p53、PTEN和VEGF在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨p53、PTEN、VEGF表达在胃癌发生、发展中的作用及其相关影响因素。方法采用免疫组织化学法检测80份胃癌组织中p53、PTEN、VEGF表达,并分析其与胃癌临床病理特征的关系。结果 p53、PTEN、VEGF在胃癌组织中的阳性表达率依次为55%(44/80)、92.5%(74/80)、52.5%(42/80);胃癌组织中p53、VEGF表达阳性率明显高于对照组,P<0.01。三者表达与性别、年龄、肿瘤分化程度、浸润情况、淋巴结转移等均无明显相关性;任意两个指标之间相关性亦不显著。结论 p53、VEGF对胃癌的诊断有一定价值;p53、VEGF、PTEN对胃癌肿瘤分化、浸润和转移等的诊断价值不大,各指标间的相关性不显著。

乳腺癌组织中NHERF1、PTEN和ERα蛋白的表达及其临床意义

目的在乳腺癌及癌旁组织中研究钠氢交换子调节因子1(Na+/H+exchanger regulatory factor 1,NHERF1)、PTEN和雌激素受体亚型ERα的免疫组织化学表达情况及其与乳腺癌临床病理分型的关系。方法采用免疫组织化学(SP)法评价乳腺癌组织及癌旁组织中NHERF、PTEN和雌激素受体亚型ERα蛋白表达情况,对其进行比较研究。结果乳腺癌组织中NHERF1和PTEN均呈现弱阳性表达或者不表达,而在癌旁组织中两者均有表达,而且在癌旁组织与癌组织中的表达量的差异有统计学意义(P<0.01)。而ERα的表达量在乳腺癌组织中明显高于癌旁组织(P<0.01)。结论乳腺癌组织中PTEN蛋白的表达水平可能与乳腺癌组织中NHERF1的表达有很大的相关性,雌激素受体在乳腺癌的发生发展过程中起了很重要的作用。

抑癌基因PTEN在口腔涎腺腺样囊性癌组织中的表达

目的 从蛋白水平研究抑癌基因 10号染色体缺失的磷酸酯酶及张力蛋白同源物 (PTEN ) ,在口腔涎腺腺样囊性癌中表达及其意义。方法 采用免疫组织化学方法检测 3 4例腺样囊性癌 (其中筛孔型 14例 ,管状型 11例 ,实体型 9例 )组织中PTEN的表达。结果 3 4例腺样囊性癌PTEN蛋白表达阴性率为 17.6% ( 6/ 3 4) ,筛孔型、管状型、实体型表达阳性率分别为 14 .3 % ( 2 /14 ) ,18.2 % ( 2 / 11)和 2 2 .2 % ( 2 / 9) ,各型之间阳性率无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 涎腺腺样囊性癌组织中存在抑癌基因PTEN表达缺失 ,PTEN在部分腺样囊性癌病变发展中起作用 。

Skp2和PTEN在上皮性卵巢肿瘤组织中的表达及临床意义

目的研究S期激酶相关蛋白2（Skp2）和PTEN蛋白在上皮性卵巢肿瘤组织中表达,探讨其临床病理学意义及在肿瘤发生发展中作用。方法收集129例上皮性卵巢肿瘤石蜡标本（良性35例、交界性32例、恶性62例）,免疫组化法检测Skp2及PTEN蛋白的表达水平,分析两者表达、临床病理参数关系及其相互关系。结果 ①Skp2在良性及交界性肿瘤中表达阴性,分别为（0/35,0/32）,在卵巢癌中阳性率40.32%（25/62）,其在卵巢癌表达水平明显高于良性和交界性肿瘤（χ~2值分别为8.25、6.72,均P〈0.05）;②PTEN蛋白在良性及交界性肿瘤阳性率分别为82.86%（29/35）、59.38%（19/32）,在卵巢癌阳性率40.32%（25/62）,明显低于良性和交界性肿瘤（χ^2值分别为11.15、9.23,均P〈0.05）;③Skp2、PTEN蛋白在卵巢癌的表达在不同年龄、是否绝经及不同组织学类型中无显著性差异（χ^2值分别为1.01、0.04、0.21,P〉0.05）。Skp2在卵巢癌Ⅲ~Ⅳ期、中低分化组及有淋巴结转移组表达明显高于Ⅰ~Ⅱ期、高分化组及无淋巴结转移组（χ^2值分别为10.05、11.21、8.54,均P〈0.05）,PTEN在卵巢癌Ⅲ~Ⅳ期、中低分化组及有淋巴结转移组表达低于Ⅰ~Ⅱ期、高分化组及无淋巴结转移组（χ^2值分别为8.23、12.15、7.65,均P〈0.05）;④Skp2和PTEN蛋白在卵巢癌中的表达呈负相关（r=-0.321,P〈0.05）。结论 Skp2表达上调与PTEN下调可能在上皮性卵巢肿瘤的发生、发展中起重要作用。检测Skp2和PTEN表达水平可能对卵巢癌预后分析有一定指导意义。

抑癌基因PTEN与iNOS在胶质瘤中表达及意义

目的探讨抑癌基因PTEN和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在胶质瘤组织中表达意义及两者与胶质瘤侵袭性的关系。方法采用LSAB免疫组织化学法检测56例胶质瘤中PTEN、iNOS蛋白的表达,并分析两者与胶质瘤病理级别和侵袭性的关系。结果PTEN在胶质瘤Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级中阳性率分别为91．7％、75％、53．3％、15．4％,PTEN表达阳性率随病理分级升高而降低(P＜0．01)。而iNOS表达阳性率分别为50％、38．1％、73．3％、76．9％;iNOS表达水平与PTEN表达水平呈负相关(P＜0．05)。结论PTEN和iNOS的表达一定程度反映胶质瘤的恶性度和侵袭性强弱;PTEN缺失可引起iNOS表达增加,在胶质瘤发生、发展过程中发挥重要作用。

肝细胞肝癌组织中FN和PTEN基因表达水平及意义

目的:研究FN和PTEN基因在肝细胞肝癌中的表达情况,探讨其在肝细胞肝癌发生发展中的作用及意义。方法:应用荧光实时定量PCR方法,检测84例肝细胞肝癌及癌旁组织中FN蛋白、PTEN蛋白、mRNA表达情况。分析FN和PTEN基因表达及肝细胞肝癌的关系。结果:FN蛋白主要定位于肝癌细胞外基质中。FN mRNA在肝细胞肝癌中的阳性率为79.76%,高于癌旁肝组织的阳性率9.52%,差异具有统计学意义(P<0.05)。PTEN蛋白明确定位于肝细胞胞质内。PTEN mRNA在肝细胞肝癌中的阳性率为38.09%,明显低于癌旁肝组织的阳性率100%,差异具有统计学意义(P<0.05)。FN在合并癌栓,淋巴结转移,AFP阳性,肿瘤数目多发的肝癌组织中的表达高,而在不同分化程度及不同肿瘤直径的肝癌组织中表达差异无统计学意义;PTEN在低分化肝癌细胞,合并癌栓,AFP阳性,淋巴结转移,肿瘤直径≥2cm的肝癌组织中表达较低,而在不同肿瘤数目的肝癌组织中表达无统计学意义,PTEN蛋白表达与HBs Ag无关,与组织学分级及转移有关。结论:肝癌组织中FN mRNA的表达量高于癌旁组织,而肝癌组织中PTEN mRNA的表达量低于癌旁组织,FN和PTEN基因可能与肝细胞肝癌的发生发展有关,其可能在肝癌的发生发展、侵袭转移中起一定的促进或抑制作用。

第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因表达下调促进肝细胞癌血管生成拟态形成

目的探讨磷酸酶第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因（PTEN）表达与肝癌血管生成拟态（VM）形成的关系。方法收集85例肝细胞癌患者的组织标本及临床资料，过碘酸希夫（PAS）／CD31双重染色及免疫组织化学法观察肝癌组织中VM的存在和PTEN的表达，分析VM存在与临床预后指标及PTEN表达的相关性；三维细胞培养观察肝癌细胞株SMMC-7221及HepG2的VM形成，实时定量聚合酶链反应（Real-timePCR）检测PTENmRNA表达。结果85例肝癌标本中17例存在VM结构，VM阳性组门脉癌栓阳性率（52．9％）高于阴性组（17．6％），生存时间为（29．9±3．6）个月低于阴性组的（42．2±5．5）个月，差异有统计学意义（P〈0．05）；PTEN表达VM阳性组（35．3％）低于VM阴性组（63．2％），差异有统计学意义（P〈0．05）；三维培养体系中肝癌细胞株SMMC-7221能够形成VM结构，而HepG2不能；SMMC-7221中PTEN的表达低于HepG2，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论肝细胞癌中PTEN表达与VM的形成及患者临床预后相关。

联合靶向第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因/磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路抑制胶质瘤细胞增殖和侵袭的机制

目的 观察LY294002联合重组腺病毒Ad-第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因（PTEN）对胶质瘤LN229细胞株增殖和侵袭的影响.方法 应用噻唑蓝（MTT）法、流式细胞术、划痕实验和Transwell细胞侵袭实验评价LY294002联合Ad-PTEN对LN229细胞增殖、侵袭的抑制作用;Western blot检测PTEN/磷酸肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路中蛋白表达的变化.结果 与二甲基亚砜（DMSO）组、空载组和LY294002组比较,联合组细胞生长明显受到抑制,第6天细胞增殖率仅为38.68％;细胞周期分析结果表明,联合组细胞G0/G1期比例为75.49％,高于DMSO组、空载组和LY294002组的51.62％、50.31％、66.35％,差异有统计学意义（P＜0.05）;Transwell法分析结果显示,联合组穿过小室的细胞数明显减少,仅为（15.58±1.45）个,低于DMSO组、空载组和LY294002组的（27.63±4.36）、（46.67 ±3.61）、（49.28±5.37）个,差异有统计学意义（P＜0.05）.Western blot检测DMSO组、空载组、LY294002组和联合组PTEN蛋白相对表达量分别为0.13 ±0.04、0.26±0.03、0.52±0.07和0.83±0.16,磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）蛋白相对表达量分别为1.30±0.07、1.73±0.07、0.87 ±0.17和0.35±0.08,增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白相对表达量为2.72±0.02、3.13±0.06、0.63 ±0.13和0.38±0.09,细胞周期素D1（Cyclin D1）蛋白相对表达量为1.72±0.09、1.18 ±0.15、0.49±0.11和0.18 ±0.14,磷酸化黏着斑激酶（p-FAK）蛋白相对表达量为0.95±0.14、1.09 ±0.16、1.29±0.08和0.65 ±0.11,基质金属蛋白酶-2（MMP-2）蛋白相对表达量为0.73 ±0.19、0.87±0.12、0.61±0.10和0.23±0.08,表明联合组PTEN蛋白表达显著上调,p-Akt、PCNA、Cyclin D1、MMP-2、p-FAK表达显著下调,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 LY294002联合Ad-PTEN通过调控PI3K/Akt信号通路对胶质瘤LN229细胞株的增殖和侵袭具有联合抑制作用。

结合bpV（pic）的壳聚糖支架对神经干细胞生长分化的影响

目的观察神经干细胞在吸附第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因（PTEN）抑制剂的壳聚糖支架上的生长分化。方法神经干细胞分壳聚糖组（培养孔内置入壳聚糖支架）和对照组，于1、3、7d行细胞计数试剂盒（CCK-8）实验，比较两组细胞的增殖。制备吸附PTEN抑制剂bpV（pie）的壳聚糖支架，以空支架为对照，与神经干细胞共培养。培养7d时取壳聚糖支架冰冻切片，免疫荧光染色鉴定其分化。结果CCK-8结果显示，各时间点壳聚糖组（0．267±0．012、0．444±0．019、0．787±0．031）和对照组（0．237±0．022、0．467±0．024、0．772±0．021）的吸光度值差异无统计学意义（P〉0．05）。免疫荧光染色显示，与空支架组比较，bpV支架组抗胶质纤维酸性蛋白（GFAP）阳性细胞比例[（73．2±9．1）％比（85．2±9．5）％]较低，而抗β-微管蛋白（[3-tubulin）Ⅲ阳性细胞比例[（24．6±8．9）％比（11．4±7．2）％]较高（P〈0．05），每视野GFAP和β-TubulinⅢ阳性细胞数在bpv支架组（11．4±2．0、4．1±1．7）都多于空支架组（8．8±2．3、1．3±0．8，P〈0．05）；两组均少见有抗受体相互作用蛋白（RIP）阳性细胞。结论壳聚糖支架对神经干细胞有良好的相容性，吸附PTEN抑制剂的壳聚糖支架能促进神经干细胞向支架迁移并向神经元分化。

第10号染色体缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路在大鼠脊髓发育过程中的表达

目的 观察第10号染色体缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因（PTEN）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路在大鼠脊髓发育过程中的表达模式.方法 选取不同发育阶段（孕15 d子鼠记为A组,出生当天大鼠记为B组,出生后7d大鼠记为C组,出生后56 d大鼠记为D组）的SD大鼠,取出其脊髓,采用Western blot法检测该通路上关键蛋白的表达水平;同时,采用免疫荧光法检测各相应蛋白在大鼠脊髓的细胞定位.结果 Western blot结果显示,A、B、C、D组PTEN与内参肌动蛋白（actin）的灰度值比分别为0.281±0.086、0.462 ±0.002、0.591±0.022、0.392±0.001,A组与其他3组比较差异有统计学意义（P＜0.05）,D组与B、C组比较差异有统计学意义（P＜0.05）;A、B、C、D组S6与actin的灰度值比分别为0.646 ±0.116、0.450±0.129、0.824±0.082、0.174±0.038,D组与A、C组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.免疫荧光染色结果显示脊髓神经元有丰富的PTEN与S6表达.结论 这些结果提示PTEN/mTOR信号通路可能与发育相关的表达模式,从而为中枢神经系统再生能力随着发育过程而降低这一现象提供依据.

第10号染色体丢失性磷酸酶及张力蛋白同源基因调控的酪氨酸蛋白激酶2/信号传导与转录因子3信号通路对糖尿病心肌缺血后处理敏感性的作用

目的 评价第10号染色体丢失性磷酸酶及张力蛋白同源基因（PTEN）调控的酪氨酸蛋白激酶2/信号传导与转录因子3（JAK2/STAT3）信号通路在糖尿病心肌对缺血后处理敏感性中的作用.方法 健康雄性SD大鼠,体重220～ 280 g,采用1％链脲佐菌素-柠檬酸盐缓冲液60 mg/kg腹腔注射法制备1型糖尿病模型.8周后取成模糖尿病大鼠60只,采用随机数字表法分为5组（每组12只）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I/R组）、缺血后处理组（IPO组）、PrEN抑制剂BpV＋缺血再灌注组（BpV＋I/R组）、BpV＋缺血后处理组（BpV＋IPO组）.I/R组采用结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min的方法建立模型;IPO组于再灌注前行3个循环的再灌注10 s/缺血10 s;S组只穿线不结扎血管;BpV于缺血前lh静脉注射1 mg/kg,对照组注射等量生理盐水.各组于再灌注120 min时处死大鼠,测定血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）的水平,心肌梗死面积（IS）和细胞凋亡指数（AI）,PTEN活性及其蛋白表达,磷酸化JAK2（p-JAK2）、磷酸化STAT3（p-STAT3）以及凋亡相关蛋白活化的半胱酰天冬氨酸特异性蛋白酶3（cleaved caspase-3）的表达水平.多组间数据比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验.结果 与S组比较,I/R组和IPO组血清CK-MB水平及PTEN活性升高,PTEN和cleaved caspase-3表达上调（t=2.997～ 7.702,均P＜0.05）;与IPO组比较,BpV＋IPO组血清CK-MB水平、IS和AI及PTEN活性降低,p-JAK2和p-STAT3的表达上调,cleaved caspase-3的表达下调[分别为3 003±613比1 247± 440、42％±8％比53％±6％、21％±3％比33％±6％、（584±78）比（918±136） pmol、1.73±0.29比1.06±0.24、1.75±0.19比1.01±0.16、1.6±0.4比2.2±0.5,t=2.837～9.249,均P＜0.05].I/R组与IPO组,BpV＋I/R组与I/R组比较上述指标差异无统计学意义.结论 PTEN抑制可通过激活JAK2/STAT3信号通路从而恢复缺血后处理对糖尿病再灌注损伤心肌的保护作用。

磷酸酶及张力蛋白同源基因在肺鳞癌中的表达及其临床意义

目的 探讨第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因（PTEN）在肺鳞癌（SQCLC）中的表达阳性率及其临床意义.方法 收集煤炭总医院2009年5月至2013年7月住院的50例肺鳞癌组织,其中男43例,女7例,年龄40 ～ 83岁,平均年龄66岁;10例癌旁肺组织,其中男9例,女1例,年龄42 ～ 79岁,平均年龄59岁;13例肺鳞状上皮乳头状瘤石蜡标本作为肺良性病变组织,其中男11例,女2例,年龄34～ 76岁,平均年龄58岁.采用免疫组织化学SP法检测各标本中PTEN的表达,比较SQCLC组、癌旁肺组织及肺良性病变组织PTEN蛋白表达阳性率,分析PTEN表达与患者性别、年龄、吸烟、临床分期、分化程度及淋巴结转移的关系.结果 （1）50例SQCLC中PTEN低表达40例,在癌旁肺组织及良性病变组织中PTEN高表达分别为8和12例;50例肺鳞癌中PTEN表达阳性10例,癌旁肺组织8例,肺良性病变组织12例,差异有统计学意义（x2=23.542,P＜0.01）.（2） PTEN蛋白的表达与患者分化程度、淋巴结转移密切相关（P＜0.05）,而与患者的性别、年龄、吸烟、临床分期无关（P＞0.05）.结论 PTEN蛋白低表达与SQCLC的恶性程度高、发生淋巴结转移密切相关;PTEN蛋白表达缺失可作为评估SQCLC恶性程度的指标之一,是判断预后的独立因素.