蝙蝠葛酚性碱的抗心律失常作用

用哇巴因致豚鼠心律失常、乌头碱致大鼠心律失常、电刺激致兔室颤、大鼠冠脉结扎致复灌性心律失常模型证实蝙蝠葛酚性碱具剂量依赖性的抗室性心律失常作用；用氟化钙一乙酰胆碱致小鼠房颤模型，结果提示蝙蝠葛酚性碱具有抗房性心律失常作用。离体试验显示蝙蝠葛酚性碱具有浓度依赖性延长豚鼠心室乳头肌ＡＰＤ＿（５０）、ＡＰＤ＿（９０）和ＥＲＰ以及降低ＡＰＡ、减馒Ｖ＿（ｍａｘ）的作用。

蝙蝠葛酚性碱对大鼠局灶性脑缺血-再灌注继发炎性损伤的保护作用

目的 研究蝙蝠葛酚性碱对大鼠局灶性脑缺血 再灌注继发炎性损伤的保护作用及其机制。方法 用线栓法制作大鼠右侧大脑中动脉栓塞模型 ,缺血 2h后 ,将线抽出实行再灌注 ,观察蝙蝠葛酚性碱对粘附分子 (ICAM 1)表达、白细胞的粘附与浸润、髓过氧化物酶 (MPO)活性和一氧化氮 (NO)含量的影响。结果 蝙蝠葛酚性碱可明显抑制ICAM 1的表达 ,减轻白细胞的粘附与浸润 ,降低缺血侧大脑皮层和海马组织中的MPO活性和NO含量。结论 蝙蝠葛酚性碱对大鼠局灶性脑缺血 再灌注后的炎性损伤有明显保护作用 ,其机制可能与抑制ICAM 1表达 ,减轻白细胞的粘附与浸润 。

蝙蝠葛酚性碱抗突变作用的研究

目的应用昆明小鼠股骨骨髓嗜多染红细胞微核实验,研究蝙蝠葛酚性碱（phenolic alkaloids from menispermum dauricum,PAMD）的致突变作用和抗突变作用.方法均在10～40 mg/kg剂量下,连续腹腔注射给药11d,在致突变实验,末次给药6 h后处死小鼠,检测骨髓嗜多染红细胞微核率.在抗突变实验,小鼠在于处死前的24 h,腹腔注射40 mg/kg环磷酰胺（cyclophosphamide,CP）或2 mg/kg丝裂霉素C（mitomycinc,MC）,末次给药6 h后取样.结果蝙蝠葛酚性碱与对照组相比未诱发骨髓嗜多染红细胞微核率的增高（微核细胞率＜3‰）.蝙蝠葛酚性碱可使环磷酰胺和丝裂霉素C诱发的骨髓细胞微核率增高数值出现明显的降低.PAMD＋CP组微核细胞抑制率分别为61.83%、43.51%和22.52%.PAMD＋MC组微核细胞抑制率分别为31.09%、21.50%和8.29%.结论蝙蝠葛酚性碱具有一定的抗突变作用,而无致突变作用.

蝙蝠葛酚性碱对犬冠状动脉结扎形成心肌梗死的保护作用

目的 :研究蝙蝠葛酚性碱 (PAMD)对急性心肌梗死的保护作用。方法 :用麻醉犬冠状动脉结扎造成心肌梗死模型 ,设立PAMD 3 5和 7mg·kg-1两剂量组 ,地奥心血康 (DAXXK) 4 0mg·kg-1阳性对照组 ,伪手术组及模型对照组。观察各组心电图ST段 ,血清LDK和CK ,以及心肌梗死范围的变化。结果 :PAMD 7 0mg·kg-1组30min时 ,在对抗ST段上移及降低LDH活性上优于DAXXK 4 0mg·kg-1组 (P <0 0 1) ,降低CK活性的作用与DAXXK相当 (P >0 0 5 ) ;7 0mg·kg-1PAMD组降低梗死范围与DAXXK 4 0mg·kg-1组作用无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 :PAMD对结扎犬冠脉造成急性心肌梗死有保护作用。

蝙蝠葛酚性碱对BxPC-3荷瘤小鼠细胞凋亡基因p53表达的影响

目的:观察蝙蝠葛酚性碱(PAMD)的抗肿瘤作用并进一步探讨其作用机制。方法:通过实时定量PCR(Real-time PCR)技术观察PAMD对胰腺癌细胞株BxPC-3皮下异位移植瘤细胞凋亡相关基因p53mRNA表达的影响,以此探讨PAMD抗肿瘤作用机理。结果:PAMD能够显著降低胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠皮下异位移植瘤组织中p53 mRNA表达量。结论:PAMD对胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠皮下异位移植瘤表现出明显抑制作用,能够有效的抑制肿瘤生长,其机理可能与凋亡相关基因表达有关。

蝙蝠葛酚性碱对血栓形成和血小板聚集的影响

目的观察蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对血栓形成、血小板聚集的影响并研究其作用机制。方法用动静脉短路血栓形成模型观察血栓形成;比浊法测定血小板聚集度;电镜技术观察血小板超微结构变化;放射免疫法测定TXB2和6-酮基-PGF1α的水平;硝酸还原酶法测定兔血浆NO浓度。结果PAMD体内给药可剂量依赖性地抑制血栓形成及由ADP,AA和THR诱导的大鼠和兔的血小板的聚集;可显著抑制血小板超微结构的变化;能明显升高兔血管壁6-酮基-PGF1α产生量,对血小板释放的TXB2无明显影响;还可提高兔血浆NO的浓度。结论PAMD具抗血栓形成和抗血小板聚集的作用,其机制与增加血管壁PG I2含量,提高兔血浆NO的浓度有关。

蝙蝠葛酚性碱抗神经元缺血再灌注损伤的作用机制

目的探讨蝙蝠葛酚性碱(PAMd)抗神经元细胞缺血再灌注损伤的作用机制。方法体外培养小鼠神经母细胞瘤细胞株N2a,缺糖、缺氧和缺血清(OGSD)培养90 min,更换正常培养液并加入不同浓度的PAMd,继续培养不同时间后,收集细胞培养液,测定乳酸脱氢酶(LDH)活性和神经递质含量;收集细胞,测定以下指标:①MTT法检测细胞生存活力;②荧光光度法分析胞质活性氧(ROS)含量;③激光共聚焦分析线粒体跨膜电位;④Western blot检测胞质细胞色素C(Cyt C);⑤采用Caspase 3可见光底物DEVD-pNa测定Caspase 3活性。结果①PAMd促进OGSD处理后的N2a细胞存活;②PAMd抑制OGSD处理后的N2a细胞释放兴奋性神经递质;③PAMd直接清除细胞内的ROS;④PAMd能维持线粒体跨膜电位的稳定;⑤PAMd抑制线粒体Cyt C释放和抑制胞质Caspase 3活性。结论PAMd通过阻断线粒体凋亡途径和抗氧化作用发挥神经元保护作用。

蝙蝠葛酚性碱对动物学习记忆能力的影响

目的:观察并比较蝙蝠葛酚性碱和吡拉西坦(脑复康)对大鼠和小鼠学习能力的影响。方法:以东莨菪碱和乙醇分别使动物发生学习记忆获得障碍和记忆再现障碍,采用迷津法和跳台法进行测试。结果:蝙蝠葛酚性碱和脑复康对东莨菪碱和乙醇所致的学习记忆障碍均有改善作用;与模型组比较,蝙蝠葛酚性碱组、脑复康组P均<0.05,蝙蝠葛酚性碱100mg/kg组比50mg/kg组效果好。结论:蝙蝠葛酚性碱对动物学习记忆障碍有改善作用。

蝙蝠葛酚性碱对犬血流动力学及冠脉循环的影响

目的 研究蝙蝠葛酚性碱 (PAMD)对正常麻醉犬血流动力学、冠脉循环及心肌氧代谢的影响。方法 设立生理盐水阴性对照组及PAMD 3 5和 7 0mg·kg- 1 两剂量组 ,在不同时间点观察各组犬血流动力学、冠脉循环及心肌氧代谢的相关指标的改变。结果 与药前相比 ,PAMD两剂量组均可降低左心室收缩压 (LVSP)和±dp dtmax,减慢心率 ,增加心肌氧含量、降低心肌氧利用率 ,且具有增加冠状动脉血流量 ,降低冠状动脉阻力和外周阻力的作用。对血压、心输出量和左室舒张末压 (LVEDP)无显著影响。结论 PAMD能改善血流动力学。

蝙蝠葛酚性碱对脑缺血大鼠海马CA3区诱发电位的影响

目的探讨蝙蝠葛酚性碱(PAMd)对脑缺血大鼠海马CA3区神经元突触传递功能的影响。方法在体记录正常大鼠海马CA3区诱发的群峰电位(PS);结扎大鼠双侧颈总动脉,造成急性不完全性脑缺血,观察PS幅度的变化;缺血前给予PAMd(5、10、20mg/kg),观察其对缺血后PS幅度的影响;并观察不同剂量谷氨酸(Glu)对诱发电位的影响。结果①急性不完全性脑缺血后,PS的幅度显著降低。②5、10、20mmol/LGlu注入后,PS的幅度均升高;当给予50mmol/LGlu时PS幅度则显著降低。③20mg/kgPAMd能部分改善脑缺血引起的PS幅度降低,并能减弱50mmol/LGlu降低PS幅度的作用。结论预先给予20mg/kgPAMd对高浓度Glu和急性脑缺血所致CA3区突触传递功能减弱有明显的改善作用。

蝙蝠葛酚性碱诱导多药耐药细胞系K562/MDR1凋亡及逆转耐药性的研究

目的:探讨蝙蝠葛酚性碱(phenolic alkaloids from Menispermum dauricum,PAMD)诱导多药耐药(multidrug resistance,MDR)细胞系K562/MDR1凋亡及逆转耐药性的作用。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测K562/S及K562/MDR1细胞对不同浓度PAMD的敏感性,并计算半数抑制浓度(IC50)。膜联蛋白V(AnnexinV)-异硫氰酸荧光素(FITC)+碘化丙啶(PI)双参数检测细胞凋亡百分率变化,分析在PAMD的作用下,两种细胞对伊马替尼(IM,STI571)敏感性的变化。结果:PAMD可诱导两种细胞凋亡,其低剂量72h时对K562/S和K562/MDR1细胞的凋亡率分别为(10.92±1.03)%和(8.12±0.98)%,并可提高伊马替尼对K562/MDR1的凋亡率。PAMD可显著逆转K562/MDR1细胞对伊马替尼的耐药性,其逆转倍数为2.22。结论:PAMD对K562/S和K562/MDR1细胞具有诱导凋亡作用,同时具有逆转白血病细胞株K562/MDR1多药耐药性、回归靶位的作用。

蝙蝠葛酚性碱对局灶性脑缺血大鼠海马神经细胞谷氨酸转运体EAAC1 mRNA表达的影响

目的探讨蝙蝠葛酚性碱(PAMd)对大鼠局灶性脑缺血后海马神经细胞谷氨酸转运体EAAC1 mRNA表达的影响,及其对脑缺血的保护机制。方法 SD大鼠42只,随机分为假手术组(不给药)、模型对照组(不给药)、PAMd组(灌胃给予PAMd 10 mg·kg-1),每组14只。线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测脑梗死体积,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测海马神经细胞谷氨酸转运体EAAC1 mRNA表达。结果缺血24 h后,假手术组、模型对照组和PAMd组脑梗死比例分别为(0.0±0.0)%,(35.3±2.9)%,(21.3±3.8)%(P<0.05);缺血侧海马EAAC1 mRNA相对表达量分别为0.97±0.04,2.46±0.13,1.91±0.15(P<0.05)。结论 PAMd可能通过下调缺血后EAAC1的表达升高,从而减轻谷氨酸的兴奋毒性作用,发挥对脑缺血的保护作用。

蝙蝠葛酚性碱对BxPC-3裸鼠的抑瘤作用及对bFGF表达的影响

目的研究蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对BxPC-3裸鼠的抑瘤作用及对肿瘤新生血管bFGF表达的影响,进一步探讨其作用机制。方法建立BxPC-3裸鼠的动物模型,检测蝙蝠葛酚性碱对转移瘤的抑制率,同时应用SP免疫组织化学方法检测各组BxPC-3裸鼠肿瘤组织bFGF的表达水平。结果蝙蝠葛酚性碱对BxPC-3裸鼠瘤组织具有抑制作用,高、中、低剂量组抑瘤率分别为34.91%、52.83%、41.51%,与模型对照组比较具有统计学意义(P<0.01);各剂量均能明显降低BxPC-3裸鼠瘤组织bFGF的表达水平。结论蝙蝠葛酚性碱对BxPC-3裸鼠肿瘤具有明显的抑制作用,其机制可能是通过改善裸鼠免疫功能,抑制肿瘤新生血管形成来实现的。

蝙蝠葛酚性碱对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究蝙蝠葛酚性碱对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法线栓法制备大鼠大脑中动脉阻断局灶性脑缺血模型,缺血2h后再灌注24h,观察蝙蝠葛酚性碱(5、10、20mg/kg,再灌开始时ip给药)对神经功能评分、脑梗死范围、脑水肿和血脑屏障通透性的影响,测定脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果蝙蝠葛酚性碱能明显减轻大鼠的神经功能缺陷、缩小脑梗死体积、减轻脑水肿和血脑屏障通透性,显著增加SOD和GSH-Px活性,降低MDA水平。结论蝙蝠葛酚性碱对脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与降低血脑屏障通透性、抗脂质过氧化有关。

蝙蝠葛酚性碱对离体大鼠心肌顿抑的保护作用

目的 探讨蝙蝠葛酚性碱 (PAMD)对离体大鼠心肌顿抑的作用。方法 采用缺血 10min后再灌注 30min造成心肌顿抑模型 (S) ,灌流液中加 0 5mg·mL- 1 PAMD(P)组同样缺血再灌注。结果 灌注末S组LVSP ,+dp dtmax和 -dp dtmax分别降至预灌末的 49% ,5 3%和 5 8% ,LVEDP则增至 42 2 % ;心肌钙含量为 (5 14± 142 ) μg·g- 1 (干重 ) ;出现可逆性心肌超微结构损伤。而P组再灌注末LVSP ,LVEDP ,+dp dtmax和 -dp dtmax恢复为预灌末值的 70 % ,2 0 5 % ,78%和 79% ;心肌钙为 (316± 84) μg·g- 1 (干重 ) ;以上变化均有显著差异。

蝙蝠葛酚性碱对胃癌细胞SGC-7901增殖作用的实验研究

目的测定蝙蝠葛酚性碱对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响。方法通过MTr法和台盼兰法，观察蝙蝠葛酚性碱在不同浓度，不同时间条件下，对胃癌细胞SGC-7901增殖作用的影响。结果蝙蝠葛酚性碱能明显抑制SGC-7901细胞的增殖，并呈剂量和时间依赖关系，随浓度增大和作用时间延长其抑制率呈上升趋势。结论蝙蝠葛酚性碱对胃癌可能具有一定治疗作用。

蝙蝠葛酚性碱在大鼠小肠吸收特性研究

目的研究蝙蝠葛酚性碱在大鼠小肠的吸收特性。方法采用大鼠肠灌流实验,主要从药物吸收部位、浓度和介质pH等三方面对蝙蝠葛酚性碱的吸收特性进行研究。结果蝙蝠葛酚性碱在大鼠小肠吸收速率(Ka)顺序为:回肠>空肠≈十二指肠;药物浓度对Ka无显著影响;蝙蝠葛酚性碱在pH 5.4,6.8,7.8介质的Ka差异有统计学意义(P<0.05)。结论蝙蝠葛酚性碱在大鼠小肠各肠段均有一定吸收,但在回肠段吸收更好;蝙蝠葛酚性碱的吸收机制为被动扩散;随着肠循环液pH增大,蝙蝠葛酚性碱Ka增大。

蝙蝠葛酚性碱对脑缺血大鼠细胞凋亡相关蛋白PKB表达的影响

目的:探讨蝙蝠葛酚性碱(phenolic alkaloids fromMenispermum dauricum,PAMD)预处理对脑缺血后大脑皮质细胞凋亡蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)表达的影响。方法:采用线栓阻塞大脑中动脉方法制备大鼠脑缺血模型,并用受试药物术前连续预处理模型大鼠7 d。采用免疫组织化学方法测定假手术组,模型组,PAMD高、中、低剂量组,尼莫地平、银杏叶片预处理组大鼠缺血后24,48,72 h大脑皮质中细胞凋亡相关蛋白PKB表达变化。结果:行大脑中动脉闭塞后大鼠大脑皮质PKB均被诱导表达,PAMD预处理7 d后,缺血后各时间点大鼠大脑皮质PKB表达明显升高。结论:PAMD能明显促进缺血脑损伤后抑制细胞凋亡相关蛋白PKB表达水平,从而在缺血性脑损伤中起到神经保护作用。

脑心康片对大鼠脑缺血再灌注损伤后Caspase-3 mRNA表达的影响

目的:观察脑心康片对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,并进一步探讨其作用机制。方法:Wistar大鼠雄性60只,按照体质量随机分为6组,即脑心康片高剂量组、脑心康片中剂量组、尼莫地平组、银杏叶片组、模型组和假手术组,每组10只。分别给等体积生理盐水,各组均连续灌胃给药5 d后,采用大鼠大脑中动脉线栓法制备不完全脑缺血模型,RT-PCR法检测脑心康片对脑缺血后脑组织Caspase-3 mRNA表达的影响。结果:脑心康片能明显抑制Caspase-3 mRNA的表达。结论:脑心康片对脑缺血具有保护作用,其机理可能与脑心康片通过抑制凋亡相关基因的表达,进而抑制神经元细胞凋亡有关。

蝙蝠葛酚性碱对大鼠的行为致畸性

蝙蝠葛酚性碱（phenolic alkaloid of Menispermum dauricum,PAMD）系从蝙蝠葛（Menispermum dauricum DC）中提出的酚性生物碱,药理试验表明有较好的抗心律失常作用,本实验研究曾发现,PAMD对大鼠母体无毒性作用,亦无致畸胎作用,但40mg·kg-1染毒,可引起胎鼠胸骨,蝶骨和枕骨发育迟缓.本文进一步观察其对仔鼠早期行为发育的影响.