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Identification and Expression Analysis of the Phosphoenolpyruvate Carboxylase Gene Family in Peanut (Arachis hypogaea L.) 被引量:6
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作者 YU Shan-lin PAN Li-juan +2 位作者 YANG Qing-li CHEN Ming-na ZHANG Hong-sheng 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2010年第4期477-487,共11页
Phosphoenolpyruvate carboxylase (PEPC) is widely distributed in plants and bacteria, and catalyzes the carboxylation of phosphoenolpyruvate to form oxaloacetate and inorganic phosphate. To investigate the molecular ... Phosphoenolpyruvate carboxylase (PEPC) is widely distributed in plants and bacteria, and catalyzes the carboxylation of phosphoenolpyruvate to form oxaloacetate and inorganic phosphate. To investigate the molecular mechanisms of the regulation and control of peanut oil, with the degenerated primers and RACE-PCR approach, five PEPC genes were cloned from peanut, and designated as AhPEPC1, AhPEPC2, AhPEPC3, AhPEPC4, and AhPEPC5, respectively. The structure and phylogenetic analysis of PEPC protein indicated that AhPEPC1-4 genes encoded a typical plant-type PEPC-enzyme, and AhPEPC5 a bacterial-type. By real-time quantitative RT-PCR approach the expression pattern of each gene was detected in various tissues of normal and high oil-content peanut varieties. It was found that there was a lower expression level of AhPEPCs genes except for the AhPEPC2 in high-oil peanut than normal-oil peanut line. The results provide some fundamental information for the further investigation of plant PEPC proteins and their role in regulation of oil-content in peanut seeds. 展开更多
关键词 PEANUT phosphoenolpyruvate carboxylase gene cloning expression pattern regulation of oil-content
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Functional Analysis of the Phosphoenolpyruvate Carboxylase on the Lipid Accumulation of Peanut(Arachis hypogaea L.) Seeds 被引量:4
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作者 PAN Li-juan YANG Qing-li +7 位作者 CHI Xiao-yuan CHEN Ming-na YANG Zhen CHEN Na WANG Tong WANG Mian HE Ya-nan YU Shan-lin 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2013年第1期36-44,共9页
Phosphoenolpyruvate carboxylase(PEPC;EC 4.1.1.31) catalyses phosphoenolpyruvate(PEP) to yield oxaloacetate,which is involved in protein biosynthesis.Pyruvate kinase(PK;EC 2.7.1.40) catalyzes PEP to yield pyruvat... Phosphoenolpyruvate carboxylase(PEPC;EC 4.1.1.31) catalyses phosphoenolpyruvate(PEP) to yield oxaloacetate,which is involved in protein biosynthesis.Pyruvate kinase(PK;EC 2.7.1.40) catalyzes PEP to yield pyruvate,which is involved in fatty acid synthesis.In this study,five PEPC genes(AhPEPC1,AhPEPC2,AhPEPC3,AhPEPC4,and AhPEPC5) from peanut have been cloned.Using a quantitative real-time RT-PCR approach,the expression pattern of each gene was monitored during the seed development of four peanut varieties(E11,Hebeigaoyou,Naihan 1,and Huayu 26).It was found that these five genes shared similar expression behaviors over the developmental stages of E11 with high expression levels at 30 and 40 d after pegging(DAP);whereas these five genes showed irregular expression patterns during the seed development of Hebeigaoyou.In Naihan 1 and Huayu 26,the expression levels of the five genes remained relatively high in the first stage.The PEPC activity was monitored during the seed development of four peanut varieties and seed oil content was also characterized during whole period of seed development.The PEPC activity followed the oil accumulation pattern during the early stages of development but they showed a significantly negative correlation thereafter.These results suggested that PEPC may play an important role in lipid accumulation during the seed development of four peanut varieties tested. 展开更多
关键词 peanut(Arachis hypogaea L.) phosphoenolpyruvate carboxylase PEPC activity lipid accumulation
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Photosynthetic Characteristics and Heterosis in Transgenic Hybrid Rice with Maize Phosphoenolpyruvate Carboxylase (pepc) Gene 被引量:1
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作者 LI Ji-hang XIANG Xun-chao +3 位作者 ZHou Hua-qiang HE Li-bin ZHANG Kai-zheng LI Ping 《Rice science》 SCIE 2006年第3期185-192,共8页
Three F3 hybrids derived from the sterile rice lines Gang 46A, 776A and 2480A and the improved restorer line Shuhui 881 containing maize phosphoenolpyruvate carboxylase (pepc) gene were used to analyze the effect of... Three F3 hybrids derived from the sterile rice lines Gang 46A, 776A and 2480A and the improved restorer line Shuhui 881 containing maize phosphoenolpyruvate carboxylase (pepc) gene were used to analyze the effect of pepc gene on the heterosis and photosynthetic characteristics, while the F3 obtained by crossing Shuhui 881 with the above three sterile lines served as controls. The dynamics of photosynthetic characteristics in leaves of three F1 with pepc gene and their controls were determined at the initial-tillering, maxium-tillering, elongation, initial-heading, heading, maturity stages, and other different times after flag leaf fully expanded. The PEPCase activities of the three F1 with pepc gene increased significantly as compared with control plants during the whole developmental stages. Moreover, the net photosynthesis rate (Pn) also increased to certain extent. The data showed that PEPCase activity was significantly correlated to Pn with a correlation coefficient of 0.6081. The photosynthetic indexes of the three F1 with pepc gene were obviously superior to respective controls in apparent quantum efficiency, light compensation point and carboxylation efficiency, while the CO2 compensation point was lower than that of corresponding control. The Pn of the three F1 with pepc gene at light saturation point and CO2 saturation point was also higher than that of control plants. in addition, the three F1 with pepc gene had an average increase of 37.10% in grain yields per plant in comparison with control plants. The results indicated that the photosynthetic characteristics of hybrid rice containing pepc gene had been improved to some extent due to the introduction of pepc gene. 展开更多
关键词 hybrid rice phosphoenolpyruvate carboxylase gene photosynthetic characteristic high photosynthetic efficiencybreeding heterosie
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PCK1对小鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移的作用及其机制
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作者 张黎 王嘉 +5 位作者 方世正 张钟健 杨曦 王武帅 孙雄山 杨大春 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期971-979,共9页
目的:探讨磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)在小鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及迁移中的作用及机制。方法:用30μg/L血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)诱导小鼠VSMCs增殖和迁移,将小鼠VSMCs分为溶剂对照(vehicle)组和PDGF-BB组,采用Western b... 目的:探讨磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)在小鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及迁移中的作用及机制。方法:用30μg/L血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)诱导小鼠VSMCs增殖和迁移,将小鼠VSMCs分为溶剂对照(vehicle)组和PDGF-BB组,采用Western blot和免疫荧光染色检测PCK1表达水平的变化。使用小鼠Pck1 siRNA(siPck1)转染小鼠VSMCs沉默PCK1表达,将VSMCs分为vehicle组、siPck1+vehicle组、PDGF-BB组和siPck1+PDGF-BB组,采用免疫荧光染色检测细胞增殖能力,CCK-8法检测细胞活力,划痕实验检测细胞迁移能力,透射电镜观察细胞线粒体动力学变化。发动蛋白相关蛋白1(Drp1)基因过表达慢病毒(lenti-Drp1)转染VSMCs使DRP1过表达,将小鼠VSMCs分为PDGF-BB组、siPck1+PDGF-BB组、lenti-Drp1+PDGF-BB组和lenti-Drp1+siPck1+PDGF-BB组,再次检测上述指标。结果:PDGF-BB使VSMCs中PCK1和DRP1表达增加,细胞活力升高,Ki-67阳性细胞率增加,划痕愈合率升高,线粒体分裂增加;沉默PCK1表达后以上过程均受到抑制。过表达DRP1后,沉默PCK1表达对VSMCs细胞活力、Ki-67阳性细胞率、划痕愈合率和线粒体分裂的抑制作用明显削弱。结论:PCK1通过调控DRP1表达促进小鼠VSMCs线粒体分裂、细胞增殖和迁移。 展开更多
关键词 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1 血管平滑肌细胞 细胞增殖 细胞迁移 线粒体动力学
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Plasticity of photorespiratory carbon concentration mechanism in Sedobassia sedoides(Pall.)Freitag&G.Kadereit under elevated CO_(2)concentration and salinity
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作者 Zulfira RAKHMANKULOVA Elena SHUYSKAYA +2 位作者 Maria PROKOFIEVA Kristina TODERICH Pavel VORONIN 《Journal of Arid Land》 SCIE CSCD 2024年第7期963-982,共20页
Rising atmospheric CO_(2)(carbon dioxide)concentrations and salinization are manifestations of climate change that affect plant growth and productivity.Species with an intermediate C_(3)-C_(4)type of photosynthesis li... Rising atmospheric CO_(2)(carbon dioxide)concentrations and salinization are manifestations of climate change that affect plant growth and productivity.Species with an intermediate C_(3)-C_(4)type of photosynthesis live in a wide range of precipitation,temperature,and soil quality,but are more often found in warm and dry habitats.One of the intermediate C_(3)-C_(4)photosynthetic type is C_(2)photosynthesis with a carbon concentration mechanism(CCM)that reassimilates CO_(2)released via photorespiration.However,the ecological significance under which C_(2)photosynthesis has advantages over C_(3)and C_(4)plants remains largely unexplored.Salt tolerance and functioning of CCM were studied in plants from two populations(P1 and P2)of Sedobassia sedoides(Pall.)Freitag&G.Kadereit Asch.species with C_(2)photosynthesis exposed to 4 d and 10 d salinity(200 mM NaCl)at ambient(785.7 mg/m^(3),aCO_(2)and elevated(1571.4 mg/m^(3),eCO_(2))CO_(2).On the fourth day of salinity,an increase in Na+content,activity catalase,and superoxide dismutase was observed in both populations.P2 plants showed an increase in proline content and a decrease in photosynthetic enzyme content:rubisco,phosphoenolpyruvate carboxylase(PEPC),and glycine decarboxylase(GDC),which indicated a weakening of C_(2)and C_(4)characteristics under salinity.Treatment under 10 d salinity led to an increased Na^(+)content and activity of cyclic electron flow around photosystem I(PSI CEF),a decreased content of K^(+)and GDC in both populations.P1 plants showed greater salt tolerance,which was assessed by the degree of reduction in photosynthetic enzyme content,PSI CEF activity,and changes in relative growth rate(RGR).Differences between populations were evident under the combination of eCO_(2)and salinity.Under long-term salinity and eCO_(2),more salt-tolerant P1 plants had a higher dry biomass(DW),which was positively correlated with PSI CEF activity.In less salt-tolerant P2 plants,DW correlated with transpiration and dark respiration.Thus,S.sedoides showed a high degree of photosynthetic plasticity under the influence of salinity and eCO_(2)through strengthening(P1 plants)and weakening C_(4)characteristics(P2 plants). 展开更多
关键词 photosystemsⅠandⅡ carbon-concentrating mechanism glycine decarboxylase RUBISCO phosphoenolpyruvate carboxylase(PEPC) cyclic electron flow salinity stress DRYLANDS
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‘蛇龙珠’葡萄果实糖酸含量和代谢关键酶活的变化
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作者 杨从弟 《安徽农学通报》 2024年第7期99-103,共5页
糖酸是决定葡萄品质及葡萄酒风味的重要指标之一。本研究以酿酒葡萄‘蛇龙珠’为试验材料,在其生长发育过程中的E-L 33、35、36、37和38这5个时期,测定和分析了果实生长发育过程中可溶性糖(葡萄糖、果糖)、主要有机酸(酒石酸、苹果酸)... 糖酸是决定葡萄品质及葡萄酒风味的重要指标之一。本研究以酿酒葡萄‘蛇龙珠’为试验材料,在其生长发育过程中的E-L 33、35、36、37和38这5个时期,测定和分析了果实生长发育过程中可溶性糖(葡萄糖、果糖)、主要有机酸(酒石酸、苹果酸)和游离氨基酸的动态变化,并分别测定了果实中磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)活性的变化。结果表明,‘蛇龙珠’果实在生长发育过程中葡萄糖和果糖逐渐增加;精氨酸、脯氨酸、缬氨酸、亮氨酸和丙氨酸等游离氨基酸含量逐渐增加;主要有机酸酒石酸和苹果酸含量逐渐下降,PEPC酶的活性在E-L 35时期后表现出与果实中苹果酸含量相似的变化趋势,表明葡萄果实中苹果酸的降解可能受PEPC酶的影响。通过对有效成份含量的研究,更深入地了解葡萄果实的发育过程,并为优化葡萄酒酿造和调整香气特性提供参考。 展开更多
关键词 ‘蛇龙珠’ 酒石酸 苹果酸 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶
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磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1对胃癌细胞生物学行为的影响及相关机制 被引量:1
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作者 沈昕草 朱孝仁 +1 位作者 刘媛媛 吴晓阳 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2023年第1期9-16,22,共9页
目的:探讨磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(phosphoenolpyruvate carboxykinase 1,PCK1)在胃癌中的表达、与胃癌患者预后的关系及其潜在机制。方法:利用TCGA数据库、HPA数据库及Oncomine 4.5数据库中胃癌以及癌旁组织的相关数据与图片,分析PCK... 目的:探讨磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(phosphoenolpyruvate carboxykinase 1,PCK1)在胃癌中的表达、与胃癌患者预后的关系及其潜在机制。方法:利用TCGA数据库、HPA数据库及Oncomine 4.5数据库中胃癌以及癌旁组织的相关数据与图片,分析PCK1表达水平与胃癌患者临床病理学特征和总生存期的关系,采用基因功能富集分析(GSEA)预测PCK1调控胃癌潜在的信号通路。体外细胞学实验采用慢病毒转染胃癌HGC-27和AGS细胞,分别敲低与过表达PCK1,采用细胞功能学实验检测PCK1对胃癌细胞生长、增殖、迁移等影响,同时采用蛋白质免疫印迹检测相关蛋白的表达。结果:与癌旁组织相比,PCK1在胃癌组织中表达明显上调(P<0.05);ROC曲线提示PCK1对胃癌患者预后具有良好的预测效能;通过GSEA富集分析提示原发性免疫缺陷、细胞黏附分子、趋化因子信号通路、全身性红斑狼疮、产生IgA的肠道免疫网络及RIGⅠ样受体信号通路相关的基因集在PCK1基因低表达表型中差异富集;敲低PCK1后,胃癌HGC-27和AGS细胞生长、克隆形成能力、迁移能力显著下降,同时p-AKT(Ser473)、p-mTOR、p-S6和p-4EBP1表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01);过表达PCK1则与之作用相反。结论:PCK1在胃癌中呈高表达且与患者预后相关,其可能通过活化AKT-mTOR信号通路促进胃癌细胞生长、增殖与迁移。 展开更多
关键词 胃癌 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1 迁移 增殖 AKT-mTOR信号通路
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枯草芽孢杆菌pckA影响四甲基吡嗪合成的研究 被引量:1
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作者 黄璐 贡献 +1 位作者 佟硕秋 吴拥军 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期47-53,共7页
四甲基吡嗪(tetramethylpyrazine,TTMP)是传统发酵食品中重要的香气化合物,具有调节心脏收缩、修复损伤肝肾等生理活性。为提高发酵豆豉的品质,该研究对枯草芽孢杆菌的TTMP代谢能力进行优化。基于已报道的TTMP合成途径,利用同源重组技术... 四甲基吡嗪(tetramethylpyrazine,TTMP)是传统发酵食品中重要的香气化合物,具有调节心脏收缩、修复损伤肝肾等生理活性。为提高发酵豆豉的品质,该研究对枯草芽孢杆菌的TTMP代谢能力进行优化。基于已报道的TTMP合成途径,利用同源重组技术,在枯草芽孢杆菌BJ3-2中进行磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶基因(pckA)的缺失,并研究BJ3-2ΔpckA对发酵豆豉风味的影响。结果表明,敲除pckA不影响菌株的正常生长,在45℃发酵72 h,BJ3-2ΔpckA发酵的豆豉中TTMP含量比BJ3-2中增加23.71%,酱香更浓郁,氨味明显降低,风味品质显著提升。研究结果首次发现pckA对TTMP合成有显著的调控作用,将为豆豉发酵品质的提升提供理论依据。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶 四甲基吡嗪 豆豉 基因敲除
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C3植物绿色器官PEP羧化酶活性的比较研究 被引量:23
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作者 郝迺斌 谭克辉 +4 位作者 那松青 贾志旺 戈巧英 张玉竹 杜维广 《Acta Botanica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1991年第9期692-697,共6页
本文研究了小麦(Triticum aestivum L.)和大豆(Glycine max L.)的不同光合器官中的PEP羧化酶及其相关的酶类。在这些器官中均含有PEP羧化酶,其中以大豆的荚壳和种皮及小麦的内稃中PEP羧化酶活性最高。不同绿色器官在光下或暗中均能... 本文研究了小麦(Triticum aestivum L.)和大豆(Glycine max L.)的不同光合器官中的PEP羧化酶及其相关的酶类。在这些器官中均含有PEP羧化酶,其中以大豆的荚壳和种皮及小麦的内稃中PEP羧化酶活性最高。不同绿色器官在光下或暗中均能固定CO2,但是在黑暗条件下,小麦的内稃和大豆的荚壳及种皮所固定的CO2远高于叶片。此外,参与暗固定的NAD-苹果酸酶和NAD-苹果酸脱氢酶的活性,在这些器官中也最高,说明这些器官中PEP羧化酶的CO2 β-羧化作用主要在于固定呼吸作用所释放的CO2,只有少量的CO2是通过C4光合途径被固定。 展开更多
关键词 PEP羧化酶 小麦 大豆 C3植物
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根癌农杆菌介导获得稗草Ecppc转基因小麦的研究 被引量:25
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作者 张彬 丁在松 +5 位作者 张桂芳 石云鹭 王金明 方立锋 郭志江 赵明 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期356-362,共7页
采用携带pUbi-Ecppc质粒的3个根癌农杆菌菌株(LBA4404、EHA105和C58c1),对经过预培养10-12 d的春小麦品种扬麦158、Bobwhite和扬麦12的幼胚愈伤组织进行了遗传转化,对筛选中的抗生素浓度、菌液浓度、共培养温度和时间、受体基因型、菌株... 采用携带pUbi-Ecppc质粒的3个根癌农杆菌菌株(LBA4404、EHA105和C58c1),对经过预培养10-12 d的春小麦品种扬麦158、Bobwhite和扬麦12的幼胚愈伤组织进行了遗传转化,对筛选中的抗生素浓度、菌液浓度、共培养温度和时间、受体基因型、菌株-质粒组合等影响转化的重要因素进行了研究。首次将单子叶野生C4植物稗草的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(Ecppc)导入不同基因型小麦受体,并得到具有潮霉素(Hyg)抗性的转化植株。从816块共培养愈伤组织中转化得到34株抗性植株,其中14株PCR检测为阳性。扬麦158的转化效率达3.03%。Southern和RT-PCR分析表明,外源基因已整合到小麦基因组并得到正确的转录。生理学检测显示,转基因小麦植株的光合速率和PEPC活性都有所提高。说明Ubiqintin基因启动子控制的稗草PEPC cDNA基因在小麦中可以正确表达和起到一定的生理作用。这些工作为进一步探讨PEPC对小麦光合作用及其他生理过程的影响奠定了基础。 展开更多
关键词 小麦 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC) 农杆菌介导法 转基因植株
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田间条件下转玉米C4型PEPC基因小麦的光合生理特性 被引量:18
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作者 吴琼 许为钢 +4 位作者 李艳 齐学礼 胡琳 张磊 韩琳琳 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期2046-2052,共7页
为了检验转PEPC基因小麦是否具有C4光合生理特性,以转PEPC基因小麦和对照周麦19为试验材料,分别于抽穗期、开花期、花后第7天和花后第15天测定其单株旗叶的气体交换参数日变化,对净光合速率日变化进行单位日光合总量分析,并且对净光合... 为了检验转PEPC基因小麦是否具有C4光合生理特性,以转PEPC基因小麦和对照周麦19为试验材料,分别于抽穗期、开花期、花后第7天和花后第15天测定其单株旗叶的气体交换参数日变化,对净光合速率日变化进行单位日光合总量分析,并且对净光合速率日变化与单株气孔导度、胞间CO2浓度、蒸腾速率日变化的相关性进行了分析;在花后第15天测定其单株叶绿素荧光参数,并在成熟期调查了单株产量性状。与对照相比,转基因株系在4个测定时期的旗叶净光合速率明显提高,尤其在花后第15天,单位日光合总量较对照提高29.1%和23.3%,气孔导度和蒸腾速率均明显增加,胞间CO2浓度降低;花后第15天12:00与8:00相比,转PEPC基因小麦的Fv/Fm、qP、NPQ、ΦPSII的变幅均小于对照;单茎重、千粒重、单穗重和收获指数较对照显著增加。以上结果表明,转PEPC基因小麦材料在田间条件下光合特性明显优于对照,且具有提高小麦产量水平的潜力。 展开更多
关键词 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 转基因小麦 光合特性
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盐胁迫下野大麦耐盐生理机制初探 被引量:31
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作者 王雪青 张俊文 +2 位作者 魏建华 王宏芝 李瑞芬 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2007年第1期17-21,共5页
以盐生植物野大麦、甜土植物中国春小麦为材料,研究了NaCl胁迫对野大麦、小麦幼苗叶片质膜透性、含水量、地上和根部离子含量、脯氨酸含量、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCase)活性的影响。结果表明,随盐胁迫浓度增加,野大麦的细胞膜透性... 以盐生植物野大麦、甜土植物中国春小麦为材料,研究了NaCl胁迫对野大麦、小麦幼苗叶片质膜透性、含水量、地上和根部离子含量、脯氨酸含量、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCase)活性的影响。结果表明,随盐胁迫浓度增加,野大麦的细胞膜透性、Na+含量、脯氨酸含量、Na+/K+、PEPCase活性增加,含水量、K+含量下降;但在相同盐胁迫条件下野大麦地上部和根部Na+含量明显低于小麦,而根中K+含量高于小麦,表明野大麦可能具有拒绝吸收Na+和维持高K+含量的能力;野大麦的脯氨酸含量增加幅度小于小麦,表明在盐胁迫下野大麦不是通过脯氨酸的积累来达到体内渗透平衡的;野大麦PEPCase活性增加明显高于小麦,说明提高光合效率可能是野大麦实现盐适应的主要措施之一。 展开更多
关键词 野大麦 盐生植物 甜土植物 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 耐盐
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稗草磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCase)基因的克隆与分析 被引量:32
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作者 张桂芳 赵明 +2 位作者 丁在松 张丽 肖俊涛 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1365-1369,共5页
为揭示C4野生植物稗草(Echinochloa crusgalli)PEPCase的结构和功能特点,探索改善作物高光效新途径,克隆了稗草(E.crusgalli)磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(ppc)的cDNA全长,测序及同源性比较分析结果证实,稗草ppc的cDNA全长为2 886 bp,编... 为揭示C4野生植物稗草(Echinochloa crusgalli)PEPCase的结构和功能特点,探索改善作物高光效新途径,克隆了稗草(E.crusgalli)磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(ppc)的cDNA全长,测序及同源性比较分析结果证实,稗草ppc的cDNA全长为2 886 bp,编码961个氨基酸(GenBank登录号:AY251482);核苷酸序列与谷子(Setaria italica)C3型、高粱(Sorghumbicolor)C3-2型、玉米(Zea mays)C3-2型、水稻(Oryza sativa)C3型磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的同源率分别达94.8%、93.2%9、3.0%和89.7%。推导的氨基酸序列中C末端第771位氨基酸是丙氨酸(A),表明是一个C3型基因。与其他植物几种不同形式PEPCase进行的多重序列比对与系统进化分析结果也证实,此基因的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列与所有参与对比的C3型序列的同源性均远远高于与C4型的同源性。与玉米、高粱C3-2型PEPCase的同源性分别高达96.5%9、6.4%,与高粱、玉米的C3-1型PEPCase的同源性分别为84.3%、83.8%,而与谷子、玉米、甘蔗和高粱的C4型PEPCase的一致性相对较低,分别为82.2%、79.1%、77.1%和76.6%。因此进一步推论新克隆的稗草ppc基因属于C3-2型。对其编码的蛋白序列进行了结构域、活性位点和功能位点预测。 展开更多
关键词 稗草 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 基因克隆与分析
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转ppc基因水稻苗期抗旱特性研究 被引量:21
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作者 方立锋 丁在松 赵明 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1220-1226,共7页
通过C4转基因技术改善C3作物光合作用,以期提高作物产量是国内外研究的热点之一。然而,目前关于转磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因对水稻的光合作用、产量和抗旱性的影响及其调节机理仍不很清楚。本研究以T4代转ppc基因水稻为材料,进... 通过C4转基因技术改善C3作物光合作用,以期提高作物产量是国内外研究的热点之一。然而,目前关于转磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)基因对水稻的光合作用、产量和抗旱性的影响及其调节机理仍不很清楚。本研究以T4代转ppc基因水稻为材料,进行产量和苗期抗旱性研究。结果表明,在旱作栽培条件下,两个转ppc基因株系(T1,T2)单株产量分别比未转基因的对照(WT)增产28%和42%,分蘖增加27%和40%;T1和T2可维持较高的光合速率、气孔导度和水分利用效率;干旱胁迫使超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量增加,T1和T2SOD活性增幅(+25%)都显著高于WT(+9%),而MDA含量增幅显著低于WT,表明转ppc基因水稻具有较强的抗氧化能力;T1和T2比WT具有较高的脯氨酸含量和渗透势下降幅度,说明转PEPC基因水稻的渗透调节能力高于对照。PEG-6000处理下,得到的结果相似。 展开更多
关键词 水稻 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC) 转基因 干旱
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蓝藻正反义pepcA基因导入对大肠杆菌中脂类合成的调控 被引量:11
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作者 侯李君 施定基 +2 位作者 蔡泽富 宋东辉 王学魁 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期52-58,共7页
为了探索原核生物中磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)在调控脂类代谢中的作用。PCR法扩增了鱼腥藻Anabaena sp.PCC 7120 PEPC基因中含保守结构域Fa的一段基因片段pepcA,并将其克隆到pMD 18-T载体上。将pepcA正反向连接到穿梭表达载体pRL-48... 为了探索原核生物中磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)在调控脂类代谢中的作用。PCR法扩增了鱼腥藻Anabaena sp.PCC 7120 PEPC基因中含保守结构域Fa的一段基因片段pepcA,并将其克隆到pMD 18-T载体上。将pepcA正反向连接到穿梭表达载体pRL-489上BamHI位点之间,构建得带有pepcA正反义基因的载体pRL-Sen pepcA和pRL-Anti pepcA,转化入大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α宿主细胞中。分析结果表明:pepcA片段的转入对宿主菌的生长影响不大;与野生型细胞相比较,转反义pepcA片段E.coli中PEPC酶活性降低到野生菌的30.2%,蛋白合成减少23.6%,脂类的合成增加了46.9%,;而转正义pepcA片段E.coliPEPC酶活性是野生菌的2.38倍,蛋白合成增加了14.5%,脂类合成减少了49.6%;转基因菌中十八碳酸的含量明显增加。上述结果可能为利用原核生物做生物柴油原料提供线索。 展开更多
关键词 蓝藻 大肠杆菌 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC) 脂类 调控 生物柴油
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PEPC过表达可以减轻干旱胁迫对水稻光合的抑制作用 被引量:43
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作者 周宝元 丁在松 赵明 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期112-118,共7页
为了明确磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)过量表达能否提高水稻的光合速率,测定了42个表达不同PEPC水平的转玉米PEPC基因水稻株系及对照(受体亲本中花8号)开花期和灌浆期的光合速率。结果表明,在水田条件下,转基因株系光合速率与未转基因... 为了明确磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)过量表达能否提高水稻的光合速率,测定了42个表达不同PEPC水平的转玉米PEPC基因水稻株系及对照(受体亲本中花8号)开花期和灌浆期的光合速率。结果表明,在水田条件下,转基因株系光合速率与未转基因对照相比没有明显差异;而在旱地条件下,转基因水稻的光合速率显著高于对照(27%和24%)。随机选取2个PEPC相对活性分别为10倍和25倍的转基因株系进行网室精确控水盆栽实验得到相似的结果。说明单纯导入PEPC并不能提高水稻的光合速率,而干旱胁迫下转基因水稻的光合优势可能是由于PEPC参与水稻的抗旱反应而减轻了干旱胁迫对光合作用的抑制作用。 展开更多
关键词 干旱 转基因水稻 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC) 光合速率
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脂联素对大鼠肝细胞葡萄糖激酶与磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶活性影响的研究 被引量:7
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作者 龚明 李超林 +1 位作者 肖谦 黄昶荃 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第4期567-569,共3页
目的:探讨脂联素对体外培养大鼠肝脏细胞葡萄糖激酶与磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶活性影响,及其在胰岛素抵抗中的意义。方法:以BRL肝脏细胞株为细胞模型,分别用10μg/ml、30μg/ml、50μg/ml脂联素处理细胞,用6-磷酸葡萄糖脱氢酶偶联比色法... 目的:探讨脂联素对体外培养大鼠肝脏细胞葡萄糖激酶与磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶活性影响,及其在胰岛素抵抗中的意义。方法:以BRL肝脏细胞株为细胞模型,分别用10μg/ml、30μg/ml、50μg/ml脂联素处理细胞,用6-磷酸葡萄糖脱氢酶偶联比色法、乳酸脱氢酶偶联比色法检测大鼠肝脏细胞葡萄糖激酶与磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶活性。结果:与对照组比较,磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶在脂联素处理24h后活性明显降低,且随脂联素浓度升高作用越明显,P<0.05。葡萄糖激酶在脂联素处理24小时后,活性与对照组比较没有显著性差异,P>0.5。结论:脂联素对葡萄糖激酶无明显的调节作用,而对于磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶具有显著的抑制作用。脂联素通过对肝细胞磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶活性的调节,降低肝脏葡萄糖异生,减少肝糖输出,改善胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 脂联素 葡萄糖激酶 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶 胰岛素抵抗
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谷子PEPC基因的鉴定及其对非生物逆境的响应特性 被引量:8
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作者 赵晋锋 杜艳伟 +5 位作者 王高鸿 李颜方 赵根有 王振华 王玉文 余爱丽 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期700-711,共12页
磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPC)是C4植物光合作用关键酶,并在植物多种代谢途径及逆境信号应答过程中起重要作用。本研究通过序列比对,从谷子基因组中筛选出6个SiPEPC候选基因。SiPEPC蛋白特征参数相似... 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPC)是C4植物光合作用关键酶,并在植物多种代谢途径及逆境信号应答过程中起重要作用。本研究通过序列比对,从谷子基因组中筛选出6个SiPEPC候选基因。SiPEPC蛋白特征参数相似度很高,序列非常保守,都含有PEPC基因特征功能域PEPcase Motif。SiPEPC成员主要被定位在细胞质、细胞核和线粒体。在SiPEPC成员启动子序列中含大量有光、激素、逆境以及其他生长调控相关的顺式应答元件。苗期逆境qRT-PCR表达谱分析表明,5个SiPEPC基因(SiPEPC1、SiPEPC2、SiPEPC3、SiPEPC5、SiPEPC6)不同程度受ABA、PEG、高盐和低温诱导表达,表明其参与了苗期对非生物逆境的响应。5个SiPEPC基因表达量在正常生长条件下随着谷子的生长呈增强趋势,且在不同生育时期干旱胁迫下明显增加,表明其参与了拔节、抽穗、灌浆期的干旱胁迫应答。拔节期弱光可诱导5个SiPEPC基因的表达,而在拔节期中等强度光照以及抽穗期和灌浆期的中等光照和弱光照下表达量均急剧降低,揭示光照强度严重影响SiPEPC基因的表达。 展开更多
关键词 谷子 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 非生物逆境 表达分析
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四种油料作物中的细菌型PEPC基因的鉴定及在发育种子中的表达 被引量:8
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作者 王志慧 童超波 +5 位作者 袁午舟 刘学群 程晓辉 于景印 董彩华 刘胜毅 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期8-16,23,共10页
鉴定和获取了四种油料作物(油菜、大豆、花生和芝麻)中的细菌型PEPC基因,分析了所编码蛋白的保守结构域(BOX I-IV)和蛋白作用功能位点。基因包括甘蓝型油菜的Bna10093361、Bna1009749和Bna10093360,大豆的Glyma10g34970.1,Glyma01g2284... 鉴定和获取了四种油料作物(油菜、大豆、花生和芝麻)中的细菌型PEPC基因,分析了所编码蛋白的保守结构域(BOX I-IV)和蛋白作用功能位点。基因包括甘蓝型油菜的Bna10093361、Bna1009749和Bna10093360,大豆的Glyma10g34970.1,Glyma01g22840.1和Glyma02g14500.1,芝麻的SIN1018296和花生的AhPPC5。这8个基因通常含有19~21个内含子,内部插入一个约350~600bp的高度变异区,编码的蛋白在C端形成R/KNTG结构域,在N端缺乏磷酸化作用位点。在种子发育的不同时期,油菜中仅Bna10093360表达,但其表达量不到油菜Bn-Actin表达量的0.1%;大豆中Glyma10g34970.1表达量最高(接近大豆GlymaActin的2%),Glyma02g14500.1次之;花生AhPPC5表达量为花生AhActin的32%~175%,在种子不同发育时期表达量为早期>中期>晚期;芝麻SIN1018296表达量为芝麻SINActin的3%~18%,在种子发育时期的表达趋势和花生AhPPC5相似。8个基因种子中的表达模式差异明显,说明细菌型PEPC基因可能存在着广泛的功能分化。 展开更多
关键词 细菌型PEPC基因 甘蓝型油菜 大豆 芝麻 花生 种子发育 荧光定量PCR
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外源葡萄糖增强高表达转玉米C_4型pepc水稻耐旱性的生理机制 被引量:15
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作者 张金飞 李霞 +1 位作者 何亚飞 谢寅峰 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期82-94,共13页
为揭示葡萄糖参与植物耐旱性的内在机制,以高表达转玉米C4型磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPC)基因(C4-pepc)水稻(PC)和受体"Kitaake"(WT)为材料,通过盆栽和水培试验,研究外施葡萄糖联合干旱处理... 为揭示葡萄糖参与植物耐旱性的内在机制,以高表达转玉米C4型磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPC)基因(C4-pepc)水稻(PC)和受体"Kitaake"(WT)为材料,通过盆栽和水培试验,研究外施葡萄糖联合干旱处理下,功能叶片的光合参数、总可溶性糖及其组分、Ca2+、NO含量、己糖激酶活性、B类钙调磷酸酶(calcineurin B-like,CBL)与蔗糖非发酵1(sucrose nonfermenting-1,SNF1)相关蛋白激酶(SNF1-related protein kinase 3s,Sn RK3s)基因表达的变化。结果表明,在盆栽试验中,分蘖期外施3%葡萄糖联合干旱处理对水稻的产量及其构成因子影响不显著,而在孕穗期处理,PC的株高、穗数、每穗实粒重和单株产量均显著高于WT。在水培试验中,外施1%葡萄糖和12%(m/v)聚乙二醇6000(polyethylene glycol-6000,PEG-6000)模拟干旱处理,均显著提高了PC功能叶片的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)和羧化效率(CE),叶片内蔗糖和果糖的含量也均显著高于WT。值得关注的是,PC叶片己糖激酶(hexokinase,HXK)活性、CBL1/Sn RK3.1/Sn RK3.4/Sn RK3.21基因的相对表达量在外施1%葡萄糖联合12%PEG模拟干旱处理下均显著低于12%PEG处理,而NO含量则显著上升。相关性分析也表明,PC中Pn、胞间CO2浓度(Ci)和Gs分别与葡萄糖含量、HXK活性和Sn RK3.16基因表达显著相关。外施葡萄糖处理可上调PC糖水平,下调其CBL和Sn RK3s基因表达,诱导NO参与叶片气孔调节,从而增强保水能力,保持光合能力稳定,最终表现为耐旱。 展开更多
关键词 水稻 葡萄糖 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶 气孔导度 干旱
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