尿足细胞标志蛋白Podocalyxin检测在糖尿病肾脏损害程度评估中的意义

目的探讨尿液足细胞表面标志蛋白Podocalyxin(PCX)检测在糖尿病肾脏损害程度评估中的意义。方法选取97例2型糖尿病患者及30例健康体检者(正常对照组)。按照尿清蛋白排泄率(UAER)及血清肌酐(SCr)水平,将97例糖尿病患者分为4组:Ⅰ组,UAER<30 mg/24 h,SCr≤135μmol/L,27例;Ⅱ组,UAER为30～299 mg/24 h,SCr≤135μmol/L,29例;Ⅲ组,UAER≥300 mg/24 h,SCr≤135μmol/L,22例;Ⅳ组,UAER≥300mg/24 h,SCr>135μmol/L,19例。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测5组受检者尿液中PCX水平,分析尿液中PCX与UAER、尿蛋白定量的关系。结果与正常对照组比较,Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组糖尿病患者糖化血红蛋白(HbA1c)、尿中PCX、UAER显著升高(P<0.05),Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组SCr、尿蛋白定量亦显著升高(P<0.05);且随着糖尿病肾病的进展,Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组尿液中PCX分别为(5.8±1.0)μg/L、(15.3±4.3)μg/L、(28.9±9.0)μg/L和(23.3±10.6)μg/L,Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05),Ⅲ组与Ⅳ组比较差异无统计学意义(P>0.05)。相关分析显示,尿液中PCX与UAER、尿蛋白定量均呈正相关(r值分别为0.78和0.58,P均<0.01)。结论尿液PCX检测可反映糖尿病肾病的进展。

吡格列酮对糖尿病大鼠肾组织podocalyxin表达的影响

目的观察不同剂量盐酸吡格列酮(PIO)对STZ诱导的糖尿病大鼠的肾脏保护作用及肾小球Podocalyxin(PCX)表达的影响方法链脲佐菌素(STZ)65 mg.kg-1腹腔注射后建立糖尿病大鼠模型后随机分为4组,分别为模型组(DM组,n=8)和不同剂量盐酸吡格列酮组(DR1、DR2、DR3组,PIO分别:10、20和30 mg.kg-1.d-1,各组n=8),并设正常对照组(NC组,n=8)。于0周及8周末测尿白蛋白(UAlb),尿视黄醇结合蛋白(URBP),尿沉渣PCX(UPCX)和尿肌酐(UCr)。每周监测血糖,8周末取血检测HbA1c,留取左肾观察病理变化,免疫组化及RT-PCR检测肾组织PCX蛋白及mRNA水平。结果①各组糖尿病大鼠各时间点血糖及8周末HbA1c明显高于NC组(均P<0.01),各糖尿病组间差异无统计学意义;②8周末DR1、DR2和DR3组UACR、URCR、肾脏肥大指数(KI)、基底膜厚度(GBMT)、足突融合率(FPFR)均明显低于DM组(均P<0.05),且DR2组和DR3组低于DR1组(均P<0.05);DR2组及DR3组UPCR明显低于DM组(P<0.01),DR1组轻度降低但差异无统计学意义;各PIO组肾组织PCX蛋白及mRNA水平明显高于DM组(P<0.01),且DR2组和DR3组PCX蛋白表达高于DR1组(P<0.05);③8周末,各糖尿病组大鼠Scr、BUN、TG、LDL-C均高于NC组,HDL-C低于NC组,各PIO组BUN、TG均明显低于模型组(P<0.05),DR2及DR3组HDL-C水平高于模型组(P<0.05)。④UPCR与UACR和KI呈正相关(r=0.86,r=0.833,P<0.01)。结论吡格列酮可减轻糖尿病大鼠肾脏损伤,该作用可能部分与其增加肾小球足细胞PCX蛋白和mRNA表达,抑制PCX随尿排泄有关,这一作用具有一定的剂量依赖性。

尿足细胞标志蛋白podocalyxin在肾病综合征合并急性肾损伤诊断中的价值

目的探讨原发性肾病综合征(PNS)患者尿液中podocalyxin(PCX)的变化对急性肾损伤(AKI)的诊断价值。方法对PNS合AKI患者(n=33例,AKI组)和未合并AKI患者(n=24例,非AKI组)尿液PCX、血清半胱氨酸蛋白酶抑制物C(Cystatin C,Cys C)、血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和血浆清蛋白(ALB)水平进行检测,观察上述指标与病情关系。结果 AKI组尿PCX(42.04±11.01)ng/ml显著高于非AKI组(30.88±9.93)ng/ml;血清Cys C水平(1.91±0.54)mg/L显著高于非AKI组(1.29±0.34)mg/L,而血清LDL-C和血浆ALB水平在两组中比较差异无统计学意义。随着AKI病情加重,估算的肾小球滤过率(e GFR)的减少,尿PCX、血清Cys C增加更为明显。结论联合检测原发性肾病综合征患者尿PCX、血清Cys C有助于AKI的诊断及病情判断。

益气化瘀清热方及其拆方对嘌呤霉素氨基核苷损伤小鼠足细胞表达Podocalyxin及Podocin的影响

目的观察益气化瘀清热方及其拆方对嘌呤霉素氨基核苷(Puromycin aminonucleoside,PAN)损伤体外培养的小鼠足细胞表达Podocalyxin及Podocin的影响。探讨不同类中药治疗肾病的作用强度。方法应用PAN(50μg/mL)刺激体外培养的小鼠足细胞,形成PAN足细胞损伤模型,造模成功后的足细胞随机分为益气组、化瘀组、清热组、复方组、对照组、模型组、空白组,采用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)检测各组血清对小鼠足细胞表达Podocalyxin、Podocin的影响。结果益气化瘀清热方及其拆方均能影响造模足细胞Podocalyxin及Podocin的表达,但不同药物作用于造模足细胞的时间不同,其对Podocalyxin及Podocin表达的作用强度不同。结论益气化瘀清热方及其拆方可能通过提高造模足细胞Podocalyxin及Podocin的表达而发挥治疗作用。

尿液足细胞标志蛋白podocalyxin评估肾功能损伤的意义

目的通过检测肾病患者尿液中足细胞标志蛋白podocalyxin(PCX)浓度,探讨尿PCX的变化评估肾病患者肾小球损伤的临床意义。方法收集肾内科住院的肾病患者30例作为观察组,64例体检健康者作为对照组。收集患者和健康者尿液,采用免疫透射比浊法检测尿PCX,观察组按尿PCX检测结果分两组分别计算肾小球病理平均活动指数积分,并对所有检测数据进行统计学分析。结果 (1)观察组尿PCX浓度为(29.50±15.64)ng/mL,明显高于对照组的(3.51±1.13)ng/mL(P<0.01);尿PCX与尿微量白蛋白浓度有一定的相关性(r=0.54,P<0.05);(2)观察组患者随着尿PCX浓度的增加,肾小球病理平均活动指数积分也逐渐升高,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论尿PCX为评估肾功能损伤指标之一,且升高程度与肾病患者肾小球的活动性有关;尿PCX浓度可能与肾病病理类型有一定的联系。

尿液细胞外囊泡中的podocalyxin在糖尿病肾病诊断中的价值

目的探究尿液细胞外囊泡中足细胞表面标志蛋白podocalyxin(PCX)水平在糖尿病肾病诊断中的应用价值。方法收集2017年3月~2017年9月在本院确诊收治的糖尿病患者共57例,其中34例单纯糖尿病患者,23例糖尿病肾病患者,并收集21例其他类型肾病患者,11例健康体检者作为对照。采用透射电镜(TEM)和纳米示踪技术(NTA)验证尿液中细胞外囊泡的分离效果,Western blot法检测分离出的各组细胞外囊泡的分子标记物(TSG101、PCX),ELISA法检测细胞外囊泡中PCX水平。结果TEM结果发现尿液中细胞外囊泡含量丰富、形态完整、大小不等,NTA结果发现绝大多数颗粒直径小于300 nm。Western blot法显示4组样本中均可以检测出TSG101表达,且糖尿病肾病患者样本中PCX均呈阳性表达,而在健康体检组、单纯糖尿病患者以及其他肾病患者样本中呈阴性表达。ELISA法显示糖尿病肾病组24 h尿液细胞外囊泡中PCX水平(3.27±2.30 ng/μmol)显著高于健康体检组(1.22±0.36 ng/μmol)、单纯糖尿病组(2.22±1.29 ng/μmol)以及其他肾病组(1.24±0.45 ng/μmol),有统计学意义(P<0.05)。结论糖尿病肾病患者尿液细胞外囊泡中PCX水平明显升高,可以作为临床检测糖尿病肾病的潜在标志物之一,具有重要的临床意义。

紫癜性肾炎患儿肾组织podocalyxin的表达及其与尿足细胞数的相关分析(英文)

目的：分析肾脏足细胞特异蛋白podocalyxin（PCX）的表达和尿足细胞数在紫癜性肾炎（Henoch-Schnlein purpura nephritis,HSPN）病理进展过程中的变化。方法：56例HSPN患儿为病例组,根据肾脏病理改变分为4组：HSPN Ⅱ（Ⅱa＋Ⅱb）级组（n=10）,Ⅲ（Ⅲa＋Ⅲb）级组（n=21）,Ⅳ级组（n=16）和Ⅴ级组（n=9）;另取非肾脏疾病死亡病例尸检切取的肾脏标本4例作为正常肾组织对照组;同时收集8例健康儿童的晨尿作正常尿液对照组。应用免疫荧光方法检测PCX在4例正常肾组织及56例HSPN肾组织中的表达,并对其结果进行定量分析;同时检测8例健康儿童及56例HSPN患儿尿足细胞阳性的发生率和尿足细胞数。结果：在正常对照组和HSPN Ⅱ（Ⅱa＋Ⅱb）级组的肾组织中,PCX表达完整,2组之间肾组织PCX阳性面积占肾小球面积的百分比差异无统计学意义（P〉0.05）;在HSPN Ⅲ（Ⅲa＋Ⅲb）级﹑Ⅳ级和Ⅴ级组的肾组织中,PCX表达均有不同程度缺失,从Ⅲ（Ⅲa＋Ⅲb）~Ⅴ级其表达依次下降,各组间比较差异有统计学意义（P〈0.01）;病理分级在Ⅲ（Ⅲa＋Ⅲb）级以上的HSPN,尿中有PCX的阳性表达,提示尿中有足细胞存在;肾组织PCX荧光阳性面积占肾小球的百分比与尿中足细胞数呈负相关（r=-0.637,P〈0.01）。结论：足细胞损伤在儿童HSPN病理进展中发挥一定作用;可以在一定程度上反映HSPN的病理损伤程度。

高血压大鼠足细胞的超微病变和podocalyxin的表达及其作用研究

目的观察高血压大鼠足细胞的超微结构病变,探讨足细胞蛋白podocalyxin(PCX)在高血压大鼠肾组织中的表达及作用。方法随机将30只雄性SD大鼠以改进的"两肾一夹"方法建立高血压大鼠模型,分为高血压组和对照组。分别于造模前和造模后1、5、10周检测两组大鼠的尿β2-微球蛋白(β2-MG)、血尿素氮(BUN)及血肌酐(Scr)水平;免疫荧光方法观察PCX在肾组织的表达,并用Image-pro plus 6.0软件,以面积密度值进行分析;光镜、电镜观察肾小球及足细胞超微结构改变。结果 (1)术后2周起高血压组收缩压(SBP)较对照组显著升高(137.2±9.4mmHg vs 92.3±10.3mmHg,P<0.01),并且逐渐升高至术后4周趋于平稳。(2)术后5周起高血压组尿β2-MG显著高于对照组[(110.28±11.25)ng/L vs(56.68±9.51)ng/L,P<0.01],并且有继续增高的趋势。两组BUN、Scr在整个实验过程中没有显著性差异。(3)光镜、电镜观察均可见高血压组肾脏发生病理改变;足细胞超微结构发生病变。(4)免疫荧光可见高血压组PCX表达明显减少,其面积密度值显著低于对照组(0.204±0.042 vs 0.296±0.039,P<0.01),且PCX表达与尿β2-MG呈显著负相关(r=-0.927,P<0.01)。结论 PCX蛋白表达降低可能是参与高血压肾损害的机制之一,其可能是导致肾小球电荷屏障受损、尿蛋白排泄增加、肾功能受损、肾脏病理及足细胞超微结构发生病变的基础之一。

儿童紫癜性肾炎临床病理与尿Podocalyxin的关系

目的紫癜性肾炎(henoch-Schnlein purpura nephritis,HSPN)是儿童最常见的继发性肾小球疾病。为寻找评价肾组织病理损伤的分子标志物,文中探讨儿童HSPN的临床分型、病理分级、足细胞损伤情况与尿Podocalyxin的联系,将尿Podocalyxin作为分子标志物评估儿童肾组织病理损伤的程度。方法分析72例经肾活检病理检查诊断为过敏性HSPN的住院患儿,对其进行肾穿刺活检和尿Podocalyxin检测。肾组织病理除常规进行病理分级和免疫荧光分型外,还在电镜下观察肾小球足细胞损伤程度,按照足突融合情况进行分类。分析其临床特点、肾组织病理、尿Podocalyxin的关系。结果病理分级集中在Ⅱ级和Ⅲ级,其中病理分级为Ⅱ级的患儿34例,占47.2%;Ⅲ级患儿38例,占52.8%,与Ⅱ级的患儿比较,尿Podocalyxin检测值高(P<0.05)。电镜下观察肾小球足细胞损伤情况:足突广泛融合21例,足突节段融合35例和无足突融合11例,5例电镜下未见肾小球。患儿足突融合程度加重,尿中Podocalyxin检测值升高。孤立性蛋白尿型患儿尿中Podoca-lyxin检测值较孤立性血尿型高,较肾病综合征型低(P<0.05)。结论儿童HSPN的肾小球病理改变除系膜细胞的增生外,还存在足细胞损伤的情况。尿Podocalyxin检测可作为分子标志物,评估儿童HSPN肾小球足细胞损伤情况和肾组织病理分级的严重程度。

肾小球疾病患者尿沉渣足细胞分子podocin和podocalyxin分析

目的:以ELISA法检测尿沉渣足细胞podocin,podocalyxin排泌并观察其与不同肾小球疾病的关系。方法:共收集我院自2010年5月～8月以来行肾活检证实为肾小球疾病的患者,收集其临床资料,并以ELISA法检测尿沉渣足细胞分子podocin,podocalyxin。结果:共40个患者,男15例,女25例,平均年龄(38.27±16.33)岁,增殖性肾小球疾病患者19例:IgA肾病10例,新月体性肾炎2例,IgM肾病2例,Ⅳ(A/G)型狼疮性肾炎5例;非增殖性肾小球疾病患者19例:微小病变型(MCD)5例,局灶节段硬化性肾小球肾炎(FSGS)8例,膜性肾病(MN)6例,另原发性肾淀粉样变性2例,对照健康自愿者10例。尿podocin分子排泌在正常对照组最低,在增殖性肾小球疾病和非增殖性肾小球疾病间差异无统计学意义(P>0.05),增殖性肾小球疾病尿podocin排泌高于肾淀粉样变性患者(P<0.05)。新月体肾炎的尿podocin排泌显著高于其他肾小球疾病(P<0.05),后依次FSGS,IgA肾病,狼疮性肾炎,MN,IgM肾病,MCD;尿沉渣podocalyxin排泌在正常对照组最低,而增殖性肾小球肾炎和非增殖性肾小球肾炎间差异无统计学意义(P>0.05)。新月体肾炎尿podocalyxin排泄量最高,其后依次为FSGS,IgA肾病,MN,狼疮性肾炎,MCD,IgM肾病,以肾淀粉样变性最低。尿podocalyxin与podocin呈正相关,尿podocin与血C3呈负相关。结论:ELISA法检测尿沉渣足细胞分子检测可对肾小球疾病患者的肾病理类型提供参考,以正常人尿podocin,podocalyxin排泌最少,增殖性肾小球疾病和非增殖性肾小球疾病间差异无统计学意义,新月体性肾炎尿沉渣podocin及Podocalyxin高于其他疾病患者,FSGS患者的尿沉渣podocin及Podocalyxin排泌量也较多,肾淀粉样变性患者的尿沉渣podocin及Podocalyxin最低,血清C3与尿podocin的排泌呈负相关。

肾炎康复片对糖尿病肾病大鼠肾组织Podocalyxin表达的影响

目的:观察肾炎康复片对糖尿病肾病大鼠肾组织Podocalyxin表达、生化指标及病理改变的影响。方法:40只雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组、DN模型组(模型组)、肾炎康复片治疗组(中药组)、氯沙坦钾治疗组(西药组)。复制糖尿病肾病大鼠模型,并予药物干预。分别观察不同时期各组大鼠血糖、24h尿蛋白定量,12周末大鼠肾组织Podocalyxin表达水平、Scr、BUN及肾脏组织病理变化。结果:12周模型组、中药组、西药组大鼠Podocalyxin蛋白表达均显著低于同期正常对照组(P<0.05),肾组织病理损伤明显,24h尿蛋白定量较正常对照组显著增高(P<0.05)。12周末用药组大鼠肾组织Podocalyxin蛋白表达显著高于同期模型组(P<0.05),肾组织病理损伤较模型组明显减轻。血糖水平略低于同期模型组,但差异无统计学意义(P>0.05),24h尿蛋白定量、BUN、Scr水平显著低于同期模型组(P<0.05)。结论:肾炎康复片能够上调糖尿病肾病大鼠肾组织Podocalyxin表达水平,对糖尿病肾病肾脏损伤有保护性作用。

膜性肾病肾活检组织中TRPC6和podocalyxin表达改变及其意义

目的检测膜性肾病(membranous nephropathy,MN)患者肾活检组织中肾小球足细胞瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(transient receptor potential cation channel 6,TRPC6)和podocalyxin的表达和分布,探讨足细胞蛋白TRPC6和podocalyxin在MN蛋白尿发生中的作用。方法采用常规组织病理以及免疫组化检查,并行免疫荧光双套色染色于激光共聚焦显微镜下观察TRPC6、podocalyxin在各组肾组织中表达及分布的改变,以计算机图像分析系统进行半定量分析。结果对照组肾组织podocalyxin沿肾小球毛细血管壁连续均匀分布,阳性荧光信号表达强,MN组表达减弱,且分布不均或节段性缺失,部分呈点状、短线状不连续分布,肾病综合征组较非肾病综合征组减弱更明显;TRPC6在对照组肾小球有一定的表达,沿肾小球基膜呈均匀连续线型分布,MN组TRPC6荧光强度有不同程度增强,且呈点状、团块状不均匀分布,肾病综合征组较非肾病综合征组更明显。结论 TRPC6和podocalyxin在正常肾组织沿肾小球基膜呈连续线状均匀分布;MN患者肾小球内TRPC6表达增加,podocalyxin表达减少,且分布形式亦发生变化,提示TRPC6和podocalyxin等足细胞相关蛋白表达改变及分布异常可能是MN蛋白尿发生的重要病理机制。

来氟米特对糖尿病大鼠肾脏Podocalyxin表达的影响

目的:研究来氟米特对糖尿病大鼠肾脏Podocalyxin蛋白表达的影响。方法:48只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、糖尿病肾病模型组、来氟米特干预组、氯沙坦干预组,每组12只。腹腔注射STZ建立糖尿病肾病大鼠模型,给予药物干预。观察各组大鼠血糖、24h尿微量白蛋白量的变化,8周、12周末各组大鼠血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、肾脏组织病理变化及肾组织Podocalyxin表达水平。结果:8周、12周末模型组、来氟米特干预组、氯沙坦干预组24h尿微量白蛋白定量较正常对照组显著增高(P<0.05),肾组织病理损伤明显,大鼠Podocalyxin蛋白表达均显著低于正常对照组(P<0.05)。8周、12周末干预组24h尿微量白蛋白定量、BUN、Scr水平显著低于同期模型组(P<0.05),肾组织病理损伤较模型组明显减轻,大鼠肾组织Podocalyxin蛋白表达显著高于同期模型组(P<0.05)。结论:来氟米特能够上调糖尿病大鼠肾组织Podocalyxin表达水平,对糖尿病肾脏损伤有保护作用。

α-硫辛酸对2型糖尿病患者尿podocalyxin及MCP-1排泄的影响

α-硫辛酸（alpha—lipoic acid，ALA）是一种存在于线粒体的酵素，通过清除氧自由基、还原体内抗氧化系统、螯合金属离子等发挥强抗氧化作用。临床上已被广泛用于治疗糖尿病相关并发症，但有关其对糖尿病肾脏足细胞的保护和抗炎作用的研究尚少。糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）发病机制复杂，现研究认为炎症反应及足细胞损伤参与了DN发生发展的全过程。

Podocalyxin与IgA肾病患者的临床特点的相关性

目的探讨尿中足细胞标记蛋白Podocalyxin(PCX)表达与IgA肾病患者病情的相关性。方法选取2015年6月至2016年10月期间确诊的100例Ig A肾病患者作为研究对象,选取同一时期的健康体检者100例作为对照组。比较不同病程、Lee分级、CDS分期、蛋白尿、血压及血糖的患者肾组织及尿中的PCX表达量,分析二者的相关性。线性回归分析影响尿中PCX表达量的相关因素。结果不同病程、血压、血糖、24 h尿蛋白、CKD分级及Lee分期患者的PCX含量的差异具有统计学意义(P<0.05),即随着病程的延长,患者的PCX含量逐渐提升(P<0.05);有高血压患者的PCX含量显著高于无高血压患者(P<0.05);随着24 h尿蛋白、CKD分级、Lee分期的提升,患者的PCX含量逐渐提升(P<0.05)。患者肾组织及尿中PCX量呈负相关(P<0.05)。患者使用逐步线性回归对PCX进行线性回归分析:肾小球滤过率(e GFR)、24 h尿蛋白、SBP、空腹血糖及患者病程与尿中PCX具有显著的相关性(P<0.05)。结论尿中PCX蛋白表达量与e GFR、24 h尿蛋白、SBP、空腹血糖及病程等多种因素有关,对患者的病情及预后具有提示作用。

子痫前期患者尿nephrin与podocalyxin表达水平及意义

目的观察足细胞裂孔膜蛋白(nephrin)、足细胞标记蛋白(podocalyxin)在子痫前期患者尿中的表达水平及意义。方法用ELISA法检测45例重度子痫前期、50例轻度子痫前期和40例同期健康妊娠女性(对照组)尿nephrin、podocalyxin水平,并探讨其与收缩压、舒张压、平均动脉压和尿蛋白质水平的相关性。结果重度子痫前期组尿nephrin、podocalyxin高于轻度子痫前期组和对照组(P均<0.01),轻度子痫前期组高于对照组(P均<0.01)。子痫前期患者尿nephrin、podocalyxin水平均与收缩压、舒张压、平均动脉压呈正相关,相关系数(r)分别为0.512、0.424、0.478和0.634、0.574、0.622(P均<0.01)。子痫前期患者尿nephrin、podocalyxin水平与尿蛋白质水平呈正相关(r分别为0.815、0.706,P均<0.01);尿nephrin水平与podocalyxin水平呈正相关(r为0.722,P<0.01)。结论尿nephrin、podocalyxin水平异常表达在子痫前期蛋白尿的发生中可能起重要作用。

连黄降浊颗粒对SHR肾组织VEGF和足细胞podocalyxin表达的影响

目的:观察连黄降浊颗粒对单侧肾切除SHR肾组织血管内皮细胞生长因子(VEGF)和足细胞podocalyxin(PCX)表达的影响。方法:40只SHR随机分为模型组(SHR组)、西药对照组(西药组)、中药对照组(中药组)、连黄降浊颗粒低剂量组(低剂量组)、连黄降浊颗粒高剂量组(高剂量组),6只同周龄WKY作为正常血压对照组(WKY组)。右肾切除法建立高血压性肾损害动物模型。造模后各组给予相应药物,给药8周末测量血压,收集尿液观察尿微量白蛋白(m Alb)、β2-微球蛋白(β2-MG)、α1-微球蛋白(α1-MG)、尿微量白蛋白/尿肌酐(m Alb/Ucr);取血检测血肌酐(Scr)、血清胱抑素C(Cys-C)。8周后处死所有大鼠,肾组织行HE、PAS和Masson染色,光镜观察肾小球和肾小管-间质病理变化;电镜观察肾脏毛细血管基底膜(GBM)及足细胞的变化;免疫组化、Western blotting和RT-PCR检测VEGF、PCX及PCX-mRNA表达水平。结果:给药第8周WKY组和4个治疗组血压显著低于SHR组(P<0.05~0.01),且4个治疗组血压差异亦有统计学意义(P<0.05)。SHR组尿m Alb、β2-MG、α1-MG、m Alb/Ucr,血Scr、Cys-C明显高于WKY组(P<0.01),高剂量组显著低于其他治疗组(P<0.05~0.01)。光镜下PAS染色显示SHR组肾小球病变明显,肾小球硬化指数(GSI)显著高于WKY组(P<0.01),高剂量组GSI明显降低(P<0.05~0.01);HE染色、Masson染色显示SHR组肾小管间质轻度纤维化,肾间质纤维化指数(IF)显著高于WKY组(P<0.01),高剂量组IF显著降低(P<0.05~0.01)。透射电镜下SHR组足细胞及GBM形态结构明显改变,高剂量组足细胞、GBM均无显著改变。免疫组化、RT-PCR、Western blotting结果显示4个治疗组VEGF均低于SHR组,高剂量组VEGF表达显著降低;SHR组PCX及其m-RNA表达显著低于WKY组,高剂量组表达明显高于中、西药组和低剂量组。结论:连黄降浊颗粒能够有效缓解足突融合、减少尿蛋白,降低VEGF表达、上调PCX表达水平,减轻肾小球及肾小管-间质病理改变。

舒洛地特对血管紧张素Ⅱ诱导足细胞podocalyxin表达的影响

目的:观察舒洛地特对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导足细胞podocalyxin表达的影响,探讨舒洛地特降低蛋白尿的分子机制。方法:小鼠永生化足细胞传代培养,分为对照组、舒洛地特(30 LSU·ml^(-1))组、AngⅡ(10^(-8)mol·L^(-1))刺激组和AngⅡ+舒洛地特共孵育组,免疫荧光法检测podocalyxin在足细胞的表达和分布,RT-PCR和Western-blotting法检测podocalyxin的mRNA和蛋白表达。结果:AngⅡ刺激后podocalyxin胞膜和胞浆表达明显减少,podocalyxin mRNA(0.35±0.10比0.62±0.11)和蛋白(0.49±0.18比0.82±0.26)较对照组显著降低(P<0.05),舒洛地特共孵育后podocalyxin mRNA(0.59±0.12比0.35±0.10)和蛋白(0.70±0.17比0.49±0.18)较AngⅡ组显著增加(P<0.05)。结论:舒洛地特可抑制AngⅡ诱导的足细胞podocalyxin表达降低,修复足细胞电荷屏障。

来氟米特治疗特发性膜性肾病对尿C5b-9和Podocalyxin含量的影响

目的观察来氟米特治疗特发性膜性肾病的临床疗效和安全性,以及对尿C5b-9和Podocalyxin含量的影响。方法将特发性膜性肾病患者20例随机分为来氟米特治疗组(LEF组,n=10)和卡托普利对照组(CAP组,n=10),分别给予来氟米特和卡托普利治疗12月,观察各组的疗效、不良反应以及对尿C5b-9和Podocalyxin含量的影响。结果 LEF组缓解率为70%(3例完全缓解,4例部分缓解);CAP组缓解率20%(均为部分缓解)。LEF组从治疗第3个月起尿蛋白显著降低,血清白蛋白显著升高;CAP组至治疗12个月尿蛋白显著低于治疗前,血清白蛋白无明显改变;治疗第3个月起LEF组尿蛋白显著低于CAP组,血清白蛋白显著高于CAP组。尿C5b-9、PCX含量LEF组治疗后显著降低,而CAP组治疗前后无变化。结论 LEF治疗特发性膜性肾病有较高的临床缓解率,且能抑制C5b-9产生,减少足细胞损伤。

紫癜性肾炎患儿肾组织和尿液Podocalyxin蛋白表达与足细胞损伤的关系

目的研究足细胞蛋白Podocalyxin在紫癜性肾炎各病理分型肾组织中表达变化,同时检测尿中足细胞以期反映肾脏病理改变。方法应用免疫荧光方法检测Podocalyxin在4例正常肾组织及56例紫癜性肾炎进行抗过敏﹑激素或免疫抑制剂等治疗前各病理分型(Ⅱa﹑Ⅱb﹑Ⅲa﹑Ⅲb﹑Ⅳa﹑Ⅳb﹑Ⅴa﹑Ⅴb)肾组织中的表达,并对其结果进行定量分析;同时检测8例健康儿童及56例HSPN患儿尿中足细胞Podocalyxin的阳性发生率。结果足细胞蛋白Podocalyxin在正常对照组﹑HSPNⅡa及Ⅱb组肾组织阳性荧光信号表达沿肾小球毛细血管壁走行分布均匀、连续,各组肾组织Podocalyxin染色占肾小球面积的百分比和灰度值组间无统计学差异(P>0.05),而在HSPNⅢa﹑Ⅲb﹑Ⅳa﹑Ⅳb﹑Ⅴa及Ⅴb组肾组织阳性荧光信号表达均有不同程度分布不均匀,或呈颗粒状分布,或节段性消失,在新月体形成区或硬化区几乎无阳性信号表达,从Ⅱb﹑Ⅲa﹑Ⅲb﹑Ⅳa﹑Ⅳb﹑Ⅴa到Ⅴb其表达依次下降,各组间比较有显著差异(P<0.01);病理分型Ⅲ型以上HSPN检测尿中有足细胞蛋白Podocalyxin的表达阳性。结论随着HSPN病理改变的加重,足细胞蛋白Podocalyxin在肾组织的表达呈下降趋势,Ⅲ型以上HSPN患儿尿足细胞蛋白Podocalyxin检测阳性,提示足细胞损伤可能在HSPN病理进展中发挥一定作用。