用HPLC法测定不同地区虎杖饮片中的4种有效成分

目的:采用HPLC法检测不同地区所产虎杖饮片中的4种有效成分(虎杖苷、白藜芦醇、大黄素和大黄素甲醚)的含量,为鉴别虎杖药材的真伪优劣提供依据。方法:色谱条件为色谱柱Agilent Zorbax SB-C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为0.1%甲酸水溶液(A相)-乙腈(B相),梯度洗脱(0~15min,20%B相;15~20min,20%~40%B相;20~30min,40%~70%B相;30~35min,70%~80%B相);检测波长306nm;流速1ml/min;柱温30℃;进样量为10μl。结果:虎杖饮片中的有效成分虎杖苷、白藜芦醇、大黄素和大黄素甲醚分离良好,精密度、重复性和稳定性均符合标准。虎杖苷在9.34~83.74μg/ml、白藜芦醇在4.07~36.65μg/ml、大黄素在3.74~33.62μg/ml、大黄素甲醚在3.62~32.54μg/ml范围内线性关系良好。虎杖苷、白藜芦醇、大黄素和大黄素甲醚的加样回收率分别为(98.21±1.086)%、(97.70±0.802)%、(97.58±1.005)%和(97.38±0.714%)(n=6)。结论:该方法快捷简便、稳定可靠,可用于虎杖饮片中有效成分的含量测定。

化瘀丸质量标准的建立

目的:建立化瘀丸的质量标准。方法:采用薄层色谱法对化瘀丸中丹参、大黄炭、三七进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对化瘀丸中丹参酮Ⅱ_A、大黄酚、大黄素甲醚进行含量测定,色谱柱为Wondasil C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液(85∶15),流速为1.0 ml·min^(-1),检测波长为254nm,柱温为35℃,进样量10μl。结果:TLC斑点清晰,分离度好,阴性对照无干扰;丹参酮Ⅱ_A、大黄酚、大黄素甲醚分别在进样量0.212~2.12μg(r=0.999 9)、0.159~1.59μg(r=0.999 9)、0.072 6~0.726μg(r=0.999 9)范围内与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率分别为99.55%、99.56%、100.60%,RSD分别为1.57%、2.26%、2.28%(n=6)。结论:该方法快速、准确、专属性强,可作为化瘀丸质量控制的方法。

HPLC法同时测定痔痛安搽剂中三种蒽醌类成分的含量

目的建立同时测定痔痛安搽剂中三种蒽醌类成分大黄素、大黄酚和大黄素甲醚含量的方法，提高制剂的质量控制标准。方法采用HPLC法。色谱柱为Diamonsil C18柱，流动相为甲醇-质量分数为0．1％的磷酸水溶液（体积比75：25），流速1．0mL·min^-1，检测波长254nm，柱温35℃。结果大黄素、大黄酚、大黄素甲醚质量浓度分别在0．64～20．48mg·L^-1（r=0．9995）、0．31～9．84mg·L^-1（r=0．9997）、0．50～16．08mg·L^-1（r=0．9998）内与峰面积呈良好的线性关系；大黄素平均加样回收率为98．8％，大黄酚平均加样回收率为99．6％，大黄素甲醚平均加样回收率为98．5％。结论采用HPLC法可同时测定痔痛安搽剂中三种蒽醌类成分大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量，且操作方法简便，分离效果好，运行成本低。该法可用于痔痛安搽剂的质量评价。

RP-HPLC法同时测定胆石消胶囊中四种蒽醌类成分的含量

目的建立以RP—HPLC法同时测定胆石消胶囊中大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量测定方法。方法采用Waters SunFire C18柱（250mm×4．6mm，5μm），以甲醇-0．1％磷酸（85：15）为流动相，流速：1．0ml／min，柱温：28℃，检测波长：254am。结果大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚进样量分别在0．13208～0．79248μg、0．08752～0．52512μg、0．11184～0．67104μg、0．08016～0．48096μg范围内与峰面积呈良好的线性关系，相关系数分别为0．9998、0．9996、0．9994、0．9997，平均加样回收率分别为99．32％、98．80％、99．05％、99．14％，RSD分别为0．76％（n=9）、1．31％（n=9）、1．41％（n=9）、0．94％（n=9）。结论本方法简便易行，专属性强，准确度高，重现性好，可作为胆石消胶囊质量控制方法。

LC-ESI-MS同时测定大鼠血浆中盐酸小檗碱、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量

目的:建立同时测定大鼠血浆中盐酸小檗碱、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚含量的方法。方法:采用高效液相色谱串联质谱法,色谱柱为Shim Pack VP-ODS C_(18)色谱柱(150 mm×2.0 mm,5μm),柱温30℃,流动相为乙腈:0.5%甲酸水溶液(80:20,氨水调pH=3.5),流速0.2ml·min^(-1)。结果:盐酸小檗碱、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的最低检测限范围为1.0～1.2ng·ml^(-1),定量下限范围为5.0～11.5 ng·ml^(-1),日内、日间RSD<2.98%。结论:该法准确、快速,可用于上述4种成分的药动学研究。

泰山白首乌、赤首乌及市售何首乌中游离大黄素和大黄素甲醚的比较研究

目的采用高效液相色谱法测定白首乌、赤首乌以及市售何首乌中大黄素、大黄素甲醚的含量,旨在比较不同种类何首乌中两种成分含量的差异。方法采用大连依利特Sinochom ODS-BP色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm),以甲醇-0.1%磷酸溶液(90︰10)为流动相,检测波长254 nm,流速1.0 ml/min,进样量20μl,柱温25℃。结果大黄素、大黄素甲醚标准品在1.0~25μg/ml的浓度范围内,线性关系良好;泰山白首乌中未检测到大黄素及大黄素甲醚;赤首乌中大黄素和大黄素甲醚的含量分别为:33.49μg/g、35.21μg/g;市售何首乌中大黄素和大黄素甲醚的含量分别为88.03μg/g、33.43μg/g。结论本方法快速、准确,可用于何首乌中大黄素和大黄素甲醚的含量测定;不同种类何首乌中大黄素和大黄素甲醚的含量存在差异。

大黄素甲醚调节miR-370诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

目的:观察大黄素甲醚调节miR-370诱导肝细胞癌(HCC)细胞的凋亡情况,并探讨其作用机制。方法:将大黄素甲醚作用于SMMC7721和HepG2两组HCC细胞,使用TaqMan探针用实时定量PCR法检测miR-370的表达;用Western blot检测Sp1和DNMT1相应的蛋白表达水平。结果:大黄素甲醚抑制肝细胞癌细胞增长和诱导凋亡。肝细胞癌细胞中通过上调miR-370造成大黄素甲醚诱导型细胞凋亡。大黄素甲醚处理的细胞中通过miR-370抑制剂抑制miR-370水平能明显降低凋亡细胞的百分比(P<0.01)。大黄素甲醚通过AMPK/Sp1/DNMT1信号调节miR-370的水平(P<0.01)。AMPK/Sp1/DNMT1信号参与大黄素甲醚诱导的HCC细胞凋亡。结论:大黄素甲醚通过上调miR-370诱导HCC细胞凋亡,通过调节AMPK/Sp1/DNMT1信号通路对miR-370发挥调节作用。