新试剂10－（2－羧基苯偶氮）－9－菲酚的合成及与铈显色反应的研究

本文研究新试剂１０－（２－羧基苯偶氮）－９－菲酚（简称ＣＡＰ）的合成，测定试剂的离解常数。研究了试剂ＣＡＰ与铈（Ⅳ）的显色反应。在表面活性剂ＯＰ存在下，光度法测定球墨铸铁中铈的含量，结果较满意。

离子对配合物在纸上光度法中的应用——银菲罗啉和溴酚兰的沉淀反应研究

在中性条件下,银同1,10—菲罗啉络合,用溴酚兰形成离子对配合物沉淀,研究了缔合比和溶度积。离子对配合物沉淀易吸滤在滤纸上而且稳定,碱水可洗掉过量的试剂,采用双波长吸光度差值法在600nm及720nm处进行测定,对于ppm级的含银水,相对标准偏差为4％。

TRPM4通道抑制剂9-菲酚对胰岛β细胞INS-1电活动的抑制作用

细胞内钙激活通透单价阳离子的瞬时受体电位M4(transient receptor potential melastatin 4,TRPM4)通道在胰岛β细胞表达,但是调节TRPM4的功能是否影响胰岛细胞的电活动尚需研究。本研究通过电生理方法,探讨了TRPM4通道抑制剂9-菲酚对胰岛β细胞动作电位发放的影响。采用全细胞电流钳技术,记录了不同浓度9-菲酚对胰岛β细胞放电频率、电位峰值及振幅的影响。结果显示,9-菲酚对甲苯磺丁脲刺激胰岛β细胞产生的动作电位发放频率有显著的抑制作用,且呈剂量依赖性,IC_(50)值为14.99±7.93μmol·L^(-1)。此外,9-菲酚对电刺激胰岛β细胞产生的动作电位发放频率也有相似的剂量依赖性抑制作用;对甲苯磺丁脲刺激胰岛β细胞产生的动作电位峰值和振幅也均有显著的抑制作用。本研究结果表明,TRPM4通道的功能能够影响胰岛β细胞动作电位的放电模式,为TRPM4通道在胰岛β细胞的研究提供了药理学实验方法和理论依据。

尿中多环芳烃单羟基代谢产物的液相色谱-质谱测定方法研究

目的建立同时测定尿液中萘、菲和芘的单羟基代谢产物1-羟基萘、2-羟基萘、3-羟基菲和1-羟基芘等的液相色谱-质谱检测方法。方法尿液样品经酶水解后,利用液液萃取进行净化提取,吹氮定容后进液相色谱质谱仪进行分析,利用内标标准曲线法对目标化合物进行定量。结果利用内标法进行定量分析,提高了方法的重现性和精密度,4种目标化合物的回收率在89.7%～103.0%范围内,批内和批间精密度分别在1.0%～4.2%和1.8%～5.8%范围内;1-羟基萘、2-羟基萘和1-羟基芘的检出限为0.2μg/L,3-羟基菲的检出限为0.1μg/L。结论液相色谱-质谱法灵敏度高,重现性和回收率好,适用于正常人群和多环芳烃暴露人群尿中1-羟基萘、2-羟基萘、3-羟基菲和1-羟基芘等多环芳烃代谢产物的检测。

中国八省份一般人群尿中多环芳烃羟基代谢产物水平研究

目的 调查我国一般人群尿液中多环芳烃羟基代谢产物2-羟基萘、1-羟基萘、3-羟基菲和1-羟基芘的水平,为进一步的研究工作提供基线资料.方法 2009至2010年在我国东部、西部和中部8个省份的24个市县,采用多阶段分层整群随机抽样的方法抽取了18 120名6～60岁人群为调查对象,对其生活环境和健康状况进行了问卷调查并收集尿液样品;用液相色谱质谱联用仪检测了4 680份尿液中2-羟基萘、1-羟基萘、3-羟基菲和1-羟基芘的水平,统计分析不同性别和年龄人群尿中上述代谢产物的分布情况.结果 我国一般人群尿中2-羟基萘、1-羟基萘、3-羟基菲和1-羟基芘的几何均数（95％ CI）分别为1.85（1.75～1.95）、1.55（1.50 ～1.61）、0.57（0.54 ～0.59）和0.82（0.78～0.85） μg/L,中位数分别为2.44、＜0.50、0.72和0.90 μg/L.6～12、13～16、17～20、21～30、31～45和46 ～60岁年龄组2-羟基萘的几何均数分别为1.60、1.56、1.69、2.23、1.91和1.86 μg/L（x2=17.90,P＜0.01）,1-羟基萘的几何均数分别为1.30、1.16、1.53、1.68、1.80和1.52 μg/L（x2=76.22,P＜0.01）,3-羟基菲的几何均数分别为0.78、0.76、0.55、0.42、0.50和0.99 μg/L（x2=66.48,P＜0.01）,1-羟基芘的几何均数分别为0.77、0.64、1.00、0.84、0.84和0.57μg/L（x2 =51.48,P＜0.01）,不同年龄组间4种代谢产物含量差异均有统计学意义.结论 我国一般人群尿中多环芳烃单羟基代谢产物的水平存在性别、年龄差异,本研究为进一步开展多环芳烃代谢产物生物监测提供了基础数据.

焦化厂工人尿中多环芳烃代谢物浓度的影响因素

[目的]以尿中多环芳烃代谢产物2-羟基萘(2-NAP)、2-羟基芴(2-FLU)、9-羟基菲(9-PHE)和1-羟基芘(1-OHP)作为生物标志,评价焦化厂工人体内多环芳烃(PAHs)暴露水平,探讨4种PAHs代谢物浓度的影响因素。[方法]对某焦化厂焦炉工437人(接触组)及非焦炉工167人(对照组)进行问卷调查,高效液相色谱-荧光检测法测定两组工人晨尿中4种多环芳烃代谢物水平。[结果]接触组尿中羟基代谢产物2-NAP、2-FLU、9-PHE和1-OHP浓度的中位数[分别为0.725、0.300、0.092、0.059μg/mmo L(以Cr计)]均显著高于对照组[分别为0.615、0.197、0.065、0.040μg/mmo L(以Cr计)](P<0.01);逐步logistic回归分析显示吸烟量每增加一个等级,致2-NAP发生高浓度的可能性增加了3.393倍;接触组的代谢物2-NAP、2-FLU、9-PHE和1-OHP发生高浓度的可能性分别是对照组的1.665、3.399、2.185和2.905倍。[结论]影响人群尿中多环芳烃代谢物浓度的主要因素是工种和吸烟,其中2-FLU与1-OHP是焦炉工职业暴露敏感的生物标志,而2-NAP是吸烟暴露敏感的生物标志。

辽宁省一般人群尿中多环芳烃单羟基代谢产物水平研究

目的调查我省一般人群尿液中多环芳烃单羟基代谢产物2-羟基萘、1-羟基萘、3-羟基菲和1-羟基芘的水平,为进一步的研究工作提供基线资料。方法 2009—2010年在辽宁省东部、中部和西部的3个城市,采用随机抽样的方法选取764名6~60岁人群,对其生活环境和健康状况进行问卷调查并收集尿液样品;采用液相色谱质谱联用仪检测764份尿液中2-羟基萘、1-羟基萘、3-羟基菲和1-羟基芘的水平,统计分析不同性别和年龄人群尿中代谢产物的分布情况。结果我省一般人群尿中1-羟基萘、2-羟基萘、3-羟基菲和1-羟基芘的几何均数（95%CI）分别为1.86（1.72~2.04）、1.85（1.58~2.16）、0.66（0.60~0.71）、0.77（0.69~0.86）μg/L,中位数分别为0.95、2.98、0.73和0.83μg/L。2-羟基萘、3-羟基菲和1-羟基芘含量在男性和女性间差异有统计学意义;1-羟基萘、2-羟基萘和1-羟基芘在不同年龄组间含量差异均有统计学意义;4种代谢物含量在我省东、中、西部间存在差异;吸烟与否在1-羟基萘、2-羟基萘、3-羟基菲含量中差异有统计学意义。结论辽宁省一般人群尿中多环芳烃单羟基代谢物的水平存在性别、年龄、地区差异,本研究为进一步开展多环芳烃代谢产物生物监测提供了基础。

被动吸烟对孕妇尿中4种多环芳烃代谢物浓度的影响

[目的]以尿中2-羟基萘（2-NAP）、2-羟基芴（2-FLU）、9-羟基菲（9-PHE）和1-羟基芘（1-PYR）作为生物标志物,评价太原市孕妇体内多环芳烃（PAHs）暴露水平,探讨被动吸烟对其浓度的影响。[方法]2009年4月—2010年4月,抽取太原市某医院住院分娩孕妇287人,对其工作生活环境等情况进行问卷调查。将符合纳入标准的264名孕妇根据被动吸烟指数等级分为3组：0、1-49、≥50组,收集各组产前尿样,利用高效液相色谱-荧光检测法测定尿中4种PAHs的羟基代谢产物（OH-PAHs）水平。[结果]符合纳入标准的孕妇尿样中均可检测到2-羟基萘、2-羟基芴、9-羟基菲和1-羟基芘,浓度中位数分别为0.47、0.24、0.23和0.10μg/mmol Cr。除9-羟基菲外,3组尿中2-羟基萘、2-羟基芴、1-羟基芘的差异均有统计学意义（P〈0.05）;多元线性回归分析显示,被动吸烟、使用煤炉、采暖期、汽修厂加油站是影响孕妇尿中4种OH-PAHs水平的主要因素。[结论]被动吸烟可以增加孕妇尿中4种OH-PAHs含量,其中2-羟基萘可以作为反映被动吸烟对孕妇体内多环芳烃暴露水平影响的最佳指标。

TRPM4通道抑制剂9-菲酚在骨关节炎软骨细胞中的作用

目的研究TRPM4信号通道抑制剂-9-菲酚对骨关节炎(OA)软骨细胞的肥大分化及软骨组织的降解的作用,并研究9-菲酚对OA软骨细胞凋亡的影响,从而为治疗OA提供实验依据。方法选取因OA进行膝关节置换而截下的胫骨平台关节软骨,消化成软骨细胞进行细胞培养。软骨细胞均分为6组,一组不加药作为对照组,其余分别加入不同量的。9-菲酚干预1 d培养后细胞分别进行RT-q PCR,检测Runx-2、MMP-13(软骨细胞肥大指标)及COL Ⅱ、Aggrecan(软骨代谢指标);采用TUNEL染色荧光显微镜检测及Annexin V和7-AAD标记流式细胞仪检测9-菲酚干预1 d后OA软骨细胞凋亡情况。结果 RT-q PCR显示:无法判断9-菲酚对软骨细胞代谢的影响;而软骨细胞肥大指标Runx-2、MMP13的m RNA较对照组表达水平有升高趋势,可见在m RNA水平上,9-菲酚可能促进软骨细胞肥大。TUNEL染色荧光显微镜检测软骨细胞凋亡率发现,9-菲酚浓度为2×10^(-5) mol/L组较对照组凋亡率明显下降(P<0.05),其他浓度组与对照组比较均无统计学差异,但均有凋亡率下降的趋势。Annexin V和7-AAD标记流式细胞仪检测软骨细胞凋亡率发现,9-菲酚浓度为1×10^(-5) mol/L、2×10^(-5) mol/L、4×10^(-5) mol/L时较对照组凋亡率均有所下降(P<0.05),而在另外两组有下降趋势。结论 9-菲酚在细胞水平上对OA软骨细胞的肥大分化有促进作用,可能促进OA的进展。同时9-菲酚可以抑制OA软骨细胞的凋亡,在OA治疗方面可能具有积极意义。