托吡酯对戊四氮点燃大鼠海马生长相关蛋白-43 mRNA表达的影响

目的:观察托吡酯对戊四氮点燃大鼠海马结构内生长相关蛋白(GAP)-43mRNA表达的影响。方法:健康成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只。I组大鼠胃内注入生理盐水(10mL/kg)后1h腹腔注射10g/L戊四氮(35mg/kg);Ⅱ组和Ⅲ组大鼠腹腔注射戊四氮(剂量同I组)前1h分别按100mg/kg和40mg/kg胃内注入10g/L托吡酯生理盐水溶液;Ⅳ组大鼠按10mL/kg和3.5mL/kg分别胃内注入和腹腔注射生理盐水,间隔1h。各组选取2个研究时间点,第1个时间点为I组大鼠性发作达到Ⅲ级,第2个时间点为Ⅰ组大鼠性发作达到Ⅴ级,每个时间点各组大鼠为5只。应用RT-PCR半定量检测不同时间点各组大鼠齿状回、海马CA3区及CA1区GAP-43mRNA的表达。结果:2周和4周时I组大鼠性发作分别达到Ⅲ级和V级。GAP-43mRNART-PCR产物经溴乙啶显色后显示出256bp和385bp2个预期的条带。在同一时间点,Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组大鼠齿状回及CA3区的GAP-43mRNA表达强于Ⅳ组,差异有统计学意义(P<0.05);各组在CA1区GAP-43mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);Ⅱ组和Ⅲ组大鼠齿状回和CA3区的GAP-43mRNA表达水平较Ⅰ组降低,差异有统计学意义(P<0.05),而Ⅱ组和Ⅲ组大鼠之间GAP-43mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。与2周时相比,4周时Ⅰ组大鼠GAP-43mRNA表达水平进一步增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:戊四氮点燃大鼠海马GAP-43mRNA表达增强,表明突触重建参与了癫发生的病理过程;托吡酯可抑制GAP-43的表达,可能是托吡酯抗癫作用的机制之一。

戊四氮点燃大鼠海马Nogo-A及其受体NgR的表达

目的:探讨戊四氮点燃大鼠海马Nogo-A及其受体NgR的表达变化。方法:40只成年健康雄性大鼠随机分为实验组(腹腔注射戊四氮35mg/kg,1次/d)和正常对照组(腹腔注射生理盐水3.5mL/kg,1次/d),每组20只。实验第2周、4周,每组各取10只大鼠测定脑电图,然后采用免疫组织化学方法检测大鼠海马结构内Nogo-A及NgR的表达水平。结果:与对照组比较,第2周及4周时,实验组大鼠海马齿状回内分子层、门区及海马CA3区Nogo-A的表达降低(P<0.05),同时,实验组大鼠海马齿状回颗粒细胞层、门区及海马CA3区NgR的表达也降低(P<0.05)。结论:Nogo-A及NgR可能参与了癫后海马异常苔藓纤维出芽及突触重建过程。

托吡酯对戊四氮点燃大鼠海马白介素-1β表达的影响

目的:探讨戊四氮(PTZ)点燃大鼠海马结构白细胞介素1β(IL-1β)表达的特征及托吡酯(TPM)对其表达的影响。方法:将30只成年健康雄性SD大鼠随机分为3组,每组10只。模型组大鼠胃灌入生理盐水(10mL/kg)1h后腹腔注射10 g/L PTZ生理盐水溶液(35mg/kg);TPM组大鼠按40mg/kg胃灌注10g/L TPM生理盐水溶液,1h后腹腔注射PTZ(剂量同模型组);对照组大鼠按10 mL/kg和3.5 mL/kg分别胃灌注和腹腔注射生理盐水。各组每d给药1次。当模型组大鼠性发作行为达到点燃标准时,对大鼠的行为进行观察和记录,采用免疫组织化学方法对各组大鼠海马结构IL-1β的表达进行检测。结果:实验第4周,模型组大鼠达到点燃标准;而TPM组大鼠最高发作级别为3级,均未达点燃标准;对照组大鼠行为正常。与对照组比较,模型组和TPM组大鼠海马结构IL-1β表达增强(P<0.05);TPM组大鼠海马结构IL-1β的表达较模型组降低(P<0.05)。结论:癫大鼠免疫系统处于活化状态,TPM能降低PTZ点燃大鼠海马结构IL-1β的表达而对癫具有一定的抑制作用。

托吡酯对戊四氮点燃大鼠海马生长相关蛋白-43mRNA和蛋白表达的影响

目的:观察托吡酯(TPM)对戊四氮点燃大鼠海马生长相关蛋白-43(GAP-43)蛋白和mRNA表达的影响。方法:健康成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只。模型对照组大鼠灌胃给予生理盐水(10mL/kg),低、高剂量TPM组分别按40mg/kg和100mg/kg给予10g/LTPM生理盐水溶液,空白对照组给予等量生理盐水,1h后,前3组大鼠腹腔注射10g/L戊四氮(35mg/kg)建立戊四氮点燃大鼠癫模型,空白对照组给予等量生理盐水。当模型对照组大鼠行为达到点燃时,应用RT-PCR方法半定量检测GAP-43mRNA的表达,应用免疫组织化学方法检测齿状回、海马CA3区和CA1区内GAP-43蛋白的表达强度。结果:与空白对照组相比,模型对照组,低剂量TPM组和高剂量TPM组大鼠齿状回与CA3区的GAP-43mRNA和蛋白表达强度升高(P<0.05);与模型对照组相比,低剂量TPM组和高剂量TPM组大鼠齿状回和CA3区的GAP-43mRNA和蛋白表达强度降低(P<0.05)。结论:戊四氮点燃大鼠海马GAP-43表达增强,表明突触重建参与了癫发生的病理过程。TPM可抑制GAP-43的过表达,2种剂量的抑制作用无差异。