc-β-Ala-Trp-Met-Asp-phe·NH_2)、葡萄糖-1-脱氧果糖四肽(GIe-1-Deoxyflu-Trp-Met-Asp-phe·NH_2)及Boc-三肽(Boc-Met-Asp-Phe·NH_2)等胃泌素类似物对~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)参入胃粘膜细胞DNA合成的影响。实验结果表明五肽胃泌素对胃粘膜细胞DNA合成有明显促进作用,而泌酸活性比五肽胃泌素还强的葡萄糖-1-脱氧果糖四肽却没有这种作用。进一步证明胃泌素的营养作用是独立于泌酸活性而存在的,二者有着不同的作用机理。

促胰液素和生长抑素经血管灌流大鼠离体胃抑制胃酸分泌

本工作利用血管灌流离体大鼠胃研究促胰液素和生长抑素对泌酸的影响及其与内源性前列腺素E(PGE)和前列环素(PGI_2)释放的关系。结果表明:(1)促胰液素和生长抑素都能有效地抑制五肽胃泌素(G_5)促进胃酸分泌的作用,消炎病可翻转这种抑制作用。(2)促胰液素能显著促进PGE和PGI_2代谢产物6-酮-前列腺素F_(1α)(6-Keto-PGF_(1α))释放;生长抑素只能促进FGE释放。消炎痛分别阻断促胰液素对PGE和6-keto-PGF_(1α)释放及生长抑素对PGE释放的促进作用。上述结果提示:(1)促胰液素的抑酸效应由促进PGI_2和PGE释放介导;(2)生长抑素的抑酸效应通过促进PGE释放介导。

清醒大鼠下丘脑外侧区注射胃泌素对胃运动的影响及胃泌素免疫反应性细胞的定位

在大鼠下丘脑外侧区(LHA)微量注入五肽胃泌素(G-5)0.01/μg和0.05μg可明显增强胃窦的运动。达一反应可被切断迷走神经所阻断。提示在LHA存在的胃泌素可参与胃运动的调节,并可能通过迷走神经起作用。用免疫组化PAP方法可显示出LHA有含阳性颗粒的大型胃泌素免疫反应性细胞和神经纤维网,这些胃泌素免疫反应性细胞和神经纤维网,这些胃泌素神经细胞可能在调节胃运动功能中起重要作用。

传入信息在十二指肠高渗溶液中对胃酸分泌和胃粘膜血流量抑制效应的作用

采用氢气清除法测定胃粘膜血流量(gastric mucosal blood flow,GMBF),以及用利多卡因消除十二指肠传入信息的技术,观察传入信息在十二指肠灌注高渗盐溶液对外源性五肽胃泌素(pentagastrin,G_5)引起的胃酸分泌和 GMBF 抑制效应中的作用。结果表明:(1)静脉灌注 G_5引起胃酸分泌和 GMBF 增加;(2)十二指肠灌注高渗盐溶液可使 G_5激发的胃酸分泌明显减少,而 GMBF 不再增高;(3)使用利多卡因后,在十二指肠灌注高渗盐溶液对胃酸分泌和 GMBF 的抑制性影响消除。这提示十二指肠传入信息不仅可调节生理性胃酸分泌,而且在十二指肠内灌注高渗盐溶液对 G_5刺激胃酸分泌和 GMBF 的抑制性效应中亦有作用。

三种非侵入性胃泌酸功能试验在消化性溃疡病中的应用

报告三种非侵入性胃泌酸功能试验在消化性溃疡（PU）病人中的应用，并与常用的五肽胃泌素刺激试验进行比较．口服金属镁胃酸呼气氢测定结果表明，十二指肠球部溃疡（DU）患者（18例）氢气产生量明显高于健康对照者（10例），且与胃溃疡（GU）病人（27例）有显著差异性（P＜0．01）。H2受体阻滞剂治疗DU（15例）后，氢气产生量明显下降．19例浅表性胃窦炎患者99m锝扫描结果与基础及总产氢量呈正相关性（γ＝0．9664，P＜0．001）。尿天青A含量测定，DU患者（14例）排出量明显高于正常人（21例）及胃癌患者（21例）（P＜0.01）。上述三种试验与插管法五肽胃泌素刺激试验相比均有显著相关性。

五肽胃泌素和胆囊收缩素对血管灌流大鼠离体胃运动的影响

用血管灌流大鼠离体胃制备,研究五肽胃泌素(G5)和八肽胆囊收缩素(CCK8)对胃窦收缩运动的影响。结果表明:(1)血管灌流G5和CCK8都能显著兴奋胃窦收缩运动,并有量效关系;(2)抗胃泌素血清(1:100)可完全取消G5对胃窦收缩运动的兴奋作用;(3)CCK受体阻断剂双丁酰环磷鸟苷和抗CCK8血清(1:100)都能完全取消CCK8对胃窦收缩运动的兴奋作用;(4)M受体阻断剂阿托品能完全阻断G5对胃窦收缩运动的兴奋作用,部分阻断CCK8对胃窦收缩运动的兴奋作用。上述结果提示:(1)G5可特异性兴奋血管灌流大鼠胃窦收缩运动,该作用通过壁内胆碱能神经系统介导;(2)CCK8对血管灌流大鼠胃窦收缩运动亦有特异性兴奋作用,该作用只是部分与壁内胆碱能神经系统有关。

胃泌素对白细胞介素─1β致大鼠离体胰岛B细胞分泌抑制的影响

采用新生大鼠胰岛离体培养方法，观察了五肽胃泌素（Ｇ－５）对ＩＬ－１Ｂ致胰岛Ｂ细胞分泌抑制的影响。结果表明：（１）ＩＬ－１Ｂ能剂量依赖性抑制Ｂ细胞的分泌功能；（２）Ｇ－５能对抗ＩＬ－１Ｂ对Ｂ细胞功能的抑制，与单纯ＩＬ－１Ｂ作用组相比，加用Ｇ－５能使葡萄糖刺激的胰岛素分泌量明显增加：（３）向ＩＬ－１Ｂ作用后的胰岛治疗性地给予Ｇ－５．能使抑制的Ｂ细胞功能得到部分恢复，作用呈时间和剂量依赖性。

侧脑室注射微量五肽胃泌素对大鼠胃电和胃运动的影响

在大鼠侧脑室微量注入五肽胃泌素(G-5)0.1μg观察其对胃电和胃运动的影响。实验结果表明:侧脑室注射G-5(0.1μg/10μl)后胃电慢波的振幅由对照值的0.56mV增加到0.847mV(P<0.01),快波的振幅和频率也明显增加;胃窦运动频率增加到对照值的41.556±1.01%(P<0.01),振幅增加196.68±2.07%(P<0.001)。这一反应被切断双侧颈迷走神经所阻断。提示脑内的胃泌素可参与对胃电和胃运动的调节,这一作用可能是通过迷走神经来实现的。

慢性束缚应激和交感神经切除对大鼠胃酸分泌及血清促胃液素水平的影响

采用慢性束缚应激（Chronicrestraintstrees，CRS）和腹腔交感神经节切除的方法，观察了CRS及CRS加交感神经切除对大鼠胃酸分泌和血清促胃液素水平的影响。结果：①CRS能降低正常以及交感神经切除后大鼠血清促胃液素水平（P＜0．05）；②单纯交感神经切除及交感神经切除加CRS大鼠，其胃酸分泌量均显著降低（P＜0．05）；③CRS和交感神经切除均可增强大鼠五肽促胃液素刺激的胃酸分泌反应。提示：交感神经介导的CRS适应性胃粘膜细胞保护作用可能与胃酸以及促胃液素分泌改变无直接关系。

KA8肽的合成及其对五肽胃泌素刺激大鼠胃液分泌的抑制作用

胃酸分泌调节肽是一个37肽。1-29肽段即为胰高糖素,而C-端8肽称为KA8。用固相法合成了此八肽,并观察了它的生物活性。实验结果表明五肽胃泌素能明显刺激胃酸分泌,但这种刺激作用可被预先给予的KA8所抑制,因此,KA8可能是一种胃酸分泌调节肽。

钙通道活性与胃泌素促人结肠癌细胞增殖间关系的研究

目的 :探讨钙通道活性在胃泌素促人结肠癌细胞增殖中的作用。方法 :运用流式细胞仪检测细胞内游离钙离子水平 ,MTT比色法测定细胞增殖情况。结果 :2 5× 10 -6M的五肽胃泌素 (PG)可以引起HT2 9细胞内游离钙离子水平明显升高 (P <0 0 1) ,钙通道阻滞剂nifedipine (10 -5M)可以使PG引起的钙离子水平升高幅度明显下降 (P <0 0 1)。同时可以部分抑制PG促增殖作用 (P <0 0 5 )。钙通道激动剂Bayk86 44 (10 -6M)可以明显升高细胞内钙离子水平 (P <0 0 1)。并能促进HT2 9细胞增殖 (P <0 0 5 ) ,与PG的促增殖作用相比无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 :钙通道作为调节细胞内钙离子变化的主要途径 ,在调控PG促HT2

大鼠胃泌酸腺细胞膜和肝匀浆对五肽胃泌素及其类似物的降解

本文用HPLC分离五肽胃泌素(Pentagastrin,Boc-β-Ala-Trp-Met-Asp-Phe·NH_2,PG_(1-5))及其N-端无保护基的TFA·五肽(β-Ala-Trp-Met-Asp-Pne·NH_2·TFA,TFA·PA_(1-5))被胃泌酸细胞膜和肝匀浆降解之产物,并对它们的氨基酸组成作了分析,又用薄层层析作了进一步验证,从而提出了酶促降解时可能的酶切位点。实验结果表明,N-端的Boc-基团能大幅度增加对酶降解的抵抗力,这从一个方面解释了为什么商品五肽胃泌素的泌酸活性大于其它胃泌素类似物的原因。

下丘脑外侧区胃泌素神经元对大鼠胃缺血-再灌注损伤的作用

目的 :观察下丘脑外侧区 (lateralhypothalamicarea,LHA)对胃缺血 再灌注损伤 (gastricischemia reperfu sioninjury ,GI RI)的影响 ,并对LHA的调控通路进行了初步分析。 方法 :采用夹闭大鼠腹腔动脉 30min ,松开动脉夹血流复灌 6 0min的GI RI模型 ,用电和化学刺激、电损毁和核团微量注射等方法。 结果 :(1)电或化学刺激LHA均显著加重GI RI;(2 )背侧迷走复合体 (dorsalvagalcomplex ,DVC)内微量注射五肽胃泌素后 ,对GI RI的效应与电刺激一致 ;(3)电解损毁双侧DVC或DVC内微量注射胃泌素受体阻断剂丙谷胺均可取消电刺激LHA加重GI RI的作用 ;(4)切断膈下迷走神经后电刺激LHA ,GI RI则减轻。 结论 :LHA具有加重大鼠GI RI的作用 ;LHA的这种作用可能是因电或化学刺激后 ,激活了其中的胃泌素能神经元 ,经其下行投射纤维释放胃泌素作用于DVC神经元上的胃泌素受体 ,并通过迷走神经介导 ,从而影响GI RI。