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鸡plgR多克隆抗体的制备及初步鉴定
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作者 李德军 刘运枫 +1 位作者 宋雪 任利敏 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第12期13-16,共4页
根据GenBank中鸡pIgR基因序列和蛋白序列,设计引物,利用PCR技术扩增胞外配体结合区片段,构建原核重组表达质粒pET-32a(+)/pIgR,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG的诱导表达融合蛋白,通过镍离子螯合柱纯化后免疫新西兰大白兔,... 根据GenBank中鸡pIgR基因序列和蛋白序列,设计引物,利用PCR技术扩增胞外配体结合区片段,构建原核重组表达质粒pET-32a(+)/pIgR,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG的诱导表达融合蛋白,通过镍离子螯合柱纯化后免疫新西兰大白兔,获得兔抗鸡pIgR多克隆抗体,通过酶联免疫吸附试验(ELISA法)和Western Blot法检测抗体的效价和特异性。结果显示,成功制备特异性的鸡pIgR抗体,为研究鸡pIgR的功能提供有力依据。 展开更多
关键词 pIgR 多克隆抗体
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大菱鲆多聚免疫球蛋白受体基因的克隆及表达分析 被引量:12
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作者 丁冰洁 绳秀珍 +2 位作者 唐小千 邢婧 战文斌 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期792-801,共10页
鱼类多聚免疫球蛋白受体(polymeric immunoglobulin receptor,pIgR)是黏膜免疫系统的关键因子,能够介导多聚免疫球蛋白向黏液中的转运和分泌。本研究利用同源克隆和cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification ofcDNA ends,RACE),首次得... 鱼类多聚免疫球蛋白受体(polymeric immunoglobulin receptor,pIgR)是黏膜免疫系统的关键因子,能够介导多聚免疫球蛋白向黏液中的转运和分泌。本研究利用同源克隆和cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification ofcDNA ends,RACE),首次得到了大菱鲆(Scophthalmus maximus)pIgR完整的cDNA序列,全长1 584 bp,该序列包含一个1 005 bp的开放阅读框及5’和3’UTR,编码334个氨基酸。同源性比较发现,大菱鲆pIgR氨基酸序列与牙鲆(Paralichthys olivaceus)、斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)鲀、红鳍东方(Takifugu rubripes)的序列相似性分别是74%、74%和59%,表现出较高的保守性。多序列比对显示,硬骨鱼pIgR包含两个ILD(Ig-like domain),分别对应哺乳类的ILD1和ILD5区域。系统进化树分析表明,大菱鲆pIgR和牙鲆的聚为一支。半定量RT-PCR显示,pIgR在健康大菱鲆各组织中均有表达,但表达水平不同,其中在黏膜相关淋巴组织中表达最强。经灭活的鳗弧菌菌液浸泡处理后,实时荧光定量PCR结果显示,大菱鲆各组织中pIgR的相对表达量在72 h内均呈现先增加后减少的趋势,在48 h内均有一个最高值出现,且黏膜相关淋巴组织中峰值出现较早,说明pIgR在硬骨鱼类黏膜免疫中发挥了重要作用。 展开更多
关键词 大菱鲆 多聚免疫球蛋白受体(pIgR) 黏膜免疫 克隆 基因表达
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奶牛pIgR基因5′侧翼区SNP检测及其与IgA和IgM含量的相关性研究 被引量:1
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作者 张春刚 王加启 +7 位作者 卜登攀 刘光磊 程金波 董晓丽 赵国琦 魏宏阳 周凌云 刘开朗 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期57-64,共8页
本试验研究了pIgR基因5′侧翼区的多态性及其对IgA和IgM含量的影响。从NCBI上的Map Viewer数据库下载牛pIgR基因的5′侧翼区的序列(NW_174143),长度为3.2 kb,设计4对引物进行PCR扩增,通过对25头奶牛的PCR产物直接测序发现并确定SNP位点... 本试验研究了pIgR基因5′侧翼区的多态性及其对IgA和IgM含量的影响。从NCBI上的Map Viewer数据库下载牛pIgR基因的5′侧翼区的序列(NW_174143),长度为3.2 kb,设计4对引物进行PCR扩增,通过对25头奶牛的PCR产物直接测序发现并确定SNP位点,并用SNP Stream标签微列阵基因分型系统对189头牛进行基因分型,将其与牛奶和血液中的IgA和IgM的含量进行关联分析。结果表明,pIgR基因在-3128、-3072、-2834、-2348和-515位发现了5个SNP位点,其中SNP1和SNP2为A/G突变,SNP3、SNP4和SNP5为T/C突变。方差分析结果表明,SNP1对牛奶IgM和血液IgA含量有显着的影响(P<0.05),SNP3和SNP5对血液IgM含量有显着影响(P<0.05),其他SNP位点与单倍型组合对乳及血液中IgA和IgM的含量均没有显著影响(P<0.05);多重比较分析表明,SNP1位点的基因型AB个体与BB个体的牛奶IgM和血液IgA含量的最小二乘均数差异显著(P<0.05),SNP3和SNP5的不同基因型对血液IgM含量的最小二乘均数分别达到了显著水平(P<0.05)。因此得出,牛pIgR基因5′侧翼区的多态性影响牛奶和血液中的IgA和IgM的含量,这为进一步研究牛奶中IgA和IgM分泌转运机理提供了理论依据。 展开更多
关键词 奶牛 pIgR基因 IgA和IgM SNP 单倍型
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Expression of pIgR in the tracheal mucosa of SHIV/SIV-infected rhesus macaques 被引量:3
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作者 Dong Li Feng-Jie Wang +3 位作者 Lei Yu Wen-Rong Yao Yan-Fang Cui Gui-Bo Yang 《Zoological Research》 CAS CSCD 2017年第1期44-48,共5页
Polymeric immunoglobulin receptors(pIgR) are key participants in the formation and secretion of secretory Ig A(S-Ig A), which is critical for the prevention of microbial infection and colonization in the respirato... Polymeric immunoglobulin receptors(pIgR) are key participants in the formation and secretion of secretory Ig A(S-Ig A), which is critical for the prevention of microbial infection and colonization in the respiratory system. Although increased respiratory colonization and infections are common in HIV/AIDS, little is known about the expression of pIgR in the airway mucosa of these patients. To address this, the expression levels of pIgR in the tracheal mucosa and lungs of SHIV/SIV-infected rhesus macaques were examined by real-time RTPCR and confocal microscopy. We found that the levels of both PIGR m RNA and pIgR immunoreactivity were lower in the tracheal mucosa of SHIV/SIVinfected rhesus macaques than that in non-infected rhesus macaques, and the difference in pIgR immunoreactivity was statistically significant. IL-17 A, which enhances pIgR expression, was also changed in the same direction as that of pIgR. In contrast to changes in the tracheal mucosa, pIgR and IL-17 A levels were higher in the lungs of infected rhesus macaques. These results indicated abnormal pIgR expression in SHIV/SIV, and by extension HIV infections, which might partially result from IL-17 A alterations and might contribute to the increased microbial colonization and infection related to pulmonary complications in HIV/AIDS. 展开更多
关键词 Tracheal mucosa Lungs plgr SHIV/SIV infection IL-17A
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ASSOCIATION OF pIgR POLYMORPHISMS WITH NASOPHARYNGEAL CARCINOMA
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作者 范钦 贾卫华 +4 位作者 张如华 余杏娟 陈丽珍 冯启胜 曾益新 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2006年第3期168-172,共5页
Objective: Epstein-Barr virus (EBV) associated nasopharyngeal carcinoma (NPC) is an important squamous cell cancer endemic in southern China and Southeast Asia. pIgR (polymeric immunoglobulin receptor) gene pla... Objective: Epstein-Barr virus (EBV) associated nasopharyngeal carcinoma (NPC) is an important squamous cell cancer endemic in southern China and Southeast Asia. pIgR (polymeric immunoglobulin receptor) gene plays central roles during immune responses and EBV inflammatory and therefore is a good candidate susceptibility gene for NPC. This study is to evaluated potential associations between pIgR gene and NPC susceptibility. Methods: Sequencing was used to identify multiple single nucleotide polymorphisms (SNPs) within the exon regions of pIgR in Guangdong population. Four SNPs were genotyped in 528 NPC patients and 408 normal individuals to perform case-control study. Results: There was no statistical difference in the allele frequencies of each SNP (P〉0.05). After categorized into 2 groups by age of 45 y, in the group of age below 45 the minor allele T frequency of C888oT was 7%, whereas 4% in controls, with significant difference (P〈0.05). The Odds Ratio (OR=1.84) also showed higher risk of NPC with individuals carried the minor alleles. Conclusion: The result has proved that SNP C8880T is associated with NPC susceptibility and pIgR gene might play a certain role in oncogenesis and development of NPC. 展开更多
关键词 Nasopharyngeal carcinoma (NPC) Polymeric immunoglobulin receptor plgr Single nucleotide polymorphisms (SNP) SUSCEPTIBILITY Case-control study
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鱼类多聚免疫球蛋白受体(pIgR)研究进展 被引量:2
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作者 王占飞 唐小千 +1 位作者 绳秀珍 战文斌 《海洋湖沼通报》 CSCD 北大核心 2016年第2期84-89,共6页
鱼类皮肤、鳃、消化道等黏膜相关淋巴组织及其表面的黏液是鱼类抵御外界病原入侵的第一道防线,而其局部的特异性免疫应答对病原体的抵御更加重要。黏膜免疫系统以分泌型抗体(SIgs)为主要的防御因子,多聚体IgM、IgT等黏膜免疫球蛋白通过... 鱼类皮肤、鳃、消化道等黏膜相关淋巴组织及其表面的黏液是鱼类抵御外界病原入侵的第一道防线,而其局部的特异性免疫应答对病原体的抵御更加重要。黏膜免疫系统以分泌型抗体(SIgs)为主要的防御因子,多聚体IgM、IgT等黏膜免疫球蛋白通过多聚免疫球蛋白受体(pIgR)介导的转胞吐作用被转运穿过黏膜上皮细胞,以SIgs形式分泌到黏膜表面,在鱼类黏膜免疫防御中发挥重要作用。硬骨鱼类pIgR研究在近年来成为日渐活跃的领域,本文综述了有关鱼类pIgR基因与结构、表达分布、功能及表达调节等方面的研究进展,有助于促进对pIgR在鱼类黏膜免疫中作用的理解。 展开更多
关键词 鱼类 多聚免疫球蛋白受体(pIgR) 黏膜免疫球蛋白 黏膜免疫
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