血清可溶性Apo-1/Fas水平对监测胃癌生物学行为和预后的临床价值

背景与目的:国内外研究检测发现一些恶性肿瘤血清可溶性Apo-1/Fas(sApo-1/Fas)水平明显高于正常人,但有关化疗对血清sApo-1/Fas影响的研究不多;本课题通过检测胃癌患者血清sApo-1/Fas水平及化疗对血清sApo-1/Fas影响的研究,探讨其临床价值。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测42例胃癌患者化疗前后血清sApo-1/Fas水平,并与30例正常人作对比分析。结果:胃癌患者血清sApo-1/Fas水平明显高于正常对照组(P<0.01),血清sApo-1/Fas水平与临床分期、细胞分化程度有关,与患者性别、年龄无关。Ⅳ期胃癌患者血清sApo-1/Fas水平明显高于Ⅲ期和Ⅱ期(P<0.05～0.01),Ⅲ期明显高于Ⅱ期(P<0.05)。中、高分化胃癌患者血清sApo-1/Fas水平低于低分化胃癌患者(P<0.05～0.01),化疗后有效(完全缓解和部分缓解)患者血清sApo-1/Fas水平明显低于化疗前(P<0.01)。结论:血清sApo-1/Fas与胃癌的发生、发展相关,可作为胃癌生物学行为和预后的标记物。sApo-1/Fas有可能成为胃癌治疗的新靶点。

慢性阻塞性肺疾病患者血清Fas/Apo-1及TNF-α与细胞凋亡的相关性研究

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清可溶性(Fas)及(TNF-α)的变化及相关性。方法30例急性加重期和稳定期COPD患者、25例健康体检者,分别查血常规、测定肺功能,用ELISA法检测血清sFas及TNF-α浓度。结果发现COPD急性加重期组患者外周血中性粒细胞占白细胞总数百分比Neu/Leu%、sFas、TNF-α明显高于COPD稳定期组(P<0.01,P<0.05,P<0.01);COPD急性加重期组患者血清sFas、TNF-α明显高于健康对照组(P<0.05,P<0.01),且在急性加重期组中TNF-α与Neu/Leu%呈正相关(r=0.586,P<0.05)。结论COPD急性加重期及稳定期sFas和TNF-α水平显著升高,提示凋亡参与了COPD的发病,可能是引起肺内炎症细胞浸润及肺实质破坏的主要原因之一。

化疗对肝癌患者血清可溶性Apo-1/Fas水平的影响及其临床意义

目的:评价肝癌患者化疗前后血清可溶性Apo-1/Fas(sApo-1/Fas)水平变化的临床意义。方法:采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测30例正常人及58例肝癌患者化疗前后血清sApo-1/Fas水平,并作对比分析。结果:肝癌患者血清sApo-1/Fas水平明显高于正常对照组(P<0.01),Ⅲ期肝癌血清sApo-1/Fas水平明显高于Ⅱ期(P<0.01),化疗后有效(完全缓解和部分缓解)患者血清sApo-1/Fas水平明显低于化疗前者(P<0.01),血清sApo-1/Fas水平与肝癌患者性别、年龄均无相关。结论:血清sApo-1/Fas可能参与调控肝癌的发生、发展过程,可作为化疗疗效和判断预后观察指标。

食管癌患者化疗前后血清可溶性Apo-1/Fas水平变化及其临床意义

目的 探讨食管癌患者化疗前后血清可溶性Apo 1/Fas(sApo 1/Fas)水平及其临床意义。 方法 应用酶联免疫吸附试验法 (ELISA)检测 4 9例食管癌患者化疗前后血清sApo 1/Fas水平 ,并同时检测 30例正常人血清sApo 1/Fas水平作对比分析。结果 食管癌患者血清sApo 1/Fas水平明显高于正常对照组 (P <0 .0 1) ,血清sApo 1/Fas水平与临床分期有关、与食管癌患者性别、年龄、细胞分化程度无相关 ,Ⅳ期食管癌血清sApo 1/Fas水平明显高于Ⅲ期和Ⅱ期 (P <0 .0 1) ,Ⅲ期明显高于Ⅱ期 (P <0 .0 1) ,化疗后有效 (完全缓解和部分缓解 )患者血清sApo 1/Fas水平明显低于化疗前 (P <0 .0 1)。 结论 血清sApo 1/Fas与食管癌的发生及发展有一定关系 ,检测血清sApo 1/Fas有可能成为食管癌辅助诊断、病情发展及化疗疗效观察的一项有价值的指标。

恶性肿瘤患者血浆和胸腹水可溶性Apo-1/Fas的检测及其临床意义

目的 :研究恶性肿瘤患者血浆和胸腹水可溶性 Apo- 1/ Fas水平变化及其临床意义。方法 :用 EL ISA法检测 15 7例恶性肿瘤患者和 2 5例正常对照组血浆以及 12 9例不同性质胸腹水可溶性 Apo- 1/ Fas浓度变化。结果 :恶性血液病中急性白血病、慢性白血病和多发性骨髓瘤 (MM)患者血浆可溶性 Apo- 1/ Fas水平均显著高于正常对照组 (P<0 .0 5 ) ;慢性粒细胞白血病高于急性粒细胞白血病 ,慢性淋巴细胞白血病高于急性淋巴细胞白血病 (P<0 .0 5 ) ;急性白血病和 MM化疗完全缓解时 Apo- 1/ Fas水平显著下降 (P<0 .0 5 ) ,无效和复发病例均为高值。在实体恶性肿瘤中血浆可溶性 Apo- 1/ Fas水平也均显著高于正常对照组 (P<0 .0 1) ,且转移性癌显著高于非转移癌 (P<0 .0 1) ,术后好转或放疗后缓解患者较术前或放疗前明显回落 (P<0 .0 1) ,而术后复发转移患者显著升高 (P<0 .0 1)。恶性肿瘤患者胸腹水可溶性 Apo- 1/ Fas水平明显增高 ,并明显高于结核性和漏出性胸腹水 (P<0 .0 1)。结论 :恶性肿瘤患者血浆和胸腹水可溶性 Apo- 1/ Fas水平明显升高 ,并可能与肿瘤的发生、发展有关 ,观察其水平变化 ,有助于了解肿瘤的病理过程 ,鉴别胸腹水的不同性质。

冬凌草乙素诱导GBC-SD细胞的凋亡及对Bcl-2、p53、Fas/APO-1、C-myc表达的影响

目的 探讨冬凌草乙素对人胆囊癌GBC SD细胞增殖抑制和诱导调亡的机制。方法 不同浓度的冬凌草乙素处理GBC SD细胞后 ,用MTT法检测GBC SD细胞的存活率 ,通过倒置显微镜、扫描电子显微镜、流式细胞仪、荧光分光光度计观察和分析凋亡细胞 ,用免疫组织化学法和流式细胞仪检测细胞内Bcl 2、p5 3、Fas/APO 1、C myc的表达。结果 冬凌草乙素浓度依赖性地抑制GBC SD细胞增殖及诱导其凋亡 ;药物作用 2 4h后 ,细胞内Bcl 2、p5 3、Fas/APO 1、C myc的表达有不同程度的下调 ;Caspase 3活性与凋亡程度相关。结论 冬凌草乙素抑制GBC SD细胞的增殖和诱导其凋亡与Bcl 2、p5 3、Fas/APO 1、C

独活寄生汤对肝肾亏虚型腰椎间盘突出症患者外周血中Fas/APO-1的影响

目的:观察独活寄生汤对肝肾亏虚型腰椎间盘突出症患者外周血中Fas/APO-1(细胞凋亡抑制因子)的影响,探讨其治疗腰椎间盘突出症的机制。方法:将80例腰椎间盘突出症(肝肾亏虚型)患者随机分为治疗组和对照组各40例。对照组予以卧床休息、腰椎牵引、腰背肌功能锻炼、推拿、中药熏洗治疗。治疗组在对照组的基础上予独活寄生汤口服。治疗2周后观察两组患者Fas/APO-1变化,并评价疗效。结果:治疗2周后,治疗组Fas/APO-1值明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组治疗后比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组疗效优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:独活寄生汤治疗腰椎间盘突出症有较好疗效,可能机制为降低Fas/Apo-l的升高。

康莱特注射液对肾癌细胞Fas/Apo-1、FasL和PCNA表达的研究

目的探讨康莱特注射液（KLT）对肾癌细胞（GRC－1）Fas／Apo－1、FasL和PCNA基因表达的影响。材料和方法利用免疫细胞化学法分析KLT对肾癌细胞Fas／Apo－1、FasL和PCNA基因表达的影响。结果免疫细胞化学证明康莱特注射液组GRC－1细胞Fas／Apo－1基因表达标记指数（LI）为74．6％，而空白乳组为21．2％。空白乳组和0．2mg／ml康莱特组GRC－1细胞无FasL基因表达改变，康莱特组GRC－1细胞PCNA表达的LI为15．2％，空白乳组GRC－1细胞几乎无PCNA表达。结论康莱特注射液的抗肾癌细胞作用可能是通过上调Fas／Apo－1和PCNA基因表达，对FasL基因表达没有明显的影响。

bcl-2和Fas/Apo-1基因在缺血-再灌注损伤、缺血预适应心肌细胞中的表达

目的:观察凋亡抑制基因bcl-2和凋亡促进基因Fas/Apo-1在缺血-再灌注损伤、缺血预适应心肌细胞中的表达情况。方法:制备家兔心肌缺血-再灌注损伤(RI)、缺血预适应(IP)、持续缺血(CI)和control模型。实验方法:①采用免疫组织化学方法观察bcl-2基因表达。②采用逆转录扩增(PCR)方法观察Fas/Apo-1表达情况。结果:①免疫组化检测bcl-2基因蛋白标记阳性者,在病变边缘区,IP组为(46.5±11.0)%,CI组为(42.9±9.9)%,两者之间无明显差别(P>0.05),但均明显高于RI组(19.4±5.6)%和对照组(1.92±0.88)%(P<0.01);在病变中心区,IP组为(52.5±8.8)%,均明显高于RI组(32.2±10.2)%和CI组(28.0±10.2)%(P<0.01);而RI组与CI组之间比较则无显著性差异(P>0.05);在正常对照组分别仅为(1.92±0.88)%和(1.92±1.02)%,说明正常心肌中bcl-2无表达或弱表达。从自身不同部位对照来看,RI组在病变中心区bcl-2基因蛋白的表达明显强于边缘区(P<0.01);而IP组2个部位比较无明显差别(P>0.05);CI组则表现出病变边缘区bcl-2基因蛋白的表达增强(P<0.01)。②在RT-PCR方法观察Fas蛋白的表达中,可见凝胶电泳在control和IP组的心肌细胞中Fas基因蛋白的表达水平极低,在RI组和CI组的心肌细胞中则见Fas基因蛋白的表达明显增高(P<0.01);而对照β-actin基因的mRNA表达水平在各组基本一致,无显著性差异(P>0.05)。结论:缺血可诱发凋亡促进基因Fas/Apo-1基因蛋白的表达增强,而再灌注则加重这一过程。

血清IL-8和sApo-1/Fas与乳腺癌患者临床病理学参数的关系

目的:探讨外周血IL-8和sFas在不同绝经状态、不同雌激素受体状态(ER)、不同转移情况的乳腺癌术后复发及转移患者中的表达及其临床意义。方法:采用酶联免疫双抗体夹心法检测94例乳腺癌术后复发及转移患者和30例正常人的血清IL-8和sFas水平,并比较它们与绝经状态、ER状态、不同转移情况的关系以及化疗对其影响。结果:1)乳腺癌患者血清IL-8及sFas水平明显高于正常人(P<0.05)。2)血清IL-8与雌激素受体(ER)状态和骨转移关系密切:ER(-)者高于ER(+)者(P<0.05);有骨转移者高于局部复发及/或区域淋巴结转移(P<0.01)以及肝、肺转移者(P<0.05)。3)血清sFas水平与绝经状态及肝、肺转移关系密切:绝经后患者高于绝经前患者(P<0.05);有肝、肺转移者高于局部复发及/或区域淋巴结转移(P<0.01)以及骨转移者(P<0.05)。4)化疗后血清sFas水平较化疗前下降(P<0.05),而血清IL-8无明显变化。结论:血清IL-8和sFas水平与乳腺癌患者的生物学行为及预后有一定关系,值得进一步研究。

Fas/APO-1基因真核表达质粒的构建

目的 :构建凋亡信号受体Fas/APO - 1基因真核表达质粒 ,为进一步研究Fas/APO - 1在肿瘤细胞凋亡中的作用提供物质基础。方法 :将质粒pBluscript-FascDNA酶切后 ,回收DNA片段并提纯 ;用连接酶连接到真核表达载体pBK CMV内 ,克隆出重组基因载体pBK FascDNA。结果 :原始质粒pBluscript-FascDNA及重组质粒pBK -FascDNA酶切后 ,凝胶电泳鉴定均含有大小正确的Fas/APO - 1碱基片段。结论 :本实验成功地构建了Fas/APO - 1基因的真核表达质粒。

bcl-2和Fas/APO-1在宫颈癌的表达及其意义

目的 :探讨bcl 2和Fas/APO 1基因在宫颈癌患者血浆中的表达水平及与宫颈癌发生发展的关系。方法 :用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测 2 1例宫颈癌患者血浆中bcl 2和Fas/APO 1基因的表达水平 ,与 18例宫颈正常妇女的表达水平比较。结果 :bcl 2在 2 1例宫颈癌患者血浆中的水平为 (2 2 3.5 6 3± 1.6 19)U/ml(x- ±s) ,显著高于 18例宫颈正常者的 (6 6 .4 2 0± 1.4 0 1)U/ml(x- ±s) ,两者比较经t检验P <0 .0 5 ,差异有显著性 ;Fas/APO 1在 2 1例宫颈癌患者血浆中的水平为 (5 2 0 .116± 1.15 8)ng /L(x- ±s) ,明显低于 18例宫颈正常者 (6 38 2 6 3± 1 2 4 1)ng/L(x- ±s) ,两者比较P <0 .0 5 ,差异有显著性。结论 :在宫颈癌中bcl 2高表达 ,而Fas/APO 1低表达 ,bcl 2和Fas/APO

凋亡调控基因Fas/APO-1、bcl-2在胆囊癌中的表达及与生物学特性的关系

目的 研究肿瘤凋亡调控基因Fas/APO 1、bcl 2在胆囊癌发生发展中的作用。方法 应用免疫组化法对 2 8例胆囊癌及其癌旁组织、2 0例胆囊息肉和腺瘤组织检测基因Fas/APO 1、bc1 2的表达 ,并分析它们与胆囊癌生物学特性的关系。结果 胆囊癌组织中bc1 2表达率与癌旁组织、息肉和腺瘤组织相比显著增高 ,而Fas/APO 1表达明显降低 (均P <0 .0 5 ) ;与肿瘤生物学特性的关系 ,bc1 2蛋白表达率在高、中分化组中明显低于低、未分化组 ,NevinⅠ、Ⅱ、Ⅲ期低于Ⅳ、Ⅴ期 ,而Fas/APO 1蛋白表达则相反 (均P <0 .0 5 )。结论 bc1 2为胆囊癌细胞凋亡抑制基因 ,而Fas/APO 1则为促进基因 。

培哚普利对充血性心力衰竭患者血清Fas/Apo-1水平的影响

目的 :观察培哚普利对充血性心力衰竭 (CHF)患者细胞凋亡抑制因子Fas/Apo 1的影响 .方法 :酶联免疫方法检测 84例CHF患者 (培哚普利治疗 4 2例、常规治疗 4 2例 )治疗前、后及 30例健康人血清中Fas/Apo 1水平 .结果 :①与健康人相比 ,84例CHF患者Fas/Apo 1水平显著升高 [分别为(0 .10± 0 .0 4 ) μg·L-1和 (0 .2 0± 0 .0 7) μg·L-1,P <0 .0 1],CHF患者Fas/Apo 1水平随着心功能损害加重而升高 ,各组间有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;②培哚普利组与常规治疗组治疗前Fas/Apo 1水平两组间无显著差异 [分别为(0 .2 0± 0 .0 7)μg·L-1和 (0 .2 1± 0 .0 7) μg·L-1];与常规治疗组相比 ,培哚普利组治疗后血清中Fas/Apo 1降低更为明显 [分别为 (0 .12±0 .0 4 ) μg·L-1和 (0 .15± 0 .0 5 ) μg·L-1,P <0 .0 1].结论 :CHF患者血清中Fas/Apo 1水平可反映心力衰竭的严重程度 ,培哚普利改善CHF患者心脏功能的作用可能与其抑制心肌细胞的凋亡的机制有关 .

Fas/APO-1基因转染食管癌Eca-109细胞及其表达

目的 通过将Fas/APO 1基因转染食管癌细胞 ,比较转导前后基因及蛋白的表达水平。方法 运用已构建的Fas/APO 1真核表达质粒 ,用脂质体介导法将目的基因导入Eca 10 9细胞 ,筛选克隆细胞以Southernblot ,Northernblot ,Westernblot法检测Fas/APO 1基因的表达。结果 转导株与非转导株均有Fas/APO 1cDNA的表达 ,但转导株在基因及蛋白水平的表达均明显高于非转导株。结论 Fas/APO 1基因在食管癌细胞中处于低表达状态 ;通过基因转导能有效增强其表达。

大肠癌患者化疗前后血清可溶性Apo-1/Fas水平变化及其临床意义

目的 探讨可溶性Apo 1/Fas(sApo 1/Fas)在大肠癌患者化疗前后血清中的水平及其临床价值。 方法 采用酶联免疫吸附试验法 (ELISA )对 5 5例大肠癌患者化疗前后血清sApo 1/Fas水平进行测定 ,并同时检测 3 0例正常人血清sApo 1/Fas水平作为对照。结果 大肠癌患者血清sApo 1/Fas水平明显高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,血清sApo 1/Fas水平与临床分期有关、与大肠癌患者性别、年龄、细胞分化程度无关 ;DukesD期大肠癌患者血清sApo 1/Fas水平明显高于其它各期 (P <0 .0 1) ,DukesC期明显高于DukesB及DukesA期 (P <0 .0 1) ,DukesB期与DukesA期比较无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;分化程度较好 (高分化腺癌及中分化腺癌 )大肠癌患者血清sApo 1/Fas水平 ,与分化程度较差 (低分化腺癌及黏液腺癌 )大肠癌患者比较无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;化疗后有效 (完全缓解和部分缓解 )患者血清sApo 1/Fas水平明显低于化疗前 (P <0 .0 5 )。 结论 血清sApo 1/Fas的检测对探讨大肠癌的发生机理、病情判断及指导化疗有一定价值。

bcl-2和Fas/Apo-1基因在急性白血病细胞中的表达及其意义的探讨

目的 :研究 bcl- 2和 Fas/ Apo- 1基因在急性白血病 (AL)细胞中表达及其与 AL 的分型、临床特征、疗效及预后因素的关系。方法 :采用免疫组化 SP法检测 5 4例初治 AL骨髓细胞的 bcl- 2和 Fas/ Apo- 1基因蛋白的表达情况。结果 :AL骨髓细胞中 bcl- 2基因的表达显著高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,而 Fas/ Apo- 1基因的表达低于正常对照组 (P <0 .0 5 )。 bcl-2和 Fas/ Apo- 1基因表达在急性髓系白血病 (AML)与急性淋巴细胞白血病 (AL L)无显著差异 ;在 AML 的亚型中 ,bcl-2在 M4及 M5中的表达高于 M1、M2和 M3(P<0 .0 5 ) ;而 Fas/ Apo- 1的表达在各亚型中无显著性差异。bcl- 2的表达与初诊时的白细胞数呈正相关 (r=0 .4 4 ,P <0 .0 5 ) ,与疗效呈负相关 (r=- 0 .4 0 ,P <0 .0 5 ) ;急性淋巴细胞白血病中 Fas/ Apo-1的表达与疗效呈正相关 (r=0 .34,P <0 .0 5 ) ,与骨髓原始细胞数呈负相关 (r=- 0 .71P <0 .0 5 )。结论 :bcl- 2和 Fas/ Apo-1基因的紊乱是 AL 形成与发展的原因之一 ,且与 AL 的某些临床特征。

Fas/APO-1基因表达与食管鳞状细胞癌分级的相关性及意义

目的 :探讨Fas/APO - 1基因蛋白的表达与食管鳞状细胞癌发生发展的关系。方法 :应用免疫组织化学方法 ,对 78例人食管鳞状细胞癌及 2 0例癌旁组织标本的Fas/APO - 1蛋白的表达分别进行了检测。结果 :在 78例食管鳞癌组织中 ,Fas/APO- 1基因蛋白阳性表达率为 4 7.4 % (37/ 78) ,与癌旁正常组织 (阳性表达率为 5 % )相差显著 (P <0 .0 5 )。其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期阳性率分别为 18.2 %、4 8.3%及 5 5 .3% ,Fas/APO - 1的表达同食管癌TNM分期存在相关趋势 (P <0 .0 5 )。结论 :Fas/APO - 1基因可能在食管癌的发生发展中起重要作用 。

fas/apo-1、bcl-2蛋白在急性髓系白血病细胞的表达特点及意义

用免疫印迹（Western blot）、碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法（APAAP）分析19例急性髓系白血病（AML）骨髓细胞fas/apo-1、bcl-2蛋白表达水平的变化。结果表明绝大部分AML骨髓过表达bcl-2蛋白,部分病例表达fas/apo-1,两者表达呈一定的负相关性。分析结果显示bcl-2蛋白过表达所致的凋亡抑制状态是化疗耐药的主要机制之一,而fas/apo-1的表达是预后较好的特征。

急性白血病细胞bcl-2、Bax和Fas/Apo-1基因表达的研究

目的 研究bcl 2、Bax、Fas/Apo 1基因在急性白血病 (AL)细胞中的表达及其与AL的分型、临床特征、疗效及预后因素的关系。方法 采用免疫组化方法检测 5 4例初治AL骨髓细胞bcl 2、Bax、Fas/Apo 1蛋白表达情况。结果 AL骨髓细胞中bcl 2基因的表达显著高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,而Bax、Fas/Apo 1基因的表达显著低于正常对照组(P <0 .0 5 )。bcl 2、Bax、Fas/Apo 1基因表达在急性髓系白血病 (AML)与急性淋巴细胞白血病 (ALL)无显著差异 ;在AML亚型中 ,bcl 2在M4及M5中的表达高于M1、M2和M3(P <0 .0 5 ) ;而Bax及Fas/Apo 1的表达在各亚型中无显著性差异 (P >0 .0 5 )。bcl 2的表达与初诊时的白细胞数呈正相关 (r=0 .4 4 ,P <0 .0 5 ) ,与疗效呈负相关 (r=- 0 .4 0 ,P <0 .0 5 ) ,Bax的表达与骨髓白血病细胞数呈负相关 (r=- 0 .39,P <0 .0 5 ) ,与髓外浸润呈负相关 (r =- 0 .4 5 ,P <0 .0 5 ) ,急性淋巴细胞白血病中Fas/Apo 1的表达与疗效呈正相关 (r =0 .34,P <0 .0 5 ) ,与骨髓原始细胞数呈负相关 (r =- 0 .71,P <0 .0 5 )。结论 bcl 2、Bax、Fas/Apo 1基因的紊乱可能在AL的发病中起着重要作用 ,还与白血病的某些临床特征、疗效及预后因素密切相关。