提高离体蛙心灌流实验成功率的方法研究

离体蛙心灌流实验是生理学中一个重要的实验项目。近年来的教学实践表明,插管过程导致蛙心受损、插管内血液凝固堵塞、动脉切口位置不当等是易导致该实验失败的主要原因。选择合适的实验动物及插管,以及插管方法的改进、控制灌流液温度等措施可有效提高离体蛙心灌流实验的成功率。

白花九里明提取液对蟾蜍离体灌流蛙心收缩力和心率的影响

目的观察白花九里明提取液对蟾蜍离体灌流蛙心的心肌收缩力和心率的影响。方法取40只蟾蜍制备离体灌流蛙心,随机分为4组。正常对照组灌流液中加入生理盐水,白花九里明低、中、高浓度组灌流液中分别加入白花九里明(1.0、2.0、4.0g/ml)提取液,剂量均为25μl,观察加药前、后离体灌流蛙心的心肌收缩力和心率。结果白花九里明低浓度组心肌收缩力与正常对照组比较差异无统计学意义,白花九里明中浓度组心肌收缩力与白花九里明低浓度组比较差异无统计学意义,而明显小于正常对照组(P<0.05),白花九里明高浓度组心肌收缩力明显小于白花九里明低、中浓度组和正常对照组(P<0.05,0.01)。各组间的心率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论白花九里明不影响心率,低浓度的白花九里明对心肌收缩影响不明显;中、高浓度的白花九里明能降低心肌收缩力,且随药物浓度增大降低心肌收缩力的效应越明显。

浅谈如何提高蛙心灌流实验的教学效果

离体蛙心灌流的方法自建立以来就是动物生理学实验中一个重要的实验项目。斯氏蛙心插管法在高校实验教学中广泛采用,但是对初学者来说,插管难度大,实验成功率低。插管无法插入或者操作时间过长造成心脏功能受损、插管内发生凝血、切口位置不当、静脉窦受损和插管脱落是造成实验失败的主要原因。通过视频资料的观看使学生掌握实验的流程与细节、注意实验过程中的技巧、通过课程调整让学生得到多次练习的机会以达到一定的熟练度。这些措施的实施有效地提高了插管成功率和实验完成率,有效地提升了蛙心灌流实验的教学效果。

不同浓度MgCl_2溶液对蟾蜍离体心脏收缩力和心率的影响

利用蟾蜍离体心脏灌流法,先用正常任氏液灌流,后用含不同浓度MgCl2的任氏液灌流,观察了不同浓度MgCl2溶液对蟾蜍心肌收缩力和心率的影响。结果表明1.0mmol/L的MgCl2溶液显著增强心肌的收缩力(P<0.05),而对心率无明显影响;2.0mmol/L的MgCl2溶液显著增强心肌的收缩力(P<0.05),却使心率极显著减慢(P<0.01);5.0mmol/L的MgCl2溶液对心肌收缩力和心率的影响均不显著1;0.0mmol/L的MgCl2溶液使心肌收缩力减弱显著(P<0.05),对心率的影响不显著;15.0mmol/L的MgCl2溶液不仅极显著减弱心肌的收缩力(P<0.01),也显著减慢心率(P<0.05)。这些结果表明,细胞外液中低浓度的镁离子增强蟾蜍心肌的收缩力,但高浓度镁离子降低心肌的收缩力。

马尾松花粉多糖及其酯化物对离体蟾蜍心肌生理特性的影响

利用常规离体蟾蜍心脏灌流法,通过生理记录仪经张力换能器系统描记心脏活动,观察了60%马尾松花粉多糖及其硫酸酯化多糖对离体蟾蜍心肌收缩力及心率的影响,并用普萘洛尔、氯化镉、维拉帕米等药物对心肌上的特异受体进行阻断,初步探讨了酯化多糖对心肌的作用机制。结果表明:60%多糖有降低离体蟾蜍心肌收缩力的作用,酯化60%多糖则有增强心肌收缩力的作用,两者对心率都没有影响;酯化60%多糖可以逆转普萘洛尔、氯化镉对心肌的抑制作用,而在维拉帕米存在的情况下,其正性肌力作用受到抑制,说明酯化多糖的正性肌力作用可能是通过胞膜上的L型-钙通道介导完成,而与β1受体无关。因而,加深研究酯化多糖影响心脏生理活动的的分子机制,对治疗相关疾病和开发松花粉多糖具有双重意义。

垂体后叶素诱发离体蛙心心肌缺血实验模型

目的:建立一个新的心肌缺血实验模型,探讨垂体后叶素对心肌收缩力和心率的直接影响。方法:采用Straub氏法制备离体蟾蜍心脏标本,用任氏液维持心脏的正常活动,加入1ml含有垂体后叶素0.1U/ml的任氏液,记录心肌收缩力和心率的变化。结果:给予垂体后叶素后,心肌收缩力逐渐下降,心率逐渐减慢。在3min时,收缩力由给药前的(4.33±2.30)克降到(0.62±0.48)克(P<0.01),区域时间由(0.52±0.06)秒延迟到(0.64±0.06)秒(P<0.01)。结论:垂体后叶素可以直接抑制心肌收缩,诱发蟾蜍心脏发生心肌缺血。

蟾酥对豚鼠离体心脏的毒性作用和物质基础研究

目的:研究蟾酥对豚鼠离体心脏的毒性作用和其物质基础。方法:通过Langendorff灌流研究蟾酥对豚鼠离体心脏的毒性作用,HPLC测定灌流后心脏中蟾蜍甾烯的含量。结果:蟾酥诱导豚鼠离体心脏出现房室传导阻滞、室速、室颤多种心律失常现象。当给药量累积达(60±11.5)μg时致其停跳。采用HPLC在灌流心脏中测到9种蟾蜍甾烯类化合物,其与心脏亲和力增加的顺序为:沙蟾毒精>蟾毒灵>远华蟾毒配基>嚏根草苷元>日蟾毒它灵>华蟾毒灵>蟾毒它灵>脂蟾毒配基>去乙酰蟾毒它灵。结论:蟾酥对豚鼠心脏具有显著毒性,其物质基础可能是脂蟾毒配基、蟾毒灵、蟾毒它灵、日蟾毒灵等9种蟾蜍甾烯类化合物。