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题名神经元单层细胞电镜原位包埋方法的探讨
被引量:2
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作者
潘立君
何苗
张宾
张芳
吴亮亮
孔妤
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机构
中国科学院上海生命科学研究院神经科学研究所
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出处
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
2016年第12期1512-1517,共6页
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文摘
为探究神经元单层细胞电镜原位包埋方法,该研究以体外培养的大鼠皮层神经元单层细胞为材料,采用了三种不同的方法进行样品制备。结果表明,常规悬浮离心包埋法容易对细胞造成机械损伤,且无法保持原位性;培养在玻璃盖玻片上的细胞,虽能保持较好的原位性,但其超薄切片表层易破碎,遇水溶解,且在透射电镜下可见细胞整体衬度弱和超微结构不完整;而培养在Thermanox塑料薄膜盖玻片上的细胞,可容易观察到相邻细胞间的紧密连接,超微结构清晰,衬度较前组样品好,三维重构之后可很好地显示神经元细胞之间的毗邻关系。因此,相比前两种细胞制样方式,Thermanox塑料薄膜上单层细胞处理过程简便,成功率高。该结果为神经元细胞超微结构的形态学研究进一步提供技术新思路,并有望推动神经元细胞超微结构观察中三维重构技术和光镜/电镜联用技术的开发应用。
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关键词
神经元单层细胞
原位包埋
塑料薄膜盖玻片
电镜三维重构
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Keywords
monolayer cultured neurons
in situ embedding
plastic film coverslip
EM 3D reconstruction
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分类号
Q813
[生物学—生物工程]
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