肾炎康复片对糖尿病肾病大鼠肾组织Podocalyxin表达的影响

目的:观察肾炎康复片对糖尿病肾病大鼠肾组织Podocalyxin表达、生化指标及病理改变的影响。方法:40只雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组、DN模型组(模型组)、肾炎康复片治疗组(中药组)、氯沙坦钾治疗组(西药组)。复制糖尿病肾病大鼠模型,并予药物干预。分别观察不同时期各组大鼠血糖、24h尿蛋白定量,12周末大鼠肾组织Podocalyxin表达水平、Scr、BUN及肾脏组织病理变化。结果:12周模型组、中药组、西药组大鼠Podocalyxin蛋白表达均显著低于同期正常对照组(P<0.05),肾组织病理损伤明显,24h尿蛋白定量较正常对照组显著增高(P<0.05)。12周末用药组大鼠肾组织Podocalyxin蛋白表达显著高于同期模型组(P<0.05),肾组织病理损伤较模型组明显减轻。血糖水平略低于同期模型组,但差异无统计学意义(P>0.05),24h尿蛋白定量、BUN、Scr水平显著低于同期模型组(P<0.05)。结论:肾炎康复片能够上调糖尿病肾病大鼠肾组织Podocalyxin表达水平,对糖尿病肾病肾脏损伤有保护性作用。

尿足细胞数量及podocalyxin蛋白与IgA肾病的相关性

目的探讨尿足细胞数量和podocalyxin蛋白表达与IgA肾病发病、发展的相关性,探索IgA肾病的诊断、病情和预后评估提供的新指标。方法采用间接免疫荧光法检测陕西省第四人民医院体检的健康人群和150例IgA肾病患者尿足细胞数量及podocalyxin蛋白表达水平,观察健康人群和IgA肾病患者尿足细胞数量差异和不同肾脏病理Lee分级IgA肾病患者尿足细胞数量和podocalyxin蛋白表达水平差异,分析不同肾脏病理Lee分级IgA肾病患者尿足细胞数量和podocalyxin蛋白表达与肾小球滤过率、24 h尿蛋白定量、血清肌酐、尿素氮等临床指标的相关性。结果健康人群组尿沉渣细胞涂片染色标本未见尿足细胞,而IgA肾病组尿沉渣细胞涂片染色标本尿足细胞数量为每20个高倍视野(12.54±2.89);不同肾脏病理Lee分级IgA肾病患者的尿足细胞数量、podocalyxin蛋白表达和24 h尿蛋白定量比较,差异有统计学意义(P<0.05),且不同肾脏病理Lee分级IgA肾病患者尿足细胞数量与24 h尿蛋白定量呈正相关(r=0.835 3,P<0.05),podocalyxin蛋白表达与24 h尿蛋白定量呈负相关(r=0.886 8,P<0.05)。结论尿足细胞数量、podocalyxin蛋白表达与IgA肾病的发病、发展密切相关。

α-硫辛酸对2型糖尿病患者尿podocalyxin及MCP-1排泄的影响

α-硫辛酸（alpha—lipoic acid，ALA）是一种存在于线粒体的酵素，通过清除氧自由基、还原体内抗氧化系统、螯合金属离子等发挥强抗氧化作用。临床上已被广泛用于治疗糖尿病相关并发症，但有关其对糖尿病肾脏足细胞的保护和抗炎作用的研究尚少。糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）发病机制复杂，现研究认为炎症反应及足细胞损伤参与了DN发生发展的全过程。

“调理脾胃针刺法”对2型糖尿病肾病大鼠足细胞中PCX、CD2AP、nephrin、desmin表达的影响

目的 研究“调理脾胃针刺法”对2型糖尿病肾病大鼠足细胞中足细胞标记蛋白(PCX)、CD2相关蛋白(CD2AP)、肾病蛋白(nephrin)、结蛋白(desmin)基因表达的影响,并阐明其可能的作用机制。方法 将70只健康雄性SD大鼠,随机分为模型组52只,空白组18只,将模型组大鼠喂养8周高脂高糖饲料之后,腹腔低剂量(30 mg·kg-1)注射链脲佐菌素,建立2型糖尿病肾病大鼠模型。将造模成功的36只大鼠按照血糖值,以及尿蛋白定性结果构成比,采用分层随机的方法分为针刺组4周(n=6),模型组4周(n=6);针刺组8周(n=6),模型组8周(n=6);针刺组12周(n=6),模型组12周(n=6)。空白组随机分为空白组4周(n=6)、空白组8周(n=6)、空白组12周(n=6)。将针刺组穿着针刺罩衣固定,采用“调理脾胃针刺法”干预,分别针刺4周、8周及12周。模型组和空白组予相同抓取固定。观测各组干预不同周期后,测定24h尿蛋白;采用HE染色光镜下观察大鼠肾脏病理变化情况;采用荧光定量PCR法检测PCX、CD2AP、nephrin和desmin mRNA表达水平。结果 4周、8周及12周后各组组间比较,针刺组24h尿蛋白含量低于模型组(P <0.05);肾脏HE染色,模型组肾小球增生,散在炎性细胞浸润,部分肾小管管腔变窄,系膜基质增生,基底膜轻度增厚,而针刺组上述病理变化均小于模型组(P <0.05);4周、8周及12周后各组组间比较,针刺组PCX、CD2AP和nephrin mRNA表达显著高于模型组(P <0.01);8周、12周后各组组间比较,针刺组desmin基因表达显著低于模型组(P <0.01)。结论 “调理脾胃针刺法”可降低2型糖尿病肾病大鼠24 h尿蛋白含量,通过其肾脏足细胞PCX、CD2AP、nephrin蛋白及基因表达的水平,降低desmin蛋白及基因表达的水平,以改善2型糖尿病肾病大鼠足细胞损伤,减轻肾小球基底膜增厚,从而延缓DN的进展,其降低尿蛋白含量的作用机制可能与此相关。

原发性高血压患者高血压类型、脉压、脉压指数与早期肾损害的关系

目的 探讨原发性高血压患者不同高血压类型、脉压、脉压指数与早期肾损害的关系.方法 将原发性高血压患者182例作为高血压组,另选取体检健康者30例作为对照组.收集各组清晨首次清洁中段尿,测定尿微量白蛋白（mALB）、尿足细胞标志蛋白podocalyxin （PCX）,计算比较高血压组和对照组及不同类型高血压组[单纯收缩期高血压（ISH）组,单纯舒张期高血压（IDH）组,收缩期高血压合并舒张期高血压（SDH）组]、不同脉压组（≤50 mmHg组、51 ～60 mmHg组、＞60 mmHg组）、不同脉压指数组（＜0.4％组、0.4％ ～0.5％组、＞0.5％组）mALB、PCX阳性率.结果 高血压组mALB、PCX阳性率较对照组高（P＜0.05或＜0.01）；且高血压组PCX阳性率较mALB阳性率高（P＜0.01）.高血压类型中ISH组、SDH组mALB、PCX阳性率较IDH组高（P均＜0.01）；且ISH组、SDH组PCX阳性率较mALB阳性率高（P均＜0.01）.脉压＞60 mmHg组mALB、PCX阳性率较≤50 mmHg组高（P均＜0.01）,且各不同脉压组PCX阳性率较mALB阳性率高（P均＜0.05）.脉压指数0.4％ ～0.5％组、＞0.5％组mALB、PCX阳性率较＜0.4％组高（P＜0.05或＜0.01）；且不同脉压指数组PCX阳性率较mALB阳性率高（P＜0.01）.结论 原发性高血压患者ISH、SDH比IDH更易发生肾损害,脉压和脉压指数越大肾损害的发生率越高,所以联合检测尿中mALB、PCX有利于早期诊断高血压肾损害.

夜间高血压对原发性高血压患者早期肾脏损害的影响

目的 :探讨夜间高血压对原发性高血压患者早期肾脏损害的影响。方法:入选原发性高血压患者182例,根据夜间平均血压是否>120/70 mm Hg(1 mm Hg=0.133 k Pa)分为两组,即夜间出现高血压者(>120/70 mm Hg)为观察组89例,夜间未出现高血压者(<120/70 mm Hg)为对照组93例。测定常规血生化指标及尿微量白蛋白(m ALB)、尿足细胞标志蛋白podocalyxin及血清胱抑素C水平。结果:(1)血压比较:观察组患者的夜间平均收缩压、夜间平均舒张压均高于对照组[分别为夜间平均收缩压(138.05±6.33)mm Hg vs(102.51±8.76)mm Hg、夜间平均舒张压(84.11±6.32)mm Hg vs(70.03±4.56)mm Hg,差异均有统计学意义(P均<0.05)]。(2)肾功能损伤标记物水平比较:观察组患者尿m ALB水平、尿足细胞标志蛋白podocalyxin水平、血清胱抑素C水平均高于对照组[分别为m ALB水平(13.60±0.69)mg vs(10.04±0.73)mg、尿足细胞标志蛋白podocalyxin水平(5.35±1.69)ng/ml vs(2.05±0.88)ng/ml、血清胱抑素C水平(1.35±0.69)mg/L vs(1.02±0.44)mg/L,差异均统计学意义(P均<0.05)]。(3)相关性分析:观察组患者尿足细胞标志蛋白podocalyxin水平与尿m ALB水平(r=0.675,P<0.05)、血清胱抑素C水平(r=0.734,P<0.05)、夜间血压水平(r=0.830,P<0.05)、患者患病年限(r=0.688,P<0.05)均呈正相关。结论:夜间高血压患者较昼间血压升高患者更易发生肾损害,联合检测尿m ALB、尿足细胞标志蛋白podocalyxin及血清胱抑素C有利于对高血压肾损害的早期诊断。

PODXL参与瘢痕疙瘩成纤维细胞的过度增殖

目的探讨podocalyxin样蛋白(PODXL)基因对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡的影响。方法RT-qPCR检测正常皮肤成纤维细胞(hDF)和瘢痕疙瘩成纤维细胞(hKF)中PODXL mRNA的表达量;用重组PODXL基因的shRNA慢病毒表达载体感染瘢痕疙瘩成纤维细胞下调PODXL基因的表达量;EdU法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞的周期和凋亡率;蛋白质印迹(Western blot)检测细胞中磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、丝苏氨酸蛋白激酶(AKT)总蛋白和磷酸化蛋白。结果与正常皮肤成纤维细胞相比,PODXL mRNA在瘢痕疙瘩成纤维细胞中的表达量显著增加(P<0.05);下调PODXL基因表达显著抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖(P<0.05),阻滞细胞周期于S期,促进细胞的凋亡(P<0.05),降低PI3K和AKT磷酸化蛋白水平(P<0.05)。结论PODXL在瘢痕疙瘩成纤维细胞中的表达量显著增加;下调PODXL基因表达可能通过抑制PI3K/AKT信号通路激活,从而将细胞周期阻滞在S期,抑制细胞的增殖和诱导凋亡。

糖肾康颗粒对糖尿病肾病患者尿蛋白的影响

目的:观察糖肾康颗粒对糖尿病肾病患者PCX、Nephrin、Podocin表达的干预作用。方法:72例糖尿病肾病患者随机分为观察组和对照组各36例,最终完成69例,观察组35例,对照组34例。观察组与对照组均给予基础治疗,观察组加服糖肾康颗粒口服,每日3次,每次10g。两组疗程均为8周。观察两组的临床疗效、中医证候积分变化、治疗前后UACR、24hUPr及尿中PCX、Nephrin、Podocin蛋白的变化情况。结果:观察组临床疗效和中医证候疗效均优于对照组(P<0.05)。两组治疗后中医证候积分、UACR、24hUPr较治疗前均显著下降(P<0.01),但观察组均显著优于对照组(P<0.01)。两组治疗前尿PCX、Nephrin、Podocin水平均高于正常组(P<0.01);治疗后两组尿PCX、Nephrin、Podocin水平均较治疗前降低(P<0.05或P<0.01),但观察组均显著优于对照组(P<0.05)。结论:糖肾康颗粒可有效改善糖尿病肾病患者的临床症状,减少尿蛋白,其作用机制可能与保护足细胞而降低尿中PCX、Nephrin、Podocin蛋白的表达有关。

尿足细胞标志蛋白、血清胱抑素和高敏C反应蛋白联合检测诊断早期糖尿病肾病的价值

目的探讨糖尿病患者尿足细胞标志蛋白(PCX)、血清胱抑素C(CysC)和高敏C反应蛋白(hs-CRP)的变化对早期糖尿病肾病的诊断价值。方法对糖尿病患者(110例)和正常人(45例)尿PCX、血清CysC、hs-CRP和肌酐(Cr)水平进行联合检测,观察上述指标与病程和病情的关系。结果糖尿病患者尿PCX、血清CysC和hs-CRP水平显著高于正常人,而血Cr水平与正常人比较无显著性差异。随着糖尿病病程的延长和肾脏病变的加重,上述各项指标增加更为明显。结论联合检测糖尿病患者尿PCX、血清CysC和hs-CRP有助于糖尿病肾病的早期诊断。

特发性膜性肾病中抗M型磷脂酶A2受体抗体、血管生成素样蛋白-4及可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体的临床意义

目的:探讨血清抗M型磷脂酶A2受体(anti-M typephospholipase A2 receptor,PLA2R)抗体、可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(soluble urokinase plasminogen activator receptor,suPAR)和尿液血管生成素样蛋白-4(angiopoietin-like protein 4,Angptl4)在特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)诊断中的临床意义。方法:以2012年6月—2016年12月南通大学附属医院肾内科经肾活检确诊为膜性肾病(membranous nephropathy,MN)的47例患者和同期10例健康成人为研究对象。MN包括IMN 30例,继发性膜性肾病(secondary membranous nephropathy,SMN)17例,其中包括肿瘤相关性MN 6例,狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)6例,乙型肝炎病毒相关性MN(hepatitis B virus-associated membranous nephropathy,HBV-MN)5例。应用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunoabsorbent assay,ELISA)检测其血清抗PLA2R抗体、suPAR和尿液中Angptl4和足糖萼蛋白(podocalyxin,PCX)蛋白水平;应用免疫组化法检测肾组织中PLA2R和Angptl4表达。比较各组血清抗PLA2R抗体、suPAR和尿液Angptl4蛋白的表达水平,并分析IMN组血清抗PLA2R抗体、suPAR和尿液Angptl4蛋白表达与各临床指标的相关性。结果:IMN组血清抗PLA2R抗体及尿液Angptl4蛋白表达均显著高于SMN组和对照组(P<0.05),各组血清suPAR水平差异无统计学意义(P>0.05)。血清抗PLA2R抗体在IMN组、SMN组和对照组阳性率分别为70%、29.4%、0。IMN组血清抗PLA2R抗体表达水平与24 h尿蛋白、尿液PCX蛋白呈正相关,与血清白蛋白呈负相关;尿液Angptl4蛋白表达水平与PCX蛋白呈正相关。IMN组肾组织中PLA2R和Angptl4阳性表达显著高于其他组(P<0.05)。结论:血清抗PLA2R抗体可作为诊断IMN的特异性指标,并与病情密切相关。血清suPAR对诊断IMN无意义。尿液Angptl4蛋白测定可作为血清抗PLA2R抗体阴性时辅助诊断IMN的新指标。

研究PODXL在肾透明细胞癌中的表达及相关意义

目的:研究足细胞标志蛋白在透明细胞肾细胞癌组织与正常组织中的表达差异,并初步分析足细胞标志蛋白与肾透明细胞癌的临床诊断和患者预后的关系。方法:运用癌症基因组图谱数据库收集转录组测序技术数据和临床数据,观察透明细胞肾细胞癌患者组织与正常组织中足细胞标志蛋白基因表达量的差异,同时分析足细胞标志蛋白与临床病理学及预后之间的关系。结果:在癌症基因组图谱数据库中,总体526例透明细胞肾细胞癌样本的癌和癌旁组织中的足细胞标志蛋白的表达水平分别为(6.42±1.42)和(3.61±1.31),差异有统计学意义(P<0.001)。72例配对的透明细胞肾细胞癌和癌旁组织中的足细胞标志蛋白表达水平分别为(6.55±1.23)和(3.53±1.35),差异有统计学意义(P<0.001)。足细胞标志蛋白的表达因患者性别、病理分级、TNM分期、远处转移、临床分期等不同均有差异(P<0.001)。生存分析发现,足细胞标志蛋白低表达量组和高表达量组的生存时间分别为(1446.75±956.32)d和(1253.81±939.57)d,差异有统计学意义(P<0.001)。受试者工作特征曲线结果显示,足细胞标志蛋白基因可作为一个灵敏度和特异度较高的透明细胞肾细胞癌诊断指标:其中ROC曲线下面积为0.805,敏感性为67.26%,特异性为78.17%。结论:足细胞标志蛋白在透明细胞肾细胞癌中高表达与临床病理特征呈正相关,是预后不良因素,有望作为肾透明细胞癌患者的生存预后及诊断的潜在生物学标志。

初诊2型糖尿病患者尿PCX和Nephrin及单核细胞趋化蛋白-1联合检测对早期糖尿病肾病的预测价值

目的:通过对初诊2型糖尿病患者尿PCX,Nephrin及单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)进行检测,探讨三者对早期糖尿病肾病的预测价值。方法:选择2011年5月—2011年12月住院初诊2型糖尿病患者132例,正常对照(N)组36例,尿白蛋白/尿肌酐(UAlb/UCR)<30 mg/g为糖尿病(DM)组56例,UAlb/UCR≥30 mg/g为糖尿病肾病(DN)组76例。检测尿PCX(UPCX),Nephrin(UNephrin),MCP-1(UMCP-1),白蛋白(UAlb)及尿肌酐(UCR)。比较各组UPCX/UCR,UNephrin/UCR,UMCP-1/UCR的差异及2型糖尿病患者上述各指标间的相关性及与UAlb/UCR的相关性,计算糖尿病患者UMCP-1/UCR,UNephrin/UCR,UPCX/UCR及三者联合检测的阳性率,并与UAlb/UCR的阳性率进行比较分析。结果:UPCX/UCR,UMCP-1/UCR水平糖尿病组分别为(37.37±22.83)μg/g和(47.19±29.98)ng/g,比正常对照组明显升高(P<0.05);UAlb/UCR,UPCX/UCR和UMCP-1/UCR水平DN组比DM组和正常对照组明显升高(P<0.05);UNephrin/UCR水平DN组较DM组明显升高(P<0.05)。2型糖尿病患者UPCX/UCR,UMCP-1/UCR和UNephrin/UCR水平与UAlb/UCR呈正相关(r=0.619;0.568;0.535)(P<0.05);UPCX/UCR水平与UMCP-1/UCR和UNephrin/UCR呈正相关(r=0.799;0.718)(P<0.05),UNephrin/UCR水平与UMCP-1/UCR水平呈正相关(r=0.635,P<0.05);UMCP-1/UCR,UNephrin/UCR and UPCX/UCR的阳性率较UAlb/UCR显著升高(χ2=9.818,6.673,5.395,P<0.05)。结论:尿PCX,Nephrin和MCP-1单独或联合检测在早期糖尿病肾病诊断中具有重要的应用价值。

乙型肝炎病毒相关性肾炎足细胞顶端膜蛋白podocalyxin的变化及拉米夫定的干预

目的探讨乙型肝炎病毒相关性肾炎（HBV-GN）足细胞顶端膜蛋白podocalyxin的改变及拉米夫定干预后的变化。方法将67例HBV—GN患者作为观察组；60例健康查体者为对照组，观察尿中足细胞计数和podocalyxin（PCX）的改变及拉米夫定治疗后的变化。结果67例不同病理类型患者尿中足细胞计数和PCX的含量均较对照组为高；与尿蛋白定量呈正相关；拉米夫定治疗后尿中足细胞计数和PCX的含量均较治疗前明显下降。结论HBV—GN患者尿足细胞计数及PCX的变化与肾脏组织的损伤程度相关；通过拉米夫定的抗病毒治疗有利于损伤足细胞的修复；尿足细胞计数及尿PCX是反映肾组织病变的灵敏指标。

受体相关蛋白不同区段对Heymann肾炎大鼠足细胞瞬时受体电位阳离子通道蛋白6、synaptopodin及podocalyxin表达和分布的影响

目的观察受体相关蛋白（RAP）不同区段对被动型Heymann肾炎（PHN）大鼠足细胞瞬时受体电位阳离子通道蛋白6（TRPC6）、synaptopodin、podocalyxin表达和分布的影响。方法给雄性SD大鼠分别注射兔抗RAP全长（RAP—FL组）、氨基端（RAP—N组）和羧基端（RAP—C组）抗血清，建立相应3种PHN模型，对照组注射等量正常兔血清。分别于造模前和造模1周末检测24h尿蛋白量、血清白蛋白和肌酐；造模1周末取大鼠肾皮质行光镜病理及间接免疫荧光激光共聚焦显微镜观察足细胞TRPC6、synaptopodin、podocalyxin的表达和分布。结果造模1周末各模型组24h尿蛋白量显著高于自身造模前和对照组，差异均有统计学意义（均P〈0．01），血清白蛋白和肌酐无明显改变。光镜下各模型组均见肾小球基底膜节段性不均匀增厚，系膜细胞和系膜基质无明显增生。间接免疫荧光激光共聚焦显微镜观察显示，对照组足细胞TRPC6、synaptopodin、podocalyxin沿肾小球基底膜呈均匀、连续线样分布；各模型组TRPC6沿肾小球基底膜呈团块状不均匀分布，荧光强度较对照组有不同程度增强，RAP—FL组较RAP-N组和RAP—C组更为明显，差异有统计学意义（P〈0．05），RAP—N组和RAP—C组间差异无统计学意义（P〉0．05）；各模型组synaptopodin和podocalyxin沿肾小球基底膜呈点状、短线状不连续分布，部分节段表达缺失，荧光强度较对照组均有不同程度的减弱，差异均有统计学意义（均P〈0.05）；各模型组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论RAP全长及其羧基端与氨基端均存在病理性抗原决定簇，在PHN模型中可上调TRPC6表达，但下调synaptopodin和podocalvxin表达，并改变它们的分布模式，与PHN蛋白尿的发生有关，但在PHN发病中的病理作用仍有待进一步研究。

足糖萼蛋白对恶性肿瘤预后的影响及其作用机制

足糖萼蛋白(podocalyxin-like protein,PODXL)是一种细胞表面的跨膜蛋白,其表达与多种恶性肿瘤的预后不良相关,并可以作为上述肿瘤预后的独立预测因子。PODXL的表达在转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β诱导肿瘤细胞EMT的过程中也显著增加。PODXL可以促进多种癌细胞侵袭和迁移,但其在肿瘤发生中的作用机制还不清楚,了解PODXL在肿瘤发生和发展中的作用便于全面分析PODXL在肿瘤中的作用及机制。

尿视黄醇结合蛋白、尿触珠蛋白、尿足细胞标志蛋白、尿肾小球裂隙膜蛋白联合检测对2型糖尿病肾病早期诊断的意义

目的探讨URBP、UHP、UPCX和UNephrin联合检测对糖尿病肾病早期诊断的价值。方法选择2型糖尿病患者180例(分3组),对照组60例。比较4组URBP、UHP、UPCX和UNephrin水平,分析各指标和联合检测预测DN的ROC及AUC。为减少受试者尿液浓度变化对测试结果的影响,结果均以除尿肌酐(UCR)的相应结果表示。结果UPCX/UCR水平DM组与对照组差异无统计学意义(P>0.05);其他各组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。UHP:AUC为0.772,特异度为56.91%,敏感度为85.47%;UPCX:AUC为0.759,特异度为51.22%,敏感度为88.89%;UNephrin:AUC为0.777,特异度为64.23%,敏感度为78.63%;URBP:AUC为0.890,特异度为85.37%,敏感度为78.63%;联合检测:AUC为0.924,特异度为86.18%,敏感度为88.89%。联合检测和单独检测相比,敏感度和特异度明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论URBP、UHP、UPCX和UNephrin联合检测在早期糖尿病肾病诊断中具有重要的临床价值。