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蜜蜂毒中蜂毒素的分离纯化方法及含量测定 被引量:12
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作者 刘岭 凌昌全 +1 位作者 胡晋红 黄雪强 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期609-611,共3页
目的 :从蜜蜂毒中分离纯化蜂毒素 (melittin) ,建立以 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS- PAGE)及 HPL C进行蜂毒素定性定量分析的方法。 方法 :用 Sephadex G- 2 5、Sephadex G- 5 0、Sephadex G- 75三步层析法从蜜蜂毒中分离纯化蜂毒素 ,... 目的 :从蜜蜂毒中分离纯化蜂毒素 (melittin) ,建立以 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS- PAGE)及 HPL C进行蜂毒素定性定量分析的方法。 方法 :用 Sephadex G- 2 5、Sephadex G- 5 0、Sephadex G- 75三步层析法从蜜蜂毒中分离纯化蜂毒素 ,以SDS- PAGE定性 ,以 HPL C进行含量测定。结果 :样品经 SDS- PAGE测定为单一条带 ,相对分子质量约 30 0 0。 HPL C含量测定 ,平均回收率为 95 .97% ,相对标准差 (RSD)为 1.0 7%。结论 :以上述分离纯化法可制得高纯度的蜂毒素 ,检测方法准确、可靠、简单。 展开更多
关键词 蜂毒素 色谱法 凝胶 聚丙烯酰胺凝胶 高压液相 SDS-PAGE HPLC
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蓖麻蚕不同组织器官中胰蛋白酶抑制剂的种类与分析 被引量:3
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作者 王凌燕 钟晓武 +3 位作者 张艳 莫现会 谭祥 赵萍 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期761-766,共6页
胰蛋白酶抑制剂(TI)是鳞翅目昆虫体内广泛存在的一种蛋白酶抑制剂,主要功能是抑制胰蛋白酶的降解。采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和胰蛋白酶抑制剂活性染色,对18个蓖麻蚕品种5龄第5天的血液及其它组织中TI种类的分布进行了调查。经... 胰蛋白酶抑制剂(TI)是鳞翅目昆虫体内广泛存在的一种蛋白酶抑制剂,主要功能是抑制胰蛋白酶的降解。采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和胰蛋白酶抑制剂活性染色,对18个蓖麻蚕品种5龄第5天的血液及其它组织中TI种类的分布进行了调查。经碱性聚丙烯酰胺凝胶电泳,在血液中共检测到8种TIs,分别命名为ETI-1~ETI-8,品种间存在多态性分布;在头和脂肪体中分别检测到1种TI;在体壁中检测到3种TIs。经酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳,在血液中共检测到4种TIs,分别命名为ETI-b1、ETI-b2、ETI-b3和ETI-b4,品种间种类分布无差异;在血液中检测到的TI包含了在头、脂肪体和体壁中检测到的TI种类。 展开更多
关键词 蓖麻蚕 胰蛋白酶抑制剂 分布 品种 组织 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
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小切口、持续负压引流与传统切开引流治疗聚丙烯酰胺水凝胶隆乳术后乳腺脓肿的比较 被引量:4
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作者 郑轲 何山 +2 位作者 刘兵 刘美宏 冯佳 《四川医学》 CAS 2012年第10期1731-1732,共2页
目的探讨小切口、持续负压引流治疗聚丙烯酰胺水凝胶隆乳术后乳腺脓肿的效果。方法 20例患者采用小切口、持续负压引流和20例患者采用传统切开油纱填塞引流治疗聚丙烯酰胺水凝胶隆乳术后乳腺脓肿,观察治疗效果。结果小切口、持续负压引... 目的探讨小切口、持续负压引流治疗聚丙烯酰胺水凝胶隆乳术后乳腺脓肿的效果。方法 20例患者采用小切口、持续负压引流和20例患者采用传统切开油纱填塞引流治疗聚丙烯酰胺水凝胶隆乳术后乳腺脓肿,观察治疗效果。结果小切口、持续负压引流组在愈合时间、换药次数、疼痛程度、瘢痕大小等方面均明显优于传统切开引流组。结论持续负压引流组可以明显缩短愈合时间,减少换药次数,减轻换药痛苦,减少瘢痕形成。是治疗聚丙烯酰胺水凝胶隆乳术后乳腺脓肿最理想方法。 展开更多
关键词 聚丙烯酰胺水凝胶 乳腺脓肿 负压引流
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超声波刺激对绞股蓝幼苗的POD同工酶影响 被引量:2
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作者 邹芳平 肖娅萍 +1 位作者 张传军 庞敏 《陕西师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期96-98,共3页
运用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)方法研究了用不同时间的超声波处理对绞股蓝幼苗的过氧化物酶(POD)同工酶表达的影响.结果表明,适当剂量的超声波处理能够促进绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum)过氧化物酶同工酶的表达;超声波处理后的绞股... 运用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)方法研究了用不同时间的超声波处理对绞股蓝幼苗的过氧化物酶(POD)同工酶表达的影响.结果表明,适当剂量的超声波处理能够促进绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum)过氧化物酶同工酶的表达;超声波处理后的绞股蓝与对照相比,过氧化物酶同工酶在酶带数目和活性上都有明显增加,尤其以T6和T12的条带数最多且染色较深. 展开更多
关键词 绞股蓝 超声波 过氧化物酶同工酶 PAGE
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盐析法联合离子液体双水相纯化木瓜蛋白酶 被引量:3
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作者 曾颖 余垒 +2 位作者 朱新儒 李雄 张海德 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第24期261-267,共7页
本实验以海南产番木瓜为研究对象,采取盐析法联合离子液体双水相对其富含的木瓜蛋白酶进行提取纯化。以不同饱和度的(NH_4)_2SO_4对粗酶液进行盐析,通过实验结果分析,确定了以饱和度分别为20%和45%的两步盐析法的最佳条件。然后再进行... 本实验以海南产番木瓜为研究对象,采取盐析法联合离子液体双水相对其富含的木瓜蛋白酶进行提取纯化。以不同饱和度的(NH_4)_2SO_4对粗酶液进行盐析,通过实验结果分析,确定了以饱和度分别为20%和45%的两步盐析法的最佳条件。然后再进行双水相萃取,通过单因素试验结果设计3因素3水平的响应面试验,优化双水相萃取条件为离子液体[C_4mim]N(CN)_2质量分数29.76%、(NH_4)_2SO_4质量分数16.08%、pH 8.18,在此最优条件下木瓜蛋白酶萃取率为89.01%,酶活力回收率为86.72%,所得到木瓜蛋白酶比活力为1 056 U/mg,纯化倍数达到9.6倍。然后对实验产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,经纯化的酶中杂条带明显减少,验证了分离纯化的效果。 展开更多
关键词 番木瓜 木瓜蛋白酶 盐析 离子液体 双水相 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
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人晶状体蛋白的质谱分析 被引量:2
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作者 姚志斌 曲勃 +1 位作者 赵宇 张劲松 《国际眼科杂志》 CAS 2010年第10期1888-1891,共4页
目的:应用质谱法检测人晶状体蛋白质组成。方法:完整晶状体预分离后再通过1D SDS-PAGE凝胶分离晶状体蛋白质,依照考马斯亮蓝染色后的结果分成条带后进行胶内酶解,酶解后的肽段通过反相液相色谱再次分离,用线性离子阱串联质谱仪(LTQ)对... 目的:应用质谱法检测人晶状体蛋白质组成。方法:完整晶状体预分离后再通过1D SDS-PAGE凝胶分离晶状体蛋白质,依照考马斯亮蓝染色后的结果分成条带后进行胶内酶解,酶解后的肽段通过反相液相色谱再次分离,用线性离子阱串联质谱仪(LTQ)对洗脱出的肽段进行分析。运用生物信息学方法分析鉴定出的蛋白质。结果:共鉴定出人晶状体蛋白质574种,许多未知蛋白和蛋白亚型被鉴定出,相似于某种蛋白有38种,不确定蛋白有56种,没有特征的蛋白有27种,已知分子质量但不知功能蛋白有42种。通过生物信息学分析实验鉴定出的晶状体蛋白质数据,获得晶状体蛋白质一些重要代谢过程的结果。结论:提供大量未知人晶状体蛋白质数据及其代谢过程。 展开更多
关键词 晶状体蛋白质类 电泳 聚丙烯酰氨凝胶 反相高效液相色谱 质谱法 生物信息学
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内淋巴囊上皮细胞单克隆抗体的制作和特性 被引量:4
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作者 张榕 朴泽孝治 绵谷秀弥 《中华耳鼻咽喉科杂志》 CAS CSCD 1997年第6期357-359,共3页
以显微解剖法取出的豚鼠内淋巴囊经超声波处理后,以其提取液作为原始抗原,探讨建立能够分泌识别内淋巴囊表面上皮细胞的单克隆抗体(McAb)的系列杂交瘤。应用电镜免疫化学和Western印迹法和聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-P... 以显微解剖法取出的豚鼠内淋巴囊经超声波处理后,以其提取液作为原始抗原,探讨建立能够分泌识别内淋巴囊表面上皮细胞的单克隆抗体(McAb)的系列杂交瘤。应用电镜免疫化学和Western印迹法和聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测定,该抗体显示具有和内淋巴囊上皮细胞进行显著的免疫组织化学反应的活性,类似的反应出现在肾脏的近曲小管和亨氏袢的上皮细胞上,与其它15个脏器(包括大脑、膀胱、胆囊、肺和肝脏等)无明显的交叉反应。所建立的单克隆抗体系列中,抗体亚型包括IgG1、IgG2b、IgM。此系列抗体分子量约为74000。该分子在内淋巴囊上皮细胞的构成和功能上的作用有待研究。 展开更多
关键词 内淋巴囊 抗体 单克隆 交叉反应 免疫印迹法
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钙亲和层析分离纯化光系统Ⅱ中的钙结合蛋白(Ⅰ) 被引量:1
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作者 张立新 李文瑞 +1 位作者 文江祁 梁厚果 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第5期45-48,共4页
Sepharose6B经环氧氯丙烷活化后,与亚氨基二乙酸钠偶联。用钙离子作配体从光系统Ⅱ中分离纯化得到一种钙结合蛋白,在SDS-聚丙烯酰胺凝胶上此蛋白呈现单一电泳谱带,分子量约为30kDa。根据Arnon和Bradf... Sepharose6B经环氧氯丙烷活化后,与亚氨基二乙酸钠偶联。用钙离子作配体从光系统Ⅱ中分离纯化得到一种钙结合蛋白,在SDS-聚丙烯酰胺凝胶上此蛋白呈现单一电泳谱带,分子量约为30kDa。根据Arnon和Bradford方法测定的结果表明该蛋白质是叶绿素a/b结合蛋白,每分子蛋白约结合有5分子叶绿素a,2分子叶绿素b和一定数量的胡萝卜素分子。 展开更多
关键词 光系统Ⅱ颗粒 钙结合蛋白 叶绿素a/b结合蛋白 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
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蛋白质组研究的进展 被引量:3
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作者 马歌丽 《郑州轻工业学院学报》 2001年第2期7-10,共4页
蛋白质组研究的目的在于利用双向凝胶电泳、质谱技术等手段从整体上研究蛋白质的水平和修饰状态 ,以便阐明生命现象的本质和活动规律 .通过对细菌、酵母等模式生物蛋白质组研究 ,人类蛋白质组研究取得了一定进展 .蛋白质组研究速度的提... 蛋白质组研究的目的在于利用双向凝胶电泳、质谱技术等手段从整体上研究蛋白质的水平和修饰状态 ,以便阐明生命现象的本质和活动规律 .通过对细菌、酵母等模式生物蛋白质组研究 ,人类蛋白质组研究取得了一定进展 .蛋白质组研究速度的提高有赖于新技术手段的应用和生物信息学的发展 .揭示蛋白质之间的相互作用关系并建立其网络图是蛋白质组研究的热点 .蛋白质组研究成果的应用将带来工业、农业。 展开更多
关键词 蛋白质组 人类基因组计划 双向凝胶电泳 生物信息学 数据库 研究进展
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人胆囊组织蛋白质表达谱的建立
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作者 钱昌林 杨林 +3 位作者 陈进宏 蔡端 王丽影 查锡良 《外科理论与实践》 2010年第1期38-42,共5页
目的:建立胆固醇结石病人与正常人胆囊组织的蛋白质表达谱,用于比较胆囊组织的蛋白质组学研究,为阐明胆石成因提供实验依据。方法:提取胆固醇结石病人及正常人的胆囊壁组织总蛋白,构建相应的双向电泳表达图谱,应用ImageMaster图像分析... 目的:建立胆固醇结石病人与正常人胆囊组织的蛋白质表达谱,用于比较胆囊组织的蛋白质组学研究,为阐明胆石成因提供实验依据。方法:提取胆固醇结石病人及正常人的胆囊壁组织总蛋白,构建相应的双向电泳表达图谱,应用ImageMaster图像分析软件对双向电泳图谱进行图像分析。结果:两组样本均获得分辨率高、重复性好的双向电泳图谱,胆固醇结石组与正常组病人组内蛋白质平均匹配点数分别为632±61和606±64,各匹配率分别为73.46%和71.49%。组间蛋白质平均匹配点为474,匹配率为70.64%。胆固醇结石病人的28个蛋白点表达上调,7个点表达下调,与正常人间蛋白表达差异明显(P<0.05)。结论:初步建立了胆固醇结石病人与正常人胆囊组织的差异蛋白质表达谱,分析两者间差异蛋白点,为胆石成因研究提供实验基础。 展开更多
关键词 胆固醇胆结石 双向凝胶电泳 比较蛋白质组学 胆囊
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Analysis of isoperoxidases of Populus spp. in Heilongjiang Province
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作者 苏含英 《Journal of Forestry Research》 SCIE CAS CSCD 1999年第2期95-98,共4页
Isoperoxidases of fourteen species of poplars in Heilongjiang Province were analyzed by polyacrylamidegel disc-electrophoresis. The major zymogram of petioles of poplars was consisted of twelve kinds of isoenzymes, in... Isoperoxidases of fourteen species of poplars in Heilongjiang Province were analyzed by polyacrylamidegel disc-electrophoresis. The major zymogram of petioles of poplars was consisted of twelve kinds of isoenzymes, in which 35% zymogram was just the same and represented the specialized zymograms of poplars. The resuits of the experiments showed that the closer the affinity relationships of the species were, the greater the similar values between the zymograms were. There were very great similar values among natural hybrid species.But in sect. Tacamahaca Spach, the similar values between Populus koreana Rehder and P nakaii Skv were obviously smaller .Isoenzyme analysis provided new information for plant classification on the molecular level. 展开更多
关键词 POPLAR Isoperoxidases polyacrylamidegel disc-electrophoresis
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谷子单籽粒醇溶蛋白提取方法的建立及其在杂交种纯度鉴定中的应用 被引量:1
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作者 崔燕娇 刘丹 +3 位作者 赵子龙 李素英 张静 刘正理 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2022年第4期1149-1152,共4页
谷子[Setaria italica (L.) P.Beauv]是起源于中国的一种古老作物,营养价值高,富含人体所需的多种维生素、氨基酸和矿物质,具有抗旱、耐瘠薄、抗逆性强的特点,尤其适合在北方干旱和半干旱地区种植。杂种优势利用已经成为提高作物产量的... 谷子[Setaria italica (L.) P.Beauv]是起源于中国的一种古老作物,营养价值高,富含人体所需的多种维生素、氨基酸和矿物质,具有抗旱、耐瘠薄、抗逆性强的特点,尤其适合在北方干旱和半干旱地区种植。杂种优势利用已经成为提高作物产量的有效途径,在谷子杂交种应用方面已经获得了一定突破。谷子杂交种是由不育系母本和恢复系父本配组育成的两系杂交种,且母本具有5%左右的自交结实率,因此在制种过程中不可避免地会导致杂交种中混杂一定的不育系自交种。此外,由于授粉时杂株花粉的污染、收获时的机械混杂以及收获后的处理程序等原因,也会导致杂交种中混有恢复系和其他假杂交种,从而严重影响谷子杂交种的纯度。这些假杂种或者几乎没有产量,或者产量明显低于真杂交种,它们的存在必然导致杂交种增产潜力得不到充分发挥。因此,如何有效地鉴定谷子杂交种的纯度,成为保证杂交种增产效果的重要一环。 展开更多
关键词 谷子 杂交种纯度鉴定 醇溶蛋白 单粒种子 A-PAGE
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