一种新的转铁蛋白压电免疫传感器的研究

报道了一种基于等离子体聚合膜、结合聚电解质设计的转铁蛋白压电免疫传感器 .采用辉光放电等离子体聚合技术 ,在石英晶体上沉积一层正丁胺聚合膜 ,再在膜上自组装一层易再生的、带负电的聚电解质 ,调节抗体溶液的 p H值使其带正电 ,经静电吸附包被抗体后用以测定抗原 .探讨了自组装聚电解质的浓度和自组装时间 ,抗体的包被浓度、包被时间和 p H值以及免疫反应的酸度、温度及响应频率与时间的关系等实验条件的影响 .考察了传感器的灵敏度、选择性、重现性和再生性能 .用传感器测定人血清中转铁蛋白的线性范围为 0 .1 0～ 1 2 .65μg/ m L.将其用于实际样品中转铁蛋白的测定 ,结果与酶联免疫法基本一致 .

高效液相色谱-柱后同位素稀释质谱法定量分析人血清中转铁蛋白及白蛋白

建立了高效液相色谱(HPLC)与电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)联用,同时结合柱后同位素稀释法,通过直接测定硫及铁元素,实现蛋白质绝对定量的分析方法。选取分子量不同的4种标准蛋白:转铁蛋白、β乳球蛋白、肌红蛋白和溶菌酶作为混合蛋白,34S或54Fe同位素稀释剂与液相色谱洗脱液经三通混合后,在线进入ICP-MS检测。根据同位素稀释法公式及蛋白中硫、铁的含量计算混合蛋白中每种蛋白的浓度,与天平称量结果一致,对方法进行了验证。将方法应用到人血清转铁蛋白、白蛋白的定量分析,针对两种蛋白含量差别大导致的信号差异,通过改变同位素稀释剂的流速,成功测定了人血清中转铁蛋白、白蛋白的含量。采用34S及54Fe同位素稀释剂分别定量的血清中转铁蛋白浓度为(2.35±0.01)g/L和(2.22±0.13)g/L,结果基本吻合。方法精密度RSD均小于10%,可用于基体样品中含硫蛋白及金属蛋白的定量分析。

凝胶电泳-激光烧蚀进样电感耦合等离子体质谱与非特异性同位素稀释法联用技术定量分析人血清中蛋白

建立了聚丙烯酰胺凝胶电泳（ PAGE）-激光烧蚀进样电感耦合等离子体质谱（ LA-ICP-MS）与非特异性同位素稀释法联用技术，通过测定蛋白条带上硫元素的含量，实现了人血清中蛋白的定量分析.血清电泳分离条件为：分离胶浓度（质量分数）为7.5%，浓缩胶浓度为4%，电泳电压100 V.为优化激光烧蚀实验条件，以LA-ICP-MS测得不同浓度硫富集凝胶中32 S的信号强度，在1~400μg/g范围内呈现良好的线性关系， R2=0.993.采用外标法对血清中的转铁蛋白和白蛋白进行了相对定量分析.此外，重点采用“电泳后同位素稀释”方法实现了蛋白条带上34 S稀释剂的加入，对血清中转铁蛋白和白蛋白进行了绝对定量分析；采用人血清蛋白标准物质ERM-DA470/IFCC对建立的方法体系进行了验证，结果表明2种蛋白的定量结果与标准值吻合，方法的准确性好，且测量精度优于外标法.

血浆转铁蛋白在慢性肝炎患者中的临床价值

目的探讨血浆转铁蛋白(transferrin TRF,siderophilin)水平对慢性肝炎患者的临床价值。方法采用散射比浊法检测183例慢性肝炎患者和71例健康人的血浆转铁蛋白的浓度,并对慢性肝炎组和健康对照组血浆转铁蛋白的水平进行比较。结果慢性肝炎患者血浆转铁蛋白水平明显低于对照组(P<0.05),并且以血浆转铁蛋白作为检测标准对病人的检出率达85%。结论血浆转铁蛋白水平对慢性肝炎患者的检测具有临床意义。

四种蛋白类肿瘤标志物对结直肠癌筛查的价值

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是常见的恶性肿瘤之一,占我国恶性肿瘤的第4位,且近年来发病率仍有不断上升的趋势.开展有效的结CRC筛查工作能改善预后,显著降低患者的死亡率,具有重大意义.在众多筛查方式中,粪便与血清中的肿瘤标志物检测技术操作简单,患者痛苦小,费用低,成为研究关注的热点.鉴于肿瘤标志物检测对CRC癌筛查的重要意义,本文对四种主要蛋白质类肿瘤标志物在CRC筛查中的研究现状作一文献综述,以期为临床提供理论依据.

转铁蛋白逆转血浆脂蛋白体外氧化修饰的研究

目的 :观察转铁蛋白 (Tf)对体外已受到Cu2 + 、Fe2 + 修饰的人血浆高密度脂蛋白 (HDL)、低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白 (VLDL)氧化修饰的影响。方法 :采用一次性密度梯度超离心法分离正常人血浆HDL、LDL和VLDL ,在 37℃分别与CuSO4 及FeSO4 温育 6小时 ,使脂蛋白在体外氧化修饰。转铁蛋白组在氧化修饰后加入4 0 0 μg ml的Tf作用 8小时。检测三种脂蛋白中脂质过氧化产物丙二醛 (MDA) ,维生素E(VitE)含量及超氧化物歧化酶 (SOD)活性。结果 :①HDL、LDL和VLDL与Cu2 + 或Fe2 + 温育后 ,MDA含量显著升高 (P <0 .0 0 1) ,并呈明显的时间效应。②在Cu2 + 或Fe2 + 修饰后加入 4 0 0 μg ml的Tf能使明显降低HDL、LDL和VLDL中MDA生成 ,阻止VitE含量下降 ,并显著提高SOD活性 ,呈现一定的浓度依赖性。结论 :结果提示Tf能显著逆转Cu2 + 或Fe2 + 介导的血浆HDL、LDL和VLDL氧化修饰 ,可能为一内源性抗动脉粥样硬化因子。其作用途径可能与阻断Cu2 + 或Fe2 + 诱导的自由基生成 ,保护内源性抗氧化物质SOD、VitE的活性有关。

鹅血中转铁蛋白质的分离纯化及其性质

以鹅血为原料,利用醋酸纤维膜电泳,分析鹅血中各球蛋白的质量浓度.采用DEAE 52离子交换和SephdexG 100凝胶层析等方法,对转铁蛋白(Transferrin,Tf)进行了分离纯化及其性质的研究.结果表明,鹅血浆中含有较多的β球蛋白,质量浓度为34.89mg/dL,每毫升血浆可纯化得到3.1mg转铁蛋白.鹅血含铁转铁蛋白(holo Tf)的特征吸收峰为470nm,相对分子质量为77000.鹅转铁蛋白对选用的革兰氏阴性菌 大肠杆菌有抑制作用,Fe3+能够改变转铁蛋白的结构,并影响转铁蛋白的抑菌功能.

缺铁性贫血患者红细胞内游离原卟啉、血浆铁和转运铁蛋白饱和度检测水平及临床意义

目的检测缺铁性贫血(IDA)患者红细胞内游离原卟啉(FEP)、血浆铁和转运铁蛋白饱和度(TSAT)水平,并探讨其临床意义。方法选取2019年12月至2022年1月西安医学院第一附属医院收治的205例IDA患者作为IDA组,另选取同期于我院体检中心体检的健康人群96例作为对照组,同时根据血红蛋白浓度将IDA组患者分为轻度贫血组(n=86)、中度贫血组(n=78)和重度贫血组(n=41),检测IDA组与对照组FEP、血浆铁、TSAT水平和血常规指标[血红蛋白浓度(HB)、红细胞计数(RBC)、平均血红蛋白量(MCH)、平均红细胞体积(MCV)、红细胞分布宽度(RDW)],采用Pearson检验分析IDA组FEP、血浆铁和TSAT水平与血常规指标的相关性,并采用受试者工作曲线(ROC)分析FEP、血浆铁和TSAT检测水平对IDA患者的诊断效能。结果IDA组患者的HB、RBC、MCH、MCV明显低于对照组,RDW明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);IDA组患者的FEP水平明显高于对照组,血浆铁和TSAT水平明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);重度贫血组患者的FEP水平明显高于轻、中度贫血组,血浆铁和TSAT水平明显低于轻、中度贫血组,而中度贫血组患者的FEP水平明显高于轻度贫血组,血浆铁和TSAT水平明显低于轻度贫血组,差异均有统计学意义(P<0.05);经Pearson分析结果显示,IDA患者FEP水平与HB、RBC、MCH、MCV水平呈负相关(P<0.05),与RDW水平呈正相关(P<0.05);血浆铁、TSAT水平与HB、RBC、MCH、MCV水平呈正相关(P<0.05),与RDW水平负相关(P<0.05);经ROC分析结果显示,FEP、血浆铁和TSAT水平单独及联合诊断IDA的曲线下面积(AUC)分别为0.749、0.798和0.890、0.947,三者联合诊断价值最高。结论IDA患者FEP、血浆铁和TSAT水平与患者贫血程度密切相关,可作为IDA早期诊断的参考指标,三者联合诊断的效能较高,可为临床诊断IDA提供新思路。

2型糖尿病患者血浆和尿纤维连接蛋白与尿转铁蛋白测定的临床意义

目的 探讨血浆纤维连接蛋白、尿纤维连接蛋白和尿转铁蛋白在糖尿病肾病 (DN)和糖尿病视网膜病变 (DR)的变化和发生机制。方法 检测 6 2例 2型糖尿病患者 (其中伴有 DN者 38例 ,伴有 DR者 14例 )和15例健康对照者的 2 4小时尿白蛋白排泄率 (AER)、纤维连接蛋白 (U Fn)、尿转铁蛋白 (U Trf)、β2 -微球蛋白 (Uβ2 -MG)、α1-微球蛋白 (Uα1 - MG)和血浆纤维连接蛋白 (PFn)水平变化。结果 2型糖尿病组 PFn水平与健康对照组无明显差别 (P>0 .0 5 ) ,伴有 DN和 DR的糖尿病患者与未发现 DN和 DR的糖尿病患者相比 ,其 PFn水平略有升高 ,但无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ;伴有 DN的 2型糖尿病患者 UFn和 UTrf水平较未发现 DN的糖尿病患者显著升高(P<0 .0 1) ;伴有 DR的 2型糖尿病患者 UFn水平升高不明显 (P>0 .0 5 ) ,但 U Trf水平升高有统计学意义 (P<0 .0 1)。PFn与 U Fn、UTrf、AER、Uβ2 - MG和 Uα1 - MG无明显相关关系 ;而 UFn和 U Trf与 AER、Uα1- MG、Uβ2 -MG呈显著正相关。结论 UFn,UTrf的升高能早期反映 DN的出现 ,而 UTrf升高可能反映 DR的发生。

精浆转铁蛋白、抑制素B在男性生育中的临床诊断意义

目的为探讨精浆中转铁蛋白(Tf)含量、抑制素B含量测定在男性生育力方面的影响及意义。结果不孕少精子组、极度少精子组精浆中Tf的含量明显低于正常生育组,经统计学分析差异有显著性(P<0.01),抑制素B含量结果测定少精子组、极度少精子组、无精子组与正常生育组比较,统计学分析差异有显著性(P<0.01)。结论精浆中Tf水平的测定、抑制素B含量测定是观察睾丸支持细胞功能,评价曲细精管生精功能的一个特异性的指标,对男性不孕的诊断治疗具有指导意义。

不育男性精浆转铁蛋白测定及其意义

目的观察精浆中转铁蛋白（Tf）在男性生育力方面的意义。方法采用单向免疫扩散法，对15例生育和72例不育男性糖浆Tf进行测定。结果精浆Tf浓度与精子密度呈明显正相关，即无精子症者精浆Tf含量＜少精子症者＜精子数在（20～59）×109/L不育者＜精子数≥60×109/L不育者＜正常生育者。糖浆Tf含量与精子成活率、活动力及正常形态精子数量关系不大。结论精浆Tf水平测定，是观察睾丸支持细胞功能，评价曲细精管生精状态的一个良好指标。

精浆转铁蛋白含量与不育的关系

为探讨精浆转铁蛋白 (Tf)含量与男性生育力的关系 ,采用速率散射比浊法 ,对 2 0例正常生育男性和 96例不育男性精浆Tf含量进行了测定 ,同时做精子密度、精子活动率及精子顶体完整率 (PIA)分析。结果表明少精子组 (精子密度 <2 0× 10 6/ml)精浆Tf含量较生育组与正常密度组 (精子密度≥ 2 0× 10 6/ml)显著低 (P <0 .0 1) ;精浆Tf含量与精子活动率无关 ;正常精子密度的不育患者精子PIA <80 %组精浆Tf的含量显著低于PIA≥ 80 %组(P <0 .0 1)。

不同品系鸡血浆转铁蛋白、血红蛋白和红细胞酯酶D多态性研究

采用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳法测定了6个品系鸡的血浆转铁蛋白(Tf)、血红蛋白(Hb)和红细胞酯酶D(EsD)的遗传多态性.转铁蛋白出现5种表型,受Tf^A、Tf^B、TP^C3个共显性等位基因控制;血红蛋白出现5种表型,受Hb^F、Hb^(M1)、Hb^(M2)3个共显性等位基因控制;红细胞酯酶D出现5种表型,受EsD^1、EsD^2、EsD^3、EsD^4、EsD^55个共显性等位基因控制.各品系鸡之间的Tf、Hb、EsD的基因频率是不同的.根据基因频率计算遗传距离并用类平均法进行聚类分析.3种肉用鸡中艾维茵和塔特姆亲缘关系最近,罗斯褐鸡与3种肉用鸡亲缘关系较近,而与其它蛋用型鸡亲缘关系较远.