我国山丘疫区与平原疫区利什曼原虫分离株分子核型分析

目的：分析我国山丘疫区和平原疫区利什曼原虫分离株分子核型。方法：脉冲场电泳。采用１％琼脂糖凝胶，电压６Ｖ／ｃｍ，０．５×ＴＢＥ，１４℃，脉冲时间６０ｓ，电泳１５ｈ和脉冲时间９０ｓ，电泳９ｈ。结果：各个分离株均分离出分子量范围在２００ｋｂ－２２００ｋｂ的ＥＢ染色条带为１５条左右，其中６个山丘疫区分离株之间的核型相似，且犬株与人株的亦相似，并与Ｌ．ｉｎｆａｎｔｕｍ的核型接近；２个平原疫区分离株之间的核型相似；山丘疫区与平原疫区分离株之间的核型不同。结论：山丘疫区分离株之间和平原疫区分离株之间均各自存在着同源性，山丘疫区分离株与Ｌ．ｉｎｆａｎｔｕｍ之间存有部分同源性，但两个疫区分离株之间存在着异源性；保虫宿主——家犬，是我国山丘疫区内脏利什曼病的重要传染源。

我国山丘疫区和平原疫区利什曼原虫分离株基因组DNA基因型分析

目的：分析我国山丘和平原疫区利什曼原虫分离株基因组ＤＮＡ（ｎＤＮＡ）的多态性。方法：对基因组ＤＮＡ进行内切酶酶切、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、染色体定位。探针采用地高辛标记。结果：采用ｇｐ６３探针，显示杜氏利什曼原虫（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａｄｏｎｏｖａｎｉ，Ｌ．ｄ．）江苏人株和Ｌ．ｄ．ＪｅｄｄａｈｎＤＮＡ之间有相似的染色体杂交带，Ｌ．ｄ．四川人株和Ｌ．ｉｎｆａｎｔｕｍｎＤＮＡ之间有相似的染色体杂交带；采用β－ｔｕｂｕｌｉｎ探针，显示Ｌ．ｄ．江苏人株与Ｌ．ｄ．ＪｅｄｄａｈｎＤＮＡ之间有两条相似的染色体杂交带，Ｌ．ｄ．四川犬株与Ｌ．ｄ．甘肃犬株ｎＤＮＡ之间有三条相似的染色体杂交带、与Ｌ．ｄ．汶川人株ｎＤＮＡ之间有两条相似的染色体杂交带。结论：提示平原疫区的江苏人株与Ｌ．ｄ．Ｊｅｄｄａｈ之间存在同源性，山丘疫区的Ｌ．ｄ．四川人株与Ｌ．ｉｎｆａｎｔｕｍ之间存在同源性，Ｌ．ｄ．四川犬株与Ｌ．ｄ．甘肃犬株之间存在同源性、与Ｌ．ｄ．汶川人株之间既存在同源性又存在差异。

我国山丘、平原疫区利什曼原虫分离株kDNA分析

为鉴别我国山丘、平原疫区杜氏利什曼原虫分离株，采用内切酶AluⅠ对其kDNA进行酶切。结果显示实验各株均有500bp片段；L．d．汶川人株、L．d．四川人株、L．d．甘肃人株（GS2）、L．d．四川犬株、L．infantum及L．d．Jeddah具有210bp片段；L．d．四川人株、Ld．甘肃人株（GS2）及L．d．四川犬株具有120bp片段；L．d．汶川人株、L．d．甘肃人株（GS2）和L．d．四川犬株具有400bp和280bp片段。L．d．甘肃犬株也具有400bp片段；L．infantum和L．d．Jeddah具有280bp片段。提示山丘疫区不同分离株的kDNAAluⅠ酶切片段相近，其中人株与犬株的相似；山丘疫区分离株与平原疫区分离株的酶切片段之间有较大差异，山丘疫区分离株与L．infantum的酶切片段之间既有相似又有差异。