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Polycystins and mechanotransduction: From physiology to disease
1
作者 Christina Piperi Efthimia K Basdra 《World Journal of Experimental Medicine》 2015年第4期200-205,共6页
Polycystins are key mechanosensor proteins able to respond to mechanical forces of external or internal origin. They are widely expressed in primary cilium and plasma membrane of several cell types including kidney, v... Polycystins are key mechanosensor proteins able to respond to mechanical forces of external or internal origin. They are widely expressed in primary cilium and plasma membrane of several cell types including kidney, vascular endothelial and smooth muscle cells,osteoblasts and cardiac myocytes modulating their physiology. Interaction of polycystins with diverse ion channels, cell-cell and cell-extracellular matrix junctional proteins implicates them in the regulation of cell structure, mechanical force transmission and mechanotransduction. Their intracellular localization in endoplasmic reticulum further regulates subcellular trafficking and calcium homeostasis, finely-tuning overall cellular mechanosensitivity. Aberrant expression or genetic alterations of polycystins lead to severe structural and mechanosensing abnormalities including cyst formation, deregulated flow sensing, aneurysms,defective bone development and cancer progression,highlighting their vital role in human physiology. 展开更多
关键词 polycystins MECHANOTRANSDUCTION KIDNEY ENDOTHELIUM OSTEOBLASTS Cancer
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Polycystin-1相关的信号转导通路 被引量:2
2
作者 侯娟 张天宝 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期258-261,共4页
已知85%~90%的常染色体显性遗传性多囊肾病是由pkd1突变引起的,因此pkd1编码的多囊蛋白-1的功能受到研究者的关注。多囊蛋白-1是一个具有长的细胞外氨基末端,11个跨膜区,短的细胞内羧基末端的跨膜蛋白。近年来发现多囊蛋白-1与多条信... 已知85%~90%的常染色体显性遗传性多囊肾病是由pkd1突变引起的,因此pkd1编码的多囊蛋白-1的功能受到研究者的关注。多囊蛋白-1是一个具有长的细胞外氨基末端,11个跨膜区,短的细胞内羧基末端的跨膜蛋白。近年来发现多囊蛋白-1与多条信号转导通路有关。文章主要介绍多囊蛋白-1相关的PI3-K/Akt/mTOR、Wnt/β-catenin和JAK-STAT等信号转导通路、各信号通路之间的联系及其在常染色体显性遗传性多囊肾病致病中的作用。 展开更多
关键词 常染色体显性多囊肾病 多囊蛋白-1 信号通路
原文传递
多囊蛋白2离子通道功能及在常染色体显性多囊肾发病中的作用机制
3
作者 汪凯 黄渊 +2 位作者 周策凡 唐景峰 陈兴珍 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第1期47-58,共12页
多囊蛋白2 (polycystin-2,PC2,或称TRPP2,PKD2)是一种瞬时受体电位通道(transient receptor potential channel,TRP),在维持细胞正常的Ca~(2+)信号传导中起着关键作用,也是最常见的单基因常染色体显性遗传多囊肾病(transient receptor p... 多囊蛋白2 (polycystin-2,PC2,或称TRPP2,PKD2)是一种瞬时受体电位通道(transient receptor potential channel,TRP),在维持细胞正常的Ca~(2+)信号传导中起着关键作用,也是最常见的单基因常染色体显性遗传多囊肾病(transient receptor potential channel,ADPKD)的潜在病因之一。PC2可自身组装为同源四聚体离子通道或与其他蛋白质形成异源受体-离子通道复合物,参与调节机械感觉、细胞极性、细胞增殖和凋亡等多种生理功能,导致囊性细胞从正常的吸收、静止状态转变为病理性分泌、增殖状态。本文阐述了PC2蛋白相关结构域以及通道特性在维持细胞内Ca~(2+)信号传导中的关键作用,并总结了PC2在细胞膜、纤毛、内质网以及线粒体等特定亚细胞定位形成多囊蛋白复合物,参与多种细胞分化、增殖、存活和凋亡相关信号通路,为确定特异性的有效的ADPKD干预治疗途径和靶点药物提供新的思考方向。 展开更多
关键词 多囊蛋白2 离子通道 钙离子 常染色体显性遗传多囊肾病
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Pkd1^(f/f):Cre小鼠在自然状态下的发病情况研究
4
作者 周卫民 刘庆生 +3 位作者 吕东颖 陈方明 朱科燕 王德军 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期501-506,共6页
目的对Pkd1^(f/f):Cre转基因小鼠的发病特点和病理特征进行研究,为临床研究提供依据。方法选用自然状态下发病的Pkd1^(f/f):Cre转基因小鼠,通过对肝、肾组织进行解剖,观察超声多普勒下的肝形态,测定脏器系数,HE染色观察肝肾组织的病理情... 目的对Pkd1^(f/f):Cre转基因小鼠的发病特点和病理特征进行研究,为临床研究提供依据。方法选用自然状态下发病的Pkd1^(f/f):Cre转基因小鼠,通过对肝、肾组织进行解剖,观察超声多普勒下的肝形态,测定脏器系数,HE染色观察肝肾组织的病理情况,免疫组化分析肝肾PCNA、E-cadherin蛋白的表达变化。结果与Pkd1^(f/f)组相比,Pkd1^(f/f):Cre组的肝重量及系数极显著升高(P<0.01),体重在Pkd1^(f/f):Cre与Pkd1^(f/f)组间比较无差异;肾重量及系数在Pkd1^(f/f):Cre与Pkd1^(f/f)组间比较无显著性差异;其中与肝功能相关的因子ALT和AST的水平,Pkd1^(f/f):Cre组显著高于Pkd1^(f/f)组(P<0.01);而肾功能相关的因子BUN与CREA、UA水平在Pkd1^(f/f):Cre组与Pkd1^(f/f)组间无差异(P>0.05)。结论Pkd1^(f/f):Cre小鼠会发生肝囊肿,损害肝功能,但肾未出现囊肿的情况。 展开更多
关键词 polycystin1基因 肝囊肿
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EPA、DHA对脂多糖刺激大鼠系膜细胞的保护作用 被引量:5
5
作者 胡晓晶 耿文静 +1 位作者 焦波 柳方娥 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期513-517,共5页
目的:观察EPA、DHA对脂多糖(LPS)刺激大鼠系膜细胞(GMCs)的氧化应激及MCP-1和TGF-β1表达的影响。方法:用LPS(10mg/L)刺激大鼠GMCs,经EPA(10μmol/L、100μmol/L)、DHA(10μmol/L、100μmol/L)培养,采用试剂盒分别测定培养24h、48h、72... 目的:观察EPA、DHA对脂多糖(LPS)刺激大鼠系膜细胞(GMCs)的氧化应激及MCP-1和TGF-β1表达的影响。方法:用LPS(10mg/L)刺激大鼠GMCs,经EPA(10μmol/L、100μmol/L)、DHA(10μmol/L、100μmol/L)培养,采用试剂盒分别测定培养24h、48h、72h培养上清中的SOD、GSH-Px和MDA。采用免疫细胞化学方法测定培养系膜细胞MCP-1和TGF-β1的表达,采用实时定量PCR方法测定MCP-1和TGF-β1mRNA的表达。结果:LPS刺激后,系膜细胞SOD、GSH-Px活力降低,MDA含量增加。EPA、DHA能明显升高SOD、GSH-Px活力,减少MDA生成。LPS刺激可使系膜细胞表达MCP-1、TGF-β1增加,经EPA、DHA处理后,MCP-1、TGF-β1mRNA和蛋白表达明显减少。DHA作用强于同剂量EPA。结论:EPA、DHA能提高系膜细胞的抗氧化酶SOD、GSH-Px活力,减少细胞内MDA生成。EPA和DHA可以降低LPS刺激的GMCs的TGF-β1与MCP-1的表达,从而起到保护肾功能的作用。 展开更多
关键词 二十碳五烯酸 二十二碳六烯酸 系膜细胞 转化生长因子β 单核细胞化学趋化蛋白质1
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常染色体显性遗传多囊肾病的治疗研究进展 被引量:15
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作者 高晋生 杨宝学 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期141-144,共4页
常染色体显性遗传多囊肾病是一种较常见的单基因遗传病,病变以双肾多发性进行性充液囊泡为主要特征。囊泡损伤肾组织,引起肾功能改变,最终导致肾衰竭。除透析和肾移植治疗终末期肾衰竭,尚无有效疗法延缓多囊肾病程进展。抑制囊泡液体分... 常染色体显性遗传多囊肾病是一种较常见的单基因遗传病,病变以双肾多发性进行性充液囊泡为主要特征。囊泡损伤肾组织,引起肾功能改变,最终导致肾衰竭。除透析和肾移植治疗终末期肾衰竭,尚无有效疗法延缓多囊肾病程进展。抑制囊泡液体分泌,抗囊泡上皮细胞生长和减轻继发病变是治疗该病的主要策略。 展开更多
关键词 常染色体显性遗传多囊肾病 多囊肾病治疗 多囊蛋白 抗细胞增殖 抑制囊液分泌
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多囊蛋白1表达载体的构建及表达 被引量:3
7
作者 赵海丹 梅长林 +1 位作者 孙田美 张树忠 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期25-28,共4页
目的 :体外表达并纯化多囊蛋白 1胞外区片段。方法 :提取健康人肾组织总 RNA,用一步法 RT- PCR选择扩增编码多囊蛋白 1胞外多拷贝区的 2个 c DNA片段 ,并将之克隆到融合蛋白表达载体 p QE30中 ,转染含有阻遏质粒 p REP4的大肠杆菌 M15... 目的 :体外表达并纯化多囊蛋白 1胞外区片段。方法 :提取健康人肾组织总 RNA,用一步法 RT- PCR选择扩增编码多囊蛋白 1胞外多拷贝区的 2个 c DNA片段 ,并将之克隆到融合蛋白表达载体 p QE30中 ,转染含有阻遏质粒 p REP4的大肠杆菌 M15。异丙基硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导表达融合蛋白 ,用亲和层析法纯化。纯化产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白质印迹分析鉴定。 结果 :克隆到 2个编码多囊蛋白 1胞外区的 c DNA片段 ,其大小分别为 5 0 2 bp和 4 71bp。构建的表达质粒p QE30 - PK D1e1和 p QE30 - PK D1e2经限制性内切酶酶切和 DNA测序证实为所需要的质粒。表达出相对分子质量分别为19 80 0、1890 0的融合蛋白 ,经蛋白质印迹分析鉴定为多囊蛋白 1的融合蛋白。结论 :本实验克服了 PK D1基因在体内多个同源序列的干扰 ,克隆了编码多囊蛋白 1胞外多拷贝区的 c DNA序列 ,并成功地获得了融合表达的目的蛋白 ,为进一步制备抗多囊蛋白 展开更多
关键词 多囊蛋白1 多囊肾病 常染色体显性 融合蛋白 多拷贝区
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常染色体显性遗传多囊肾病的研究 被引量:7
8
作者 于国鹏 齐隽 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1383-1386,1390,共5页
多囊肾病是人体常见的一种先天性遗传性疾病,根据遗传方式的不同,可分为常染色体显性遗传多囊肾病及常染色体隐性遗传多囊肾病。除肾脏改变外,多囊肾病还可累及全身多个器官,严重危害人类的健康。近年来,多囊肾病的基因及发病机制的研究... 多囊肾病是人体常见的一种先天性遗传性疾病,根据遗传方式的不同,可分为常染色体显性遗传多囊肾病及常染色体隐性遗传多囊肾病。除肾脏改变外,多囊肾病还可累及全身多个器官,严重危害人类的健康。近年来,多囊肾病的基因及发病机制的研究(尤其是分子生物学研究)、诊断和治疗都有了长足进步,文章对最常见的常染色体显性遗传多囊肾病的研究现状及进展作一综述。 展开更多
关键词 多囊肾病 常染色体显性 多囊蛋白 基因
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抗多囊蛋白1氨基端单克隆抗体的制备和鉴定 被引量:2
9
作者 赵海丹 梅长林 +4 位作者 李林 孙田美 张树忠 吴玉梅 宋吉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期186-190,共5页
目的 :用杂交瘤技术制备抗多囊蛋白 1胞外区氨基端的单克隆抗体 (mAb) ,并对其特异性进行鉴定。方法 :以肾组织总RNA为模板 ,用RT PCR扩增多囊蛋白 1胞外区氨基端的编码基因PKD1cDNA。将该基因克隆到融合蛋白表达载体pQE3 0中 ,转染大... 目的 :用杂交瘤技术制备抗多囊蛋白 1胞外区氨基端的单克隆抗体 (mAb) ,并对其特异性进行鉴定。方法 :以肾组织总RNA为模板 ,用RT PCR扩增多囊蛋白 1胞外区氨基端的编码基因PKD1cDNA。将该基因克隆到融合蛋白表达载体pQE3 0中 ,转染大肠杆菌M15。以异丙基硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导表达多囊蛋白 1胞外区氨基端的组氨酸融合蛋白 (PC1 e2 ) ,用亲和层析法纯化。以纯化的融合蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠 ,取小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞株Sp2 / 0进行细胞融合 ,间接ELISA筛选阳性克隆 ,有限稀释法进行单克隆化。mAb的特异性用间接ELISA和Westernblot鉴定。结果 :克隆到两个编码多囊蛋白 1氨基端的cDNA片段 (50 2bp和 471bp)。构建的表达质粒经酶切和DNA测序证实 ,为所需要的质粒。表达出相对分子质量 (Mr)分别为 1980 0和 1890 0的融合蛋白 ,经Westernblot鉴定 ,均为多囊蛋白 1的融合蛋白。用Mr 为 1890 0的融合蛋白免疫小鼠 ,得到杂交瘤细胞株 7B1。Westernblot分析表明 ,该细胞株分泌的mAb能特异地与多囊蛋白 1氨基端结合。结论 :本实验表达了PKD1多拷贝区所编码的PC1 e2 ,成功地制备了抗多囊蛋白 1胞外区N端的mAb。 展开更多
关键词 常染色体显性多囊 肾病 多囊蛋白1 多拷贝区 单克隆抗体
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多囊蛋白-1胞内区cDNA的克隆与表达 被引量:2
10
作者 郑瑞英 梅长林 毛积芳 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期313-315,共3页
目的 :获取多囊蛋白 - 1胞内区片段。 方法 :用 PCR法克隆多囊蛋白 - 1胞内区的 c DNA片段 ,然后插入融合蛋白表达载体 p Pro EX Hta中 ,经测序证实后 ,转入大肠杆菌中表达并用亲和层析法进行纯化。结果 :克隆到一个 6 6 0 bp的多囊蛋白... 目的 :获取多囊蛋白 - 1胞内区片段。 方法 :用 PCR法克隆多囊蛋白 - 1胞内区的 c DNA片段 ,然后插入融合蛋白表达载体 p Pro EX Hta中 ,经测序证实后 ,转入大肠杆菌中表达并用亲和层析法进行纯化。结果 :克隆到一个 6 6 0 bp的多囊蛋白- 1胞内区 c DNA片段 ,得到了一个相对分子质量为 2 .6万的融合蛋白。结论 :多囊蛋白 - 1胞内区片段的融合蛋白为制备抗多囊蛋白 - 1单克隆抗体提供了基础。 展开更多
关键词 多囊蛋白-1 融合蛋白 常染色体显性 胞内区 多囊肾 单克隆抗体 CDNA
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常染色体显性遗传性多囊肾病研究的热点问题 被引量:23
11
作者 梅长林 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期1-4,共4页
常染色体显性遗传性多囊肾病 (ADPKD)是一种常见的遗传性疾病 ,发病率约为 1/10 0 0~ 1/40 0。 ADPKD致病基因有 2个 :PK D1和 PK D 2 ,分别于 1994年和 1996年被克隆。目前研究热点主要集中于致病基因表达产物 ,即多囊蛋白 1和多囊蛋... 常染色体显性遗传性多囊肾病 (ADPKD)是一种常见的遗传性疾病 ,发病率约为 1/10 0 0~ 1/40 0。 ADPKD致病基因有 2个 :PK D1和 PK D 2 ,分别于 1994年和 1996年被克隆。目前研究热点主要集中于致病基因表达产物 ,即多囊蛋白 1和多囊蛋白 2的结构与功能、亚细胞定位 ,纤毛在多囊肾病发病中的作用 ,多囊蛋白与血管异常的关系 ,用影像学方法评价多囊肾病进展 ,阻断肾素 -血管紧张素系统延缓多囊肾病进展以及其他新的诊疗措施等方面。这些问题的深入研究将有助于阐明ADPKD的分子发病机制 ,为临床彻底治愈 展开更多
关键词 多囊肾病 常染色体显性 多囊蛋白 纤毛
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小鼠多囊蛋白1氨基端多克隆抗体的制备和其生物特性分析
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作者 刘海超 李渊 +4 位作者 李奥 陈远 孙春阳 丁镇伟 吴冠青 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期723-728,733,共7页
目的制备针对多囊蛋白1(PC1)胞外区的抗体,为分析PC1胞外区生物特性和功能提供工具。方法根据生物信息学分析结果,PCR扩增编码小鼠Pkd1的氨基端474E-640L的cDNA片段。将该片段克隆到GST融合蛋白表达载体上,在IPTG诱导下产生小鼠Pkd1抗原... 目的制备针对多囊蛋白1(PC1)胞外区的抗体,为分析PC1胞外区生物特性和功能提供工具。方法根据生物信息学分析结果,PCR扩增编码小鼠Pkd1的氨基端474E-640L的cDNA片段。将该片段克隆到GST融合蛋白表达载体上,在IPTG诱导下产生小鼠Pkd1抗原(mPkd1-N)。纯化浓缩目的蛋白并制备兔抗PC1氨基端多克隆抗体(mPkd1-Np),并以Westernblot法、免疫组化以及免疫荧光方法分析该兔抗PC1氨基端抗体的特异性。结果成功地构建了mPkd1-N片段真核及原核表达载体,在大肠杆菌中实现表达,并制备了抗小鼠PC1氨基端的多克隆抗体mPkd1-Np。通过生化和细胞学方法证实了该抗体针对PC1的特异性。结论成功制备了高效价、特异性的兔抗mPkd1-Np多克隆抗体。 展开更多
关键词 PKD1基因 polycystin-1 多克隆抗体 常染色体显性遗传多囊肾病
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多囊蛋白-1的研究进展 被引量:2
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作者 李群 李海浪 邓红 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2006年第2期146-149,共4页
多囊蛋白-1(polycystin-1,PC-1)是由多囊肾病基因-1(PKD1)编码的跨膜蛋白,属多囊蛋白家族成员,主要在上皮细胞、内分泌细胞、心肌细胞和骨骼肌细胞上表达。PC-1可与多囊蛋白-2(polycystin-2,PC-2)、踝蛋白、纽蛋白等蛋白结合,参与细胞-... 多囊蛋白-1(polycystin-1,PC-1)是由多囊肾病基因-1(PKD1)编码的跨膜蛋白,属多囊蛋白家族成员,主要在上皮细胞、内分泌细胞、心肌细胞和骨骼肌细胞上表达。PC-1可与多囊蛋白-2(polycystin-2,PC-2)、踝蛋白、纽蛋白等蛋白结合,参与细胞-细胞、细胞-基质黏附和细胞间信号转导。PC-1可调节肾小管上皮细胞的增殖和分化、介导细胞间的黏附,在肾脏的正常发育和常染色体显性遗传性多囊肾病(ADPKD)发病起重要作用。 展开更多
关键词 多囊蛋白-1 结构 功能 常染色体显性遗传性多囊肾病
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原纤毛-多囊蛋白复合物在肾和骨组织中的类似作用 被引量:1
14
作者 邱霓 肖洲生 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期423-429,共7页
纤毛-多囊蛋白复合物的功能或者结构异常,是导致常染色体显性多囊肾病的主要原因.该复合物除了被认为在正常的肾上皮细胞上起着机械和化学感受器的作用,可能在骨细胞中也有类似的作用.本文总结了多囊蛋白和纤毛的结构、分布特点以及在... 纤毛-多囊蛋白复合物的功能或者结构异常,是导致常染色体显性多囊肾病的主要原因.该复合物除了被认为在正常的肾上皮细胞上起着机械和化学感受器的作用,可能在骨细胞中也有类似的作用.本文总结了多囊蛋白和纤毛的结构、分布特点以及在肾发育过程中所发挥的作用;着重综述了纤毛-多囊蛋白复合物在肾上皮细胞上作为机械和化学感受器,通过影响细胞内一系列的信号途径,调控细胞的基因转录和蛋白合成的最新研究进展,包括与细胞内钙离子变化有关的钙调神经磷酸酶-NFAT途径和PI3K-Atk途径,调控细胞周期的JAK-STAT途径,及维持正常肾结构的Wnt/β连环蛋白信号途径等;还将通过比较在肾上皮细胞上纤毛-多囊蛋白复合物所激活的信号传导途径和在骨细胞中传导机械刺激的信号转导途径的类同,提示在骨细胞中,纤毛-多囊蛋白复合物可能起着在肾上皮细胞上类似的机械感受器作用,为系统性阐明多囊肾病的发病机制,以及揭示失重或负重状态下骨细胞机械感受的分子机制提供了一个新思路. 展开更多
关键词 多囊肾病基因 多囊蛋白复合物 原纤毛 机械刺激
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多囊蛋白-1在生长期小鼠颅底蝶枕软骨联合的表达 被引量:1
15
作者 高国杰 章筱悦 沈刚 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2017年第8期824-827,共4页
目的:了解多囊蛋白-1(PC1)在不同生长阶段小鼠蝶枕软骨联合表达的时空特征。方法:采集1、4、8周龄小鼠的蝶枕软骨联合标本,制备组织切片后进行PC1免疫组织化学染色,观察PC1的表达位置并测算单位面积组织内PC1阳性面积的百分比。结果:PC1... 目的:了解多囊蛋白-1(PC1)在不同生长阶段小鼠蝶枕软骨联合表达的时空特征。方法:采集1、4、8周龄小鼠的蝶枕软骨联合标本,制备组织切片后进行PC1免疫组织化学染色,观察PC1的表达位置并测算单位面积组织内PC1阳性面积的百分比。结果:PC1在1周龄小鼠蝶枕软骨联合表达于储备层、前肥大层和早期肥大层;4周龄时主要表达于储备层、增殖层和前肥大层;8周龄时主要表达于前肥大细胞和早期肥大细胞。1、4、8周龄组PC1阳性面积百分比的均值分别为4.51%、5.7%、4.59%;4周龄组与1周龄及8周龄组间的差异都具有显著性(P<0.05)。结论:生长期小鼠蝶枕软骨联合表达PC1,但不同生长阶段的表达区域和水平存在差异。 展开更多
关键词 多囊蛋白-1 小鼠 颅底 蝶枕软骨联合
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触脑脊液神经元的研究进展 被引量:2
16
作者 李瑞 刘海鹰 +4 位作者 王家瑶 郭保霖 高方 武胜昔 王文挺 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期633-637,共5页
触脑脊液神经元(cerebrospinal fluid-contacting neurons,CSF-cNs)是一种分布于脑室、中央管、脑室周器及脑实质等处与脑脊液接触的特殊神经元。根据分布位置不同可将CSF-cNs分为室管膜上、室管膜下和远位CSF-cNs三类,不同部位的CSF-... 触脑脊液神经元(cerebrospinal fluid-contacting neurons,CSF-cNs)是一种分布于脑室、中央管、脑室周器及脑实质等处与脑脊液接触的特殊神经元。根据分布位置不同可将CSF-cNs分为室管膜上、室管膜下和远位CSF-cNs三类,不同部位的CSF-cNs分泌不同的神经递质。以往研究CSF-cNs多采用脑室注射辣根过氧化物酶标记的霍乱毒素B亚单位(cholera toxin subunit B labeled with horseradish peroxidase,CB-HRP)进行逆行追踪. 展开更多
关键词 触脑脊液神经元 polycystin KIDNEY disease 2-like 1(PKD2L1) Acid-sensing ion channels(ASIC)
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多囊蛋白1胞内区单克隆抗体的制备及初步应用
17
作者 郑瑞英 梅长林 +1 位作者 万谟彬 孙卫民 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期795-797,共3页
目的 :制备多囊蛋白 1胞内区单克隆抗体 ,并用以观察多囊蛋白 1在肾组织中的分布与表达。 方法 :以重组多囊蛋白 1胞内段融合蛋白为抗原 ,采用杂交瘤技术 ,制备产生针对多囊蛋白 1胞内区的单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ,并利用所产生的单... 目的 :制备多囊蛋白 1胞内区单克隆抗体 ,并用以观察多囊蛋白 1在肾组织中的分布与表达。 方法 :以重组多囊蛋白 1胞内段融合蛋白为抗原 ,采用杂交瘤技术 ,制备产生针对多囊蛋白 1胞内区的单克隆抗体的杂交瘤细胞株 ,并利用所产生的单克隆抗体 ,采用标准 En Vision免疫组织化学方法 ,对多囊肾组织、正常成人肾组织和胎肾组织进行染色。结果 :获得 4株稳定分泌抗体且效价为 1∶ 10 6 左右的杂交瘤细胞株 ,传代至第 5 0代仍能稳定分泌抗体 ,效价不变 ;多囊蛋白 1在正常成人肾组织的近端小管、远端小管和集合管的上皮细胞呈弱阳性表达 ,在胎儿肾脏的肾小管上皮细胞呈强阳性 ,在多囊肾组织的囊肿衬里上皮细胞表达明显增强。 结论 :成功制备了多囊蛋白 1胞内区单克隆抗体 ,为深入了解多囊蛋白 展开更多
关键词 多囊蛋白1胞内区 单克隆抗体 制备 基因表达 组织分布 多囊肾病
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多囊蛋白-1在急性主动脉夹层发病机制中的作用
18
作者 王蕾 崔立坤 +1 位作者 张琳 刘娜 《新乡医学院学报》 CAS 2023年第1期35-39,共5页
目的探讨多囊蛋白-1(PC-1)在急性主动脉夹层(AD)发病机制中的作用及分子机制。方法收集2019年10月至2020年1月于郑州大学第一附属医院行主动脉弓置换术的6例急性AD患者的病变主动脉组织标本作为AD组,另选择6例非主动脉疾病的器官捐赠者... 目的探讨多囊蛋白-1(PC-1)在急性主动脉夹层(AD)发病机制中的作用及分子机制。方法收集2019年10月至2020年1月于郑州大学第一附属医院行主动脉弓置换术的6例急性AD患者的病变主动脉组织标本作为AD组,另选择6例非主动脉疾病的器官捐赠者的正常主动脉组织标本作为对照组。采用Western blot法检测主动脉组织中PC-1、凋亡相关蛋白及磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路相关蛋白的磷酸化位点的表达,SM22α免疫荧光/DNA末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法双标染色法检测主动脉平滑肌细胞(VSMC)凋亡情况。结果对照组和AD组受试者主动脉组织中PC-1蛋白的相对表达量分别为1.00±0.07和0.72±0.04,AD组受试者主动脉组织中PC-1蛋白的相对表达量显著低于对照组(t=7.614,P<0.01)。对照组和AD组受试者主动脉VSMC凋亡的荧光强度分别为59.03±4.57和71.26±8.25,AD组受试者主动脉VSMC凋亡的荧光强度显著高于对照组(t=3.178,P<0.05)。AD组受试者主动脉组织中cleaved caspase-3、cleaved caspase-7、cleaved caspase-9、Bax蛋白相对表达量显著高于对照组(P<0.01),AD组受试者主动脉组织中Bcl-2蛋白相对表达量显著低于对照组(P<0.01)。AD组受试者主动脉组织中PI3K的p85、p110β磷酸化位点及Akt的p-Ser-Akt、p-Thr-Akt磷酸化位点的相对表达量显著低于对照组(P<0.01)。结论AD患者主动脉组织中PC-1蛋白表达降低,PC-1蛋白低表达可能通过抑制PI3K/Akt信号通路活化、提高促凋亡蛋白表达及降低抗凋亡蛋白表达促进VSMC凋亡,这可能是AD发病的潜在机制之一。 展开更多
关键词 主动脉夹层 多囊蛋白-1 细胞凋亡
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多囊蛋白-1在肾透明细胞癌及常染色体显性多囊肾病患者体液中含量的比较研究
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作者 吴俊 梅长林 +2 位作者 赵海丹 戴兵 刘亚伟 《中国中西医结合肾病杂志》 2006年第12期711-714,共4页
目的比较多囊蛋白-1在肾透明细胞癌、常染色体显性遗传多囊肾病患者及正常人体液中的含量。方法随机选择在本院就诊的肾透明细胞癌患者20例、常染色体显性多囊肾病患者20例及正常健康查体者15例,留取血液及尿液标本各1份。以本实验室制... 目的比较多囊蛋白-1在肾透明细胞癌、常染色体显性遗传多囊肾病患者及正常人体液中的含量。方法随机选择在本院就诊的肾透明细胞癌患者20例、常染色体显性多囊肾病患者20例及正常健康查体者15例,留取血液及尿液标本各1份。以本实验室制备的鼠源抗多囊蛋白-1单克隆抗体为捕获抗体,以兔源抗多囊蛋白-1多克隆抗体为检测抗体,采用夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测体液中多囊蛋白-1的含量。结果肾透明细胞癌患者血液中多囊蛋白-1含量为(53.613±8.697)μg/L,显著高于多囊肾病患者血液中含量(6.745±3.215)μg/L(P<0.01)及正常人血液中含量(20.386±14.234)ng/ml(P<0.01)。肾透明细胞癌患者尿液中多囊蛋白-1含量为(10.228±7.989)μg/L,显著低于多囊肾病患者尿液中含量(48.268±16.452)ng/ml(P<0.01),与正常人尿液中含量(10.083±8.941)μg/L比较无统计学差异。结论多囊蛋白-1属于一个新的跨膜蛋白家族,在肾透明细胞癌患者血液中表达增加,而在多囊肾患者血液中表达减少,为进一步揭示多囊蛋白-1的功能提供实验室依据。 展开更多
关键词 常染色体显性多囊肾病 多囊蛋白-1 肾透明细胞癌
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多囊蛋白-1氨基段融合蛋白对大鼠肾小球系膜细胞周期及其调控基因表达的影响 被引量:3
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作者 关天俊 梅长林 +3 位作者 孙田美 付莉莉 赵海丹 蔡厚安 《细胞生物学杂志》 CSCD 2006年第2期223-226,共4页
研究多囊蛋白-1氨基段(PC-1NF)融合蛋白对大鼠肾小球系膜细胞(MC)周期及其调控基因表达的影响。应用Brdu-ELISA法检测PC-1NF融合蛋白对MC增殖的作用,流式细胞术观察PC-1NF融合蛋白对MC周期的影响,实时荧光定量RT-PCR方法检测PC-1NF融合... 研究多囊蛋白-1氨基段(PC-1NF)融合蛋白对大鼠肾小球系膜细胞(MC)周期及其调控基因表达的影响。应用Brdu-ELISA法检测PC-1NF融合蛋白对MC增殖的作用,流式细胞术观察PC-1NF融合蛋白对MC周期的影响,实时荧光定量RT-PCR方法检测PC-1NF融合蛋白对MC周期调控基因cyclinD1、p21WAF1表达的作用。结果表明PC-1NF融合蛋白能抑制MC增殖,呈现良好的时效与量效关系;PC-1NF融合蛋白能影响MC周期,使G0/G1期细胞增加,S期细胞减少;4μg/mlPC-1NF融合蛋白作用后,cyclinD1mRNA水平比对照组明显下调(P<0.05);而p21WAF1mRNA水平比对照组显著上调(P<0.01)。PC-1NF融合蛋白能抑制MC增殖及周期的进展,其机制可能是通过下调cyclinD1、上调p21WAF1的表达,抑制细胞通过G1-S调控点而介导的。 展开更多
关键词 常染色体显性多囊肾病 多囊蛋白-1 系膜细胞 细胞周期
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