草甘膦对小鼠的致突变作用研究

背景与目的:研究草甘膦对小鼠的致突变作用。材料与方法:采用骨髓微核试验:以不同剂量(2320、1160、580mg/kg)的草甘膦分2次经口灌胃染毒小鼠,每次间隔24h,于末次染毒后6h处死小鼠,检测骨髓嗜多染红细胞微核率;雄性小鼠精子畸形试验:设1160、580、290mg/kg的3个草甘膦剂量组,经口灌胃连续染毒5d,于首次染毒后第1、4周分2批处死动物,常规观察精子畸形率、精子数和睾丸、附睾重量及其脏器系数的变化。两种实验同时设阴性对照组(蒸馏水)和阳性对照组(CP40mg/kg)结果:2320mg/kg剂量组的微核率明显高于阴性对照组(P<0.01),染毒剂量与骨髓微核率呈现剂量依赖关系(r=0.588,P<0.01)。草甘膦染毒后1周,与阴性对照组比较,580mg/kg、1160mg/kg剂量组的精子畸形率增加而精子数减少(P<0.05,P<0.01),1160mg/kg剂量组的附睾重量及附睾系数明显下降(P<0.05);草甘膦染毒后4周,与阴性对照组比较,1160mg/kg剂量组的精子畸形率增高,精子数减少(P<0.05),睾丸和附睾重量减轻。结论:在本实验条件下,草甘膦对小鼠具有生殖毒性并具有一定的致突变作用。

取样时间对小鼠骨髓和外周血嗜多染红细胞微核率的影响

目的 :比较一次给药后不同采样时间对鼠外周血和骨髓嗜多染红细胞微核率的影响。方法 :ICR小鼠一次腹腔注射 (IP)MMC 2 0mg/kg .bw或CP 40mg/kg .bw ,后 12h、18h、2 4h、32h、48h、72h采外周血及骨髓涂片 ,Giemsa染色 ,计数嗜多染红细胞及其微核数。结果 :一次IPMMC或CP后 12h即可观察到小鼠骨髓PCE微核率增高 ,分别在给药后 2 4h、32h达到高峰 ,此后逐渐下降 ,到 72h已接近对照组水平 ;而外周血PCE微核率的显著增高则出现在给药后的 2 4h ,在 48h达到高峰。结论 :外周血PCE作为微核试验靶细胞与骨髓PCE的检测敏感性相同 ,但外周血PCE微核高峰出现较骨髓延迟约 12～ 2 4h ;在检测化学物对骨髓细胞毒性方面 ,外周血与骨髓的检测灵敏性也相同。

氚水的内照射损伤实验研究

为探讨氚水染毒后小鼠外周血白细胞总数和骨髓嗜多染红细胞微核率的改变,小鼠腹腔注入不同初始量的氚水,2、4、6、10和28 d眼球摘除取血,处死后取两侧股骨,并计数外周血白细胞总数和骨髓嗜多染红细胞微核率。结果表明,随氚水初始注入量的增加,骨髓嗜多染红细胞微核率相应增高(p<0.05),外周血白细胞总数相应降低,但只有初始注入量为16.65×105Bq/g的剂量组差异有统计学意义。氚水初始注入量相同时,随注入后时间延长,骨髓嗜多染红细胞微核率持续增加,外周血白细胞总数第2天至第6天持续下降(p<0.05),第10天后已恢复。表明外周血白细胞和骨髓嗜多染红细胞微核,可作为氚水染毒后的早期辐射损伤指标。

苯诱导小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的研究

目的探讨苯对小鼠体细胞遗传物质的影响。方法采用静式吸入法染毒,将50只动物随机分成阴性对照组、阳性对照组及0.3、0.6、1.2g/m33个剂量组,剂量组每隔24h染毒1次,每次2h,共15d,取胸骨骨髓作微核计数,分析受试小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率。结果苯染毒低、中、高3个剂量组的微核率与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),并呈现剂量-反应关系。结论苯能诱导小鼠体细胞微核增加。

中药紫草的遗传毒性实验研究

目的 探讨中药紫草水煎液对成年小鼠及胚胎鼠的遗传毒性。 方法 采用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验法、小鼠胚胎肝细胞转移微核实验法。 结果 成年小鼠与孕鼠分别灌胃紫草水煎液剂量为 1.0 g/ kg,诱发小鼠骨髓和胎鼠肝嗜多染红细胞的微核率分别为 ( 3.8± 1.0 )‰ ,( 3.8± 1.4 )‰ ,与阴性对照组 ( 2 .5± 1.5 )‰ ,( 2 .8± 1.1)‰比较 ,差异无显著性 ( t1 =0 .9,t2 =2 .1,P>0 .0 5 ) ,5 .0 g/ kg时就可诱发微核率阳性 ,微核率分别为 ( 4 .6± 2 .1)‰ ,5 .9± 1.7)‰ ,与阴性对照组比较 ,差异有显著性 ( t1 =2 .4 ,t2 =4 .3,P<0 .0 1) ;若灌胃剂量达 10 .0 g/ kg、 2 0 .0 g/kg时 ,微核率分别为 ( 7.1± 1.8)‰ ,( 8.8± 2 .2 )‰ ,( 9.3± 1.8)‰ ,与阴性对照组相比差异有显著性 ( t1 =5 .8,t2 =9.7,t3=8.4 ,P<0 .0 1)。 结论 一定剂量的中药紫草水煎液对小鼠遗传物质具有潜在的遗传毒性 ,并呈剂量 -反应关系。故在临床对于用药剂量及不同人群 。

环磷酰胺剂量、取样时间对小鼠骨髓微核率的影响

背景与目的:观察NIH小鼠在给予不同剂量环磷酰胺(Cyclophosphamide,CP)后不同取样时间点的骨髓嗜多染红细胞(Polychromatic erythrocytes,PCE)微核率的变化。材料与方法:小鼠一次性腹腔注射CP40、80mg/kg后,于18、24、48h取胸骨骨髓涂片,Giemsa染色,计数1000个PCE中含有微核的细胞数(微核率)及200个红细胞中PCE与正染红细胞(Normochromatic erythrocytes,NCE)的比值。结果:小鼠在给予40mg/kg和80mg/kgCP后的骨髓微核率随取样时间的变化趋势是一致的,给药后一段时间逐渐升高,24h达高峰,之后又逐渐下降。给药组各时间点的微核率与对照组相比差异均有统计学意义,而给药组PCE与NCE比值与对照组的比较差异均无统计学意义,提示小鼠一次腹腔注射40mg/kg和80mg/kgCP后对骨髓细胞无明显抑制作用。80mg/kgCP剂量组各时间点上的微核率显著高于40mg/kg剂量组,表现出明显的剂量_反应关系。结论:在本实验室条件下,40mg/kg和80mg/kgCP均可致小鼠骨髓嗜多染红细胞的微核率显著增加,具有剂量_反应关系。在一次性腹腔注射环磷酰胺后24h观察所得微核率最高。故认为环磷酰胺可用作微核试验的阳性对照,剂量范围为40～80mg/kg,给药后24h取材最佳。

流式细胞仪检测X射线诱导小鼠骨髓红细胞微核率的初步研究

目的观察经X射线照射后不同时相点小鼠骨髓红细胞微核率的变化,探讨嗜多染红细胞微核率(fMN-PCE)流式细胞仪(FCM)检测法能否作为快速检测辐射后早期遗传损害的生物计量仪。方法辐照组采用直线加速器激发X射线,对小鼠进行一次性全身照射,每组4只,剂量分别为0.5、3.0、6.0 Gy,于照后6、12、24 h取材;阴性对照组施以假照射,阳性对照组注射环磷酰胺。结果0.5 Gy X射线组受照后24 h,骨髓fMNPCE显著升高(P<0.05);而3.0 Gy及6.0 Gy组受照后6 h,fMNPCE显著升高(P<0.01)。结论红细胞微核流式细胞仪自动化检测法有作为辐射生物计量仪的应用前景。

流式细胞仪检测γ射线照射后小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率的研究

目的应用流式细胞仪检测γ射线照射后小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率,建立本实验室快速检测微核率的自动化实验方法。方法将48只雄性BALB/c小鼠随机分为4个照射剂量组,分别给予60Coγ射线一次性全身照射00、.51、和2Gy,于照射后24、48h取骨髓标本,每个剂量和每个时间点均为6只小鼠。采用流式细胞术检测受照小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率,以传统显微镜检微核的方法作为对照。结果流式细胞术及显微镜检方法检测的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率均呈良好的剂量依赖性及时间依赖性,并且两种方法的检测结果呈显著正相关(r=0.987,P<0.01)。流式细胞仪检测速度为人工阅片的40倍以上,且能够避免人工镜检人员阅片的主观性,检测结果更为客观。结论采用流式细胞仪检测小鼠骨髓红细胞微核较传统的人工显微镜检测,更加简便、易行、快速,检测结果准确、可信、客观,适用于大规模核辐射伤员的高通量快速生物剂量诊断。

灵芝孢子粉对小鼠实验性突变和移植性肿瘤的影响

目的 观察灵芝孢子粉对小鼠实验性突变和移植性肿瘤的影响。方法 健康昆明品系小鼠以灵芝孢子粉（0.2～5.0 g/kgb.w.）灌胃，用环磷酰胺腹腔注射诱导产生骨髓嗜多染红细胞微核后，进行微核试验测定微核出现的千分率。S180瘤源小鼠瘤细胞接种于健康小鼠体内，14 d后取出瘤块进行瘤重比较。结果 灵芝孢子粉可明显降低环磷酰胺所致小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率，也能明显抑制S180移植性肿瘤生长。结论 灵芝孢子粉能抑制或对抗细胞染色体的突变，具有一定抗肿瘤作用。

三氯乙烯染毒小鼠骨髓微核试验观察

目的 检测三氯乙烯对受试动物致突变作用。方法 以不同剂量的三氯乙烯染毒实验动物,经口灌胃给予受试物,用30h给受试物法,即两次给受试物间隙24h,第2日给受试物后6h处死动物,制片,观察并计数嗜多染红细胞的微核率,并与阳性对照组和阴性对照组进行比较分析。结果 与阴性对照组相比,各剂量组的微核率差异无显著性(P>0.05)结论 三氯乙烯小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果阴性。

辐射诱导细胞周期调控和DNA损伤反应相关基因表达变化的实验研究

采用实时定量PCR技术检测小鼠胸腺和脾脏基因表达对X射线全身照射的反应,为探索可行的辐射生物标志物打下实验基础。研究中选用细胞周期调控和DNA损伤反应相关基因Cdkn1a、Ccnd1、Ccnb1、Gadd45a、Atm和Fdxr,以Gapdh为参考基因,观察0.5、1、2、4、6 Gy X射线全身照射后4和24小时上述基因在胸腺和脾脏的相对表达量的变化。同时计数骨髓细胞涂片嗜多染红细胞(PCE)的微核率进行对比。结果显示,上述6种基因对电离辐射全身作用都出现变化,但以Cdkn1a、Ccnd1和Ccnb1三者对全身照射的剂量效应关系较为明显,其中Cdkn1a和Ccnd1基因的表达随辐射剂量增加而升高,Ccnb1基因的表达随辐射剂量增加而下降。剂量效应曲线可拟合为线性-平方方程,其相关系数r为0.851～0.998,p<0.05～0.01。但与嗜多染红细胞微核率进行对比,Ccnd1和Ccnb1的表达只有部分结果与之具有显著的相关关系。Cdkn1a的表达量则不仅随辐射剂量增加而升高,而且与嗜多染红细胞微核率的剂量-效应曲线明显相关,在两器官和两时间点其相关系数为0.950～0.975,p<0.01。另一方面Cd-kn1a表达量变化的幅度较大,照射后4小时和24小时胸腺的最高表达量分别为11.2和11.3倍,脾脏的最高表达量分别为20.6和9.3倍。鉴于实时定量PCR技术适用于快速、高通量检测,通过进一步在人体观察验证,Cdkn1a基因表达变化有可能成为研制新的辐射生物剂量计的候选者。

麦麸多肽的毒性研究及安全性评价

目的:探讨麦麸多肽的毒性作用。方法:应用急性毒性试验、Ames试验、骨髓细胞微核试验、睾丸精母细胞染色体畸变试验、彗星试验对麦麸多肽进行毒性研究。结果:麦麸多肽灌胃,对小鼠LD50>20g/kg,属无毒级。Ames试验中TA97、TA98、TA100和TA102的4个标准菌株无论代谢活化与否,皆为阴性结果;骨髓细胞微核试验、睾丸精母细胞染色体畸变试验、彗星试验2.5、5.0、10.0g/kg bw3个剂量组与阴性对照组比较差别无统计学意义。因此,Ames试验、骨髓细胞微核试验、睾丸精母细胞染色体畸变试验、彗星试验结果均为阴性。结论:麦麸多肽是一种无毒物质。

西藏灵菇奶一般毒性和生殖毒性的初步探索

西藏灵菇奶由共生菌类群体西藏灵菇对鲜奶发酵制成。通过小鼠灌胃确定急性毒性半数致死量(LD50),亚急性毒性,PCEMNR、精子畸形率等试验进行了西藏灵菇奶的毒性研究。结果表明,小鼠灌胃给药的LD50大于50 000 mg/kg,属于微毒。亚急性毒性灌胃剂量在5 000,20 000和40 000 mg/kg连续灌胃给药30 d,小鼠活动和体重生长正常,各主要器官的形状、大小、颜色等与阴性组对照无明显差异。在5 000 mg/kg和20 000 mg/kg剂量连续灌胃30 d,试验组小鼠的PCE MNR分别为(2.2±1.01)‰和(2.4±0.92)‰,与阴性对照和空白对照之间没有显著性差异;40 000 mg/kg组的PCE MNR为(2.5±1.12)‰,与阴性对照有显著的差异(P<0.05)。高、中、低剂量组小鼠的精子畸形率分别为(2.00±0.51)%,(2.04±0.49)%和(2.13±0.52)%,与阴性对照组无显著性差异。表明西藏灵菇奶在一般情况下没有显示毒性,但在较大摄入量时可表现出一定的遗传毒性。

苯和二硫化碳诱导小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的研究

目的 探讨苯和二硫化碳对雌性小鼠体细胞遗传物质的影响。 方法 采用静式吸入法分别用苯和二硫化碳染毒NIH成年雌性小鼠15d(2h/d) ,分析受试小鼠骨髓嗜多染红细胞微核细胞率。 结果 苯染毒低、中、高剂量组浓度分别为70 6、192 2、4864mg/m3 ,三剂量组的微核细胞率依次为7.2‰、7.3‰、8.3‰,与阴性对照组(2 .1‰)比较有显著性差异(P <0 .0 5 ) ,二硫化碳染毒低、中、高剂量组浓度分别为199、65 1、12 0 9mg/m3 ,三剂量组的微核细胞率依次为3 .0‰、4.2‰、5 .1‰,中剂量组和高剂量组与阴性对照组比较有显著性差异(P <0 .0 5 ) ,具有较好的剂量-效应关系。

复合多糖降低环林酰胺诱导的小鼠骨髓微核率的研究

目的 探讨复合多糖对化疗后骨髓系统损伤的保护作用。方法 复合多糖分高、中、低三个剂量组连续 7d灌胃给药 ,实验另设相同容量生理盐水代替复合多糖为阴性对照组 ,于第 8、9d ,与多糖给药间隔 6h ,腹腔注射环林酰胺 4 0mg/kg·d致染色体断裂。环林酰胺末次给药后 6h处死小鼠 ,检测小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率。结果 复合多糖能显著降低环林酰胺诱导的骨髓微核率 ,与阴性对照组比P均 <0 .0 1,复合多糖高、中、低三个剂量 ,阴性对照的微核率分别是 13.17%、11.0 0 %、19.6 7%、2 9.5 0 %。结论 复合多糖对化疗后骨髓系统损伤具有保护作用。

明矾对小鼠骨髓多染红细胞微核的影响

作者利用小鼠骨髓多染红细胞微核栓驻(钾)明矾的诱变效应。结果表明:从500mg/kg至5mg/kg各剂量组的微核细胞率明显高于阴性对照组(P<0.01);(钾)明矾不同剂量组之间也有显著差异(P<0.05)。说明(钾)明矾可诱发小鼠体细胞遗传物质结构的改变;且诱变效应随剂量的增大而增加,呈剂量效应关系。

环氧乙烷的遗传毒性研究──Ⅵ小鼠骨髓多染红细胞微核试验

应用骨髓多染红细胞微核试验研究了环氧乙烷（ｅｔｈｙｌｅｎｅｏｘｉｄｅ，Ｅｔｏ）的遗传毒性作用。本研究通过亚急性及亚慢性二种方法对Ｅｔｏ的毒性进行了检测。通过实验证明Ｅｔｏ在亚急性条件下，染毒组与对照组比较微核率呈现出极显著的差异。在亚慢性实验条件下，染毒组与对照组比较微核率也呈现极显著差异，说明环氧乙烷确是一个有效的诱变剂。

微波辐射对小鼠精子畸形率及骨髓嗜多染细胞微核检出率的影响

小鼠分别用20,30,40 mW/cm^2微波照射,结果发现照射后d 4,10,30,精子畸形率与对照组比有显著差异(p<0.05,P<0.01);d 30则三个剂量组均呈很显著差异(p<0.01)。48 h后骨髓嗜多染细胞微核检出率与对照组比有显著差异(p<0.05),96 h后则无显著差异。可以认为微波对小鼠体细胞和生殖细胞有致突变作用,且对生殖细胞影响更明显;精子畸形以胖头样为主;但微核无累加现象。

升血因子对小鼠骨髓多染性红细胞微核的影响

作者在环磷酰按所致小鼠骨髓多染性红细胞微核细胞率增高的模型上，研究了升血因子的防治效应。结果发现，升血因子可明显降低环磷酰胺对小鼠骨髓多染性红细胞微核细胞率的增高，连续４ｄ经腹腔分别注射６２．６０，２５．０４，１２．５２，６．２６和０．２５ｕ／ｋｇ剂量的升血因子，且第４ｄ同时注射５０ｍｇ／ｋｇ剂量的环磷酰胺，小鼠骨髓多染性红细胞微核细胞率分别为９．５０±１．３４．１２．１７±１．０３１３．５０±１．９２，１６．５８士１．９３和１９．６７±１．８９％，与阳性环磷酰胺对照组（２４．７５±１．４４‰）相比有显著性差异（Ｐ＜０．００１，０．００１．０．００１，０．００１和０．００１．ｎ＝６）。结果表明，升血因子对环磷酰胺所致小鼠骨髓多染性红细胞微核细胞率的增加有明显的防治作用，对骨髓多染性红细胞的遗传物质也有显著的保护作用。

砷暴露的体外及体内微核试验研究

目的探讨砷的遗传损伤作用。方法体外试验用胞质分裂阻滞法微核试验(CBMN)进行,观察不同浓度砷(0μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L、400μg/L)对人淋巴细胞微核率的影响。在RPMI1640培养基中加入正常人淋巴细胞和不同浓度砷在37℃中培养72 h(44 h时加入细胞松弛素B),经低渗固定等收获细胞后染色观察双核淋巴细胞中微核率。体内试验取40只ICR雄性小鼠应用完全随机化的方法分为4个剂量组[阴性对照组、10 mg/(kg·bw)、20 mg/(kg·bw)、30 mg/(kg·bw)],每组10只,将亚砷酸钠按剂量要求经口灌胃染毒3次,染毒后取尾静脉按常规血涂片进行涂片染色,观察外周血嗜多染红细胞微核率。结果体外试验砷接触72 h后,砷浓度200μg/L、400μg/L的双核淋巴细胞微核率分别为10.4‰和20.2‰,与砷浓度0μg/L比较差异均有统计学意义(P<0.05);体内试验ICR小鼠染毒亚砷酸钠后,阴性对照组、10 mg/(kg·bw)、20 mg/(kg·bw)、30 mg/(kg·bw)各剂量组动物外周血嗜多染红细胞微核率分别为0.7‰、0.8‰、1.6‰、2.7‰,呈剂量-反应关系,30 mg/(kg·bw)剂量组外周血嗜多染红细胞微核率明显升高,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论亚砷酸钠体外试验可导致人双核淋巴细胞微核率增加,体内试验也可导致外周血嗜多染红细胞微核率升高,体内与体外试验结果均提示砷具有遗传损伤作用。