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Cloning,tissue distribution and effects of fasting on pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide in largemouth bass 被引量:3
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作者 李胜杰 韩林强 +5 位作者 白俊杰 马冬梅 全迎春 樊佳佳 姜鹏 于凌云 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2015年第2期328-338,共11页
Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide (PACAP) has a wide range of biological functions. We cloned the full-length cDNAs encoding PACAP and PACAP-related peptide (PRP) from the brain of largemouth bass... Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide (PACAP) has a wide range of biological functions. We cloned the full-length cDNAs encoding PACAP and PACAP-related peptide (PRP) from the brain of largemouth bass (Micropterus salmoides) and used real-time quantitative PCR to detect PRP- PACAP mRNA expression. The PRP-PACAP cDNA has two variants expressed via alternative splicing: a long form, which encodes both PRP and PACAP, and a short form, which encodes only PACAR Sequence analysis results are consistent with a higher conservation of PACAP than PRP peptide sequences. The expression of PACAP-Iong and PACAP-short transcripts was highest in the forebrain, followed by the medulla, midbrain, pituitary, stomach, cerebellum, intestine, and kidney; however, these transcripts were either absent or were weakly expressed in the muscle, spleen, gill, heart, fatty tissue, and liver. The level of PACAP-short transcript expression was significantly higher than expression of the long transcript in the forebrain, cerebella, pituitary and intestine, but lower than that of the long transcript in the stomach. PA CAP- long and PACAP-short transcripts were first detected at the blastula stage of embryogenesis, and the level of expression increased markedly between the muscular contraction stage and 3 d post hatch (dph). The expression of PACAP-long and PACAP-short transcripts decreased significantly in the brain following 4 d fasting compared with the control diet group. The down-regulation effect was enhanced as fasting continued. Conversely, expression levels increased significantly after 3 d of re-feeding. Our results suggest that PRP- PA CAP acts as an important factor in appetite regulation in largemouth bass. 展开更多
关键词 pituitary adenylate cyclase activating polypeptide (PACAP) PACAP-related peptide largemouth bass gene expression FASTING
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Effects of pituitary adenylate cyclase activating polypeptide on CD4^+/CD8^+T cell levels after traumatic brain injury in a rat model 被引量:2
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作者 Rong Hua Shan-shan Mao +3 位作者 Yong-mei Zhang Fu-xing Chen Zhong-hai Zhou Jun-quan Liu 《World Journal of Emergency Medicine》 CAS 2012年第4期294-298,共5页
BACKGROUND: The effect of pituitary adenylate cyclase activating polypeptide (PACAP) during traumatic brain injury (TBI) and whether it can modulate secondary injury has not been reported previously. The present ... BACKGROUND: The effect of pituitary adenylate cyclase activating polypeptide (PACAP) during traumatic brain injury (TBI) and whether it can modulate secondary injury has not been reported previously. The present study evaluated the potential protective effects of ventricular infusion of PACAP in a rat model of TBI.METHODS: Male Sprague Dawley rats were randomly divided into 3 treatment groups (n=6, each): sham-operated, vehicle (normal saline)+TBI, and PACAP+TBI. Normal saline or PACAP (1 μg/5 μL) was administered intracerebroventricularly 20 minutes before TBI. Right parietal cortical contusion was produced via a weight-dropping method. Brains were extracted 24 hours after trauma. Histological changes in brains were examined by HE staining. The numbers of CD4+ and CD8+ T cells in blood and the spleen were detected via flow cytometry.RESULTS: In injured brain regions, edema, hemorrhage, inflammatory cell infiltration, and swollen and degenerated neurons were observed under a light microscope, and the neurons were disorderly arrayed in the hippocampi. Compared to the sham group, average CD4+ CD8+ lymphocyte counts in blood and the spleen were significantly decreased in rats that received TBl+vehicle, and CD4- CD8+ were increased. In rats administered PACAP prior to TBI, damage was attenuated as evidenced by significantly increased CD4+, and decreased CD8+, T lymphocytes in blood and the spleen.CONCLUSION: Pretreatment with PACAP may protect against TBI by influencing periphery T cellular immune function. 展开更多
关键词 Traumatic brain injury pituitary adenylate cyclase activating polypeptide CD4^+T lymphocyte CD8^+T lymphocyte Rat SPLEEN Blood Flow cytometry
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人参皂苷Rg1对缺氧诱导所致人视网膜色素上皮细胞损伤的抑制作用及机制
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作者 白玫 苗得雨 吴忧 《山东医药》 CAS 2024年第34期29-33,共5页
目的探究人参皂苷Rg1(GRg1)对缺氧诱导所致人视网膜色素上皮(ARPE)细胞损伤的作用及机制。方法体外培养ARPE-19细胞,将其随机分为对照组、模型组及GRg1高、中、低剂量组与缺氧诱导因子1α(HIF-1α)抑制剂组。除对照组外,其余组采取氯化... 目的探究人参皂苷Rg1(GRg1)对缺氧诱导所致人视网膜色素上皮(ARPE)细胞损伤的作用及机制。方法体外培养ARPE-19细胞,将其随机分为对照组、模型组及GRg1高、中、低剂量组与缺氧诱导因子1α(HIF-1α)抑制剂组。除对照组外,其余组采取氯化钴诱导ARPE-19细胞构建缺氧模型,通过CCK-8法、TUNEL法测定各组不同时间点细胞活性及凋亡情况,DCFH-DA荧光探针对各组活性氧(ROS)水平,经由RT-qPCR、Western blotting法测定各组细胞内HIF-1α、BDNF、PACAP38 mRNA与蛋白表达。结果与对照组相比,各组给药0、12、24 h时ARPE-19细胞活性均低、凋亡率高(P均<0.05);GRg1高剂量组给药12、24、48 h时ARPE-19细胞活性均高于模型组、GRg1低剂量组(P均<0.05),细胞凋亡率均低于模型组、GRg1低剂量组(P均<0.05);GRg1高剂量组给药24、48 h时细胞活性均高于GRg1中剂量组(P均<0.05)。与对照组相比,各组给药48 h时ARPE-19细胞ROS、HIF-1αmRNA及蛋白表达均高(P均<0.05);GRg1高剂量组ARPE-19细胞ROSHIF-1αmRNA及蛋白表达均低于模型组、GRg1低剂量组(P均<0.05);GRg1高剂量组ARPE-19细胞BDNF、PACAP38 mRNA及蛋白表达均高于模型组、GRg1低剂量组(P均<0.05);GRg1高剂量组与HIF-1α抑制剂组给药不同时间点细胞活性与凋亡率、细胞ROS、HIF-1α、BDNF、PACAP38表达比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论GRg1能减轻缺氧诱导所致ARPE-19细胞损伤,其机制可能与抑制细胞ROS、HIF-1α表达,上调BDNF、PACAP38表达有关。 展开更多
关键词 视网膜色素上皮细胞 缺氧 人参皂苷RG1 脑源性神经营养因子 垂体腺苷酸环化酶激活多肽38
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基于垂体腺苷酸环化酶激活多肽在帕金森动物模型中的神经保护作用及机制探索
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作者 裴丽娟 田洪战 +3 位作者 李蕊 田婷 张敏 蔡宏斌 《生物医学转化》 2024年第1期108-116,共9页
目的 探讨垂体腺苷酸环化酶激活多肽(PACAP)在帕金森病(PD)动物模型中的神经保护作用及机制。方法SD大鼠设置假手术组(Sham组)、PD组(帕金森造模组)、PD+PACAP_低浓度组(造模+按体重5μg/kg予PACAP鼻腔给药)、PD+PACAP_中浓度组(造模+... 目的 探讨垂体腺苷酸环化酶激活多肽(PACAP)在帕金森病(PD)动物模型中的神经保护作用及机制。方法SD大鼠设置假手术组(Sham组)、PD组(帕金森造模组)、PD+PACAP_低浓度组(造模+按体重5μg/kg予PACAP鼻腔给药)、PD+PACAP_中浓度组(造模+按体重10μg/kg予PACAP鼻腔给药)、PD+PACAP_高浓度组(造模+按体重20μg/kg予PACAP鼻腔给药) 5组,最终每组纳入10只。四个PD组将脂多糖溶液注射至SD大鼠黑质中建立PD模型,假手术组同法操作但注射生理盐水。通过转棒法检测大鼠行为学表现;ELISA法检测黑质谷氨酸浓度(Glu)和α-突触核蛋白(α-syn)水平,WB法检测黑质α-syn及核因子激活的B细胞的κ-轻链(NF-κB)、核因子κB抑制蛋白α (IκBα)的表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应法(qPCR)检测大鼠黑质炎症因子肿瘤坏死因子α (TNF-α)、白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-6IL-6的mRNA表达水平;WB法和免疫荧光法检测核转录因子胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平来观察星形胶质细胞的活化水平,TUNEL法检测黑质神经元的凋亡情况。结果 (1)行为学结果显示,在转棒实验中,与Sham组比较,PD组潜伏期缩短,掉落次数增加(37.20±5.27次/min);与PD组比较,PACAP组潜伏期延长,掉落次数减少(14.50±2.32次/min),PACAP治疗组的潜伏期和掉落次数随着PACAP浓度的增加而潜伏期可以更长,掉落次数可以更少(P<0.001)。(2)星形胶质细胞激活相关指标显示,PD组GFAP表达水平和黑质神经元的凋亡数量较Sham组显著升高;PACAP治疗组上述指标随着PACAP的浓度增加而显著减低(P<0.01)。(3)黑质神经炎症指标显示,与Sham组比较,PD组NF-κB含量及TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA显著升高,IκBα含量显著降低;PACAP治疗组NF-κB含量及TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA随着PACAP的浓度增加而减低,IκBα含量随着PACAP的浓度增加而升高(P<0.01)。(4) PD疾病特征指标显示,PD组谷氨酸和α-syn含量均较Sham组显著升高,3个PACAP组的上述指标较PD组显著降低;PACAP治疗组的上述指标随着PACAP的浓度增加而递减(P<0.01),以PD+PACAP_高浓度组效果最为明显。结论 PACAP在PD模型中具有神经保护作用,其机制可能为通过抑制星形胶质细胞激活来减轻神经炎症的发生。 展开更多
关键词 帕金森病 神经炎症 垂体腺苷酸环化酶激活多肽 星形胶质细胞
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Inhibition of retinal ganglion cell apoptosis: regulation of mitochondrial function by PACAP 被引量:4
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作者 Huan-Huan Cheng Hui Ye +2 位作者 Rui-Ping Peng Juan Deng Yong Ding 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2018年第5期923-929,共7页
Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide(PACAP) is an endogenous peptide with neuroprotective effects on retinal neurons, but the precise mechanism underlying these effects remains unknown. Considering the... Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide(PACAP) is an endogenous peptide with neuroprotective effects on retinal neurons, but the precise mechanism underlying these effects remains unknown. Considering the abundance of mitochondria in retinal ganglion cells(RGCs), we postulate that the protective effect of PACAP is associated with the regulation of mitochondrial function. RGC-5 cells were subjected to serum deprivation for 48 hours to induce apoptosis in the presence or absence of 100 nM PACAP. As revealed with the Cell Counting Kit-8 assay, PACAP at different concentrations significantly increased the viability of RGC-5 cells. PACAP also inhibited the excessive generation of reactive oxygen species in RGC-5 cells subjected to serum deprivation. We also showed by flow cytometry that PACAP inhibited serum deprivation-induced apoptosis in RGC-5 cells. The proportions of apoptotic cells and cells with mitochondria depolarization were significantly decreased with PACAP treatment. Western blot assays demonstrated that PACAP increased the levels of Bcl-2 and inhibited the compensatory increase of PAC1. Together, these data indicate protective effects of PACAP against serum deprivation-induced apoptosis in RGCs, and that the mechanism of this action is associated with maintaining mitochondrial function. 展开更多
关键词 nerve regeneration pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide receptor type 1 serum deprivation APOPTOSIS retinal ganglion cell retinal ganglion cell-5 GLAUCOMA MITOCHONDRIA neural regeneration
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Possible key residues that determine left gastric artery blood flow response to PACAP in dogs 被引量:2
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作者 Mu-Xin Wei Ping Hu +4 位作者 Ping Wang Satoru Naruse Kiyoshi Nokihara Victor Wray Tsuyoshi Ozaki 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2010年第38期4865-4870,共6页
AIM:To determine the effect of pituitary adenylate cy-clase-activating polypeptide (PACAP) on left gastric artery (LGA) flow and to unveil the structural or functional important sites that may be critical for discrimi... AIM:To determine the effect of pituitary adenylate cy-clase-activating polypeptide (PACAP) on left gastric artery (LGA) flow and to unveil the structural or functional important sites that may be critical for discrimination of different receptor subtypes. METHODS: Peptides, including PACAP-27, PACAP-38, amino acid substituted PACAP-27 and C-terminus truncated analogues PACAP (27-38), were synthesized by a simultaneous multiple solid-phase peptide synthesizer. Flow probes of an ultrasound transit-time blood flowmeter were placed around the LGA of beagle dogs. Whenpeptides were infused intravenously, the blood flow was measured.RESULTS: [Ala4, Val5]-PACAP-27 caused a concentration-dependent vasodepressor action which was similar to that caused by PACAP-27. The LGA blood flow response to [Ala4, Val5]-PACAP-27 was significantly higher than that to PACAP-27, which was similar to that to vasoactive intestinal polypeptide (VIP) at the same dose. [Ala6]-PACAP-27 did not increase the peak LGA ? ow. [Gly8]-PACAP-27 showed a similar activity to VIP. [Asn24, Ser25, Ile26]-PACAP-27 did not change the activity of peptides at all doses. CONCLUSION: NH2 terminus is more important to biological activity of peptides and specifi c receptor recognition than COOH-terminus. 展开更多
关键词 pituitary adenylate cyclase-activating poly-peptide pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide 27 pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide P38 Left gastric artery Blood fl ow
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垂体腺苷酸环化酶激活肽减轻大鼠缺血性脑水肿作用的实验研究 被引量:5
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作者 董艳 何成 +2 位作者 韩晞 王成海 路长林 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期121-123,共3页
目的 :研究垂体腺苷酸环化酶激活肽 (PACAP)在缺血性脑水肿中的作用及其可能的受体机制。方法 :采用大鼠四动脉结扎脑缺血模型 ,分别运用干湿重法和酶学法测定脑组织含水量及Na+ 、K+ 含量。结果 :大鼠四动脉结扎脑缺血 30min ,再灌流 1... 目的 :研究垂体腺苷酸环化酶激活肽 (PACAP)在缺血性脑水肿中的作用及其可能的受体机制。方法 :采用大鼠四动脉结扎脑缺血模型 ,分别运用干湿重法和酶学法测定脑组织含水量及Na+ 、K+ 含量。结果 :大鼠四动脉结扎脑缺血 30min ,再灌流 1h ,脑组织含水量明显增加 ,Na+ 含量增高 ,而K+ 含量降低。缺血前经测脑室分别给予 1× 10 -9mol、1× 1110 mol及 1× 11-11mol的PACAP均能抑制脑组织含水量、Na+ 含量的增加和K+ 含量的降低。特异性PACAPⅠ型受体拮抗剂PACAP6 38能完全阻断PACAP的上述作用 ,而单纯给予PACAP6 38对脑缺血后脑组织含水量、Na+ 、K+ 含量无显著影响。结论 :外源性PACAP对缺血性脑水肿具有保护作用 ,该作用是由I型受体介导的。 展开更多
关键词 垂体腺苷酸环化酶激活肽 大鼠 实验研究 脑缺血 脑水肿
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垂体腺苷酸环化酶激活肽减轻谷氨酸对海马神经元的损伤并抑制胞内钙升高 被引量:3
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作者 董艳 唐铁山 +5 位作者 路长林 何成 董建波 黄秀英 孙方臻 鲍璿 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期402-406,共5页
对原代培养 7~ 9d的海马神经元给予谷氨酸处理 ,2 4h后 ,神经元的存活率降低。预先给予垂体腺苷酸环化酶激活肽 (PACAP)能显著减少谷氨酸引起的海马神经元死亡。谷氨酸呈剂量依赖性增加海马神经元细胞内钙离子含量 ,PACAP能抑制谷氨酸... 对原代培养 7~ 9d的海马神经元给予谷氨酸处理 ,2 4h后 ,神经元的存活率降低。预先给予垂体腺苷酸环化酶激活肽 (PACAP)能显著减少谷氨酸引起的海马神经元死亡。谷氨酸呈剂量依赖性增加海马神经元细胞内钙离子含量 ,PACAP能抑制谷氨酸引起的海马神经元细胞内钙离子浓度的升高 ,特异性PACAPⅠ型受体拮抗剂PACAP 6 38能完全阻断PACAP减轻谷氨酸所致海马神经元损伤及降低谷氨酸所致神经元细胞内钙离子浓度升高的作用。提示PACAP能减轻谷氨酸引起的培养海马神经元的损伤 ,该作用与PACAP抑制谷氨酸引起的海马神经元细胞内钙离子浓度升高有关 。 展开更多
关键词 谷氨酸 PACAP 神经元损伤 保护机制 钙浓度
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垂体腺苷酸环化酶激活肽对家兔实验性动脉粥样硬化血管重塑的影响 被引量:9
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作者 任彩霞 常青 +4 位作者 李自成 李建芝 唐海兰 黄华梅 关洁宾 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2002年第6期465-468,共4页
为探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽对家兔动脉粥样硬化血管重塑的影响 ,将 6 0只新西兰雄性家兔随机等分为正常对照组、动脉粥样硬化组和垂体腺苷酸环化酶激活肽组 ,分别于实验的第 4、8和第 12周末随机处死每组家兔各 5~ 8只并取胸主动脉... 为探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽对家兔动脉粥样硬化血管重塑的影响 ,将 6 0只新西兰雄性家兔随机等分为正常对照组、动脉粥样硬化组和垂体腺苷酸环化酶激活肽组 ,分别于实验的第 4、8和第 12周末随机处死每组家兔各 5~ 8只并取胸主动脉。在上述动脉条的头、中、尾部各截取约 0 .5cm长的组织作石蜡切片 ,苏木素—伊红染色 ,光镜下观察并用图像分析系统测量相关形态学参数。余下的动脉条用苏丹Ⅳ染色 ,作大体形态观察。结果发现 ,随时间延长 ,动脉粥样硬化组斑块面积逐渐增大 ,斑块检出率逐渐增加 (P <0 .0 5 ) ,且斑块多分布于头段 ,而中段、尾段依次减少。管腔面积在早期斑块形成时并无改变 ,晚期则明显缩小 (P <0 .0 5 )。垂体腺苷酸环化酶激活肽组斑块面积、斑块最大厚度均小于同期动脉粥样硬化组 ,而管腔面积则大于动脉粥样硬化组 (P <0 .0 5 )。 展开更多
关键词 垂体腺苷酸环化酶激活肽 动脉粥样硬化 血管重塑
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PACAP对培养大鼠海马神经元损伤的保护作用 被引量:3
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作者 韩晞 董艳 +1 位作者 路长林 鲍璇 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期269-272,共4页
目的 观察垂体腺苷酸环化酶激活肽 (PACAP)对谷氨酸和葡萄糖缺乏所致海马神经元损伤的保护作用。方法 取新生SD大鼠海马 ,采用B2 7无血清培养基培养神经元 ,MTT法测定神经元存活率 ;分别给予谷氨酸、NMDA或葡萄糖缺乏处理 ,造成原代... 目的 观察垂体腺苷酸环化酶激活肽 (PACAP)对谷氨酸和葡萄糖缺乏所致海马神经元损伤的保护作用。方法 取新生SD大鼠海马 ,采用B2 7无血清培养基培养神经元 ,MTT法测定神经元存活率 ;分别给予谷氨酸、NMDA或葡萄糖缺乏处理 ,造成原代培养的海马神经元损伤。结果 谷氨酸、NMDA呈剂量依赖性降低海马神经元的存活率 ,葡萄糖缺乏也能明显降低海马神经元的存活率 ,而预先给予PACAP能明显增加海马神经元的存活率。结论 PACAP能保护原代培养的海马神经元 ,减轻谷氨酸和葡萄糖缺乏引起的损伤。 展开更多
关键词 谷氨酸 葡萄糖缺乏 垂体腺酸环化酶激活肽 海马 神经元损伤 脑缺血
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垂体腺苷酸环化酶激活肽基因的合成表达与活性研究 被引量:3
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作者 陈哲宇 柴延丰 +2 位作者 何成 路长林 吴祥甫 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第2期192-197,共6页
根据文献报道垂体腺苷酸环化酶激活肽 (pituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAP)的氨基酸序列 ,推导出其核苷酸序列并设计成部分互补的 6条寡核苷酸片段 ,利用DNA合成仪人工合成、纯化这 6条寡核苷酸片段 ,通过片段退火... 根据文献报道垂体腺苷酸环化酶激活肽 (pituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAP)的氨基酸序列 ,推导出其核苷酸序列并设计成部分互补的 6条寡核苷酸片段 ,利用DNA合成仪人工合成、纯化这 6条寡核苷酸片段 ,通过片段退火、连接、克隆及测序鉴定获得了PACAP基因 .将PACAP基因克隆至 pGEX 4T 3质粒中转化BL2 1进行表达分析 ,融合蛋白约占细胞总蛋白的 30 % ,其中部分为可溶性 ,部分以包涵体形式存在 .通过亲和层析纯化GST PACAP融合蛋白 ,该蛋白质能促进PC12细胞轴突生长及脊髓神经元存活 . 展开更多
关键词 垂体腺苷酸环化酶激活肽 基因克隆 基因表达 PC12细胞 脊髓神经元
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垂体腺苷环化酶激活多肽抑制β淀粉样蛋白对Neuro-2a细胞神经毒性作用的机制 被引量:7
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作者 桂兰润 周岩 +1 位作者 张炳烈 李文彬 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期42-46,共5页
通过MTT方法检测细胞活性 ,同时采用激光共聚焦显微镜技术检测细胞内游离钙离子的瞬时运动 ,研究了垂体腺苷环化酶激活多肽 (pituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide 2 7,PACAP2 7)通过调节细胞内钙对抗淀粉样蛋白Aβ2 5 35引... 通过MTT方法检测细胞活性 ,同时采用激光共聚焦显微镜技术检测细胞内游离钙离子的瞬时运动 ,研究了垂体腺苷环化酶激活多肽 (pituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide 2 7,PACAP2 7)通过调节细胞内钙对抗淀粉样蛋白Aβ2 5 35引起Neuro 2a细胞神经毒性作用的可能机制。结果表明 ,PACAP在一定浓度范围内 (<0 1μmol/L)可提高Neuro 2a细胞增殖能力并对抗Aβ引起的神经毒性 ,此作用可以被PACAP受体竞争性拮抗剂PACAP6 2 7所抑制。 2 5 μmol/LAβ使细胞内钙离子缓慢上升 ,并有一个较长时间的平台期。 0 1μmol/L的PACAP使细胞内钙离子迅速升高后下降 ,10min后回到接近基线水平 ,伴有较长时间的不应期。用PACAP预处理细胞 10min后Aβ引起细胞内钙的慢上升不再出现。推测 ,PACAP受体激活引起瞬时内向钙离子运动 ,而后伴随一个较长时间的不应期 ,可能是一个消除凋亡或阻止凋亡启动的保护机制。 展开更多
关键词 Β淀粉样蛋白 垂体腺苷环化酶激活多肽 PACAP Neuro-2a细胞 激光共聚集显微镜 细胞内钙
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PACAP受体激活对抗Aβ_(25-35)致神经元凋亡作用的观察 被引量:3
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作者 桂兰润 李文彬 +1 位作者 张炳烈 房征宇 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期145-147,共3页
目的和方法 :本研究采用体外原代培养新生大鼠海马神经元的方法探讨了垂体腺苷环化酶激活多肽(PACAP)对抗淀粉样蛋白 (Aβ2 5-3 5)致凋亡的作用机理。结果 :2 5 μmol/L的Aβ蛋白处理神经元 5d即有明显的凋亡特征出现。PACAP2 7(P2 7)... 目的和方法 :本研究采用体外原代培养新生大鼠海马神经元的方法探讨了垂体腺苷环化酶激活多肽(PACAP)对抗淀粉样蛋白 (Aβ2 5-3 5)致凋亡的作用机理。结果 :2 5 μmol/L的Aβ蛋白处理神经元 5d即有明显的凋亡特征出现。PACAP2 7(P2 7)在正常情况下对海马神经元无明显营养作用 ,但当Aβ导致神经元凋亡时P2 7有显著的保护作用 ,可以提高神经元的活性 ,减少细胞凋亡数目 ,降低基因组小片段DNA含量。PACAP受体拮抗剂PACAP6 - 2 7(P6 - 2 7)可以逆转P2 7的保护作用。结论 :研究结果说明PACAP通过受体激活参与对抗Aβ的神经毒性效应。 展开更多
关键词 PACAP受体激活 AΒ25-35 Β淀粉样蛋白 垂体腺苷环化酶激活多肽 海马神经元 神经细胞凋亡
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PACAP对家兔实验性冠状动脉粥样硬化心脏形态重塑的干预作用 被引量:2
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作者 常青 张莉 +2 位作者 唐海兰 黄华梅 李自成 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期529-532,共4页
目的:研究垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)对冠状动脉粥样硬化(AS)形成过程中家兔心脏重塑的干预。方法:雄性新西兰家兔60只,随机等分为正常对照组(C组)、AS模型组(A组)及PACAP干预组(P组)。于实验第4、8、12周末每组随机处死动物5-6只,... 目的:研究垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)对冠状动脉粥样硬化(AS)形成过程中家兔心脏重塑的干预。方法:雄性新西兰家兔60只,随机等分为正常对照组(C组)、AS模型组(A组)及PACAP干预组(P组)。于实验第4、8、12周末每组随机处死动物5-6只,定位取带有冠脉主干及分支的心脏组织制作石蜡切片,分别行HE、van Gieson染色,在光镜下进行定性观察和/或定量分析。结果:(1)C组心脏组织无病变。A组及P组冠状动脉的主干和小分支内均有斑块形成,心肌间胶原成分增多;但P组冠脉小分支内病变及相应部位胶原沉积较同期A组的轻。(2)A组冠状微动脉重塑指数增大,12周末时(2.58±1.54)显著高于同期C组(1.34±0.58)和P组(1.39±0.48)(P<0.05);心肌细胞最大横径缩小,8周末时(13.85μm±2.27μm)已显著小于同期C组(14.68μm±2.40μm)(P<0.05),12周末时显著小于同期C组和P组。(3)P组的上述相应参数与C组无明显差异(P>0.05)。结论:PACAP可抑制家兔冠状AS形成过程中存在的冠状动脉及心肌形态不良改变。 展开更多
关键词 垂体腺苷酸环化酶激活肽 动脉硬化 心脏
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垂体腺苷酸环化酶激活肽减轻一氧化氮介导的谷氨酸神经毒作用 被引量:9
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作者 董艳 何成 +4 位作者 陈秀青 韩晞 鲍璿 王成海 路长林 《中国神经科学杂志》 CSCD 2000年第2期130-133,共4页
研究垂体腺苷酸环化酶激活肽 ( PACAP)是否通过作用于一氧化氮 ( NO)代谢途径 ,减轻谷氨酸的神经毒作用。取新生 SD大鼠海马 ,用 B2 7无血清培养基培养神经元 ;重氮化反应法测定 NO浓度 ,MTT法测定神经元存活率 ,PACAP能减少谷氨酸引起... 研究垂体腺苷酸环化酶激活肽 ( PACAP)是否通过作用于一氧化氮 ( NO)代谢途径 ,减轻谷氨酸的神经毒作用。取新生 SD大鼠海马 ,用 B2 7无血清培养基培养神经元 ;重氮化反应法测定 NO浓度 ,MTT法测定神经元存活率 ,PACAP能减少谷氨酸引起的海马神经元死亡 ;谷氨酸呈剂量依赖性地增加海马神经元培养液中 NO的含量 ,PACAP能不同程度地减少 NO的含量 ;分别给予 2 mmol/L L - Arg,1 0 0μmol/L SNP和 2 0 0 μmol/L SNAP处理后 ,海马神经元存活率明显下降 ,给予不同浓度的 PACAP( 1 0 -9,1 0 -11,1 0 -13mol/L)能增加神经元的存活率。上述结果提示 ,PACAP通过抑制 NO释放及其神经毒作用 ,减轻谷氨酸引起的海马神经元损害。 展开更多
关键词 垂体腺苷酸环化酶激活肽 一氧化氮 神经毒性
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垂体腺苷酸环化酶激活肽基因合成表达和产物纯化与鉴定 被引量:2
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作者 余榕捷 洪岸 +3 位作者 张玲 周天鸿 戴云 高媛 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期376-382,共7页
为利用基因工程技术获得垂体腺苷酸环化酶激活肽 (pituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide ,PACAP) ,根据大肠杆菌的密码偏好性 ,设计并人工合成编码 38个氨基酸的PACAP基因 .克隆到表达载体pET 35b(+) ,构建重组质粒pET PACA... 为利用基因工程技术获得垂体腺苷酸环化酶激活肽 (pituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide ,PACAP) ,根据大肠杆菌的密码偏好性 ,设计并人工合成编码 38个氨基酸的PACAP基因 .克隆到表达载体pET 35b(+) ,构建重组质粒pET PACAP ,转化大肠杆菌BL2 1 (DE3)pLysS+ .实现纤维素结合域 (cellulosebindingdomain ,CBD)与PACAP融合蛋白的表达 ,并在两者之间引入 (凝血 )因子Ⅹa识别位点 (Ile Glu Gly Arg↓ ) .融合蛋白CBD PACAP经纤维素亲和层析纯化后 ,因子Ⅹa酶切释放PACAP .在因子Ⅹa识别位点前引入 7个氨基酸的柔性短肽 (Gly Thr Gly Gly Gly Ser Gly)明显提高了融合蛋白对因子Ⅹa的敏感性 .HPLC进一步纯化得到纯度大于 95 %PACAP多肽 .所得的PACAP多肽的Western印迹鉴定为阳性 ;激光飞行质谱测定分子量结果与理论值相符 .生物活性分析表明 ,所制备的PACAP具有促进胰腺癌细胞株SW 1 展开更多
关键词 垂体腺苷酸环化酶激活肽 因子Xa 基因合成 纯化与鉴定
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PACAP38对兔角膜瓣术后三叉神经节细胞及角膜神经生长的影响 被引量:2
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作者 赵秀丽 陈建苏 +5 位作者 余榕捷 丁勇 郑佩娥 李晓霞 田振彩 戴静 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期694-698,共5页
目的观察垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP38)对培养的兔三叉神经节细胞及角膜瓣术后角膜神经生长的影响。方法从2周龄新西兰白兔中分离三叉神经节细胞,并在神经元基础培养液中进行培养。培养24h后在培养液中分别加入1μmol/LPACAP38(A组)... 目的观察垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP38)对培养的兔三叉神经节细胞及角膜瓣术后角膜神经生长的影响。方法从2周龄新西兰白兔中分离三叉神经节细胞,并在神经元基础培养液中进行培养。培养24h后在培养液中分别加入1μmol/LPACAP38(A组)、0.1μmol/LPACAP38(B组),C组培养液中加入PBS。1周后行抗神经纤维丝蛋白(NF200)免疫荧光染色鉴别培养的三叉神经节细胞。27只新西兰白兔右眼行角膜瓣手术,并分为3组,术后1d分别以10μmol/LPACAP38、5μmol/LPACAP38或PBS点眼,共8周,行角膜敏感度测定和NF200免疫荧光染色,评价术后不同时间角膜神经的修复情况。结果 PACAP38培养的三叉神经节细胞有较多神经细胞存活,伸出突触并交织呈网状,A组神经细胞存活最多。角膜瓣手术的3个组角膜敏感度随着术后时间的延长逐渐增加(Ftime=58.196,P=0.00),10μmol/LPACAP38点眼组角膜敏感度恢复最快。10μmol/LPACAP38点眼组和5μmol/LPACAP38点眼组角膜敏感度值明显高于PBS点眼组,差异均有统计学意义(P=0.000,P=0.005)。角膜神经染色示10μmol/LPACAP38点眼组角膜神经密度较5μmol/LPACAP38点眼组和PBS点眼组高,神经干短端多膨大,以出芽方式发出细微的新生神经纤维芽。结论 PACAP38能促进兔三叉神经节细胞增生及诱导神经突形成,可促进角膜敏感性恢复及角膜神经修复再生。 展开更多
关键词 垂体腺苷酸环化酶激活肽 细胞增生分化 神经再生 角膜
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β淀粉样蛋白与氧应激的相互作用及PACAP-27对氧应激损伤的保护作用 被引量:2
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作者 桂兰润 张炳烈 +1 位作者 房征宇 李文彬 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期171-174,共4页
目的 :探讨 β淀粉样蛋白 (Aβ)与氧应激损伤的相互关系及脑下垂体腺苷环化酶激活多肽 2 7(PACAP 2 7)对抗氧应激致神经瘤细胞损伤的作用机理。方法 :体外培养第 15 0代Neuro 2a细胞 ,MTT法检测细胞存活率 ,Heochest332 5 8特异细胞核... 目的 :探讨 β淀粉样蛋白 (Aβ)与氧应激损伤的相互关系及脑下垂体腺苷环化酶激活多肽 2 7(PACAP 2 7)对抗氧应激致神经瘤细胞损伤的作用机理。方法 :体外培养第 15 0代Neuro 2a细胞 ,MTT法检测细胞存活率 ,Heochest332 5 8特异细胞核染色观察凋亡小体 ,提取基因组DNA鉴定细胞死亡方式及基因组内小片段含量。结果 :过氧化氢 (H2 O2 )处理接种 2 4h的Neuro 2a细胞 2 4h后 ,浓度相关地使细胞存活率下降 ,10mol·L-1时有明显的凋亡特征出现 ;与 2 5mol·L-1的Aβ2 5-35共同处理 2 4h可以使H2 O2 损伤神经元的ED50 降低至 1/10 ;PACAP 2 7( 0 .1(mol·L-1,1d加药 1次 ,共 2次 )对H2 O2 所致的细胞损伤有显著的保护作用 ,可以提高细胞的存活率 ,降低基因组小片段DNA的含量 ;PACAP受体拮抗剂PACAP 6 2 7( 10 0mol·L-1,与PACAP同时加药 )不能拮抗PACAP 2 7的保护作用。结论 :氧应激与Aβ在神经毒性方面有协同作用 ;PACAP参与对抗H2 O2 的神经毒性时 ,不通过受体激活。 展开更多
关键词 Β淀粉样蛋白 过氧化氢 Neuro-2a细胞 细胞培养 凋亡 神经瘤 细胞损伤 作用机理
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垂体腺苷酸环化酶激活肽减轻谷氨酸引起的大鼠海马神经元细胞内钙离子浓度升高的可能机理 被引量:1
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作者 董艳 韩晞 +4 位作者 唐铁山 娄素杰 路长林 黄秀英 孙方臻 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期261-264,共4页
目的 探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽 38(PACAP 38)稳定海马神经元细胞内钙离子浓度([Ca2 + ]i)作用的可能机理。方法 取新生SD大鼠海马 ,用B2 7无血清培养基培养神经元 ;经Fura 2 /AM标记后 ,共聚焦显微镜下测定 [Ca2 + ]i。结果PACAP ... 目的 探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽 38(PACAP 38)稳定海马神经元细胞内钙离子浓度([Ca2 + ]i)作用的可能机理。方法 取新生SD大鼠海马 ,用B2 7无血清培养基培养神经元 ;经Fura 2 /AM标记后 ,共聚焦显微镜下测定 [Ca2 + ]i。结果PACAP 38(10pmol·L- 1)能抑制谷氨酸 (5 0 0 μmol·L- 1)所致海马神经元 [Ca2 + ]i 升高 ,而Rp型硫化环腺苷酸 (2 0 μmol·L- 1)或氯化白屈菜赤碱 (0 .1μmol·L- 1)能阻断PACAP 38的抑制作用。二丁基环腺苷酸 (0 .1~ 10 0 μmol·L- 1)和豆寇酰佛波醇乙酯(0 .0 1~ 10 μmol·L- 1)也能抑制谷氨酸引起的海马神经元 [Ca2 + ]i 升高。结论 PACAP 38减轻谷氨酸引起的海马神经元 [Ca2 + ]i 展开更多
关键词 垂体腺苷酸环化酶激活肽 谷氨酸 大鼠 海马 神经元细胞 钙离子
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垂体腺苷酸环化酶激活肽对动脉粥样硬化形成过程中脂质过氧化的影响 被引量:3
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作者 李建芝 常青 +1 位作者 黄华梅 唐海兰 《解剖学研究》 CAS 2002年第1期28-29,共2页
目的 探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽 (PACAP)对家兔实验性动脉粥样硬化 (AS)形成过程中脂质过氧化的影响。方法  80只雄性新西兰家兔 ,随机分为 3组 :(1)对照组 (C组 ) :喂饲普通颗粒兔饲料 ;(2 )AS模型组 :每只兔每日喂饲含胆固醇 1 5... 目的 探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽 (PACAP)对家兔实验性动脉粥样硬化 (AS)形成过程中脂质过氧化的影响。方法  80只雄性新西兰家兔 ,随机分为 3组 :(1)对照组 (C组 ) :喂饲普通颗粒兔饲料 ;(2 )AS模型组 :每只兔每日喂饲含胆固醇 1 5g的颗粒兔饲料 ;(3)PACAP组 (P组 ) :喂饲与AS组同样的饲料 ,另从耳缘静脉注射PACAP。分别于实验的 0、4、8、12周末记录兔体重 ,同时从兔耳中央动脉取空腹血 ,测定丙二醛 (MDA)含量 :并取若干兔的主动脉标本作苏丹Ⅳ染色 ,测量斑块面积。结果  (1)AS组及P组血清MDA含量均显著高于C组 ;而P组显著低于AS组。 (2 ) 4周末时P组斑块面积显著小于AS组。结论 PACAP具有抗脂质过氧化作用 。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 垂体腺苷酸环化酶激活肽 丙二醛 脂质过氧化
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